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1、中醫(yī)肝郁脾虛證動(dòng)物模型的制備第1頁,共16頁,2022年,5月20日,3點(diǎn)41分,星期日研究目標(biāo) 立足于中醫(yī)經(jīng)典著作金匱要略的發(fā)病學(xué)說,在此基礎(chǔ)上有所創(chuàng)新運(yùn)用中醫(yī)的思維來對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物進(jìn)行中醫(yī)癥候肝郁脾虛的研究。第2頁,共16頁,2022年,5月20日,3點(diǎn)41分,星期日研究意義探索制備肝郁脾虛模型,為肝郁證臨床、實(shí)驗(yàn)研究提供基礎(chǔ)方法。在中醫(yī)身心醫(yī)學(xué)理論和實(shí)踐上、從肝論治精神行為疾患機(jī)理的探討上有所突破,同時(shí)初步建立肝郁脾虛證客觀評(píng)價(jià)指標(biāo),揭示中醫(yī)經(jīng)典證型肝郁脾虛的本質(zhì)。第3頁,共16頁,2022年,5月20日,3點(diǎn)41分,星期日研究?jī)?nèi)容 肝郁脾虛證動(dòng)物模型的制備通過情志、藥物兩大方面進(jìn)行造模對(duì)比
2、研究,以期能夠建立理想的中醫(yī)證候動(dòng)物模型。第4頁,共16頁,2022年,5月20日,3點(diǎn)41分,星期日 動(dòng)物 大鼠:SD種,20020g;小鼠:昆明種,202g;雌雄各半,清潔級(jí)。山西省中醫(yī)藥研究院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物室提供,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)許可證、使用許可證編號(hào)為SCXK(晉)2010-002研究方案第5頁,共16頁,2022年,5月20日,3點(diǎn)41分,星期日藥物與試劑 逍遙丸:山西楊文水制藥有限公司,批號(hào):101220;國藥準(zhǔn)字Z14020866; 龍膽瀉肝丸:神威藥業(yè)有限公司,批號(hào):10101511;國藥準(zhǔn)字Z20020013; 執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)中國藥典2010年版一部研究方案第6頁,共16頁,2022年,5月
3、20日,3點(diǎn)41分,星期日研究方案藥物與試劑 利血平注射液:天津金耀氨基酸有限公司,批號(hào) 國藥準(zhǔn)字H12020905。 CCL4溶液:北京化工廠,批號(hào) 國藥準(zhǔn)字Z19970120; 第7頁,共16頁,2022年,5月20日,3點(diǎn)41分,星期日研究方案利血平組大鼠:利血平 4mg/kg 腹腔注射 2天小鼠:利血平 0.1mg/kg 皮下注射 14天藥物組肝郁脾虛第8頁,共16頁,2022年,5月20日,3點(diǎn)41分,星期日研究方案藥物組肝郁脾虛CCL4組大鼠:10%CCL4花生油溶液 0.5ml/100kg 皮下注射 第1、4天小鼠:10%CCL4花生油溶液 0.1ml/10kg 皮下注射 第1、
4、6天第9頁,共16頁,2022年,5月20日,3點(diǎn)41分,星期日研究方案 將造模大鼠放入自制的鋼絲網(wǎng)籠中,令其身軀及四肢不能自由活動(dòng),正常組5只一籠合養(yǎng),模型組和治療組實(shí)驗(yàn)鼠均每籠一只,每日束縛6h,從9am-3pm。每周給大鼠不定時(shí)的禁食兩次,造模時(shí)間3周。情志組肝郁脾虛第10頁,共16頁,2022年,5月20日,3點(diǎn)41分,星期日研究方案情志組肝郁脾虛 將實(shí)驗(yàn)鼠隨機(jī)分為:空白對(duì)照組、模型對(duì)照組、疏肝方藥(逍遙散、龍膽瀉肝湯組),實(shí)驗(yàn)時(shí)分4組進(jìn)行研究,造模和給藥同時(shí)進(jìn)行三周。第11頁,共16頁,2022年,5月20日,3點(diǎn)41分,星期日觀測(cè)指標(biāo)一般外觀行為觀察:包括眼睛狀態(tài)、日常理毛皮毛變化
5、、掙扎時(shí)的表現(xiàn)、精神狀態(tài)、大便性狀。精神行為學(xué)指標(biāo)的測(cè)試:體重、攝食、攝糖率變化、高架十字迷宮測(cè)試、強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)、曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)、肛溫。相關(guān)生化指標(biāo)的檢測(cè): 腦組織中5-HT、DA,血液中SOD、MDA等進(jìn)行檢測(cè)。經(jīng)典疏肝方劑的對(duì)抗效應(yīng):選用經(jīng)典名方逍遙丸與龍膽瀉肝丸進(jìn)行對(duì)抗研究。研究方案第12頁,共16頁,2022年,5月20日,3點(diǎn)41分,星期日 應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理,多組間數(shù)據(jù)采用方差分析,兩兩比較采用LSD-t檢驗(yàn)。數(shù)據(jù)處理方法研究方案第13頁,共16頁,2022年,5月20日,3點(diǎn)41分,星期日可行性分析學(xué)術(shù)理論:立足于中醫(yī)經(jīng)典著作金匱要略的發(fā)病學(xué)說,在此基礎(chǔ)上有所創(chuàng)新運(yùn)用中醫(yī)的思維來對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物進(jìn)行中醫(yī)癥候的研究。人員配置:項(xiàng)目組成員由有經(jīng)驗(yàn)的專業(yè)技術(shù)人員組成、有豐富的實(shí)驗(yàn)技能和科研經(jīng)歷,有良好的團(tuán)隊(duì)精神,完成多項(xiàng)相關(guān)課題 。實(shí)驗(yàn)條件 :項(xiàng)目組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物室具有飼育清潔級(jí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的屏障系統(tǒng),測(cè)試設(shè)備齊全,經(jīng)費(fèi)來源穩(wěn)定,保證課題的順利實(shí)施。第14頁,共16頁,2022年,5月20日,3點(diǎn)41分,星期日工作計(jì)劃2010.82010.9:查閱、匯總資料,完成相關(guān)肝郁實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型綜述1篇,準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)材料。2010.92011.1:肝郁實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型確立并進(jìn)行試驗(yàn)。2011.22011.10:完成行為藥理與生化指標(biāo)等相關(guān)指標(biāo)的測(cè)試,書寫開題報(bào)告并修改。2011.
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