基因工程原理期末復習思考題

1、-PAGE . z.醫(yī)用基因工程復習思考題基因和基因組及基因工程的概念名詞概念 移動基因(插入序列；轉位子)； 斷裂基因； RNA剪輯； 內(nèi)含子(間隔序列)與表達子； 重疊基因； 重復序列； 假基因； 啟動子與終止子； 起始位點、終止位點。討論題什么叫基因何謂基因的新概念基因的主要功能是什么一種基因一種酶的提法妥否？基因密碼子三聯(lián)體間是否存在著逗號？基因表達的產(chǎn)物中，氨基酸序列一樣時，基因密碼子是否一定一樣？為什么？何謂轉位子和轉位作用轉位的后果如何基因中最小的突變單位和重組單位是什么？基因工程應包括哪些內(nèi)容？何謂基因工程的四大里程碑和三大技術創(chuàng)造真核細胞基因組中常有內(nèi)含子存在，能否在原核細胞

2、獲得表達？能，為什么？不能，為什么？基因工程中常用的工具酶什么是限制性核酸內(nèi)切酶？什么是R/M現(xiàn)象？如何解釋？II型核酸內(nèi)切酶的根本特點有哪些？影響II型核酸內(nèi)切酶活性的因素有哪些？如何克制和防止這些不利因素？DNA連接酶有哪兩類？有何不同？甲基化酶有哪兩類？有何應用價值？什么叫同尾酶、同裂酶？在基因工程中有何應用價值？平末端連接的方法有哪些？(圖示)Klenow酶的特性和用途有哪些？舉例說明。反轉錄酶的特性有哪些？有何應用價值？列舉堿性磷酸酶BAP/CAP的應用之一。列舉末端核苷酸序列轉移酶的應用之一。質(zhì)粒單酶切點的基因連接如何降低本底和防止自我環(huán)化和提高連接效率？基因片段與載體的平末端連接

3、的方法有哪些？用寡核苷酸和銜接物DNA的短片段連接時為使基因內(nèi)部的切點保護，常用何種方法解決？基因克隆載體基因工程常用的載體有哪5種？其共同特性如何？什么是質(zhì)粒？質(zhì)粒分哪幾種？有哪兩種復制類型，質(zhì)粒的分子生物學特性有哪些？質(zhì)粒存在的三種形式是什么？別離質(zhì)粒的根本步驟有哪些？別離純化質(zhì)粒的方法有哪幾種？簡述CsCl密度梯度(浮密度)別離法、堿變性法的原理，如何選擇適宜的別離方法？作為理想質(zhì)粒載體的根本條件有哪些？什么叫插入失活，舉例說明之。構建pBR322質(zhì)粒載體的親本質(zhì)粒有哪些？什么叫插入型和替換型噬菌體載體插入型和替換型入噬菌體Cosmid容納外源DNA的最大容量是多少？將外源性DNA克隆到

4、-半乳糖苷酶失活的插入型入噬菌體上后，如何篩選重組噬菌體？簡述細線狀噬菌體M13在基因工程中的應用。什么是Cos質(zhì)粒、Cos位點和Cos細胞？什么叫cccDNA和ocDNA？酶母載體有哪三種類型？它們構成的成分各有哪些？什么叫穿梭載體？改造后的SV40載體有哪幾種類型？各舉例說明之。目的基因的別離和克隆名詞解釋 基因組文庫；cDNA文庫。問答目的基因克隆時常用哪些方法別離和獲得基因？構建基因組庫的意義及構建過程？構建cDNA文庫的意義、常用載體及構建過程？目的基因與載體的連接方法有哪些？各有哪些優(yōu)點？基因重組時在兩個酶切位點中其中有一個不相匹配時，你如何解決連接問題？試述T-A克隆法的原理和用

5、途？重組DNA導入宿主細胞與轉化子的篩選名詞解釋 轉化； 轉染； 轉導；-互補。問答重組DNA向宿主細胞的導入方法有哪些？影響CaCl2轉化率的因素有那些？如何利用抗性標記基因篩選陽性克隆？如何利用LacZ標記基因篩選陽性克??？如何從所克隆到的基因重組載體中鑒定目的基因的存在和正確性外源基因在大腸桿菌中的表達調(diào)控名詞解釋 基因表達； 啟動子； 操縱子； Lac啟動子； Trp啟動子；Tac啟動子；RNA聚合酶； 轉化的弱化作用； 核糖體結合位點(SD序列)； 起始密碼子。問答原核表達系統(tǒng)常采用的啟動子有哪些？Lac、Tac、trp其特點如何？強終止子如何發(fā)揮終止作用？弱終止子如何發(fā)揮作用？克隆

6、的外源基因在大腸桿菌中表達需要的條件有哪些？影響外源基因在大腸桿菌中表達的因素有哪些？構建原核表達載體應具備哪些根本要素？外源基因在真核細胞中表達及調(diào)控名詞概念原病毒；鋅指構造；亮氨酸拉鏈；RNA編輯；tk基因問答真核表達調(diào)控的順式作用元件有哪些？其作用特點是什么？真核表達調(diào)控的反式作用因子有哪些？其作用特點是什么？真核表達載體所必備的條件有哪些？真核表達載體常采用的選擇標記基因有哪些？什么叫tk基因？在作選擇標記基因的克隆篩選中有何應用價值？常用的真核病毒載體有那些？并簡述其特點？真核細胞基因表達的過程是什么？主要有哪些調(diào)控機理？簡述真核、原核兩大表達系統(tǒng)的優(yōu)缺點。基因突變名詞概念 突變；

7、基因突變； 突變體； 突變基因； 野生型基因； 無義突變； 錯義突變； 同義突變； 區(qū)域隨機誘變問答1.寡核苷酸介導的點突變技術的原理是什么？簡述其誘變程序最好結合圖示說明之。2.什么叫Kunkel定點誘變法？什么叫硫代磷酸的核苷酸誘變法？什么叫大引物PCR誘變法？最好結合圖示說明之。3.基因突變技術在分子生物學研究和蛋白質(zhì)工程研究中的有哪些應用基因工程技術與國民經(jīng)濟的關系及作用自學從略基因工程藥物的研究開發(fā)及其產(chǎn)業(yè)化名詞概念 基因拼接； 基因確失； 比活性； IFNs類似物； IFNs雜合體； 重組病毒載體； 重組質(zhì)粒型載體；二、問答基因工程藥物包括哪幾大類？基因工程藥物的根本操作程序有哪幾

8、步？基因改造常用的技術手段有哪些？舉例說明之。如何獲得基因？常用的載體有哪幾種？目的基因表達系統(tǒng)有哪幾種？其特點如何？如果目的基因的基因構造中有內(nèi)含子存在，而且要采用原核表達系統(tǒng)，你應如何別離克隆基因？基因工程藥物的純化常用哪些方法？雜蛋白來自何方？基因工程藥物質(zhì)量控制點要點包括哪些？第十一章 基因工程疫苗的研究與開發(fā)名詞概念 基因工程多肽疫苗； 基因重組病毒活疫苗； 基因缺失活疫苗； 基因重組多價疫苗。討論題基因工程疫苗研究開發(fā)應遵循的原則是什么？基因工程疫苗有哪幾種？舉例說明之?；蚬こ桃呙绲难芯块_發(fā)常用的途徑是什么？(最好采用示意圖答復)第十二章 基因工程抗體和導向藥物名詞概念 CDR；

9、 嵌合抗體； 單鏈抗體(ScFV)； FV片段； 重組Fab片段。討論題CDR1、CDR2、CDR3分別由Ig的H鏈及L鏈中哪些基因片段組成？人ScFV的基因組成、功能有哪些？有何優(yōu)點？基因工程的人源化抗體的導向藥物包括哪些？在疾病診斷和生物治療中有什么應用價值？何謂基因工程抗體的噬菌體外表呈現(xiàn)技術？有何價值？主要程序包括哪些？第十三章 基因治療名詞概念 基因置換； 基因修正； 基因修飾； 基因失活； 基因治療； 抑癌基因的基因療法； 反義RNA基因療法； 核酶藥物自殺基因療法； 反基因療法；eq oac(,10) 肽核酸；eq oac(,11) 瘤苗基因療法；eq oac(,12) 多重耐藥性(MDR)基因療法. 討論題基因治療所采用的基因轉移方法有哪些？簡要說明之。病毒載體轉移基因有何特點？腫瘤基因治療有哪些方法？簡要說明之。藥物自殺基因的基因治療原理、種類和應用如何？抗病毒基因治療的方法有哪些？簡要說明之。有哪幾種反義核苷酸基因失活療法？簡述其作用原理?；蛑委煹牟呗园男?/p>