C-反應(yīng)蛋白測定試劑盒膠體金免疫層析法產(chǎn)品技術(shù)要求

1、 醫(yī)療器械產(chǎn)品技術(shù)要求編號：C-反應(yīng)蛋白測定試劑盒(膠體金免疫層析法）1.產(chǎn)品型號/規(guī)格及其劃分說明1.1 規(guī)格10/20/50人份。1.2 組分每盒含10/20/50人份試紙條和1份說明書和樣品緩沖液(0.1mol/L 的Tris-HCl緩沖液，pH值7.0)。每人份試紙條包括1份檢測卡、1支滴管和1包干燥劑。定量檢測卡由樣品墊、硝酸纖維素膜（T線包被鼠抗C-反應(yīng)蛋白單克隆抗體；C線包被羊抗鼠多克隆抗體）、金標(biāo)墊（包被膠體金標(biāo)記的鼠抗C-反應(yīng)蛋白單克隆抗體）、吸水紙、塑料載板組成。2. 性能指標(biāo)2.1 物理性狀2.1.1 外觀測定試劑應(yīng)整潔完整、無毛刺、無破損、無污染；材料附著牢固；標(biāo)簽字跡

2、清晰，無破損。2.1.2 膜條寬度測定試劑的膜條寬度2.5mm。2.1.3 液體移行速度液體移行速度應(yīng)不低于10 mm/min。2.2 空白限空白限應(yīng)不高于0.5g/mL。2.3 精密度2.3.1 批內(nèi)精密度批內(nèi)精密度CV(%）應(yīng)不高于12.0%。2.3.2 批間精密度批間精密度R（%）應(yīng)不高于15.0%。2.4 線性范圍在0.5g/mL，150g/mL的范圍內(nèi)，線性相關(guān)系數(shù)應(yīng)不低于0.990。2.5 準(zhǔn)確度回收率應(yīng)在85%115%之間。2.6 分析特異性含濃度不低于150mg/L C-反應(yīng)蛋白的零濃度C-反應(yīng)蛋白樣本，檢測結(jié)果不高于0.5g/mL。2.7 穩(wěn)定性將測定試劑在430的環(huán)境中放置

3、18個月后，取樣分別檢測2.1、2.2、2.3.1、2.4、2.5、2.6項，結(jié)果應(yīng)符合各項目的要求。3. 檢驗方法3.1.1 外觀隨機取一支測定試劑，自然光下目視觀察，應(yīng)符合2.1.1的要求。3.1.2 膜條寬度用游標(biāo)卡尺（精度為0.05mm）隨機檢測兩支測定試劑，計算兩次檢測結(jié)果的平均值，測定結(jié)果符合2.1.2的要求。3.1.3 液體移行速度取兩支測定試劑，按說明書進(jìn)行操作，從測定試劑加入空白對照液開始用秒表計時，直至空白對照液達(dá)到硝酸纖維素膜與吸水紙交界線時停止計時，所用的時間記為（t），用游標(biāo)卡尺測量樣品墊、金標(biāo)墊和硝酸纖維素膜的總長度記為（L），則計算L/t即為移行速度，重復(fù)測量2支

4、測定試劑，求平均值，測定結(jié)果應(yīng)符合2.1.3的要求。3.2 空白限取同一批號的C-反應(yīng)蛋白測定試劑20支，按廠家說明書操作檢測空白對照液，計算結(jié)果的平均濃度（）和標(biāo)準(zhǔn)差（S），空白限為+2S，結(jié)果應(yīng)符合2.2規(guī)定。3.3 精密度3.3.1 批內(nèi)精密度取同一批號的C-反應(yīng)蛋白定量檢測試劑30支，按廠家說明書操作檢測濃度為3g/mL0.3g/mL和50g/mL5g/mL和100g/mL10g/mL的C-反應(yīng)蛋白測定樣品液，每個濃度各檢測10次，分別計算測定結(jié)果的平均濃度（）和標(biāo)準(zhǔn)差（S），按照公式（1）計算變異系數(shù)（CV），其結(jié)果應(yīng)符合2.3.1規(guī)定。其中xi為10次測量值之和，n為測量次數(shù)。3.

5、3.2 批間精密度取三個批號的C-反應(yīng)蛋白測定試劑，按廠家說明書操作檢測濃度為3g/mL0.3g/mL和50g/mL5g/mL 的C-反應(yīng)蛋白測定樣品液。樣本用每個批次的產(chǎn)品至少重復(fù)測定三次，求平均值。按照公式（2）計算相對極差（R%），其結(jié)果應(yīng)符合2.3.2規(guī)定。其中R為相對極差，為測量結(jié)果的最大值，為測量結(jié)果的最小值，為測量結(jié)果的算術(shù)平均值。3.4 線性范圍將接近線性范圍上限的高值樣本按一定比例稀釋為至少5種濃度，其中低值濃度的樣本須接近線性范圍的下限，每個濃度檢測3支，記錄各濃度水平的測量結(jié)果，并計算各濃度水平三次測量值的平均值（），以濃度值（）為自變量，以測定結(jié)果均值（）為因變量求出線

6、性回歸方程。按公式（2）計算線性回歸的相關(guān)系數(shù)（），其結(jié)果應(yīng)符合2.4規(guī)定。其中為5個濃度值的平均值；為測量值的平均值。 （3）3.5 準(zhǔn)確度在380L的正常人血清樣本中，加入20L標(biāo)準(zhǔn)溶液（用新生小牛血清將C-反應(yīng)蛋白純品（購自 HYPERLINK /link?url=xYw2fEudnKMseyvCvXkkIL3F_rJTqh-Hm1hmW9PwewO t /_blank 杭州啟泰生物技術(shù)有限公司）配制成1mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液），配制成測定樣品液。取同一批號的C-反應(yīng)蛋白測定試劑3支，按廠家說明書操作檢測測定樣品液，重復(fù)測定3次,按照公式（4）計算純品回收率，其結(jié)果應(yīng)符合2.5規(guī)定。 （4

7、） 式中：R回收率； V加入標(biāo)準(zhǔn)液體積； V0人血清樣品的體積； C 人血清樣品加入標(biāo)準(zhǔn)液后的測定濃度； C0人血清樣品的測定濃度； Cs標(biāo)準(zhǔn)液的濃度。3.6 分析特異性取1份C-反應(yīng)蛋白含量為零的樣本，添加C-反應(yīng)蛋白，使樣本中C-反應(yīng)蛋白的濃度不低于150mg/L，使用C-反應(yīng)蛋白測定試劑對樣本進(jìn)行檢測，測定樣本中C-反應(yīng)蛋白的含量，結(jié)果應(yīng)符合2.6規(guī)定。3.7 穩(wěn)定性將測定試劑在430環(huán)境中放置18個月后，分別檢測2.1、2.2、2.3.1、2.4、2.5、2.6項，結(jié)果應(yīng)符合各個項目的要求。4. 術(shù)語無 附錄C-反應(yīng)蛋白測定試劑盒（膠體金免疫層析法）校準(zhǔn)品的溯源說明1.1 基本情況說明

8、采用普邁德（北京）科技有限公司的校準(zhǔn)品作為測定試劑的測定樣本。普邁德（北京）科技有限公司采用的校準(zhǔn)品能夠溯源到C反應(yīng)蛋白(CRP)定量檢測試劑盒(膠體金法)（天津中新科炬生物制藥有限公司）。普邁德（北京）科技有限公司的校準(zhǔn)品是用著名抗原抗體生產(chǎn)商啟泰公司生產(chǎn)的純品配置的（純品濃度：2.4mg/ml、目錄號：CRP01）。校準(zhǔn)品采用濃度為150g/mL、100g/mL、50g/mL、10g/mL、0.5g/mL的純品。2 企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)品的溯源及驗證2.1 企業(yè)校準(zhǔn)品的溯源2.2 企業(yè)校準(zhǔn)品的初賦值用C反應(yīng)蛋白(CRP)定量檢測試劑盒(膠體金法)（天津中新科炬生物制藥有限公司）檢測用純品配置成的150

9、ug/ml的樣品測定液，測定6次取其平均值作為150ug/ml C-反應(yīng)蛋白純品的校準(zhǔn)值。然后根據(jù)150ug/ml C-反應(yīng)蛋白純品的校準(zhǔn)值將該濃度的純品分別稀釋成校準(zhǔn)值為150g/mL、100g/mL、50g/mL、10g/mL、0.5g/mL的校準(zhǔn)品。將用CRP配制好的5種校準(zhǔn)品各取1支，用C反應(yīng)蛋白(CRP)定量檢測試劑盒(膠體金法)（天津中新科炬生物制藥有限公司）測定，每個樣品平行測定三次求平均值。測定完成后，按公式（1）計算工作校準(zhǔn)品標(biāo)示濃度和西門子BNPRO測定濃度的偏差，偏差應(yīng)小于15%，并計算各濃度水平三次測量值的平均值（），以校準(zhǔn)值（）為自變量，以測定結(jié)果均值（）為因變量求出

10、線性回歸方程。按公式（2）計算線性回歸的相關(guān)系數(shù)（）且相關(guān)系數(shù)R應(yīng)大于0.975?？烧J(rèn)為配制的工作校準(zhǔn)品無誤，此工作校準(zhǔn)品可以用于對人血漿賦值和制備產(chǎn)品的標(biāo)準(zhǔn)曲線。相對偏差（%）=校準(zhǔn)值-/校準(zhǔn)值100% （1）（2）2.3 企業(yè)校準(zhǔn)品的修訂選擇C反應(yīng)蛋白高中低值的血清40份，用C反應(yīng)蛋白(CRP)定量檢測試劑盒(膠體金法)（天津中新科炬生物制藥有限公司）定量測定系統(tǒng)檢測選定的40份血清，然后用本公司校準(zhǔn)品校準(zhǔn)的測定試劑檢測選定的40份血清，按公式（3）以天津中新科炬的結(jié)果為自變量()，以本公司的測定結(jié)果均值為因變量()求出線性回歸方程和線性相關(guān)系數(shù)r,。兩組數(shù)據(jù)的相關(guān)系數(shù)應(yīng)大于0.975方可確認(rèn)計量學(xué)上溯源的有效性。（3）2.4 企業(yè)校準(zhǔn)品的驗證重復(fù)2.2和2.3，直至線性回歸方程的線性相關(guān)系數(shù)大于0.975，按照公式(5)計算其不確定度U，不確定度范圍在8%范圍內(nèi)，則符合要求。說明校準(zhǔn)品賦值完成。(5)式中：對比試劑盒的真值； X本公司試劑盒的值； n測試的次數(shù)。3 產(chǎn)品二維碼的制作用普邁德生產(chǎn)的C-反應(yīng)蛋白測定試劑盒檢測本公司校準(zhǔn)值為150g/mL、100g/mL、50g/mL、10g/mL、0.5g/mL的校準(zhǔn)品，每個濃度重復(fù)檢測6次。將每個濃度測定結(jié)果的峰