紫外可見吸收光譜法

1、關(guān)于紫外可見吸收光譜法第一張，PPT共五十七頁，創(chuàng)作于2022年6月2.1 紫外-可見吸收光譜法基本原理 分子的紫外-可見吸收光譜法是基于分子內(nèi)電子躍遷產(chǎn)生的吸收光譜進(jìn)行分析的一種常用的光譜分析法。分子在紫外-可見區(qū)的吸收與其電子結(jié)構(gòu)緊密相關(guān)。紫外光譜的研究對(duì)象大多是具有共軛雙鍵結(jié)構(gòu)的分子。2.1.1 概述第二張，PPT共五十七頁，創(chuàng)作于2022年6月電磁輻射波譜和相關(guān)的能量躍遷 可 見 光第三張，PPT共五十七頁，創(chuàng)作于2022年6月 紫外-可見以及近紅外光譜區(qū)域的詳細(xì)劃分如圖所示。紫外-可見光區(qū)一般用波長（nm）表示。其研究對(duì)象大多在200-380 nm的近紫外光區(qū)和/或380-780 n

2、m的可見光區(qū)有吸收。 紫外-可見吸收測定的靈敏度取決于產(chǎn)生光吸收分子的摩爾吸光系數(shù)。該法儀器設(shè)備簡單,應(yīng)用十分廣泛。如醫(yī)院的常規(guī)化驗(yàn)中，95%的定量分析都用紫外-可見分光光度法。在化學(xué)研究中，如平衡常數(shù)的測定、求算主-客體結(jié)合常數(shù)等都離不開紫外-可見吸收光譜第四張，PPT共五十七頁，創(chuàng)作于2022年6月分子吸收現(xiàn)象CuSO4溶液吸收黃色光,其溶液呈現(xiàn)出藍(lán)色；KMnO4分子強(qiáng)烈地吸黃綠色光，對(duì)其他顏色的光吸收很少或不吸收，溶液呈紫紅色。問題：Na2SO4溶液無色透明,其分子吸光情況? CuS(固態(tài))呈黑色，其分子吸光又如何？700 nm530 nm420 nm580 nm470 nm620 nm

3、第五張，PPT共五十七頁，創(chuàng)作于2022年6月2.1.2 紫外-可見吸收光譜法產(chǎn)生機(jī)理1、分子能級(jí)軌道簡介 分子對(duì)電磁輻射的吸收是分子總能量變化之和，即：E = Eel + Evib + Erot，式中E代表分子的總能量，Eel，Evib，Erot分別代表電子能級(jí)的能量、振動(dòng)能級(jí)的能量以及轉(zhuǎn)動(dòng)能級(jí)的能量。 注意：電子能級(jí)、轉(zhuǎn)動(dòng)能級(jí)及振動(dòng)能級(jí)是量子化能級(jí) 分子在吸收過程中發(fā)生電子能級(jí)躍遷的同時(shí)伴隨振動(dòng)能級(jí)和轉(zhuǎn)動(dòng)能級(jí)的能量變化。一般原子對(duì)電磁輻射的吸收只涉及原子核外電子能量的變化，是一些分離的特征銳線，而分子的吸收光譜是由成千上萬條彼此靠得很緊的譜線組成，看起來是一條連續(xù)的吸收帶 所以分子吸收光譜

4、也稱為分子的電子光譜 第六張，PPT共五十七頁，創(chuàng)作于2022年6月 從圖中觀察分子的三種能級(jí)躍遷，結(jié)合已有知識(shí)比較三種光譜出現(xiàn)的區(qū)域。第七張，PPT共五十七頁，創(chuàng)作于2022年6月線光譜帶光譜第八張，PPT共五十七頁，創(chuàng)作于2022年6月2、紫外-可見光譜曲線示意圖第九張，PPT共五十七頁，創(chuàng)作于2022年6月3、有機(jī)物分子紫外可見光譜從化學(xué)鍵性質(zhì)考慮，與有機(jī)物分子紫外-可見吸收光譜有關(guān)的電子是：形成單鍵的s電子，形成雙鍵的p電子以及未共享的或稱為非鍵的n電子。有機(jī)物分子內(nèi)各種電子的能級(jí)高低次序如圖所示，s* p* n p s。標(biāo)有*者為反鍵電子 第十張，PPT共五十七頁，創(chuàng)作于2022年6

5、月 從圖中可以看出：理論上有機(jī)物的紫外可見光譜有6種躍遷形式。它們是 s s* ； s p* ； n s* ； n p* ；p p* ； p s*其中s p* ； p s*是禁阻的s s*躍遷所需能量最大，lmax170 nm，位于遠(yuǎn)紫外區(qū)或真空紫外區(qū)。一般紫外-可見分光光度計(jì)不能用來研究遠(yuǎn)紫外吸收光譜。如甲烷，lmax =125 nm。飽和有機(jī)化合物的電子躍遷在遠(yuǎn)紫外區(qū)。ns*躍遷。含有未共享電子對(duì)的取代基都可能發(fā)ns*躍遷 ，含有S，N，O，Cl,Br，I等雜原子的飽和烴衍生物都出現(xiàn)一個(gè)ns*躍遷產(chǎn)生的吸收譜帶。ns*躍遷也是高能量躍遷，一般lmax200 nm，落在遠(yuǎn)紫外區(qū)。但躍遷所需能

6、量與n電子所屬原子的性質(zhì)關(guān)系很大。雜原子的電負(fù)性越小，電子越易被激發(fā)，激發(fā)波長越長。有時(shí)也落在近紫外區(qū)。如甲胺，lmax =213 nm 第十一張，PPT共五十七頁，創(chuàng)作于2022年6月 pp*所需能量較少，并且隨雙鍵共軛程度增加，所需能量降低。若兩個(gè)以上的雙鍵被單鍵隔開，則所呈現(xiàn)的吸收是所有雙鍵吸收的疊加；若雙鍵共軛，則吸收大大增強(qiáng)，波長紅移，lmax和emax均增加。如單個(gè)雙鍵，一般lmax為150-200nm，乙烯的lmax = 185nm；而共軛雙鍵如丁二烯lmax = 217nm，己三烯lmax = 258nm。 np*所需能量最低，在近紫外區(qū)，有時(shí)在可見區(qū)。但pp*躍遷幾率大，是強(qiáng)

7、吸收帶；而np*躍遷幾率小，是弱吸收帶，一般emax500。許多化合物既有p電子又有n電子，在外來輻射作用下，既有pp*又有np*躍遷。如-COOR基團(tuán)，pp*躍遷lmax=165 nm，emax=4000；而np*躍遷lmax=205nm，emax=50。pp*和np*躍遷都要求有機(jī)化合物分子中含有不飽和基團(tuán)，以提供p軌道。第十二張，PPT共五十七頁，創(chuàng)作于2022年6月 含有p鍵的不飽和基團(tuán)引入飽和化合物中，使飽和化合物的最大吸收波長移入紫外-可見區(qū)。這類能產(chǎn)生紫外-可見吸收的官能團(tuán)，如一個(gè)或幾個(gè)不飽和鍵，C=C,C=O,N=N,N=O等稱為生色團(tuán)（chromophore） 有些基團(tuán)本身在

8、200 nm以上不產(chǎn)生吸收，但這些基團(tuán)的存在能增強(qiáng)生色團(tuán)的生色能力（改變分子的吸收位置和增加吸收強(qiáng)度），這類基團(tuán)稱為助色團(tuán)(auxochrome)。一般助色團(tuán)為具有孤對(duì)電子的基團(tuán)，如-OH, -NH2, -SH等 含有生色團(tuán)或生色團(tuán)與助色團(tuán)的分子在紫外光區(qū)有吸收并伴隨分子本身電子能級(jí)的躍遷，不同官能團(tuán)吸收不同波長的光。作波長掃描，記錄吸光度對(duì)波長的變化曲線，就得到該物質(zhì)的紫外-可見吸收光譜第十三張，PPT共五十七頁，創(chuàng)作于2022年6月吸收帶的劃分第十四張，PPT共五十七頁，創(chuàng)作于2022年6月4、無機(jī)物的紫外可見光譜 與無機(jī)物分子紫外-可見吸收光譜有關(guān)的是：電荷遷移/轉(zhuǎn)移和配位場躍遷 電荷轉(zhuǎn)

9、移/遷移光譜：當(dāng)外來輻射照射某些有機(jī)或無機(jī)化合物時(shí),可能發(fā)生一個(gè)電子從體系具有電子給予體特性部分(稱為給體,donor)轉(zhuǎn)移到該體系的另一具有電子接受體特性的部分(稱為受體，acceptor)，這種電子轉(zhuǎn)移產(chǎn)生的吸收譜帶，稱為電荷轉(zhuǎn)移吸收帶。 電荷轉(zhuǎn)移吸收帶涉及的是給體的一個(gè)電子向受體的一個(gè)電子軌道上的躍遷，激發(fā)態(tài)是這一內(nèi)氧化還原過程的產(chǎn)物。電荷轉(zhuǎn)移過程可表示如下 式中D與A分別代表電子給體與受體。下面三例是能產(chǎn)生電荷轉(zhuǎn)移吸收帶的一些化合物。 第十五張，PPT共五十七頁，創(chuàng)作于2022年6月Fe2+是電子給體,H2O是電子受體 -NR2是電子給體,苯環(huán)是電子受體 苯環(huán)是電子給體，氧是電子受體

10、電荷轉(zhuǎn)移吸收帶的一個(gè)特點(diǎn)是吸收強(qiáng)度大，emax 104l/molcm，因此含有這類結(jié)構(gòu)的分子測定靈敏度高，該原理已被廣泛應(yīng)用于分子識(shí)別的主體分子設(shè)計(jì)中第十六張，PPT共五十七頁，創(chuàng)作于2022年6月配位體場吸收帶 : 某些無機(jī)金屬離子也會(huì)產(chǎn)生紫外-可見吸收。如含d電子的過渡金屬離子會(huì)產(chǎn)生配位體場吸收帶。 依據(jù)配位場理論，無配位場存在時(shí)dx，dy，dz，d，dx，能量簡并；當(dāng)過渡金屬離子處于配位體形成的負(fù)電場中時(shí)，5個(gè)簡并的d軌道會(huì)分裂成能量不同的軌道。 在外來輻射激發(fā)下，d電子從能量低的軌道躍遷到能量高的軌道時(shí)產(chǎn)生配位體場吸收帶。一般配位體場吸收帶在可見區(qū)，max約0.1100 l/molcm

11、，吸收很弱。因此配位體場吸收帶對(duì)定量分析用處不大 鑭系及錒系離子5 電子躍遷產(chǎn)生的電子躍遷吸收譜帶出現(xiàn)在紫外-可見區(qū)。由于軌道為外層軌道所屏蔽，受溶劑性質(zhì)或配位體的影響很小，故譜帶窄 少數(shù)無機(jī)陰離子，如NO3-(lmax=313 nm)、CO32-(lmax =217 nm)、NO2-(lmax =360 、280 nm)、N3-(lmax =230 nm)、CS32-(lmax =500 nm)等也有紫外-可見吸收第十七張，PPT共五十七頁，創(chuàng)作于2022年6月Typical Organic UV/Vis SpectraNote how the same molecule displays

12、markedly different spectral features depending upon the environment in which it finds itself.第十八張，PPT共五十七頁，創(chuàng)作于2022年6月Inorganic - Transition MetalsSpectra from transition element ions arise from the 3d and 4d electrons. These spectra are quite broad, often in the visible (solutions are brightly colou

13、red), and are significantly affected by ligands and solvents.Ligand Field Theory is a molecular orbital approach to understand these effects. Essentially it assets that the d-orbital energies are split in solution (or with ligands) and transitions between these split levels are at the source of thei

14、r UV/Vis spectroscopy.第十九張，PPT共五十七頁，創(chuàng)作于2022年6月Inorganic - LanthanidesUV/Vis spectra of lanthanide ions arise from 4f levels (5f for the actinides). These are rather well-screened from outside influences and as such the spectra are comparatively sharp, and only weakly influenced by ligands and solven

15、ts.第二十張，PPT共五十七頁，創(chuàng)作于2022年6月Inorganic - Charge TransferInorganic complexes metal ions with surrounding ligands can undergo absorption processes where the electron jumps from an orbital mostly centered on the ligand to an orbital mostly centered on the metal ion (the opposite can occur, but less frequ

16、ently). Transitions are intense.Fig. 14-10 in Skoog, Holler, Nieman.第二十一張，PPT共五十七頁，創(chuàng)作于2022年6月提高無機(jī)物紫外可見光譜靈敏度的有效途徑1、合成新的高靈敏有機(jī)顯色劑（1）增大有機(jī)顯色劑分子的共軛體系 偶氮胂 偶氮胂第二十二張，PPT共五十七頁，創(chuàng)作于2022年6月（2）在有機(jī)顯色劑分子中引入取代基對(duì)一系列成絡(luò)基團(tuán)：SO3H, COOH, AsO3H2, OH含COOH, AsO3H2 的試劑對(duì)稀土元素反應(yīng)靈敏度最高。取代基Cl, Br, COCH3 處于苯環(huán)中偶氮基的對(duì)位時(shí)，對(duì)稀土元素反應(yīng)靈敏度最高。第二十

17、三張，PPT共五十七頁，創(chuàng)作于2022年6月與稀土顯色反應(yīng) max （104） 不反應(yīng) 不反應(yīng) 734 18.4 670 10.6 700 1.87第二十四張，PPT共五十七頁，創(chuàng)作于2022年6月（3）高靈敏顯色劑不對(duì)稱變色酸雙偶氮類試劑 吡啶及噻唑偶氮衍生物卟啉類試劑：大環(huán)化合物有色高分子聚合物納米粒子：金納米粒子（膠體金）第二十五張，PPT共五十七頁，創(chuàng)作于2022年6月2、多元配合物高靈敏顯色體系三元或四元配合物分子有更大的分子截面積金屬-三羥基熒光酮-表面活性劑金屬-變色酸雙偶氮衍生物-陽離子表面活性劑混配膠束四元配合物 三元配合物中引入表面活性劑金屬絡(luò)陰離子與堿性染料陽離子形成離子

18、締合 第二十六張，PPT共五十七頁，創(chuàng)作于2022年6月9.1.3 紫外可見吸收光譜法常用術(shù)語生色團(tuán)助色團(tuán)紅移和藍(lán)移增色效應(yīng)和減色效應(yīng)強(qiáng)帶與弱帶譜帶類型（）帶（）帶（）帶和帶第二十七張，PPT共五十七頁，創(chuàng)作于2022年6月1生色團(tuán) 紫外-可見光譜中，生色團(tuán)(Chromophore)是指能在近紫外和可見光區(qū)產(chǎn)生特征吸收的基團(tuán)。有機(jī)化合物中，生色團(tuán)一般是具有電子的特征基團(tuán)，如C=C， CC，C=O，C=N，CN，C=S，N=N，N=O，S=O等，如表9-4。這類基團(tuán)在有機(jī)化合物中孤立存在時(shí)，將在遠(yuǎn)紫外光區(qū)產(chǎn)生特征吸收譜帶。當(dāng)化合物中存在多個(gè)生色團(tuán)，且處于共軛狀態(tài)時(shí)，最大吸收峰將位于近紫外光區(qū)和可

19、見光區(qū)，對(duì)應(yīng)于躍遷和躍遷。第二十八張，PPT共五十七頁，創(chuàng)作于2022年6月助色團(tuán)有些基團(tuán)本身在紫外-可見光區(qū)不產(chǎn)生吸收，但這些基團(tuán)與生色團(tuán)相連時(shí)，能使生色團(tuán)的最大吸收波長向長波長方向移動(dòng)，吸收峰強(qiáng)度增加，這類基團(tuán)稱為助色團(tuán)(Auxochrome)。如-X， -OH，-OR，-NH2，-NR-，-SH，-SR-等。當(dāng)它們連接到生色團(tuán)上時(shí)，n電子與電子相互作用，相當(dāng)于增大了共軛體系，使軌道間能級(jí)差減小，生色團(tuán)的最大吸收波長向長波長方向移動(dòng)，且吸收峰強(qiáng)度增加。第二十九張，PPT共五十七頁，創(chuàng)作于2022年6月紅移和藍(lán)移 當(dāng)取代基或溶劑體系發(fā)生變更時(shí)，化合物的最大吸收波長(ma)向長波方向移動(dòng)的現(xiàn)象

20、稱為紅移(Bathochromic shift or red shift)，向短波方向移動(dòng)的現(xiàn)象稱為藍(lán)移(或紫移，Hypsochromic shift or blue shift)。第三十張，PPT共五十七頁，創(chuàng)作于2022年6月增色效應(yīng)和減色效應(yīng)最大吸收帶的摩爾吸收系數(shù)增加時(shí)稱為增(濃)色效應(yīng)(Hyperchromic effect)；最大吸收帶的摩爾吸收系數(shù)減小時(shí)稱為減(淺)色效應(yīng)(Hypochromic effect)。第三十一張，PPT共五十七頁，創(chuàng)作于2022年6月強(qiáng)帶與弱帶強(qiáng)帶多由允許躍遷產(chǎn)生，是最大摩爾吸收系數(shù)max 104 Lmol-1cm-1的吸收帶；弱帶多由禁阻躍遷產(chǎn)生，是

21、最大摩爾吸收系數(shù)max 103 Lmol-1cm-1的吸收帶。第三十二張，PPT共五十七頁，創(chuàng)作于2022年6月譜帶類型(1) R帶 R帶是含p-共軛體系的生色團(tuán)，如-N=O, -C=O，-N=N-等，發(fā)生產(chǎn)生的吸收帶。該帶的最大吸收峰一般位于200400 nm之間，吸收強(qiáng)度弱，最大摩爾吸光系數(shù)max 104 Lmol-1cm-1。K帶的最大吸收波長隨溶劑極性和共軛體系的增加而紅移；R帶的最大吸收波長隨溶劑極性增加藍(lán)移，隨共軛體系的變化不如K帶明顯。第三十三張，PPT共五十七頁，創(chuàng)作于2022年6月(3) B帶和E帶B帶和E帶是芳香族和雜芳香族化合物的躍遷產(chǎn)生的特征光譜吸收帶，B帶吸收峰位于7

22、0230nm之間，中心波長在254 nm左右，最大摩爾吸收系數(shù)(max)約在200 Lmol-1cm-1，為一伴有多重小峰的寬峰結(jié)構(gòu)，又稱精細(xì)結(jié)構(gòu)。屬于禁阻躍遷產(chǎn)生的弱吸收帶，當(dāng)苯環(huán)上有取代基時(shí)，B帶的精細(xì)結(jié)構(gòu)減弱或消失。在極性溶劑中，由于溶質(zhì)與溶劑的相互作用，其精細(xì)結(jié)構(gòu)消失或變得不明顯。 第三十四張，PPT共五十七頁，創(chuàng)作于2022年6月E帶分為E1帶(又稱B帶、帶)和E2帶(又稱La帶、p帶)。屬于躍遷概率較大或中等的允許躍遷。 E1帶最大吸收波長在184 nm左右，吸收強(qiáng)度大，最大摩爾吸收系數(shù)max 104 Lmol-1cm-1；E2帶出現(xiàn)在204 nm左右，最大摩爾吸收系數(shù)max103

23、 Lmol-1cm-1。當(dāng)苯環(huán)上引入共軛取代基(或帶n電子基團(tuán))時(shí)，最大吸收波長紅移，吸光強(qiáng)度增大。第三十五張，PPT共五十七頁，創(chuàng)作于2022年6月9.1.4 影響紫外-可見吸收光譜的因素1. 共軛效應(yīng) 共軛體系增加，最大吸收波長紅移，最大摩爾吸收系數(shù)增加2.取代基效應(yīng) 共軛雙鍵兩端有給電子基或吸電子基時(shí)，化合物的最大吸收波長和吸光強(qiáng)度會(huì)發(fā)生改變 講解Woodward-Fieser規(guī)則 3. 溶劑效應(yīng)及溶劑選用規(guī)則第三十六張，PPT共五十七頁，創(chuàng)作于2022年6月Woodward-Fieser規(guī)則 第三十七張，PPT共五十七頁，創(chuàng)作于2022年6月9.2 紫外-可見分光光度計(jì)第三十八張，PP

24、T共五十七頁，創(chuàng)作于2022年6月9.2.1 儀器基本結(jié)構(gòu)典型光譜儀的組成:(1) 穩(wěn)定的輻射源-光源(2)色散元件-單色器(3) 固定試樣用的透明容器-樣品池(4) 檢測器(5)信號(hào)處理器或輸出裝置0.575光源單色器吸收池檢測器顯示第三十九張，PPT共五十七頁，創(chuàng)作于2022年6月9.2.2 紫外-可見分光光度計(jì)類型1. 單光束分光光度計(jì)第四十張，PPT共五十七頁，創(chuàng)作于2022年6月2. 雙光束紫外-可見分光光度計(jì) 雙光束分光光度計(jì)光路示意圖第四十一張，PPT共五十七頁，創(chuàng)作于2022年6月3. 雙波長紫外-可見分光光度計(jì) 雙波長分光光度計(jì)示意圖 第四十二張，PPT共五十七頁，創(chuàng)作于20

25、22年6月4. 多道分光光度計(jì)多道分光光度計(jì)示意圖第四十三張，PPT共五十七頁，創(chuàng)作于2022年6月9.3 紫外-可見分光光度法 的應(yīng)用9.3.1 純度檢查鑒定甲醇或乙醇中的雜質(zhì)苯四氯化碳中有無二硫化碳雜質(zhì)第四十四張，PPT共五十七頁，創(chuàng)作于2022年6月9. 3. 2 定性分析1. 標(biāo)準(zhǔn)圖譜對(duì)照法2. 最大波長計(jì)算法3. 結(jié)構(gòu)推斷4. 異構(gòu)體判斷5. 構(gòu)象判斷第四十五張，PPT共五十七頁，創(chuàng)作于2022年6月9. 3. 3 定量分析1. 基本術(shù)語2. 朗伯-比爾定律 A = abc A = 第四十六張，PPT共五十七頁，創(chuàng)作于2022年6月3. 分光光度滴定法 以一定的標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定待測物溶液

26、，測定滴定中溶液的吸光度變化，通過作圖法求得滴定終點(diǎn)，從而計(jì)算待測組分含量的方法稱為分光光度滴定。一般有直接滴定法和間接滴定法兩種。前者選擇被滴定物、滴定劑或反應(yīng)生成物之一摩爾吸光系數(shù)最大的物質(zhì)的max為吸收波長進(jìn)行滴定。滴定曲線有如下幾種形式。間接滴定法需使用指示劑 光度滴定已用于酸堿滴定、氧化還原滴定、沉淀滴定和絡(luò)合滴定等第四十七張，PPT共五十七頁，創(chuàng)作于2022年6月 4. 差示分光光度法 吸光度A在0.2-0.8范圍內(nèi)誤差最小。超出此范圍，如高濃度或低濃度溶液，其吸光度測定誤差較大。尤其是高濃度溶液，更適合用差示法 一般分光光度測定選用試劑空白或溶液空白作為參比，差示法則選用一已知濃

27、度的溶液作參比。該法的實(shí)質(zhì)是相當(dāng)于透光率標(biāo)度放大第四十八張，PPT共五十七頁，創(chuàng)作于2022年6月 高吸收法在測定高濃度溶液時(shí)使用。選用比待測溶液濃度稍低的已知濃度溶液作標(biāo)準(zhǔn)溶液，調(diào)節(jié)透光率為100%。 低吸收法在測定低濃度溶液時(shí)使用。選用比待測液濃度稍高的已知濃度溶液作標(biāo)準(zhǔn)溶液，調(diào)節(jié)透光率為0。 最精密法是同時(shí)用濃度比待測液濃度稍高或稍低的兩份已知溶液作標(biāo)準(zhǔn)溶液，分別調(diào)節(jié)透光率為0或100%。第四十九張，PPT共五十七頁，創(chuàng)作于2022年6月5. 導(dǎo)數(shù)分光光度法 用吸光度對(duì)波長求一階或高階導(dǎo)數(shù)并對(duì)波長作圖，可以得到導(dǎo)數(shù)光譜。對(duì)比爾定律A=bC求導(dǎo)，得到：因此，吸光度A的導(dǎo)數(shù)值與濃度C成比例。

28、 從圖中可以看出，隨著導(dǎo)數(shù)階數(shù)的增加，譜帶變得尖銳，分辨率提高，但原吸收光譜的基本特點(diǎn)逐漸消失。 導(dǎo)數(shù)光譜的特點(diǎn)在于靈敏度高，可減小光譜干擾。因而在分辨多組分混合物的譜帶重疊、增強(qiáng)次要光譜(如肩峰)的清晰度以及消除混濁樣品散射的影響時(shí)有利 第五十張，PPT共五十七頁，創(chuàng)作于2022年6月 6. 雙波長分光光度法 前面已經(jīng)介紹了雙波長分光光度計(jì)的結(jié)構(gòu)。它是通過兩個(gè)單色器分別將光源發(fā)出的光分成1，2兩束單色光，經(jīng)斬光器并束后交替通過同一吸收池。因此檢測的是試樣溶液對(duì)兩波長光吸收后的吸光度差。 12= 即兩束光通過吸收池后的吸光度差與待測組分濃度成正比 第五十一張，PPT共五十七頁，創(chuàng)作于2022年

29、6月特點(diǎn)(1) 可用于懸濁液和懸浮液的測定，消除背景吸收。 因懸濁液的參比溶液不易配制，使用雙波長分光光度法時(shí)，可固定1為不受待測組分含量影響的等吸收點(diǎn)(于樣品中依次加入待測組分，記錄吸收光譜，得到的吸光度重疊的點(diǎn)為等吸收點(diǎn)，測定2處的吸光度變化，可以抵消混濁的干擾，提高測定精度(因?yàn)槭褂猛晃粘?。 (2) 無須分離，可用于吸收峰相互重疊的混合組分的同時(shí)測定。(3) 可測定導(dǎo)數(shù)譜。 固定1和 2兩波長差為1-2nm進(jìn)行波長掃描，得到一階導(dǎo)數(shù)光譜(DA/Dl)。有的儀器還帶有測定二階導(dǎo)數(shù)光譜的電路第五十二張，PPT共五十七頁，創(chuàng)作于2022年6月分析條件的選擇 溶劑的選擇和波長選擇 所選擇的溶劑應(yīng)易于溶解樣品并不與樣品作用，且在測定波長區(qū)