執(zhí)業(yè)中藥師考試資料之中藥鑒定的常用方法

1、執(zhí)業(yè)中藥師考試資料之中藥鑒定的常用方法中藥鑒定的一般程序在中藥鑒定的常規(guī)工作中， 一般按照下列程序進(jìn)行： 樣品登記 ( 包括送檢單位、日期、鑒定目的、樣品數(shù)量、一般狀態(tài)和包裝等) ，取樣，鑒定（根據(jù)中國藥典規(guī)定，以中藥材為例，主要內(nèi)容為：來源性狀鑒別檢查含量測定）。中藥鑒定的常用方法來源鑒定法：來源鑒定法，又稱“基原鑒定法”，它是中藥鑒定的基礎(chǔ)，也是中藥研究、生產(chǎn)、開發(fā)利用的主要依據(jù)。來源鑒定法就是應(yīng)用植物、動物或礦物形態(tài)和分類學(xué)等方面的知識，對中藥的來源或原料藥進(jìn)行鑒定，確定其正確的學(xué)名（或礦物的名稱）或中成藥的原料組成，以保證在應(yīng)用中品種準(zhǔn)確的一種方法。來源鑒定法的特點(diǎn)：宏觀。主要用于完整

2、的植物、動物、礦物類藥材的真?zhèn)舞b別。來源鑒定的步驟（以植物藥為例）：形態(tài)觀察及描述，查閱文獻(xiàn)資料，核對標(biāo)本（或采集、制備標(biāo)本），學(xué)名的確定。性狀鑒定法：性狀鑒定法也叫“直觀鑒定法”，是用感觀來鑒定中藥性狀是否與規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)或?qū)φ掌废喾系囊环N方法。它是由傳統(tǒng)鑒別方法與現(xiàn)代生物和礦物形態(tài)學(xué)相結(jié)合而形成的。具體地說，就是用眼看、手摸、鼻嗅、口嘗、感試等十分簡便的方法來鑒別中藥的真?zhèn)?、純度或粗略估?jì)品質(zhì)的優(yōu)劣。它包括看、量、嗅、嘗、試5 種主要的傳統(tǒng)經(jīng)驗(yàn)鑒別法，具有簡單、易行、迅速的特點(diǎn)。性狀特征的描述方法： 通常采用兩種方法進(jìn)行： 一是使用生物學(xué)或礦物學(xué)的形態(tài)、 組織學(xué)等名詞； 二是采用廣大醫(yī)藥工作

3、者在長期實(shí)踐中積累起來的生動、 形象的經(jīng)驗(yàn)鑒別術(shù)語。 中藥材性狀鑒定觀察的主要內(nèi)容 ( 要點(diǎn) ) ：形狀、大小、顏色、表面特征、質(zhì)地、斷面特征、氣、味、水試和火試。顯微鑒定法： 是利用顯微鏡、 顯微技術(shù)及顯微化學(xué)方法等對中藥進(jìn)行分析鑒定，以確定其真?zhèn)?、純度、品質(zhì)以及鑒別依據(jù)。中藥顯微鑒定觀察的內(nèi)容：植（動）物的組織構(gòu)造、細(xì)胞形狀、內(nèi)含物的特征以及礦物的光學(xué)特性等內(nèi)容。顯微標(biāo)本片的種類：根據(jù)制作方法和保存的需要分： 半永久制片、永久制片和臨時制片；根據(jù)制片方法分：切片標(biāo)本片( 包括橫切片、縱切片，縱切片又包括切向縱切片和徑向縱切片) 、解離組織標(biāo)本片、表面標(biāo)本片、粉末標(biāo)本片和磨片等。顯微制片觀察

4、的主要內(nèi)容：橫切片多用于觀察組織的排列特征；縱切片多用于觀察莖、木類中藥的某些細(xì)胞組織，如射線的特征；解離組織片用于觀察某些細(xì)胞的形狀，如纖維、石細(xì)胞等；表面片多用于觀察葉、花、全草、果實(shí)和種子等的表面特征，一般取某一部分制片；粉末片多用于觀察組織碎片、細(xì)胞及后含物或某些中藥顆粒的特征；磨片用于堅(jiān)硬藥材如骨類、貝殼類及礦石的顯微特征觀察。顯微化學(xué)反應(yīng)主要內(nèi)容包括：細(xì)胞壁的鑒別（如木質(zhì)化細(xì)胞壁、木栓化細(xì)胞壁、角質(zhì)化細(xì)胞壁、纖維素細(xì)胞壁、半纖維素細(xì)胞壁、硅質(zhì)化細(xì)胞壁、黏液化細(xì)胞壁、 幾丁質(zhì)細(xì)胞壁） ，糖類的鑒別（如淀粉、菊糖、可溶性糖類、黏液質(zhì)和果膠質(zhì)類） ，蛋白質(zhì) ( 糊粉粒 ) 類的鑒別，鞣質(zhì)

5、類成分的鑒別， 草酸鹽的鑒別， 碳酸鹽的鑒別和生物堿等化學(xué)成分的鑒別等。理化鑒定法：是利用中藥中存在某些化學(xué)成分的化學(xué)性質(zhì)和物理性質(zhì)，通過化學(xué)的、物理的或儀器分析的手段，鑒定其真?zhèn)?、純度、?nèi)在質(zhì)量，以及有害物質(zhì)的有無或含量?；瘜W(xué)定性分析法 ：是指利用某些化學(xué)試劑能與中藥中的某種或某類化學(xué)成分產(chǎn)生特殊的氣味、顏色、沉淀或結(jié)晶等反應(yīng)，來作為鑒別真?zhèn)蔚氖侄巍Ｒ话銇碚f，在對中藥進(jìn)行化學(xué)定性分析時，通?？捎闷涮崛∫?、粉末或切片等來進(jìn)行。 方法主要有下列幾種： 將化學(xué)試劑直接加到中藥表面、切片或粉末上， 觀察產(chǎn)生的結(jié)晶以及特殊的顏色反應(yīng)；取切片或粉末也可裝置在玻片或?yàn)V紙上，滴加相應(yīng)的試劑進(jìn)行直接觀察。如山

6、豆根中藥材表面滴加10%氫氧化鈉試液，立即由橙紅色變?yōu)檠t色（北豆根無此反應(yīng)）。取適量中藥粉末于小試管中，加適當(dāng)溶劑提出其化學(xué)成分。 然后將溶液滴于玻片上、 濾紙上或加入小試管中，滴加一定的試劑并觀察其現(xiàn)象。利用微量升華法，將中藥中可升華的成分分出， 加適當(dāng)?shù)脑噭┯^察其化學(xué)反應(yīng)現(xiàn)象。如牡丹皮粉末的微量升華物為丹皮酚，加三氯化鐵醇溶液呈暗紫色。微量升華法： 是利用中藥中所含的某些化學(xué)成分，在一定溫度下能夠升華的性質(zhì)，獲得升華物后，在顯微鏡下觀察其升華物的形狀、顏色或加某種化學(xué)試劑觀察其化學(xué)反應(yīng)作為鑒別的特征。必要時可用顯微熔點(diǎn)測定器測定升華結(jié)晶物的熔點(diǎn)。如斑蝥的升華物為白色柱狀或小片狀結(jié)晶（ 1

7、30140），加堿溶解，加酸又析出結(jié)晶；小兒化毒散經(jīng)微量升華可得冰片的結(jié)晶，其熔點(diǎn)應(yīng)在205210之間。熒光分析法：又稱“熒光光譜法”和“發(fā)射光譜法”。是利用中藥中的某些成分在吸收自然光或紫外光后能發(fā)生熒光的性質(zhì)，對中藥及其所含成分進(jìn)行鑒定的一種方法。熒光分析的常用儀器主要有熒光分析燈、光電熒光計(jì)、熒光分光光度計(jì)、顯微熒光計(jì)等。必須指出，并不是所有的中藥或其成分都有發(fā)生熒光的性質(zhì)。有些中藥本身不發(fā)生熒光，但若用酸、堿或熒光染色處理后，就可能使某些成分在紫外光線下變?yōu)榭梢娚省?有的中藥附有地衣或有多量霉菌生長，也可能有熒光出現(xiàn)，因此熒光分析還可用于檢查某些中藥的變質(zhì)情況。此外，在色譜分析應(yīng)用上

8、， 也可能使吸附在吸附柱上、 紙條上及薄層板上的各種成分產(chǎn)生熒光色譜。1）熒光定性分析：其方法主要有下列幾種：一是直接取中藥的飲片、粉末或其浸出液在紫外光下進(jìn)行觀察，如秦皮水浸液顯碧藍(lán)色熒光，日光下亦明顯 ( 含熒光物質(zhì)秦皮甲素和秦皮乙素) ；二是本身無熒光的中藥，經(jīng)化學(xué)方法處理后，在紫外光下進(jìn)行觀察；三是利用熒光顯微鏡觀察中藥的粉末或切片。2）熒光定量分析：利用被測物質(zhì)的熒光強(qiáng)度和溶液濃度成正比的關(guān)系，對中藥所含的成分進(jìn)行含量測定。熒光分析用于物質(zhì)的定量分析，測定方法與紫外光譜法基本相同，采用的方法有標(biāo)準(zhǔn)曲線法和比較法。本法對多組分混合物的分析，不經(jīng)分離就可以測得被測組分的含量。在中藥鑒定中

9、，也可通過色譜等手段，先將供試品中的預(yù)測成分分離后，然后取樣測定。顯微化學(xué)分析法： 即用顯微化學(xué)反應(yīng)來檢查中藥中細(xì)胞壁和細(xì)胞內(nèi)含物的化學(xué)物質(zhì)的性質(zhì)從而達(dá)到鑒定目的的一種方法。包括顯微化學(xué)反應(yīng)和顯微定位。本法主要用于藥材的臨時切片( 新鮮的材料效果尤佳 ) 或粉末，主要進(jìn)行細(xì)胞壁的鑒別：如木質(zhì)化細(xì)胞壁、木栓化細(xì)胞壁、角質(zhì)化細(xì)胞壁、纖維素細(xì)胞壁、半纖維素細(xì)胞壁、硅質(zhì)化細(xì)胞壁、黏液化細(xì)胞壁、幾丁質(zhì)細(xì)胞壁等；糖類的鑒別：如淀粉、菊糖、可溶性糖類、黏液質(zhì)和果膠質(zhì)類；蛋白質(zhì)( 糊粉粒 ) 類的鑒別；鞣質(zhì)類成分的鑒別；草酸鹽的鑒別； 碳酸鹽的鑒別和生物堿等化學(xué)成分的鑒別等。顯微定位：就是用顯微化學(xué)的方法確定

10、藥材中化學(xué)成分的存在部位( 有效部位 ) ，以此鑒定藥材的質(zhì)量和品種。 顯微定位的應(yīng)用必須在所鑒定的藥材有效成分明確的情況下， 然后選擇對有效成分具有特殊反應(yīng)的化學(xué)試劑， 使之產(chǎn)生顏色或結(jié)晶， 用顯微鏡確定有效成分的存在部位。具體方法是：取藥材用水浸軟或軟化后，切成薄片，滴加特定的化學(xué)試劑，封片檢查。本法是中藥鑒別和質(zhì)量評價的一種簡單、有效的方法之一，但選擇特有反應(yīng)的化學(xué)試劑較為困難。色譜法：色譜鑒定法又稱“層析法”，根據(jù)其分離原理，有吸附色譜、分配色譜、離子交換色譜與排阻色譜等。吸附色譜是利用被分離物質(zhì)在吸附劑上被吸附能力的不同， 用溶劑或氣體洗脫使組分分離，常用的吸附劑有氧化鋁、硅膠、聚酰

11、胺等有吸附活性的物質(zhì)。分配色譜是利用被分離物質(zhì)在兩相中進(jìn)行分配使組分分離， 其中一相為液體，涂布或使之鍵合在固體載體上稱為固定相； 另一相為液體或氣體稱為流動相，常用的載體有硅膠、硅藻土、硅鎂型吸附劑與纖維素粉等。離子交換色譜是利用被分離物質(zhì)在離子交換樹脂上的離子交換作用使組分分離，常用的有不同強(qiáng)度的陽、陰離子交換樹脂，流動相一般為水或含有機(jī)溶劑的緩沖液。排阻色譜又稱“凝膠色譜”或“凝膠滲透色譜”，是利用被分離物質(zhì)分子量大小不同在填充劑上滲透程度不同使組分分離；常用的填充劑有分子篩、葡聚糖凝膠、微孔聚合物、微孔硅膠或玻璃珠等，可根據(jù)載體和供試品的性質(zhì)選用水或有機(jī)溶劑為流動相。分離方法有柱色譜法

12、、紙色譜法、薄層色譜法、氣相色譜法、高效液相色譜法等。色譜法反映的是中藥提取物化學(xué)組成及含量情況，能定性定量地反映中藥的鑒別特征，具有分離能力強(qiáng)、分析速度快、定量準(zhǔn)確等特點(diǎn)。在進(jìn)行色譜鑒定時，所用溶劑應(yīng)與供試品不起化學(xué)反應(yīng)，除另有規(guī)定外，應(yīng)用純度較高的溶劑；色譜時的溫度，除氣相色譜法或另有規(guī)定外，系指在室溫條件操作。分光光度法： 光譜鑒定法又稱分光光度法，它是通過測定中藥中被測物質(zhì)在某些特定波長處或一定波長范圍內(nèi)光的吸收度，對該物質(zhì)進(jìn)行定性和定量分析的方法。藥品分析一般用200400nm的紫外光區(qū)； 400850nm的可見光區(qū)； 2.5 15m（或按波數(shù)計(jì)為4000667cm-1）的紅外光區(qū)。所用儀器為紫外分光光度計(jì)、可見光分光光度計(jì)（或比色計(jì)）、紅外分光光度計(jì)、原子吸收分光光度計(jì)和熒光分光光度計(jì)等