桂枝甘草湯方藥半仿生提取醇沉法最佳醇沉濃度的優(yōu)選

1、桂枝甘草湯方藥半仿生提取醇沉法最正確醇沉濃度的優(yōu)選【摘要】目的優(yōu)選桂枝甘草湯方藥半仿生提取醇沉(sbae)法最正確醇沉濃度。要領(lǐng)用優(yōu)選的最正確半仿生提取工藝,最正確組合方法混煎制備提取液,對(duì)提取液別離作甘草次酸、肉桂酸、總黃酮、干浸膏的含量測定,優(yōu)選最正確醇沉濃度。效果醇沉濃度為70%的sbae液綜合評(píng)價(jià)y值顯著高于其他醇沉濃度的sbae液。結(jié)論桂枝甘草湯sbae法的醇沉濃度以70%為佳。【關(guān)鍵詞】桂枝甘草湯；半仿生提取法；醇沉濃度abstrat：bjetivetptiizethealhlnentratinfguizhiganadetinextratedbysei-binialhliextra

2、tin(sbae).ethdsextratserepreparedbythebestsei-biniextratintehnlgyandthebestbinatinethd.thententsfglyyrrhetiniaid,innaiaid,ttalflavnes,vlatileilanddryextratintheeahextrateredeterined.resultsprehensiveevaluatinyf70%alhlisbaeextratassignifiantlyhigherthanthatftheralhlnentratinsbae.nlusin70%isthebestalh

3、lnentratinfguizhiganadetinextratedbysbae.keyrds：guizhiganadetin；sei-biniextratin；alhlnentratin桂枝甘草湯由桂枝、炙甘草構(gòu)成,具有補(bǔ)心助陽、生陽化氣、補(bǔ)陽扶中的作用。按照半仿生提取法(sbe)理論1-5,在用勻稱方案優(yōu)選出桂枝甘草湯方藥sbe法工藝條件和最正確組合方法的底子上6-7,為進(jìn)一步優(yōu)選該方半仿生提取醇沉法(sbae)的最正確醇沉濃度,筆者以甘草次酸、肉桂酸、總黃酮、干浸膏得率為指標(biāo),對(duì)該方藥做了種種醇沉濃度的平行比較試驗(yàn),現(xiàn)報(bào)道如下。1儀器與試藥phs-3型細(xì)密ph計(jì)(上海雷磁儀器廠)；a11

4、0型電子闡發(fā)天平(上海第二闡發(fā)儀器廠)；lxj-型離心沉淀機(jī)(上海第三闡發(fā)儀器廠)；754紫外可見分光光度計(jì)(上海細(xì)密科學(xué)儀器)；vp高效液相色譜儀(shiadzurpratinassebledinhina),spd-10a檢測器,l-10at泵；kq-250e型醫(yī)用超聲波洗濯器(昆山市超聲儀器)；re-52aa型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器(上海亞榮生化儀器廠)。實(shí)行用藥材經(jīng)山東中醫(yī)藥大學(xué)張兆旺傳授斷定。桂枝為樟科植物肉桂innauassiapresl的枯燥嫩枝；甘草為豆科植物甘草glyyrrhizauralensisfish.的枯燥根及根莖。炙甘草：取煉蜜,加適量冷開水稀釋后,淋入凈甘草片中,拌勻,悶潤,置

5、炒制容器內(nèi),用文火加熱,炒至老黃色,不粘手時(shí)取出,晾涼(每100kg甘草片用煉蜜25kg)。甘草次酸、肉桂酸、柚皮苷比較品(中國藥品生物成品檢定所提供,供含量測定用,批號(hào)別離為723-200109、0786-9802、722-200107)。甲醇為色譜純,水為重蒸餾水,別的試劑均為闡發(fā)純。2要領(lǐng)與效果2.1提取液的制備將處方藥材別離破壞,按處方比例(桂枝甘草21)稱取藥材粗粉240g(過1020目篩)。用優(yōu)選出的組合方法,即桂枝與甘草混煎的方法,用sbe法提取(雙提法；第1煎用水用0.1l/lhl調(diào)至ph為2.04,第2、3煎用水用0.1l/lnah調(diào)至ph為7.25、8.51；加水量依次為藥

6、材重量的10、8、8倍；煎煮時(shí)間依次為190、95、45in；雙提法提取的揮發(fā)油單獨(dú)存放),別離濾過,離心,歸并上清液,水浴濃縮至800l。取濃縮液100l共6份,調(diào)ph值為7.5,參加95%的乙醇調(diào)至醇濃度為30%、40%、50%、60%、70%、80%,冷藏安排24h,離心,上清液接納乙醇至無醇味后,別離用蒸餾水定容至100l(每1l相稱于原藥材0.3g)。2.2供試液的制備細(xì)密量取提取液各10l,加水35l,徐徐參加鹽酸4l,靜置30in,待氣泡消散后,再加鹽酸1l、氯仿30l,水浴加熱回流1.5h,放冷,移至分液漏斗中,靜置,分取氯仿層,水層用氯仿萃取(20l2),接納氯仿,殘?jiān)脽o水

7、乙醇定容至10l,得供試液a(每1l相稱于原藥材0.3g)。細(xì)密量取提取液各15l,別離置蒸發(fā)皿中,加硅藻土4g,拌勻,水浴蒸至近干,80烘干,研細(xì),加乙酸乙酯40l,超聲提取20in,濾過,接納乙酸乙酯,殘?jiān)眉状级ㄈ葜?l,得供試液b(每1l相稱于原藥材0.9g)。細(xì)密量取提取液各25l,別離置蒸發(fā)皿中,加硅藻土4g,拌勻,水浴至近干,80烘干,研細(xì),用甲醇100l索氏回流5h(提至無色),濾過,用甲醇定容至100l,得供試液(每1l相稱于原藥材0.075g)。2.3比較品溶液的制備細(xì)密稱取甘草次酸比較品1.70g,用無水乙醇配制成0.34g/l的溶液。細(xì)密稱取肉桂酸比較品2.20g,用甲

8、醇配制成0.22g/l的溶液。細(xì)密稱定柚皮苷比較品2.00g,用甲醇配制成1.00g/l的溶液。2.4甘草次酸的含量測定檢測波長250n；柱溫：35；敏捷度：1.0aufs；活動(dòng)相：甲醇-水(8416)；流速：1.00l/in；進(jìn)樣量：20l。在上述色譜條件下,甘草次酸與其他身分可到達(dá)基線分散,分散度大于1.5,理論塔板數(shù)1981。2.5肉桂酸的含量測定檢測波長為267n；柱溫：35；敏捷度：1.0afus；活動(dòng)相：甲醇-0.1%磷酸(5248)；流速為1.00l/in；進(jìn)樣量為20l。在上述色譜條件下,肉桂酸與其他身分均到達(dá)基線分散,分散度大于1.5,理論塔板數(shù)2778。細(xì)密取肉桂酸比較液0

9、.025、0.05、0.1、0.2、0.4、0.8、1.0l,別離加甲醇定容至1l,各取20l進(jìn)樣,測定峰面積。以進(jìn)樣量為橫坐標(biāo),峰面積為縱坐標(biāo),繪制尺度曲線,效果肉桂酸在0.110.44g范疇內(nèi),其進(jìn)樣量(g)與峰面積呈精良的線性干系,回歸方程：y7.4677106x123315.29,r0.9998。2.6總黃酮的含量測定精取柚皮苷比較品溶液0.02、0.04、0.06、0.08、0.1l,參加甲醇1l,再參加10%kh溶液0.5l,室溫安排5in,用甲醇稀釋并定容至10l,以甲醇作空缺比較,在412n處測定汲取度。以濃度(g/l)為橫坐標(biāo),吸光度(a)為縱坐標(biāo),繪制尺度曲線,效果總黃酮的

10、線性范疇為20100g/l,回歸方程：a0.052170.0197,r0.9994。精取供試液各4l,用甲醇稀釋并定容至100l。取上述稀釋液1l,加10%kh溶液0.5l,室溫安排5in,用甲醇稀釋至10l,在412n處測定汲取度。另取上述稀釋液1l,用甲醇稀釋至10l,作為空缺比較。總黃酮的含量以柚皮苷盤算,效果見表1。2.7干浸膏的含量測定勸2.1項(xiàng)下各提取液10l,別離置恒重的蒸發(fā)皿中,水浴蒸干,烘至恒重,盤算干浸膏的含量,效果見表1。表16種醇沉濃度sbae液中各指標(biāo)身分含量(略)2.8綜合評(píng)判要領(lǐng)與效果將表1中各指標(biāo)身分的測定命據(jù),按公式xi;j(xi;jx()j)/sj舉行尺度化

11、處置懲罰。xi;j為驗(yàn)證明行樣品液i中身分j的含量,x()j、sj別離為各醇沉濃度樣品液中身分j的均勻值和尺度差,xi;j為尺度化后的值。按照各指標(biāo)在提取工藝中的主次職位,賜與差異的加權(quán)系數(shù),以尺度化后的值xi;j加權(quán)求和,即得綜合評(píng)價(jià)y值,并求出綜合評(píng)價(jià)y值,效果見表2。表26種醇沉濃度sbae液中各指標(biāo)身分含量的尺度化值及綜合評(píng)代價(jià)略注：y(甘草次酸肉桂酸總黃酮)7干浸膏4(根據(jù)各指標(biāo)在藥效發(fā)揮中的作用)3小結(jié)與討論水提醇沉為中藥制劑的常用提取方法,顛末醇沉可以淘汰制劑體積,撤除雜質(zhì),并可以進(jìn)一步制備其他劑型。本研究對(duì)桂枝甘草湯差異醇沉濃度sbae液中甘草次酸、肉桂酸、總黃酮的含量和干浸膏

12、得率舉行比力,效果醇沉濃度為70%的sbae液綜合評(píng)價(jià)y值顯著高于其他醇沉濃度的sbae液,提示桂枝甘草湯sbae法的醇沉濃度以70%為佳。在制備提取液時(shí)調(diào)治ph值,目的是使甘草次酸、肉桂酸以鹽的情勢存在,防范濃縮液中甘草次酸、肉桂酸結(jié)晶,醇沉后離心喪失。醇沉?xí)r必需對(duì)乙醇自己的濃度作溫度校正,以包管醇沉濃度的正確,校正公式為：實(shí)測(20t)0.4?！緟⒖嘉墨I(xiàn)】1張兆旺,孫秀梅.試論“半仿生提取法制備中藥口服制劑j.中國中藥雜志,1995,20(11)：670673.2張瑞亭,張兆旺,孫秀梅.頭腦方法的轉(zhuǎn)換與中藥“半仿生提取法j.中國中藥雜志,1997,22(9)：542544.3張兆旺,孫秀梅.“半仿生提取法是中藥藥劑當(dāng)代化的科學(xué)途徑n.中國中醫(yī)藥報(bào),2000-05-08(4).4張兆旺,