定性試驗(yàn)性能驗(yàn)證報(bào)告

1、性能驗(yàn)證報(bào)告（定性類）單位名稱：AAA醫(yī)院科室名稱：檢驗(yàn)科實(shí)驗(yàn)室：臨床微生物與病原學(xué)實(shí)驗(yàn)室驗(yàn)證人員：審核人：批準(zhǔn)人：驗(yàn)證日期：2012年8月10日一2012年9月10日檢測方法分析性能驗(yàn)證報(bào)告方法名稱：細(xì)菌鑒定儀器名稱：VITEK 2全自動(dòng)微生物鑒定/藥敏分析系統(tǒng)試劑名稱：GN鑒定卡、GP鑒定卡、YST鑒定卡項(xiàng)目名稱正確度（）革蘭陽性球菌（GP）100革蘭陰性ffWCGN）100真菌（YST）1001.3.性能驗(yàn)證計(jì)劃驗(yàn)證指標(biāo)驗(yàn)證方式正確度以參照參加衛(wèi)生部和山東省臨檢中心室間質(zhì)評的結(jié)果符合率表示符合率以公認(rèn)的標(biāo)準(zhǔn)菌株按日常操作上機(jī)鑒定，比較鑒定的百分率及生化反應(yīng)的符合率重復(fù)性米用公認(rèn)的標(biāo)準(zhǔn)菌株

2、及衛(wèi)生部質(zhì)評菌株，對同一株細(xì)菌在不同工作日進(jìn) 行上機(jī)鑒定，比較兩次鑒定結(jié)果的鑒定百分率及生化反應(yīng)的符合率1.4.實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備：1.4.1在進(jìn)行實(shí)驗(yàn)前，根據(jù)作業(yè)指導(dǎo)書由儀器責(zé)任人和儀器工程師共同對儀器進(jìn)行 全面的保養(yǎng)、維護(hù)和核查，以使儀器達(dá)到一個(gè)良好的工作狀態(tài)。1.4.2試劑耗材準(zhǔn)備無菌比濁管、無菌棉簽、比濁儀、定量加樣器、載卡架等。1.4.3標(biāo)本的準(zhǔn)備菌種的復(fù)蘇：根據(jù)鑒定卡要求結(jié)合實(shí)驗(yàn)室現(xiàn)有菌種儲備，選用菌株如下：GN鑒定卡GP鑒定卡YST鑒定卡 .肺炎克雷伯菌TCC700603采用新鮮細(xì)菌（處于對數(shù)生長期）進(jìn)行試驗(yàn)。1.4.4菌懸液制備1.4.4.1比濁儀校準(zhǔn)：采用標(biāo)準(zhǔn)比濁管0.5麥?zhǔn)线M(jìn)行測定

3、，連續(xù)測定三次，要求每 次結(jié)果在控。1.4.4.2選取潔凈比濁管，加入適量的無菌鹽水，挑取新鮮菌落2-3個(gè)，充分研磨， 混勻。1.4.4.3比濁：按照標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程。配制濃度0.50.63麥?zhǔn)系木鷳乙骸?.4.4.4上機(jī)操作。1.4.4.5上機(jī)完成時(shí)將剩余細(xì)菌懸液轉(zhuǎn)種至血平板，過夜培養(yǎng)，檢查其純度。1.5. 結(jié)果1.5.1正確度驗(yàn)證結(jié)果：2010年，參加全國衛(wèi)生部質(zhì)控共3次，參加山東省臨檢中心 質(zhì)控共2次。共鑒定細(xì)菌26例，其中革蘭陽性細(xì)菌占7例，鑒定正確7例，正確度為100%； 革蘭陰性細(xì)菌占15例，鑒定正確15例，正確度為100%；未檢出致病菌占1例，正確度 為100%。真菌4例，正確度為1

4、00%。1.5.2符合率驗(yàn)證結(jié)果：對標(biāo)準(zhǔn)菌株上機(jī)鑒定，比較細(xì)菌鑒定的百分率及其生化反應(yīng)的符合率，見表1。1.5.2重復(fù)性驗(yàn)證結(jié)果：留取部分標(biāo)準(zhǔn)菌株及臨床分離株，隔日重新上機(jī)，比較兩次鑒定結(jié)果，見表2。1.6結(jié)果判讀符合率試驗(yàn)：最好試驗(yàn)結(jié)果和預(yù)期結(jié)果完全符合；要求鑒定菌種正確，生化反應(yīng)不 符合項(xiàng)數(shù)不超過一項(xiàng)。重復(fù)性試驗(yàn)：要求兩次鑒定完全相同；差異生化反應(yīng)項(xiàng)數(shù)不多于一項(xiàng)。表1 VITEK-2 COMPACT全自動(dòng)細(xì)菌分析系統(tǒng)細(xì)菌鑒定符合率實(shí)驗(yàn)結(jié)果標(biāo)準(zhǔn)菌株鑒定卡試劑批號鑒定 百分率生化試驗(yàn) 總項(xiàng)數(shù)不符合生化反應(yīng)項(xiàng)數(shù)不符合生化反應(yīng)原因分析操作者備注細(xì)菌名ATCC大腸埃希菌25922GN24121604

5、099%470李繼霞連續(xù)做5次銅綠假單胞菌27853GN24121604099%470李繼霞連續(xù)做5次金黃色葡萄球菌29213GP24223414099%430李繼霞連續(xù)做5次糞腸球菌29212GP24223414099%430李繼霞連續(xù)做5次白色念珠菌90028YST24323681099%460李繼霞連續(xù)做5次表2 VITEK-2COMPACT全自動(dòng)細(xì)菌分析系統(tǒng)細(xì)菌鑒定重復(fù)性實(shí)驗(yàn)結(jié)果細(xì)菌名第一次(2012.9.7)第二次(2012.9.8)兩次結(jié)果生化反應(yīng)不同項(xiàng)數(shù)/總反應(yīng)項(xiàng)數(shù)差異生化原因分析備注鑒定率試劑批號操作者鑒定率試劑批號操作者大腸埃希菌(ATCC25922)99%241216040

6、李繼霞99%241216040李繼霞0/47銅綠假單胞菌(ATCC27853)99%241216040李繼霞99%241216040李繼霞0/47肺炎克雷伯菌(ATCC19603)99%241216040李繼霞99%241216040李繼霞0/47金黃色葡萄球菌(ATCC29213)99%242234140李繼霞99%242234140李繼霞0/43糞腸球菌(ATCC29212)99%242234140李繼霞99%242234140李繼霞0/43白色念珠菌ATCC(90028)99%243236810李繼霞99%243236810李繼霞0/461.7評估小結(jié)：1.7.1本儀器參評質(zhì)控全部合格，

7、正確率為100%。1.7.1采用標(biāo)準(zhǔn)菌株對GP、GN、YST分別測定，結(jié)果與預(yù)期值結(jié)果完全符合，符合率100%。1.7.2分別采用標(biāo)準(zhǔn)菌株與衛(wèi)生部質(zhì)控菌株對GP、GN、YST卡在兩個(gè)不同工作日重復(fù)上機(jī)測定，結(jié)果顯示生化結(jié)果在質(zhì)控株 完全一致，儀器重復(fù)性好。方法名稱：藥敏試驗(yàn)（KB法）2.1試劑名稱：MH瓊脂培養(yǎng)擂濟(jì)南百博、MH羊血瓊脂培養(yǎng)基濟(jì)南百博、HTM瓊脂培養(yǎng)基（濟(jì)南百博、抗生素（英BOXOID）項(xiàng)目名稱正確度（）細(xì)菌藥敏分析1002.3結(jié)果：2011年，參加全國衛(wèi)生部質(zhì)控共3次，參加山東省臨檢中心質(zhì)控共2次。藥敏共檢測39種次，其中正確分析39次，正確度100%。2.2性能驗(yàn)證計(jì)劃驗(yàn)證指

8、標(biāo)驗(yàn)證方式正確度以參照參加衛(wèi)生部和山東省臨檢中心室間質(zhì)評的結(jié)果符合率表示符合率以公認(rèn)的標(biāo)準(zhǔn)菌株按日常操作方法操作，比較藥敏紙片的抑菌圈直徑大小的差異性重復(fù)性米用公認(rèn)的標(biāo)準(zhǔn)菌株，對同一株細(xì)菌在不同工作日進(jìn)行藥敏試驗(yàn)，比較 兩次鑒定結(jié)果的鑒定百分率及生化反應(yīng)的符合率2.3標(biāo)本的準(zhǔn)備菌種的復(fù)蘇：根據(jù)鑒定卡要求結(jié)合實(shí)驗(yàn)室現(xiàn)有菌種儲備，選用菌株如下:MH瓊脂培養(yǎng)基MH羊血瓊脂培養(yǎng)基HTM瓊脂培養(yǎng)基符合率試驗(yàn)大腸埃希菌（TCC25922銅綠假單胞曲TCC278）3肺炎鏈球菌ATCC49619流感嗜血桿TCC492）7重復(fù)性試驗(yàn)大腸埃希菌(TCC25922肺炎鏈球菌(TCC49619流感嗜血桿|TCC492

9、47采用新鮮細(xì)菌(處于對數(shù)生長期)進(jìn)行試驗(yàn)。2.3.1菌懸液的制備2.3.1.1比濁儀校準(zhǔn)：采用標(biāo)準(zhǔn)比濁管0.5麥?zhǔn)线M(jìn)行測定，連續(xù)測定三次，要求每次結(jié)果在控。2.3.1.2選取潔凈比濁管，加入適量的無菌鹽水，挑取新鮮菌落2-3個(gè)，充分研磨，混勻。2.3.1.3比濁：按照標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程。配制濃度0.50.63麥?zhǔn)系木鷳乙骸?.3.1.4將菌液均勻涂布平板，靜止10分鐘，待平板將菌液吸收后，貼藥敏紙片。2.4結(jié)果2.4.1符合率試驗(yàn)結(jié)果表3 MH平板藥敏試驗(yàn)驗(yàn)證結(jié)果MH瓊脂生產(chǎn)廠家濟(jì)南百博紙片產(chǎn)地OXOIDA T C C2 5 9 2 2A T C C2 7 8 5 3培養(yǎng)條件5%CO92培養(yǎng)時(shí)間2

10、0-24小時(shí)培養(yǎng)溫度35C抗菌藥物名稱及含量Ug /片抑菌環(huán)直徑(mm)CLSI質(zhì)控范圍(mm)評價(jià)抗菌藥物名稱Ug /片抑菌環(huán)直徑(mm)CLSI 質(zhì)控范圍(mm)評價(jià)頭孢唑啉302121-27在控慶大霉素101916-21在控慶大霉素102019-26在控妥布霉素102019-25在控丁胺卡那302019-26在控哌拉西林1002625-33在控哌拉西林/三唑巴坦100/102724-30在控丁胺卡那302218-26在控阿莫西林/棒酸20/102018-24在控氨曲南302523-29在控頭孢呋辛鈉302320-26在控頭孢毗肟302524-30在控頭孢曲松303229-35在控亞胺培南

11、2520-28在控頭孫塞肟303029-35在控美洛培南103227-33在控頭孢毗肟303531-37在控環(huán)內(nèi)沙星53025-33在控頭孢西丁302623-29在控左氧氟沙星52519-26在控亞胺培南103026-32在控頭孢哌酮/舒巴坦2523-29在控美洛培南103128-34在控多粘菌素B1614-18在控左氧氟沙星53329-37在控復(fù)方新諾1.25/23.752623-29在控頭孢他啶303025-32在控氨曲南302928-36在控諾氟沙星102928-35在控呋喃妥因3002220-25在控表4 MH羊血瓊脂平板藥敏試驗(yàn)驗(yàn)證結(jié)果MH瓊脂生產(chǎn)廠家濟(jì)南百博紙片產(chǎn)地OXOID菌株A

12、TCC49616培養(yǎng)條件5%CO92培養(yǎng)時(shí)間20-24小時(shí)培養(yǎng)溫度35C抗菌藥物名稱及含量口g /片抑菌環(huán)直徑(mm)CLSI質(zhì)控范圍(mm)評價(jià)氨芐西林103330-36在控利福平52925-30在控頭孢曲松103230-35在控頭孫塞肟303531-39在控頭孢毗肟303228-35在控美洛培南103528-35在控左氧氟沙星52420-25在控復(fù)方新諾1.25/23.752520-28在控利奈唑安303125-34在控諾氟沙星102015-21在控呋喃妥因3002623-29在控表5 HTM平板藥敏試驗(yàn)驗(yàn)證結(jié)果MH瓊脂生產(chǎn)廠家濟(jì)南百博紙片產(chǎn)地OXOID菌株ATCC49247培養(yǎng)條件5%C

13、O92培養(yǎng)時(shí)間16-18小時(shí)培養(yǎng)溫度35C抗菌藥物名稱及含量Ug /片抑菌環(huán)直徑(mm)CLSI質(zhì)控范圍(mm)評價(jià)哌拉西林/三唑巴坦100/103533-38在控頭孢曲松103331-39在控頭孢噻肟303331-39在控頭孢毗肟302925-31在控亞胺培南102521-29在控美洛培南102520-28在控左氧氟沙星53832-40在控復(fù)方新諾1.25/23.753024-32在控頭孢他啶302927-35在控氨曲南303030-38在控氨芐西林101913-21在控環(huán)丙沙星303634-42在控利福平52522-30在控2.4.2重復(fù)性試驗(yàn)結(jié)果表6ATCC25922細(xì)菌藥敏符合率實(shí)驗(yàn)結(jié)

14、果菌名ATCC25922抗菌藥物名稱及含量ng /片抑菌環(huán)直徑 (mm)2012.9.1抑菌環(huán)直徑 (mm)2012.9.2CLSI質(zhì)控范圍(mm)評價(jià)頭孢唑啉30212021-27在控慶大霉素10202219-26在控丁胺卡那30202219-26在控哌拉西林/三唑巴坦100/10272624-30在控阿莫西林/棒酸20/10202318-24在控頭孢呋辛鈉30232120-26在控頭孢曲松30323229-35在控頭孫塞肟30303129-35在控頭孢毗肟30353431-37在控頭孢西丁30262523-29在控亞胺培南10303126-32在控表7ATCC49616細(xì)菌藥敏符合率實(shí)驗(yàn)結(jié)

15、果抗菌藥物名稱及含量ng /片抑菌環(huán)直徑(mm)2012.9.1抑菌環(huán)直徑(mm)2012.9.2CLSI質(zhì)控范圍(mm)評價(jià)氨芐西林10333230-36在控利福平5292925-30在控頭孢曲松10323230-35在控頭孫塞肟30353631-39在控頭孢毗肟30323528-35在控美洛培南10353528-35在控左氧氟沙星5242520-25在控復(fù)方新諾1.25/23.75252520-28在控利奈唑安30313025-34在控諾氟沙星10202015-21在控呋喃妥因300262823-29在控表8ATCC49247細(xì)菌藥敏符合率實(shí)驗(yàn)結(jié)果抗菌藥物名稱及含量ng/ 片抑菌環(huán)直徑 (

16、mm)2012.9.1抑菌環(huán)直徑 (mm)2012.9.2CLSI質(zhì)控范圍(mm)評價(jià)哌拉西林/三唑巴坦100/10353533-38在控頭孢曲松10333331-39在控頭孫塞肟30333431-39在控頭孢毗肟30292925-31在控亞胺培南10252621-29在控美洛培南10252520-28在控左氧氟沙星5383532-40在控復(fù)方新諾1.25/23.75302924-32在控頭孢他啶30292827-35在控氨曲南30303030-38在控氨芐西林10191613-21在控環(huán)內(nèi)沙星30363634-42在控利福平5252722-30在控表9三種平板藥敏結(jié)果統(tǒng)計(jì)表標(biāo)準(zhǔn)菌株藥敏試驗(yàn)總

17、項(xiàng)數(shù)不在控藥敏結(jié)果項(xiàng)數(shù)不符合藥敏原因分析操作者備注細(xì)菌名ATCC大腸埃希菌25922180/李繼霞銅綠假單胞菌27853120/李繼霞肺炎鏈球菌49619110/李繼霞流感嗜血桿菌49247130/李繼霞2.5評估小結(jié)2.5.1采用標(biāo)準(zhǔn)菌株對MH、MH羊血瓊脂平板、HTM平板分別進(jìn)行藥敏測定，結(jié)果與預(yù)期值結(jié)果完全符合，符合率100%。2.5.2分別采用臨床菌株與標(biāo)準(zhǔn)菌株對三種平板在兩個(gè)不同工作日重復(fù)上機(jī)測定，結(jié)果顯示測定結(jié)果均一致重復(fù)性好。3.方法名稱：血培養(yǎng)（儀器法）3.1全自動(dòng)血培養(yǎng)分析系統(tǒng)性能驗(yàn)證分析方法：季度回顧分析全自動(dòng)血培養(yǎng)分析系統(tǒng)的假陰性率和假 陽性率。驗(yàn)證指標(biāo)驗(yàn)證方式假陰性率對

18、血培養(yǎng)系統(tǒng)陰性結(jié)果盲轉(zhuǎn)血平板，任何細(xì)菌生長均視為假陰性， 統(tǒng)計(jì)分析假陰性結(jié)果占總送檢血培養(yǎng)數(shù)的百分比假陽性率對血培養(yǎng)系統(tǒng)陽性結(jié)果鏡檢未見侖細(xì)菌，轉(zhuǎn)種血平板和巧克力平板培 養(yǎng)一周后無任何侖晡生長均視為假陽性，統(tǒng)計(jì)分析假陽性結(jié)果占總 送檢血培養(yǎng)數(shù)的百分比表10 BacT Alert 3D全自動(dòng)血培養(yǎng)分析系統(tǒng)的假陰性和假陽性結(jié)果分析2011 年血培養(yǎng)總數(shù)假陰性例數(shù)假陰性率假陽性例數(shù)假陽性率79月166000%10.06%10 12 月236500%30.12%合計(jì)402500%40.09%表11 BACTEC9120全自動(dòng)血培養(yǎng)分析系統(tǒng)的假陰性和假陽性結(jié)果分析2011 年血培養(yǎng)總數(shù)假陰性例數(shù)假陰性率

19、假陽性例數(shù)假陽性率79月23000%00.00%10 12 月39000%10.26%合計(jì)62000%10.16%3.2全自動(dòng)血培養(yǎng)分析系統(tǒng)報(bào)陽時(shí)間分析7-r-L 1 c 11 c TnV L Zkizfe vttr 曰、尤 4444、）卜 I . -Un irvhlurn 司 4 T r/l-T rt-U r、n 日 K、工 rz102 （大腸）SF0ACEU9201208030.44符合李繼霞需氧103 （大腸）SF0ACEXN201208030.40符合李繼霞需氧104 （大腸）SF0ACEW5201208030.35符合李繼霞需氧105（大腸）SF0ACF01201208030.30符

20、合李繼霞需氧101 （大腸）SF0BAFZV201207040.43符合李繼霞厭氧102 （大腸）SF0BAG08201207040.42符合李繼霞厭氧103 （大腸）SF0BAFZU201207040.39符合李繼霞厭氧104 （大腸）SF0BA34符合李繼霞厭氧105 （大腸）SG0BAG07201207040.30符合李繼霞厭氧101 （大腸）SF2ADE36201209030.48符合李繼霞兒童102 （大腸）SF2ADE2X201209030.45符合李繼霞兒童103 （大腸）SF2ADEP1201209030.40符合李繼霞兒童104 （大腸）SF2ADF

21、N7201209030.34符合李繼霞兒童105 （大腸）SF2ADF01201209030.31符合李繼霞兒童101 （金葡）SF0ACEWR201208030.49符合李繼霞需氧102 （金葡）SF0ACEWW201208030.45符合李繼霞需氧103 （金葡）SF0ACF0J201208030.40符合李繼霞需氧104 （金葡）SF0ACF00201208030.35符合李繼霞需氧105 （金葡）SF0ACF05201208030.31符合李繼霞需氧101 （金葡）SG0BAG20201207040.45符合李繼霞厭氧102 （金葡）SG0BAG1Y201207040.43符合李繼霞厭

22、氧103 （金葡）SG0BAG01201207040.38符合李繼霞厭氧104 （金葡）SG0BAG04201207040.35符合李繼霞厭氧102 （白念）SF0ACF0A201208030.54符合李繼霞需氧103 （白念）SF0ACEVR201208030.58符合李繼霞需氧104 （白念）SF0ACEV1201208030.56符合李繼霞需氧105 （白念）SF0ACEZ5201208030.51符合李繼霞需氧101 （白念）SG0BAFYY201207040.54符合李繼霞厭氧102 （白念）SG0BAFZ3201207040.47符合李繼霞厭氧103 （白念）SG0BAFYZ201

23、207040.44符合李繼霞厭氧104 （白念）SG0BAG0K201207040.54符合李繼霞厭氧105 （白念）SG0BAG09201207040.49符合李繼霞厭氧101 （白念）SF2ADEP7201209031.20符合李繼霞兒童102 （白念）SF2ADDYU201209031.02符合李繼霞兒童103 （白念）SF2ADFOL201209030.93符合李繼霞兒童104 （白念）SF2ADFH4201209030.83符合李繼霞兒童105 （白念）SF2ADE22201209030.70符合李繼霞兒童表13 BACTEC9120血培養(yǎng)質(zhì)控瓶報(bào)陽時(shí)間記錄菌懸液濃度（cfu/ml）

24、血培養(yǎng)瓶標(biāo)識批號報(bào)陽時(shí)間（d）（要求72h）結(jié)果評估操作者備注101 （大腸）449445148332208136210.25符合李繼霞兒童瓶102 （大腸）44944514833920813629.75符合李繼霞兒童瓶103 （大腸）44944514834020813628.58符合李繼霞兒童瓶104 （大腸）44944514835120813627.24符合李繼霞兒童瓶102 （金葡）449445148336208136211.52符合李繼霞兒童瓶103 （金葡）449445148312208136210.52符合李繼霞兒童瓶104 （金葡）44944514834220813627.69符合李繼霞兒童瓶105 （金葡）44