細(xì)菌的基本性狀、微生物致病性與感染、細(xì)菌檢驗(yàn)技術(shù)、細(xì)菌對(duì)抗菌藥物的敏感試驗(yàn)期末復(fù)習(xí)考點(diǎn)、重點(diǎn)總結(jié)_第1頁
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1、第二章 細(xì)菌的基本性狀一、細(xì)菌的形態(tài)與結(jié)構(gòu)(一)細(xì)菌的大小和形態(tài)1、細(xì)菌個(gè)體微小,通常以微米作為測(cè)量單位。2、細(xì)菌的基本形態(tài)有三類:球菌、桿菌、螺形菌。(二)細(xì)菌的基本結(jié)構(gòu)1、細(xì)菌的基本結(jié)構(gòu)由外向內(nèi)依次是細(xì)胞壁、細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)和核質(zhì)。2、根據(jù)細(xì)胞壁的化學(xué)組成與結(jié)構(gòu)不同,用革蘭染色將細(xì)菌分為G和G兩大類。3、磷壁酸是革蘭陽性菌細(xì)胞壁特有的結(jié)構(gòu),壁磷壁酸為革蘭陽性菌的重要表面抗原,膜磷壁酸為黏附因子。4、外膜層是革蘭陰性菌特細(xì)胞壁的特殊成分,從外向內(nèi)依次是脂多糖、脂質(zhì)雙層、脂蛋白。其中脂多糖是革蘭陰性菌內(nèi)毒素,脂質(zhì)A是內(nèi)毒素的主要毒性部分。5、由于革蘭陰性菌和革蘭陽性菌細(xì)胞壁組成成分的不同,兩者對(duì)

2、藥物的敏感性也不一樣。革蘭陽性菌細(xì)胞壁有五肽交聯(lián)橋,是青霉素作用的部位。6、中介體:又稱中間體,是細(xì)胞膜內(nèi)陷折疊而成的管狀囊狀結(jié)構(gòu)。其功能類似真核細(xì)胞的線粒體,故有人稱之為類線粒體。7、質(zhì)粒:是細(xì)菌染色體(核質(zhì))以外的遺傳物質(zhì),為雙鏈閉環(huán)DNA分子,攜帶遺傳信息,控制細(xì)菌某些特定的遺傳性狀。F質(zhì)??刂菩跃漠a(chǎn)生、R質(zhì)粒與細(xì)菌的耐藥性有關(guān)。(二)細(xì)菌的特殊結(jié)構(gòu)1、鞭毛:細(xì)菌的運(yùn)動(dòng)器官,是由細(xì)胞質(zhì)伸出的蛋白性絲狀物。2、菌毛:主要出現(xiàn)在革蘭陰性菌中。分為性菌毛和普通菌毛。僅少數(shù)革蘭陰性細(xì)菌具有性菌毛,較普通菌毛少,只有14根,比普通菌毛長(zhǎng)且粗,呈中空管狀,是兩菌之間傳遞遺傳物質(zhì)的通道。帶有性菌毛

3、的細(xì)菌稱為F+菌或雄性菌,無菌毛的細(xì)菌稱為F-菌或雌性菌。細(xì)菌的耐藥性及某些毒力因子均可通過這種方式轉(zhuǎn)移。3、莢膜:通常在機(jī)體內(nèi)和營養(yǎng)物質(zhì)豐富的環(huán)境中形成,在細(xì)胞壁外包繞的一層界限分明,且不易被洗脫的黏稠性物質(zhì)。4、芽胞:主要為革蘭陽性桿菌在一定條件下細(xì)胞質(zhì)、核質(zhì)濃縮脫水而形成的一個(gè)遮光性很強(qiáng)、具有多層膜狀結(jié)構(gòu)、通透性很低的圓形或卵圓形小體。細(xì)菌L型即為細(xì)菌細(xì)胞壁缺陷型。在人工誘導(dǎo)(少量青霉素、頭孢菌素存在)或自然情況下,細(xì)菌L型在體內(nèi)或體外均可產(chǎn)生。細(xì)菌L型在含血清的高滲低瓊脂培養(yǎng)基中能緩慢生長(zhǎng),可形成“油煎蛋”樣菌落(典型L型細(xì)菌):菌落較小,中心致密并深陷人瓊脂中;四周較薄,由透明的顆粒

4、組成,在低倍鏡下觀察菌落呈“油煎蛋”狀。細(xì)菌L型保留了親代的遺傳特性,可返祖,可致病。二、細(xì)菌的生理1、細(xì)菌的基本化學(xué)組成:水、無機(jī)鹽、蛋白質(zhì)、糖類、脂類、核酸(細(xì)菌含有RNA和DNA兩種核酸)。2、細(xì)菌有帶電現(xiàn)象,革蘭陽性菌的等電點(diǎn)約為pH23,革蘭陰性菌的等電點(diǎn)約為pH45。(一)細(xì)菌的生長(zhǎng)繁殖、控制、遺傳及變異1、細(xì)菌根據(jù)營養(yǎng)類型的不同,分為自養(yǎng)菌(以無機(jī)物作為原料)和異養(yǎng)菌,異氧菌又根據(jù)所需營養(yǎng)物質(zhì)的不同分為腐生菌(以無生命的有機(jī)物作為原料)和寄生菌(以宿主體內(nèi)的有機(jī)物作為原料)。2、細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖的主要條件有:(1)充足的營養(yǎng)物質(zhì):水、碳源、氮源、無機(jī)鹽、生長(zhǎng)因子。(2)合適的pH:大

5、多數(shù)細(xì)菌的最適pH為7.27.6,有個(gè)別例外,結(jié)核分支桿菌在pH6.46.8、霍亂弧菌在pH8.49.2的環(huán)境中生長(zhǎng)最佳。(3)合適的溫度: 3537(4)必要的氣體根據(jù)細(xì)菌對(duì)氧氣需求不一,分為:需氧菌:必須在有氧(空氣)的情況下才能生長(zhǎng)。微需氧菌:在5%6%的低氧環(huán)境中才能生長(zhǎng)。厭氧菌:必須在無氧的環(huán)境中才能生長(zhǎng)。兼性厭氧菌:在有氧和無氧環(huán)境中均能生長(zhǎng)。3、細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖的規(guī)律(1)細(xì)菌一般一無性二分裂的方式繁殖。(2)大多數(shù)細(xì)菌2030分鐘繁殖一代,結(jié)核需要1820小時(shí)才繁殖一代。(3)細(xì)菌的生長(zhǎng)曲線分為四個(gè)時(shí)期:遲緩期:適應(yīng)階段,此階段細(xì)菌幾乎不繁殖。一般約14小時(shí)。對(duì)數(shù)期:細(xì)菌的形態(tài)、染

6、色性、生理活性都較典型,可以用來觀察細(xì)菌的大小、形態(tài)、染*色性、對(duì)抗菌藥物的敏感性等。一般約818小時(shí)。穩(wěn)定期:細(xì)菌繁殖數(shù)與死亡數(shù)大致平衡。衰亡期:細(xì)菌死亡逐漸增多,死菌數(shù)超過活菌數(shù)。4、細(xì)菌合成代謝的產(chǎn)物主要有:熱原質(zhì)、毒素(革蘭陽性菌合成外毒素、革蘭陰性菌合成內(nèi)毒素)、侵襲性酶類、色素、抗生素、細(xì)菌素、維生素。我國規(guī)定生活飲用水的標(biāo)準(zhǔn)是:1ml水中的細(xì)菌總數(shù)不超過100cfu;100ml水中不得檢出大腸埃希菌。5、細(xì)菌的控制:(1)消毒:殺死物體上的病原微生物但不一定殺死細(xì)菌芽胞的方法。(2)滅菌:殺滅物體上所有的微生物,包括細(xì)菌芽孢。(3)防腐:防止或抑制微生物生長(zhǎng)繁殖的方法。(4)無菌

7、和無菌操作:無菌是指沒有活的微生物存在。防止微生物進(jìn)入機(jī)體或者其他操作對(duì)象的方法稱為無菌操作。(5)高壓蒸汽滅菌法的壓力為103.4kPa,溫度為121.3,維持15-30分鐘。檢測(cè)高壓蒸汽滅菌效果的細(xì)菌是嗜熱枯草芽孢桿菌。(6)用于牛奶等物品的消毒方法是巴氏消毒法。(7)紫外線殺菌的主要機(jī)制是干擾DNA的復(fù)制。6、正常情況下,人體與外界相同的器官都有細(xì)菌,機(jī)體的胃、骨骼、肌肉、血液、腦等無菌。濫用抗生素會(huì)導(dǎo)致菌群失調(diào)而發(fā)生一系列的病理反應(yīng)。7、細(xì)菌常見的變異現(xiàn)象:(1)形態(tài)與結(jié)構(gòu)變異:如細(xì)菌L型。莢膜變異,從有到無;鞭毛變異(H-O變異),從有到無;芽胞變異,從有到無。(2)菌落變異:S-R

8、變異,細(xì)菌菌落光滑型與粗造型之間的變異。(3)毒力變異:包括毒力加強(qiáng)和毒力減弱。(4)抗原變異(5)耐藥性變異:細(xì)菌對(duì)某種藥物從敏感變?yōu)椴幻舾小#?)酶活性變異(7)生化特性的變異8、細(xì)菌的R質(zhì)粒是耐藥質(zhì)粒,可通過細(xì)菌間的接合或通過噬菌體進(jìn)行傳遞。9、細(xì)菌基因轉(zhuǎn)移與重組的方式有轉(zhuǎn)化、接合、轉(zhuǎn)導(dǎo)、溶原性轉(zhuǎn)換、原生質(zhì)融合等。(1)轉(zhuǎn)化:是受體菌直接攝取供體菌提供的游離DNA片段整合重組,使受體菌的性狀發(fā)生變異的過程。(2)轉(zhuǎn)導(dǎo):是以噬菌體為媒介,將供體菌的基因轉(zhuǎn)移到受體菌內(nèi),導(dǎo)致受體菌基因改變的過程。(3)接合:受體菌和供體菌直接接觸,供體菌通過性菌毛將所帶有的F質(zhì)粒或類似遺傳物質(zhì)轉(zhuǎn)移至受體菌的過

9、程。(4)溶原性轉(zhuǎn)換:是噬菌體的DNA與細(xì)菌染色體重組,使宿主菌遺傳結(jié)構(gòu)發(fā)生改變而引起的遺傳型變異。(5)原生質(zhì)體融合:兩種經(jīng)過處理失去細(xì)胞壁的原生質(zhì)體混和可發(fā)生融合,融合后的雙倍體細(xì)胞可發(fā)生細(xì)菌染色體間的重組。10、細(xì)菌的主要遺傳物質(zhì)是染色體,為一條環(huán)狀閉合的雙螺旋DNA。質(zhì)粒也是細(xì)菌的遺傳物質(zhì)。但不是主要遺傳物質(zhì)。第三章微生物致病性與感染高頻考點(diǎn)1、病原微生物能否致病與病原體的毒力、數(shù)量、侵入么戶、機(jī)體的免疫力、環(huán)境因素等密切相關(guān)。2、細(xì)菌分泌的侵襲性酶類主要有:(1)透明質(zhì)酸酶:分解結(jié)締組織的透明質(zhì)酸,易于細(xì)菌擴(kuò)散。(2)膠原酶:分解細(xì)胞外基質(zhì)的膠原蛋白。(3)神經(jīng)氨酸酶:分解腸黏膜上皮

10、細(xì)胞的細(xì)胞間質(zhì)。(4)磷脂酶:可水解細(xì)胞膜的磷脂,破壞組織細(xì)胞。(5)卵磷脂酶:分解細(xì)胞膜的卵磷脂。(6)激酶:將血纖維蛋白酶原激活為纖維蛋白酶,以分解纖維蛋白,防止形成血凝塊。(7)凝固酶:使血漿發(fā)生凝固,保護(hù)細(xì)菌不被吞噬細(xì)胞吞噬和殺滅。(8)IgA蛋白酶:與細(xì)菌的黏附有關(guān)。3、細(xì)菌毒素根據(jù)來源、性質(zhì)和作用特點(diǎn)不同分為外毒素和內(nèi)毒素。(1)外毒素的特性:主要是革蘭陽性菌產(chǎn)生;具有菌種特異性;毒性作用強(qiáng);毒性作用有組織選擇性;具有良好的免疫原性:外毒素經(jīng)過0.4%的甲醛處理可失去毒性但仍保持免疫原性變?yōu)轭惗舅?,可刺激幾天產(chǎn)生抗毒素;不耐熱;都是蛋白質(zhì),易被酸及蛋白水解酶滅活。(2)內(nèi)毒素的特性

11、:主要是革蘭陰性菌產(chǎn)生;化學(xué)性質(zhì)是脂多糖;抵抗力強(qiáng),耐熱、耐酸、耐堿、耐強(qiáng)氧化劑;細(xì)菌死亡溶解后釋放;毒性及免疫原性均較外毒素弱,不能用甲醛處理成類毒素。4、內(nèi)毒素的主要生物學(xué)活性有致熱作用、白細(xì)胞增多、感染性休克、DIC等。5、細(xì)菌全身感染在臨床上常見以下幾種情況:(1)毒血癥:致病菌不進(jìn)入血液循環(huán),但其產(chǎn)生的外毒素入血。(2)菌血癥:致病菌侵入血流,但不在其生長(zhǎng)繁殖。(3)敗血癥:致病菌侵入血流,在其中大量繁殖并產(chǎn)生毒性物質(zhì)。(4)膿毒血癥:化膿性細(xì)菌侵入血流,并在其大量繁殖。(5)內(nèi)毒素血癥:革蘭陰性細(xì)菌侵入血流,并在其大量繁殖,崩解后釋放大量?jī)?nèi)毒素。第四章細(xì)菌檢驗(yàn)技術(shù)一、細(xì)菌染色標(biāo)本鏡

12、檢染色標(biāo)本檢查的基本程序是涂片、干燥、固定、染色、鏡檢。(一)革蘭染色1、革蘭染色為兩種染料先后進(jìn)行染色,為復(fù)染色法。2、染液:結(jié)晶紫、盧戈碘液、95%乙醇、稀釋苯酚復(fù)紅液或沙黃。3、染色步驟:初染1min(結(jié)晶紫)流水沖洗媒染1min(盧戈碘液)流水沖洗脫色20-30s(95%乙醇)流水沖洗復(fù)染0.5-1min(稀釋苯酚復(fù)紅液或沙黃)流水沖洗干燥鏡檢4、意義:鑒別細(xì)菌、指導(dǎo)用藥、指導(dǎo)臨床治療。5、結(jié)果判定:染紫色為革蘭陽性,染紅色為革蘭陰性。(二)抗酸染色1、抗酸染色也是兩種染料先后染色,也是復(fù)染色法。2、染液:苯酚復(fù)紅、3%鹽酸酒精、呂氏堿性亞甲藍(lán)3、染色步驟:初染58min(苯酚復(fù)紅加熱

13、)流水沖洗脫色(3%鹽酸酒精)流水沖洗復(fù)染1min(呂氏亞甲藍(lán))流水沖洗干燥鏡檢4、注意事項(xiàng):苯酚加熱冒氣即可,切勿煮沸或煮干;脫色要脫到無紅色染液脫下為止。痰標(biāo)本需要經(jīng)過酸或堿處理后,使痰液化后接種。5、臨床意義:一般用于分枝桿菌屬的檢查,如結(jié)核分枝桿菌、麻風(fēng)桿菌等。6、結(jié)果判定:染成紅色為抗酸菌,染成藍(lán)色為非抗酸菌。二、細(xì)菌不染色標(biāo)本鏡檢壓滴法、懸滴法、暗視野聚光法均用于觀察細(xì)菌動(dòng)力。暗視野聚光法使用暗視野顯微鏡可觀察螺旋體及其動(dòng)力。三、細(xì)菌接種與培養(yǎng)技術(shù)高頻考點(diǎn)1、液體培養(yǎng)基是在肉浸液中加入1%蛋白胨和0.5%NaCl,調(diào)pH至7.4,蛋白胨的作用為提供細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖所需的氮源。2、半固體

14、培養(yǎng)基是在液體培養(yǎng)基中加入0.2%0.5的瓊脂。3、固體培養(yǎng)基是在液體培養(yǎng)基中加入2%3%的瓊脂。4、細(xì)菌L型的培養(yǎng)基必須采用高滲(3%5%NaC l、10%20%蔗糖等)低瓊脂培養(yǎng)基。5、制備好的培養(yǎng)基放于4活冷暗處一般可以保存一周,最多不超過2周。6、平板劃線接種法一般用于含有多種細(xì)菌的標(biāo)本,利用此接種法可以得到單個(gè)菌落,分為分區(qū)劃線法和連續(xù)劃線法。7、分區(qū)劃線法下一區(qū)應(yīng)與上一區(qū)接觸34次,此方法多用于含菌量多的標(biāo)本,如糞便、濃汁、痰液等標(biāo)本。連續(xù)劃線法多用于含菌量少的標(biāo)本。8、斜面接種法主要用于純種增菌及保留菌種或生化反應(yīng)。9、穿刺接種法可用于觀察細(xì)菌動(dòng)力,有鞭毛的細(xì)菌可沿穿刺線擴(kuò)散生長(zhǎng)

15、。10、液體接種法多用于普通肉湯、蛋白胨水等液體培養(yǎng)基接種。11、細(xì)菌在液體培養(yǎng)基上的生長(zhǎng)現(xiàn)象有三種,分別是:混濁(大多數(shù)細(xì)菌);沉淀(鏈狀生長(zhǎng)的細(xì)菌,如鏈球菌、炭疽芽孢桿菌等);菌膜(專性需氧菌,如銅綠假單胞菌等)。12、血瓊脂上的溶血現(xiàn)象:溶血:又叫草綠色溶血,菌落周圍血培養(yǎng)基變?yōu)榫G色環(huán)狀。溶血:又稱完全溶血,菌落周圍形成一個(gè)完全清晰透明的環(huán)。溶血:即不溶血,菌落周圍的培養(yǎng)基沒有變化;紅細(xì)胞沒有溶解或無缺損。雙環(huán):上層溶血環(huán),內(nèi)層為溶血,外層為溶血。如產(chǎn)氣莢膜梭菌。13、傾注平板法用于水、牛乳、飲料及尿液等液體標(biāo)本的細(xì)菌計(jì)數(shù)。14、常用的厭氧培養(yǎng)法有:皰肉培養(yǎng)基法;焦性沒食子酸法;厭氧罐法

16、;氣袋法;厭氧手套箱法,氣體噴射法。15、最常用的營養(yǎng)培養(yǎng)基:血平板和巧克力平板。16、鑒別培養(yǎng)基:如糖發(fā)酵管、三糖鐵培養(yǎng)基、枸櫞酸鹽培養(yǎng)基、克氏雙糖鐵瓊脂(KIA)、伊紅-美藍(lán)瓊脂和動(dòng)力-吲哚-尿素(MIU)等培養(yǎng)基。17、選擇培養(yǎng)基:在培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)成分或抗生素以抑制某些細(xì)菌的生長(zhǎng),而有助于需要的細(xì)菌生長(zhǎng),此培養(yǎng)基稱為選擇培養(yǎng)基。如SS瓊脂,其中的膽鹽能抑制革蘭陽性菌,因而使沙門菌、志賀菌容易得到分離。18、增菌培養(yǎng)基:如乙型溶血性鏈球菌、肺炎鏈球菌的生長(zhǎng)需含血液或血清的培養(yǎng)基;霍亂弧菌的增菌常用堿性蛋白胨水。19、特殊培養(yǎng)基:包括厭氧培養(yǎng)基和細(xì)菌L型培養(yǎng)基。巰基乙醇酸鈉是特殊培養(yǎng)基

17、。厭氧培養(yǎng)基如皰肉培養(yǎng)基;細(xì)菌L型培養(yǎng)基是針對(duì)細(xì)胞壁缺陷的細(xì)菌L型,由于胞內(nèi)滲透壓較高,培養(yǎng)基必須采用高滲低瓊脂培養(yǎng)基。20、細(xì)菌血液培養(yǎng)使用的抗凝劑為聚苯乙烯磺酸鈉(SPS)。四、細(xì)菌生化鑒定技術(shù)(一)碳水化合物代謝試驗(yàn)1、碳水化合物代謝試驗(yàn)包括:糖(醇、苷)類發(fā)酵試驗(yàn)、葡萄糖氧化/發(fā)酵試驗(yàn)、甲基紅試驗(yàn)(MR)、V-P試驗(yàn)、-半乳糖苷酶試驗(yàn)(ONPG)、七葉苷水解試驗(yàn)。2、甲基紅試驗(yàn)的原理是細(xì)菌發(fā)酵葡萄糖產(chǎn)酸,使培養(yǎng)基pH下降至4.5以下,加入甲基指示劑變紅為試驗(yàn)陽性。3、V-P試驗(yàn)出現(xiàn)紅色為陽性,ONPG出現(xiàn)黃色為陽性,七葉苷水解試驗(yàn)出現(xiàn)黑色為陽性。V-P試驗(yàn)常與甲基紅試驗(yàn)一起使用,因?yàn)榍?/p>

18、者陽性的細(xì)菌,后者通常為陰性。4、七葉苷水解試驗(yàn)主要用于D族鏈球菌與其他鏈球菌的鑒別,前者為陽性(黑色)。(二)蛋白質(zhì)和氨基酸代謝試驗(yàn)1、蛋白質(zhì)和氨基酸代謝試驗(yàn)包括:靛基質(zhì)(吲哚)試驗(yàn)、硫化氫試驗(yàn)、尿素酶試驗(yàn)、苯丙氨酸脫氨酶試驗(yàn)、氨基酸脫羧酶試驗(yàn)。2、吲哚試驗(yàn)是由于細(xì)菌有色氨酸酶,可以分解色氨酸而產(chǎn)生吲哚,與對(duì)二甲基苯甲醛反應(yīng)生成紅色化合物,本試驗(yàn)呈現(xiàn)紅色為陽性。3、硫化氫試驗(yàn)是細(xì)菌能分解含硫氨基酸,產(chǎn)生的H2S與Fe2+反應(yīng)呈黑色為陽性。主要用于腸桿菌科中屬及種的鑒別。如沙門菌屬、愛德華菌屬、亞利桑那菌屬、枸櫞酸桿菌屬、變形桿菌屬細(xì)菌,絕大多數(shù)硫化氫陽性,其他菌屬陰性。沙門菌屬中也有硫化氫陰

19、性菌種。4、尿素酶試驗(yàn)是細(xì)菌分解尿素生成氨,使培養(yǎng)基呈堿性,指示劑變紅為陽性。5、苯丙氨酸脫氨酶的陽性結(jié)果為綠色,氨基酸脫羧酶的陽性結(jié)果為培養(yǎng)基從黃色變?yōu)樽仙?。(三)碳源利用試?yàn)1、碳源利用試驗(yàn)包括枸櫞酸鹽利用試驗(yàn)和丙二酸鹽利用試驗(yàn)。2、枸櫞酸鹽利用試驗(yàn)的陽性結(jié)果為深藍(lán)色,陰性為綠色。3、丙二酸鹽利用試驗(yàn)的陽性結(jié)果為深藍(lán)色。4、枸櫞酸鹽利用試驗(yàn)在腸桿菌科中埃希菌屬、志賀菌屬、愛德華菌屬和耶爾森菌屬均為陰性,沙門菌屬、克雷伯菌屬通常為陽性。(四)酶類試驗(yàn)1、觸酶試驗(yàn):細(xì)菌能催化過氧化氫生成水和氧氣,出現(xiàn)氣泡為陽性。2、氧化酶試驗(yàn):某些細(xì)菌具有細(xì)胞色素氧化酶,能將二甲基對(duì)苯二胺或四甲基對(duì)苯二胺氧化

20、成紅色的化合物,出現(xiàn)紅色為陽性。3、凝固酶試驗(yàn):主要用于金黃色葡萄球菌的鑒定。4、DNA酶試驗(yàn):細(xì)菌產(chǎn)生DNA酶分解DNA,是菌落周圍出現(xiàn)透明環(huán)。葡萄球菌、沙雷菌、變形桿菌均為陽性。5、硝酸鹽還原試驗(yàn):出現(xiàn)紅色為陽性。若加入試劑后無顏色反應(yīng),可能是:硝酸鹽沒有被還原,試驗(yàn)陰性;硝酸鹽被還原為氨和氮等其他產(chǎn)物而導(dǎo)致假陰性結(jié)果,這時(shí)應(yīng)在試管內(nèi)加入少許鋅粉(還原劑),如出現(xiàn)紅色則表明試驗(yàn)確實(shí)為陰性。若仍不產(chǎn)生紅色,表示試驗(yàn)為假陰性。(五)其他及藥敏鑒定試驗(yàn)1、CAMP試驗(yàn):B群鏈球菌能產(chǎn)生CAMP因子,可促進(jìn)葡萄球菌的-溶血素溶解紅細(xì)胞的活性,因此在兩菌(B群鏈球菌和葡萄球菌)的交界處溶血力增加,出

21、現(xiàn)箭頭狀或矢形(半月形)的溶血區(qū)。在鏈球菌中,只有B群鏈球菌CAMP試驗(yàn)陽性,故可作為特異性鑒定。2、膽汁溶菌試驗(yàn):膽汁或膽鹽可溶解肺炎鏈球菌,可能是由于膽汁降低細(xì)胞膜表面的張力,使細(xì)胞膜破損或使菌體裂解;或者是由于膽汁加速了肺炎鏈球菌本身自溶過程,促使細(xì)菌發(fā)生自溶。3、O/129抑菌試驗(yàn):O/129抑菌試驗(yàn)為藥敏試驗(yàn),0129(二氨基喋啶)對(duì)弧菌屬細(xì)菌有抑制作用,而對(duì)氣單胞菌屬細(xì)菌無抑制作用。4、桿菌肽試驗(yàn):A群鏈球菌對(duì)桿菌肽幾乎全部敏感,而其他群鏈球菌絕大多數(shù)對(duì)其耐藥。5、奧普托欣(Optochin)試驗(yàn):幾乎所有肺炎鏈球菌對(duì)奧普托欣試驗(yàn)敏感,而奧普托欣試驗(yàn)對(duì)其他鏈球菌則無抑制作用。五、細(xì)

22、菌毒力鑒定內(nèi)毒素常采用鱟試驗(yàn)內(nèi)毒素激活鱟試劑中凝固酶原轉(zhuǎn)變?yōu)槟堂?,凝固蛋白原生成凝固蛋白。外毒素常用體內(nèi)及體外毒力試驗(yàn)檢測(cè),也用ELISA法測(cè)定。第五章細(xì)菌對(duì)抗菌藥物的敏感試驗(yàn)一、臨床常用抗菌藥物(一)-內(nèi)酰胺類1、常見藥物主要是青霉素類、頭孢菌素類和單環(huán)-內(nèi)酰胺類(氨曲南和卡蘆莫南)。2、作用機(jī)制:-內(nèi)酰胺類抗生素的作用機(jī)制相似,均是與青霉素結(jié)合蛋白(PBP)結(jié)合,抑制細(xì)菌細(xì)胞壁合成,致使細(xì)菌死亡。(二)氨基糖苷類1、作用機(jī)制:依靠離子的附作用,吸附在菌體表面,造成膜的損傷;和細(xì)菌核糖體30S小亞基發(fā)生不可逆結(jié)合,抑制mRNA的轉(zhuǎn)錄和蛋白質(zhì)的合成,造成遺傳密碼的錯(cuò)讀,產(chǎn)生無意義的蛋白質(zhì)。2

23、、種類:鏈霉菌屬:如鏈霉素、卡那霉素、妥布霉素、核糖霉素、巴龍霉素、新霉素;小單胞菌屬:如慶大霉素、福提霉素;半合成氨基苷類:阿米卡星、奈替米星、地貝卡星等,氨基苷類抗菌藥物對(duì)需氧G-桿菌有較強(qiáng)的抗菌活性,對(duì)G+球菌有一定的活性。(三)喹諾酮類1、作用機(jī)制:通過外膜孔蛋白和磷脂滲透進(jìn)入細(xì)菌細(xì)胞;作用于DNA旋轉(zhuǎn)酶,干擾細(xì)菌DNA復(fù)制、修復(fù)和重組。2、種類:第一代:為窄譜抗菌藥物,對(duì)G+球菌無作用;主要作用于大腸埃希菌,且迅速出現(xiàn)耐藥,較少應(yīng)用于臨床。第二代:對(duì)G-和G+細(xì)菌均有作用;比較這類藥的抗菌活性強(qiáng)度依次為環(huán)丙沙星、氧氟沙星、羅美沙星、氟羅沙星、培氟沙星、諾氟沙星;第三代:對(duì)G+菌作用高

24、于第二代的48倍,對(duì)厭氧菌亦有作用;司帕沙星、妥舒沙星、左氧氟沙星、加替沙星、格帕沙星、莫西沙星等。(四)大環(huán)內(nèi)酯類1、作用機(jī)制:可逆結(jié)合細(xì)菌核糖體50S大亞基的23S單位,抑制細(xì)菌蛋白質(zhì)合成和肽鏈延伸;2、種類:國內(nèi)常用有紅霉素、吉他霉素、麥迪霉素、乙酰螺旋霉素。新一代大環(huán)內(nèi)酯類有克拉霉素、羅紅霉素、地紅霉素、氟紅霉素、阿奇霉素和乙酰麥迪霉素。(五)其他抗菌藥物磺胺類:競(jìng)爭(zhēng)性第與二氫葉酸合成酶結(jié)合,阻止核酸形成。四環(huán)素類:阻止酰胺基轉(zhuǎn)移酶RNA與mRNA核糖體的受體位點(diǎn)結(jié)合。分為短效(土霉素、四環(huán)素)、中效(地美環(huán)素、美他環(huán)素)和長(zhǎng)效(多西環(huán)素、米諾環(huán)素)。氯霉素類、林克霉素類:能與細(xì)菌核蛋白體50S亞基結(jié)合,使蛋白質(zhì)合成呈可逆性抑制。糖肽類:屬于殺菌劑,能與一個(gè)或多個(gè)肽聚糖合成中間產(chǎn)物

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