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1、FlowJo 中給數(shù)據(jù)添加注釋及更改坐標(biāo)標(biāo)注在流式細(xì)胞儀上數(shù)據(jù)的時(shí)候,一般都會(huì)對(duì)數(shù)據(jù)添加一些注釋以便于分析及實(shí)驗(yàn)的備注。如果由于疏忽而沒有添加必要的注釋,可以在 FlowJo 中進(jìn)行添加。一、修改熒光通道的標(biāo)注:數(shù)據(jù)時(shí)一般都會(huì)對(duì)各個(gè)通道的參數(shù)進(jìn)行標(biāo)注。比如在一個(gè)三色實(shí)驗(yàn)中(FITC, PE, PerCP),對(duì)應(yīng)的通道可以被標(biāo)注為 FL1 -FITC-CD3, FL2-PE-CD4,FL3-PerCP-CD8。如果沒有進(jìn)行標(biāo)注,在中分析時(shí)則不能顯示各熒光參數(shù)所對(duì)應(yīng)的抗原。在 FlowJo 中可以重新進(jìn)行標(biāo)注,使其對(duì)應(yīng)到相應(yīng)的抗原具體操作步驟如下:下面的例子中,修改前圖形窗口中顯示情況如下圖所示:
2、X 軸為 APC-Ax700,Y 軸為 APC-H71. 到“Wrokspace”菜單欄中選擇”Edit Columns”,打開如下窗口:2. 在左側(cè)的”All Column Values”列中向下拖動(dòng)滾動(dòng)條,找到對(duì)應(yīng)的熒光參數(shù)。本例中CD4 對(duì)應(yīng)的是 ACP-Ax700,CD8 對(duì)應(yīng)的是 APC-H3.單擊選中”Comp-APC-Ax700-A reagent”和”Comp-APC-H7-A reagent”4.點(diǎn)擊”Add Column”按鈕將其添加到右側(cè)的”Column To Play”列,點(diǎn)”O(jiān)K”按鈕確定,5.所選中的兩個(gè)熒光參數(shù)及其標(biāo)注被顯示在工作臺(tái)中,手動(dòng)輸入需要更改的標(biāo)注,如下
3、圖所示:修改后圖形窗口中顯示情況如下圖所示:X 軸為 CD4,Y 軸為 CD8另外,如果你想要完全自定義坐標(biāo)軸的話,可以將步驟如下:拖到布局頁(yè),在布局頁(yè)中進(jìn)行編輯,1.將需要輸出的拖到布局頁(yè)2.雙擊,在打開的圖形定義窗口中選擇“Annoe”選項(xiàng)卡,在“XAxis Label”中輸入 CD4,在“YAxisLabel”中輸入 CD83. 修改后圖形的坐標(biāo)軸如下圖所示:二、添加新的對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行標(biāo)注:在下面的例子中,數(shù)據(jù)在時(shí)名是從 A1-A9,而不是根據(jù)數(shù)據(jù)的用途命名的。在FlowJo 中,可以添加一個(gè)新的,并命名為”Sle Name”,然后再輸入相關(guān)的值,比如:control_1,condition
4、_A。具體步驟如下:1. 到”Workspace”菜單欄中選擇”Add Keyword”,并給新添加的 Name”命名為”Sle2. 點(diǎn)”O(jiān)K”按鈕確定,”S據(jù)對(duì)應(yīng)的值,如下圖:le Name”顯示在工作臺(tái)中,手動(dòng)在列中輸入各個(gè)數(shù)另外,你也可以刪除任何添加的注釋,其步驟如下:1. 到“Wrokspace”菜單欄中選擇”Edit Columns”,打開如下窗口:2. 在右側(cè)的“ColumnsTo Display”列中選中需要?jiǎng)h除的“SleName”,點(diǎn)擊 列被刪除,“RemoveColumn”按鈕,按“OK”鍵確認(rèn)。工作臺(tái)中的“S如下圖所示:leName”還可以用于在布局頁(yè)里面進(jìn)行相對(duì)復(fù)雜的迭代批
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