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文檔簡介

1、歡迎下載 、名詞解釋1、廣義分子生物學:在分子水平上研究生命本質(zhì)的科學,其研究對象是生物大分子的結(jié)構(gòu)和功能。22、狹義分子生物學:即核酸(基因)的分子生物學,研究基因的結(jié)構(gòu)和功能、復制、轉(zhuǎn)錄、翻譯、表達調(diào)控、重組、修復等過程,以及其中涉及到與過程相關的蛋白質(zhì)和酶的結(jié)構(gòu)與功能3、基因:遺傳信息的基本單位。編碼蛋白質(zhì)或RNA等具有特定功能產(chǎn)物的遺傳信息的基本單位,是染色體或基因組的一段DNA序列(對以RNA作為遺傳信息載體的RNA病毒而言則是RNA序列)。4、基因:基因是含有特定遺傳信息的一段核苷酸序列,包含產(chǎn)生一條多肽鏈或功能RNA所必需的全部核苷酸序列。5、功能基因組學:是依附于對DNA序列的

2、了解,應用基因組學的知識和工具去了解影響發(fā)育和整個生物體的特定序列表達譜。6、蛋白質(zhì)組學:是以蛋白質(zhì)組為研究對象,研究細胞內(nèi)所有蛋白質(zhì)及其動態(tài)變化規(guī)律的科學。7、生物信息學:對DNA和蛋白質(zhì)序列資料中各種類型信息進行識別、存儲、分析、模擬和轉(zhuǎn)輸8、蛋白質(zhì)組:指的是由一個基因組表達的全部蛋白質(zhì)9、功能蛋白質(zhì)組學:是指研究在特定時間、特定環(huán)境和實驗條件下細胞內(nèi)表達的全部蛋白質(zhì)。10、單細胞蛋白:也叫微生物蛋白,它是用許多工農(nóng)業(yè)廢料及石油廢料人工培養(yǎng)的微生物菌體。因而,單細胞蛋白不是一種純蛋白質(zhì),而是由蛋白質(zhì)、脂肪、碳水化合物、核酸及不是蛋白質(zhì)的含氮化合物、維生素和無機化合物等混合物組成的細胞質(zhì)團。

3、11、基因組:指生物體或細胞一套完整單倍體的遺傳物質(zhì)總和。12、C值:指生物單倍體基因組的全部DNA的含量,單位以pg或Mb表示。13、C值矛盾:C值和生物結(jié)構(gòu)或組成的復雜性不一致的現(xiàn)象。14、重疊基因:共有同一段DNA序列的兩個或多個基因。15、基因重疊:同一段核酸序列參與了不同基因編碼的現(xiàn)象。16、單拷貝序列:單拷貝順序在單倍體基因組中只出現(xiàn)一次,因而復性速度很慢。單拷貝順序中儲存了巨大的遺傳信息,編碼各種不同功能的蛋白質(zhì)。17、低度重復序列:低度重復序列是指在基因組中含有210個拷貝的序列18、中度重復序列:中度重復序列大致指在真核基因組中重復數(shù)十至數(shù)萬(105)次的重復順序。其復性速度

4、快于單拷貝順序,但慢于高度重復順序。19、高度重復序列:基因組中有數(shù)千個到幾百萬個拷貝的DNA序列。這些重復序列的長度為6200堿基對。20、基因家族:真核生物基因組中來源相同、結(jié)構(gòu)相似、功能相關的一組基因,可能由某一共同祖先基因經(jīng)重復和突變產(chǎn)生。21、基因簇:基因家族的各成員緊密成簇排列成大段的串聯(lián)重復單位,定位于染色體的特殊區(qū)域。22、超基因家族:由基因家族和單基因組成的大基因家族,各成員序列同源性低,但編碼的產(chǎn)物功能相似。如免疫球蛋白家族。23、假基因:一種類似于基因序列,其核苷酸序列同其相應的正常功能基因基本相同、但卻不能合成功能蛋白的失活基因。24、復制:是指以原來DNA(母鏈)為模

5、板合成新DNA(子鏈)的過程?;蛏矬w以DNA/RNA為模板合成DNA/RNA的過程。25、半保留復制:DNA復制過程中,新合成的子代DNA分子中,一條鏈是新合成的,另外一條鏈來自親代,這種復制方式稱為半保留復制。26、復制子:基因組上能夠獨立進行復制的單位,包括復制起點和復制終點。所有的原核生物的染色體、噬菌體僅有一個復制子;真核生物的染色體有多個復制子27、復制起始點:DNA分子上起始復制并控制復制起始頻率的特定位置28、復制終點:終止復制的位點。29、復制叉:又稱生長點,復制開始時,起始點處的DNA雙螺旋要解鏈,松開的兩股鏈和未松開的雙螺旋形狀象一把叉子,稱為復制叉,是復制有關的酶和蛋白

6、質(zhì)組裝成新的復合物和新鏈合成的部位。30、引物:是人工合成的與模板DNA互補的寡核苷酸序列31、簡并引物:是指代表編碼單個氨基酸所有不同堿基可能性的不同序列的混合物。32、相向復制:從兩個起點開始兩條鏈的復制,形成兩個復制叉,各以一條鏈為模板單一方向復制出一條新鏈。33、單向復制:復制從一個起始點開始,只有一個復制叉,以同一方向生長出兩條鏈。34、雙向復制:從一個起始點開始,沿著兩個相反的方向形成兩個復制叉,一方向移動,兩條DNA鏈都被作為模板,各生長出兩條新鏈,形成一個復制泡,用電子顯微鏡可以觀察到復制泡的存在。這是原核生物和真核生物DNA復制最主要的形式35、D環(huán)復制:又稱取代環(huán)復制,是線

7、粒體DNA的復制形式。復制中呈字母D形狀而得名。36、DNA的半不連續(xù)復制:DNA在復制過程中,一條鏈合成是連續(xù)的,而另一條鏈合成是不連續(xù)的,這樣的復制過程稱為半不連續(xù)合成。37、岡崎片段:DNA復制時,以5t3方向的母鏈作為模板,子鏈沿5宀3最初合成長短不一、不連續(xù)核苷酸小片段,最后連接成為完整子鏈,這些小片段稱之為崗崎片段。38、前導鏈:以3t5方向DNA鏈為模板鏈,子代DNA以5t3方向連續(xù)合成,稱為前導鏈。39、后隨鏈:以5t3方向DNA鏈為模板鏈,子代DNA以5t3方向不連續(xù)合成,形成許多不連續(xù)的岡崎片段,最后連接成一條完整的DNA鏈,稱為后隨鏈,又稱后滯鏈。40、引物酶:又稱引發(fā)酶

8、,合成起始引物,引物長度為10-60個核苷酸,E.coli中是DnaG蛋白。41、RNA聚合酶:以一條DNA鏈或RNA鏈為模板催化由核苷-5-三磷酸合成RNA的酶。促進DnaA活性,促進復制起始。42、端粒:真核生物線性染色體DNA的兩端是一種特殊結(jié)構(gòu)稱為端粒功能:穩(wěn)定染色體末端結(jié)構(gòu),防止染色體末端融合、重組、降解;補償5末端在切除RNA引物后留下的空缺43、DNA的損傷:生物體生命過程中DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)發(fā)生的任何改變都稱之為DNA損傷。44、DNA修復:是細胞對DNA受損傷后的一種反應。主要包括:直接修復、切除修復、錯配修復、重組修復、易錯修復和SOS應急反應45、光修復:光裂合酶能特異地和

9、嘧啶二聚體結(jié)合,在可見光下催化光化合反應,使環(huán)丁烷環(huán)回復到兩個獨立的嘧啶,這一過程叫光復活作用。46、應急反應(SOS反應):許多能造成DNA損傷或抑制DNA復制的過程能引起一系列復雜的誘導效應,這種效應稱為應急反應(SOS反應)47、同義突變:指突變改變了密碼子的組成,但由于密碼子的簡并性沒有改變所編碼的氨基酸序列的突變48、錯義突變:指基因突變改變了所編碼氨基酸的序列,不同程度地影響蛋白質(zhì)和酶的活性。49、無義突變:指基因改變使代表某種氨基酸的密碼子變?yōu)榻K止密碼子,導致肽鏈合成過早終止。50、致死突變:有些錯義突變和無義突變嚴重影響到蛋白質(zhì)活性甚至完全無活性,從而影響了表現(xiàn)型。51、滲漏突

10、變:有些錯義的產(chǎn)物仍然有部分活性,使表現(xiàn)型介于完全的突變型和野生型之間的中間類型。52、中性突變:有些錯義突變不影響或基本上不影響蛋白質(zhì)活性,不表現(xiàn)出明顯的性狀變化。53、電泳:帶電顆粒在電場的作用下,向著與其電性相反的電極移動,稱為電泳。54、遷移率:是指帶電顆粒在單位電場下泳動的速度。影響遷移率的內(nèi)在因素:(1)樣品所帶靜電荷的多少(2)樣品顆粒大?。?)樣品分子空間構(gòu)象影響遷移率的外界因素:電場強度、電泳緩沖液的離子強度、電泳緩沖液的pH值、支持物及其濃度的影響、插入染料的影響、溫度的影響、電滲55、DNA重組:又稱遺傳重組,指DNA分子內(nèi)或分子間發(fā)生遺傳信息的重新組合,重組產(chǎn)物叫重組D

11、NA56、同源重組:又稱一般性重組,指發(fā)生在兩條同源DNA分子之間,通過配對、鏈斷裂和再連接,而產(chǎn)生片段交換過程。重組產(chǎn)物稱為重組體57、Holliday中間體:同源重組中,兩條同源的DNA分子經(jīng)過配對、斷裂和再連接,形成的連接分子,稱為Holliday中間體58、Chi位點:它是刺激重組的位點。這一位點是由8個堿基組成的非對稱序列59、特異位點重組:指發(fā)生在一個特定的短DNA序列內(nèi),由特異的酶和輔助因子識別和作用的重組。60、單鏈同化:單鏈DNA與同源雙鏈DNA分子發(fā)生鏈的交換,從而使重組過程中DNA配對、Holliday中間體的形成、分支移動等步驟得以實現(xiàn)的過程。61、轉(zhuǎn)座子:基因組上中可

12、以移動的DNA片段。轉(zhuǎn)座子由基因組的一個位置轉(zhuǎn)移到另一個位置的過程叫轉(zhuǎn)座62、反轉(zhuǎn)座子:又稱反轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)座子或反轉(zhuǎn)錄子,是一類在轉(zhuǎn)座過程中需要以RNA為中間體,經(jīng)過反轉(zhuǎn)錄過程再分散到基因組中的轉(zhuǎn)座子。生物學意義:對基因表達的影響;反轉(zhuǎn)座子介導基因的重排;反轉(zhuǎn)座子在進化中的作用63、轉(zhuǎn)錄:生物體以DNA為模板合成RNA的過程。64、反轉(zhuǎn)錄:生物體以RNA為模板合成DNA的過程。65、剪接:真核生物RNA前體去除內(nèi)含子,連接外顯子的過程。66、剪接體:在mRNA前體內(nèi)含子的剪接過程中,由多個核內(nèi)小分子核糖核酸(snRNA)和蛋白質(zhì)組裝形成催化剪接反應的復合體。67、模板鏈:“鏈”、“反義鏈”,指用于轉(zhuǎn)

13、錄的DNA單鏈,是合成RNA的模板68、編碼鏈:“鏈”、“有義鏈”、“非模板鏈”,指模板鏈的對應DNA鏈,堿基序列與mRNA一致(DNA:T,RNA:U)69、編碼序列:編碼序列從AUG開始以三核苷酸單位閱讀直到出現(xiàn)終止密碼UGA,UAA或UAG之一。70、RNA編輯:是指轉(zhuǎn)錄后的RNA在編碼區(qū)發(fā)生堿基的插入、丟失或替換等現(xiàn)象。編輯的生物學意義:(1)改變和補充遺傳信息;(2)增加基因產(chǎn)物的多樣性,是基因調(diào)控的一種方式,有利于進化;(3)可能與學習和記憶有關71、反式作用因子:通過擴散到與其編碼基因不在同一個DNA分子上的靶位置,識別、結(jié)合而調(diào)節(jié)基因表達的分子。如轉(zhuǎn)錄因子、RNA聚合酶72、順

14、式作用元件:通常只在原位影響與其處于同一個DNA分子上的、物理上緊密相連、被表達的基因序列。通常不編碼蛋白,多位于基因旁側(cè)或內(nèi)含子中。如啟動子、終止子、增強子、操縱基因、MAR73、啟動子:位于轉(zhuǎn)錄起始點附近,且為轉(zhuǎn)錄起始所必需,可被RNA聚合酶特異性識別、結(jié)合,并起始轉(zhuǎn)錄的一段保守DNA序列,其本身不被轉(zhuǎn)錄。74、-10序列(Pribnow框):幾乎所有原核基因的啟動子中,在轉(zhuǎn)錄起始位點上游-10bp位點區(qū)域都有一個典型的6bp區(qū)域,共有序列為TATAAT(T80A95T45A60A50T96)序列,稱為-10序列或Pribnow框。75、-35序列(Sextama框):轉(zhuǎn)錄起始位點上游約一

15、35bp處有一段6bp區(qū)域,共同序列為TTGACA(T82T84G78A65C54A45),稱為-35序列(Sextama框)76、操縱子:是原核生物在分子水平上基因表達調(diào)控的單位,由調(diào)節(jié)基因、啟動子、操縱基因和結(jié)構(gòu)基因等序列組成。77、增強子:指能使基因轉(zhuǎn)錄頻率明顯增加的DNA遠端調(diào)控序列78、強終止子:無需其他蛋白質(zhì)因子的幫助,而是依靠轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物形成特殊的二級結(jié)構(gòu)就可以終止轉(zhuǎn)錄,這種終止子被稱為內(nèi)部終止子。79、弱終止子:需要在一種蛋白質(zhì)因子p的幫助才能終止,所以又稱為P依賴性終止子。80、結(jié)構(gòu)基因:編碼參與細胞結(jié)構(gòu)或代謝活動的結(jié)構(gòu)蛋白、酶的基因。81、操縱基因:指操縱子中常與啟動子相鄰或重

16、疊的序列,被有活性調(diào)節(jié)蛋白結(jié)合后,影響啟動子啟動下游結(jié)構(gòu)基因轉(zhuǎn)錄,是一類順式作用元件。82、調(diào)節(jié)基因:編碼控制其它基因表達的蛋白質(zhì)或RNA的基因。83、調(diào)節(jié)蛋白:是調(diào)節(jié)基因產(chǎn)物,有活性調(diào)節(jié)蛋白可與操作基因結(jié)合,控制下游結(jié)構(gòu)基因轉(zhuǎn)錄。84、效應物:調(diào)節(jié)蛋白需要有一個小分子物質(zhì)結(jié)合并改變其活性,共同調(diào)節(jié)結(jié)構(gòu)基因轉(zhuǎn)錄,這個小分子物質(zhì)稱為效應物(effector)85、CAP:(降解物活化蛋白)或CRP(環(huán)腺苷酸受體蛋白)是分子量為22.5kd的二聚體86、順反子:遺傳學將編碼一個蛋白質(zhì)或多肽的遺傳單位稱為順反子(cistron)。87、多順反子:原核細胞中數(shù)個結(jié)構(gòu)基因常串聯(lián)為一個轉(zhuǎn)錄單位,轉(zhuǎn)錄生成的

17、mRNA可編碼幾種功能相關的蛋白質(zhì),為多順反子(polycistron)。88、單順反子:真核mRNA只編碼一種蛋白質(zhì),為單順反子(singlecistron)。89、遺傳密碼:DNA(或mRNA)中的核苷酸序列與蛋白質(zhì)中氨基酸序列之間的對應關系稱為遺傳密碼。特點:連續(xù)性、簡并性、通用性、變異性、方向性、變偶性90、密碼子:mRNA上每3個相鄰的核苷酸編碼蛋白質(zhì)多肽鏈中的一個氨基酸,這三個核苷酸就稱為一個密碼子或三聯(lián)體密碼。91、同義密碼子:同一種氨基酸具有兩個或更多密碼子的現(xiàn)象稱為密碼子的簡并性。對應于同一種氨基酸的不同密碼子稱為同義密碼子。92、開放閱讀框架:從mRNA5端起始密碼子AUG

18、到3端終止密碼子之間的核苷酸序列,按照三聯(lián)體密碼連續(xù)排列編碼一個蛋白質(zhì)多肽鏈,稱為開放閱讀框架(openreadingframe,ORF)。93、RNA的再編碼:mRNA以不同的方式翻譯,改變原來編碼信息,稱為RNA的再編碼94、氨基酸的活化:是指氨基酸與tRNA相連,形成氨酰-tRNA的過程。氨基酸的活化在細胞質(zhì)中進行。反應由氨酰-tRNA合成酶(又稱氨基酸活化酶)催化。意義:(1)使氨基酸本身被活化,利于下一步形成肽鍵反應。(2)tRNA可攜帶氨基酸到mRNA的指定部位,使氨基酸進入到肽鏈合適的位置95、安慰誘導物:又稱義務誘導物:能高效誘導酶的合成,但不是酶作用底物,與酶底物結(jié)構(gòu)類似的分

19、子96、應急反應:當細菌能源十分缺乏時,幾乎所有的生化反應都停止,為生存,細菌體內(nèi)可立即產(chǎn)生一種應急應答反應,關閉許多基因表達。97、反式作用因子:通過擴散到與其編碼基因不在同一個DNA分子上的靶位置,識別、結(jié)合而調(diào)節(jié)基因表達的分子。如轉(zhuǎn)錄因子、RNA聚合酶98、順式作用元件:通常只在原位影響與其處于同一個DNA分子上的、物理上緊密相連、被表達的基因序列。通常不編碼蛋白,多位于基因旁側(cè)或內(nèi)含子中。如啟動子、終止子、增強子、操縱基因、MAR99、轉(zhuǎn)錄后的加工:是指將各種前體RNA分子加工成成熟RNA的過程。100、信號序列:所有靶向輸送的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)中存在分選信號,主要為N末端特異氨基酸序列,可引

20、導蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移到細胞的適當靶部位,這一序列稱為信號序列。101、分子伴侶:分子伴侶是細胞一類保守蛋白質(zhì),可識別肽鏈的非天然構(gòu)象,促進各功能域和整體蛋白質(zhì)的正確折疊。102、應急反應(strigentresponse):當細菌能源十分缺乏時,幾乎所有的生化反應都停止,為生存,細菌體內(nèi)可立即產(chǎn)生一種應急應答反應,關閉許多基因表達。103、管家基因:在生物體幾乎所有的細胞中始終表達的基因,表達產(chǎn)物大致以恒定水平始終存在于細胞內(nèi),是維持細胞最低限度功能所不可缺少的基因,是細胞生存所必須的。這類基因的表達稱為組成型表達104、奢侈基因:只在特定的細胞類型或細胞生長發(fā)育特定時間表達的基因。這類基因的表達稱為

21、可調(diào)節(jié)表達105、核基質(zhì)結(jié)合區(qū):30nm染色質(zhì)纖維以特定的DNA序列結(jié)合在核基質(zhì)上,這些特定DNA序列稱為MAR,它使纖維狀的染色質(zhì)DNA形成數(shù)以萬計的環(huán)狀結(jié)構(gòu)域。106、絕緣子:是一類特殊的順式作用元件,阻止激活或阻遏作用在染色質(zhì)上的傳遞,使染色質(zhì)活性限定于結(jié)構(gòu)域內(nèi)107、座位控制區(qū)(LCR):是一種遠距離順式元件,為相連接的基因提供了一個可以活化的染色體環(huán)境,可能是DNaseI的超敏感位點和許多轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點,可促進基因轉(zhuǎn)錄108、CpG島:真核生物基因組中,常見富含的CpG的區(qū)域,稱為CpG島,常位于轉(zhuǎn)錄調(diào)控區(qū)及其附近,其甲基化程度直接影響轉(zhuǎn)錄活性。109、DNA甲基化:真核生物DNA

22、雙螺旋中,胞嘧啶核苷的嘧啶環(huán)5位甲基化,并與其上的鳥嘌吟形成mCpG,是DNA甲基化的唯一形式110、高速泳動蛋白(HMG):活性染色質(zhì)中含有兩種高度豐富的小分子非組蛋白,這些蛋白具有異常高的電荷,在凝膠電泳中移動快,所以稱為高速泳動蛋白(HMG)111、小衛(wèi)星DNA序列:又稱可變數(shù)目串聯(lián)重復,重復單位6-40bp,每個拷貝長度0.1-20Kb(6-100次),分為位于鄰近染色體端粒的區(qū)域(端粒家族),以及分散在基因組的多個位置上(高變家族),一般沒有轉(zhuǎn)錄活性。112、增強子:指能使基因轉(zhuǎn)錄頻率明顯增加的DNA遠端調(diào)控序列。二、填空題1、原核生物復制方式:b型復制、滾環(huán)復制、D環(huán)復制2、真核生

23、物復制方式:多起點雙向復制3、真核生物基因組組分包括:核內(nèi)染色體DNA、核外細胞器DNA(線粒體DNA、葉綠體DNA)、質(zhì)粒4、真核生物DNA序列類型:單拷貝序列、低度重復序列、中度重復序列、高度重復序5、PCR體系:引物、DNA聚合酶模板dNTPMg2+濃度6、反式作用因子結(jié)構(gòu)包括:DNA結(jié)合結(jié)構(gòu)域、轉(zhuǎn)錄激活結(jié)構(gòu)域、二聚體結(jié)構(gòu)域,其中,DNA結(jié)構(gòu)域包括:螺旋-轉(zhuǎn)角-螺旋(HTH)結(jié)構(gòu)基序、鋅指(ZF)結(jié)構(gòu)基序、螺旋-突環(huán)-螺旋(HLH)結(jié)構(gòu)基序、亮氨酸拉鏈(LZ)結(jié)構(gòu)基序7、DNA的提取的一般步驟1、準備生物材料2、裂解細胞3、去除雜質(zhì)4、沉淀DNA5、檢測6、保存三、簡答論述題1、增強子為

24、什么具有遠距離作用呢?答:成環(huán)模型:認為增強子通過一些蛋白質(zhì)因子的介導可與遠距離的啟動子結(jié)合,使DNA形成了一個環(huán),從而促使遠距離的啟動子的轉(zhuǎn)錄。成環(huán)模型也符合染色體的側(cè)環(huán)模型和核基質(zhì)的調(diào)控理論,也就是說DNA的特殊序列可以和核基質(zhì)結(jié)合形成側(cè)環(huán),在某些細胞中有些基因通過環(huán)的形成讓增強子區(qū)和啟動子區(qū)相互靠近,使這些基因能得以表達??磥憝h(huán)的形成主要是兩種因素:某些蛋白質(zhì)因子的介導;和核基質(zhì)特異的結(jié)合2、病毒基因組的結(jié)構(gòu)特點答:a與細菌相比,病毒基因組很小,大小相差較大。b病毒基因組由DNA組成,也可以由RNA組成,每種病毒顆粒中只含有一種核酸,核酸結(jié)構(gòu)可以是單鏈或雙鏈、環(huán)狀或線狀。c有重疊基因。d

25、大部分是用來編碼蛋白質(zhì)的,基因間的間隔序列較短。e功能上相關的基因集中成簇,在基因組的特定的部位,形成一個功能單位或轉(zhuǎn)錄單元,轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為多順反子,之后經(jīng)過簡單加工。f噬菌體的基因是連續(xù)的;而真核細胞病毒的基因是不連續(xù)的,具有內(nèi)含子。3、細菌染色體基因組結(jié)構(gòu)的一般特點答:細菌的染色體基因組通常僅由一條環(huán)狀雙鏈DNA分子組成,染色體相對聚集在一起,形成一個較為致密的區(qū)域,稱為類核。只有一個復制起點,數(shù)個相關的結(jié)構(gòu)基因串聯(lián)在一起,受同一調(diào)控區(qū)調(diào)節(jié),合成多順反子mRNA。具有操縱子結(jié)構(gòu)。編碼蛋白質(zhì)的基因都是單拷貝,但rRNA基因是多拷貝。和病毒的基因組相似,非編碼的DNA部份所占比例比真核細胞基因組少

26、得多?;蚪MDNA中具有多種調(diào)控區(qū)如復制起始區(qū)、復制終止區(qū)、轉(zhuǎn)錄啟動區(qū)和終止區(qū)等,還有重復序列,比病毒基因組復雜。具可移動的DNA序列4、真核生物基因組的特點答:真核生物的基因組比較龐大,具有多個復制起始點。一個基因組包括多條線狀染色體,每條染色體DNA上有多個復制起始點。真核生物的基因組DNA與蛋白質(zhì)結(jié)合形成染色質(zhì)的復雜高級結(jié)構(gòu),儲存于細胞核內(nèi)。真核細胞被核膜分隔成細胞核和細胞質(zhì),在基因表達中,轉(zhuǎn)錄和翻譯在時間和空間上被分隔,不偶聯(lián)。真核生物基因組存在著許多重復序列,重復序列單位長度不一,重復程度各異。真核生物的蛋白質(zhì)基因一般以少拷貝形式存在,轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為單順反子。存在著可移動的DNA序列。大

27、多數(shù)真核生物基因含內(nèi)含子,為斷裂基因。5、滾環(huán)復制特點:(1)共價延伸;2)模板鏈和新合成的鏈分開;3)不需RNA引物,在正鏈3OH上延4)只有一個復制叉;5)形成多聯(lián)體;6、D環(huán)復制的特點:D環(huán)復制的特點是:復制起始點不在雙鏈DNA同一位點,內(nèi)、外環(huán)復制有時序差別。7、DNA聚合酶反應特點以4種dNTP作為底物反應需要接受模板指導鏈延伸需要引物3-羥基存在新鏈延伸方向5T3產(chǎn)物DNA極性與模板相對內(nèi)切酶活性生理功能:滯后鏈合成中除去RNA引物并添補其留下的缺口;參與10、DNA聚合酶II的主要活性DNA損傷修復5t3聚合活性3t5外切活性生理功能:修復中起作用DNA聚合酶III的主要活性多亞

28、基酶5t3聚合活性3t5外切活性生理功能:是體內(nèi)DNA復制的主要承擔者DNA的復制過程1、復制的起始DNA解旋、解鏈,形成復制叉:拓撲異構(gòu)酶、解旋酶及單鏈11、RNA引物合成:依賴于單鏈模版,由引物酶催化合成一小段特點:原核環(huán)形DNA通常只有一個起點,雙向復制;真核線性形成多個復制叉2、復制的延長子鏈延長:引物合成后,由pollI催化,在引物3-OH末端逐一添加與模板鏈對應互補的脫氧核苷三磷酸12、DNA結(jié)合蛋白RNA引物DNA通常多個起始點,八、&DNA聚合酶I的結(jié)構(gòu)DNA聚合酶I有5個結(jié)合位點:模板結(jié)合位點引物結(jié)合位點底物dNTP結(jié)合位點53外切酶結(jié)合位點3t5校正位點9、DNA聚合酶I的

29、主要活性和生理功能5T3聚合活性:催化條件:4XdNTP、Mg2+、模板DNA(雙、RNA引物;鏈)可用與DNA測序鏈315外切活性:無dNTP是外切活性,有dNTP時,校正作用5t3外切活性半不連續(xù)合成:A.領頭鏈:鍵的延長方向與解鏈方向相同,為連續(xù)合成B.隨從鏈:鍵的延長方向與解鏈方向相反,為不連續(xù)合成,產(chǎn)生岡崎片段3、復制的終止水解引物及填補空隙:岡崎片段合成后,由PolI水解去除RNA引物,并填補留下的空隙連接酶連接岡崎片段形成完整雙鏈DNA分子:空隙填補后,DNA片段與片段之間的一個缺口由DNA連接酶催化連接,從而產(chǎn)生完整的雙鏈DNA分子13、端粒酶的生物學意義(1)細胞水平的老化,

30、可能與端粒酶的活性下降有關。(2)基因突變、腫瘤形成,端粒也可表現(xiàn)缺失,融合或序列縮短等現(xiàn)象。(3)研究端粒的變化是目前腫瘤研究中的一個新領域。14、DNA重組的意義1、迅速增加遺傳群體的多樣性2、與DNA修復有關3、可調(diào)節(jié)某些基因的表達15、轉(zhuǎn)座子轉(zhuǎn)座的特征轉(zhuǎn)座不依賴靶序列的同源性轉(zhuǎn)座后靶序列重復轉(zhuǎn)座子的插入具有專一性轉(zhuǎn)座具有排他性轉(zhuǎn)座具有極性效應活化臨近的沉默基因區(qū)域性優(yōu)化16、轉(zhuǎn)座子的應用1、用于難以篩選的基因的轉(zhuǎn)移2、作為基因定位的標記3、篩選插入突變4、構(gòu)建特殊菌株5、克隆難以進行表型鑒定的基因17、RNA轉(zhuǎn)錄的一般特點具有選擇性,即只對基因組或DNA分子中的編碼區(qū)進行轉(zhuǎn)錄開始于特定

31、位點,并在特定的終點處終止催化轉(zhuǎn)錄反應的是RNA聚合酶被轉(zhuǎn)錄的DNA雙鏈中只有其中一股模板鏈(反義鏈)作為RNA合成的模板,進行“不對稱”轉(zhuǎn)錄啟動子控制起始底物為4種5-核糖核苷三磷酸合成方向5宀318、原核生物啟動子的特征結(jié)構(gòu)典型:都含保守的識別序列(R)、結(jié)合序列(B)、起始位點(I)以及間隔長度直接和聚合酶相結(jié)合;常和操縱子相鄰;常位于基因的上游;19、真核RNA聚合酶的一般特點結(jié)構(gòu)非常復雜結(jié)構(gòu)具有相似性3類RNA聚合酶都有幾種共同的亞基:根據(jù)其結(jié)構(gòu)與功能,可以分為核心亞基、共同亞基和非必須亞基。20、原核生物和真核生物的rRNA基因差異原核生物無5.8SrRNA5SrRNA編碼基因與其

32、它rRNA編碼基因關系不同重復次數(shù)不同21、帽子結(jié)構(gòu)的功能(1)對翻譯起識別作用為核糖體識別RNA提供信號,CapO的全部都是識別的重要信號,Cap1,2的甲基化能增進識別(2)增加mRNA的穩(wěn)定性,使5端免遭外切核酸酶的攻擊(3)有助于mRNA越過核膜,進入胞質(zhì)22、poly(A)的功能(1)可能與核質(zhì)轉(zhuǎn)運有關(2)增強mRNA穩(wěn)定性(3)增強可翻譯能力23、剪接機制剪接體套索模型第一次轉(zhuǎn)酯,內(nèi)含子形成套索第二次轉(zhuǎn)酯,外顯子1、2連接、套索狀內(nèi)含子釋放拼接體解體與套索降解24、翻譯(蛋白質(zhì)的生物合成):以氨基酸為原料以mRNA為模板以tRNA為運載工具以核糖體為合成場所起始、延長、終止各階段

33、蛋白因子參與合成后加工成為有活性蛋白質(zhì)25、簡并性的生物學意義?可以降低由于遺傳密碼突變造成的災難性后果??梢允笵NA上的堿基組成有較大的變化余地,而仍然保持多肽上氨基酸序列不變。26、tRNA的結(jié)構(gòu)與功能1、tRNA的一級結(jié)構(gòu)特點含1020%稀有堿基,如DHU3末端為一CCA-OH5末端大多數(shù)為G具有T呢2、tRNA的二級結(jié)構(gòu)一一三葉草形氨基酸臂DHU環(huán)反密碼環(huán)額外環(huán)TWC環(huán)3、tRNA的三級結(jié)構(gòu)倒L型27、肽鏈合成延長包括以下三步:進位:新氨酰tRNA識別核糖體內(nèi)的mRNA,進入A位轉(zhuǎn)肽:P位的氨基酸轉(zhuǎn)到A位新氨基酸末端,形成肽鍵移位:核糖體向3端移動1個密碼子長度肽鏈延長是以上3步在核糖

34、體上連續(xù)性循環(huán)式進行,每次循環(huán)增加一個氨基酸,又稱為核糖體循環(huán)(ribosomalcycle)。28、原核生物基因表達調(diào)控的特點主要是短期調(diào)節(jié)主要是轉(zhuǎn)錄水平的調(diào)節(jié)以操作子為單位,存在正、負調(diào)控,但以負調(diào)控為主,調(diào)節(jié)因子的活性主要受變構(gòu)效應調(diào)節(jié)還存在其它調(diào)控機制29、Lac操縱子調(diào)控機制總結(jié)當?shù)推咸烟嵌呷樘菚r,部分乳糖在B-半乳糖苷酶作用下轉(zhuǎn)變?yōu)楫惾樘?,異乳糖可作為誘導物和有活性阻遏蛋白結(jié)合,使阻遏蛋白失活,不能結(jié)合O,RNA聚合酶順利結(jié)合啟動子,起始轉(zhuǎn)錄利用乳糖的酶;同時,由于沒有葡萄糖存在,胞內(nèi)cAMP濃度高,大量的CAMPCAP復合物結(jié)合在CAP位點,極大的促進下游結(jié)構(gòu)基因轉(zhuǎn)錄效率,B半

35、乳糖苷酶、通透酶和轉(zhuǎn)乙酰酶的含量高,這時候,細菌就分解乳糖為葡萄糖和半乳糖,葡萄糖直接作為碳源,半乳糖利用gal操縱子調(diào)控的酶轉(zhuǎn)變?yōu)槠咸烟?,由于阻遏物不斷合成,當乳糖被消耗完畢后,有活性的阻遏蛋白可重新建立阻遏狀態(tài),酶合成被抑制,經(jīng)過一段延遲期后,逐漸被稀釋。當高葡萄糖和高乳糖時,乳糖可作為誘導物和有活性阻遏蛋白結(jié)合,使阻遏蛋白失活,不能結(jié)合O,RNA聚合酶可順利結(jié)合P起始轉(zhuǎn)錄分解利用乳糖的酶;同時,但是由于葡萄糖存在,胞內(nèi)CAMP濃度極低,沒有CAMPCAP結(jié)合在CAP位點,轉(zhuǎn)錄雖然可以起始但還是效率極低,B-半乳糖苷酶、通透酶和轉(zhuǎn)乙酰酶的含量非常少,這時候,細菌就利用葡萄糖作為碳源,而不利用乳糖。30、色氨酸操縱子調(diào)節(jié)機制當環(huán)境能提供足夠濃度的色氨酸時,調(diào)節(jié)蛋白R與輔阻遏物色氨酸結(jié)合,構(gòu)象變化而活化,就能夠與

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