全自動(dòng)廠家cyfra21非小細(xì)胞肺癌相關(guān)抗原21-1電化學(xué)發(fā)光檢測(cè)試劑盒說明書

1、非小細(xì)胞肺癌相關(guān)抗原21-1電化學(xué)發(fā)光檢測(cè)試劑盒說明書Elecsys CYFRA 21-1Elecsys Systems 1010/2010/MODULARYTICS E100 人份【名稱】通用名： 非小細(xì)胞肺癌相關(guān)抗原21-1電化學(xué)發(fā)光檢測(cè)試劑盒英文名： Elecsys CYFRA 21-1漢語拼音：Fei xiao xi bao fei ai xiang gu ce shi ji heang yuan 21-1 dian hua xue fa guang jian【注意事項(xiàng)】【用途】用免疫學(xué)方法體外定量測(cè)定人或血漿中細(xì)胞角蛋白19的含量。電化學(xué)發(fā)光免疫測(cè)定試劑，適用于免疫測(cè)定分析儀。Ele

2、csys1010、2010和E170（Elecsys模塊）【概述】細(xì)胞角蛋白是上皮細(xì)胞的結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)。目前為止已發(fā)現(xiàn)20種不同的細(xì)胞角蛋白多 肽。由于它們特殊的分布形式，細(xì)胞角蛋白現(xiàn)已成為腫瘤病理學(xué)研究的劃分指標(biāo)。中檢測(cè)到1.2.9.10。完整的細(xì)胞角蛋白多肽是很難溶的,但是溶解的片斷能夠在借助于二種特異的單克隆抗體（KS19.1和BM19.21），CYFRA21-1可檢測(cè)細(xì)胞角蛋白19的一個(gè)片段(分子量大約30,000)。CYFRA21-1 主要用于監(jiān)測(cè)非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)的病程2.3。CYFRA21-1 也可用于監(jiān)測(cè)橫紋肌浸潤(rùn)性癌的病程4。CYFRA21-1 用于與良性肺部疾病(鑒別，

3、特異性比較好6.7。,結(jié)核,慢性支氣管炎,支氣管哮喘,肺氣腫)的在良性的肝病和腎功能衰竭中偶見CYFRA21-1輕微升高（約10ng/ml）。,吸煙沒有任何相關(guān)性11。懷孕對(duì)CYFRA21-1的值也CYFRA21-1的含量與沒有任何影響。樣本的非小細(xì)胞肺癌相關(guān)抗原（CYFRA21-1）測(cè)定值的高低因采用的檢測(cè)方法而異。因此的檢測(cè)應(yīng)注明非小細(xì)胞肺癌相關(guān)抗原所采用的檢測(cè)方法。樣本的非小細(xì)胞肺癌相關(guān)抗原測(cè)定值主要取決于采用不同的檢測(cè)方法,因此兩種方法測(cè)出的含量不能相互直接比較，以免引起出現(xiàn)錯(cuò)誤的醫(yī)學(xué)解釋。在療效觀察過程中，如因檢測(cè)方法改動(dòng)引起非小細(xì)胞肺癌相關(guān)抗原的含量變化，用新的檢測(cè)方法獲得的 CY

4、FRA21-1 的測(cè)定值必須用原方法同時(shí)平定核實(shí)。肺癌的最初要以臨床的全部癥狀,影像學(xué)檢查,內(nèi)窺鏡檢查,外科手術(shù)結(jié)果為基礎(chǔ)。肺部有不明的陰影,CYFRA21-130ng/ml提示存在性支氣管癌的可能性8。 血中CYFRA21-1水平顯著升高提示腫瘤已晚期或預(yù)后差12。但CYFRA21-1正?；蜉p微升高，不能排除腫瘤的存在。治療效果好，CYFRA21-1的水平會(huì)很快下降或恢復(fù)到正常水平，如果CYFRA21-1值不變或輕度減低提示腫瘤沒有完全去除，或有多發(fā)性腫塊存在。在疾病的發(fā)展過程中，CYFRA21-1值的變化常常早于臨床癥狀和影像檢查。8【原理】采抗體夾心法原理，整個(gè)過程18分鐘完成。 第1步

5、孵育：20l標(biāo)本、生物素化的抗細(xì)胞角蛋白19單克隆抗體和釕（Ru）標(biāo)記的抗細(xì)胞角蛋白19單克隆抗體混勻，形成夾心復(fù)合物。 第2步孵育：加入鏈和素的微粒，讓上述形成的復(fù)合物通過生物素與鏈和素間的反應(yīng)結(jié)合到微粒上。 第3步：反應(yīng)混和液吸到測(cè)量池中，微粒通過磁鐵吸附到電極上，未結(jié)合的物質(zhì)被液洗去，電極加電壓后產(chǎn)生化學(xué)發(fā)光，通過光電倍增管進(jìn)定。 檢測(cè)結(jié)果由機(jī)器自動(dòng)從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出。此曲線由儀器通過2點(diǎn)定標(biāo)校正，由從試劑條形碼掃描入儀器的原版標(biāo)準(zhǔn)曲線而得?！驹噭┲饕煞荨縈：鏈和素的微粒（透明瓶蓋），1瓶，6.5ml。粒子濃度0.72mg/ml，生物素結(jié)合能力： 470ng生物素/mg粒子。含防腐劑。

6、R1：生物素化的抗細(xì)胞角蛋白19單克隆抗體（灰蓋），1瓶，10ml。濃度1.5mg/l，磷酸緩沖液100mmol/l，pH7.2。含防腐劑。R2：Ru(bpy) 32+標(biāo)記的抗細(xì)胞角蛋白19單克隆抗體（黑蓋），1瓶，10ml。濃度2mg/l，磷酸緩沖液100mmol/l，pH7.2。含防腐劑?！绢A(yù)防措施和警告】?jī)H用于體外采用使用。試劑所必須的標(biāo)準(zhǔn)預(yù)防措施。所有廢物的丟棄應(yīng)遵循當(dāng)?shù)氐囊?。【試劑使用】試劑盒中的試劑是一個(gè)整體,打開后可立即使用,不能被分開。需要的確切操作信息,分別通過試劑的二維條碼?！竞头€(wěn)定性】存放在28 .為了確保使用前自動(dòng)混勻期間提供足夠量的磁性微粒, CYFRA21-1試劑

7、盒倒置。穩(wěn)定性：,切莫未開封28，可穩(wěn)定至標(biāo)明的保質(zhì)期。開封后，28，放在Elecsys2010或E170上，放在Elecsys1010上，12周；8周；4周（交替在冰箱內(nèi)和儀器上，室溫2025，開瓶使用時(shí)間累計(jì)約20小時(shí)）【標(biāo)本和準(zhǔn)備】標(biāo)本只有按照下列方法收集,檢測(cè),結(jié)果才能被接受。標(biāo)本用標(biāo)準(zhǔn)樣本試管。血漿：肝素(Li-,Na-)、K3EDTA或枸櫞酸鈉抗凝。其中用枸櫞酸鈉抗凝的血漿，測(cè)定結(jié)果需+10%。標(biāo)準(zhǔn):值的批內(nèi)回收 90-110%或斜率 0.9-1.1+批內(nèi)干擾0.95.標(biāo)本在28可穩(wěn)定7天，-20可穩(wěn)定6個(gè)月。只能凍融一次13.17。建議樣本混勻或放置在混旋器上（最多5分鐘）。含沉

8、淀的標(biāo)本使用前需離心。不要加熱滅活標(biāo)本。標(biāo)本和質(zhì)控品禁用疊氮鈉作穩(wěn)定劑。樣本唾液污染會(huì)導(dǎo)致測(cè)定值假性升高17。確保樣本、定標(biāo)物、質(zhì)控物在測(cè)試前溫度達(dá)到20-25.因?yàn)榭赡軗]發(fā)的影響,放在分析儀上的樣本、定標(biāo)物、質(zhì)控物應(yīng)在兩小時(shí)內(nèi)測(cè)試完?！緳z測(cè)步驟】提供的材料：貨號(hào)：11820966，100人份的Elecsys CYFRA21-1試劑盒包含： M 鏈和素的微粒R1 生物素化的抗細(xì)胞角蛋白19抗體R2 三聯(lián)吡啶釕標(biāo)記的抗細(xì)胞角蛋白19抗體需要的材料（未提供）：Elecsys CYFRA21-1定標(biāo)液（CalSet），41ml，貨號(hào)11820974Elecsys 腫瘤標(biāo)志物質(zhì)控品（PreciCont

9、rol Tumor Marker）1和2，每個(gè)23ml，貨號(hào)11776452Elecsys通用稀釋液，218ml，貨號(hào)11732277或Elecsys通用稀釋液，240ml，貨號(hào)03183971 常用設(shè)備 Elecsys1010、2010 或E170分析儀Elecsys1010/2010分析儀需要 Elecsys 系統(tǒng)緩沖液（ProCell）,6380ml，貨號(hào)11662988 Elecsys 測(cè)量池液（CleanCell），6380ml，貨號(hào)11662970 Elecsys 添加劑液（SysWash），1500ml，貨號(hào)11930346 Elecsys 系統(tǒng)液支架（Adapter for S

10、ysClean），貨號(hào)11933159 Elecsys 1010反應(yīng)杯（Assay Cup），1232， 貨號(hào)11706829或Elecsys 2010反應(yīng)杯（Assay Cup），6060， 貨號(hào)11706802 Elecsys 2010吸樣頭（Assay Tip），30120，貨號(hào)11706799E170分析儀需要 Elecsys 系統(tǒng)緩沖液（ProCell M）,12L,貨號(hào)12135019 Elecsys 測(cè)量池液（CleanCell M）,12L,貨號(hào)12135027 Elecsys 系統(tǒng)緩沖液/測(cè)量池液預(yù)熱杯（PC/CC-Cup）,50個(gè),貨號(hào)03023141 Elecsys液（P

11、robeWash M），1270ml，用于最終和試劑轉(zhuǎn)換，貨號(hào)03005712 Elecsys 反應(yīng)杯/吸樣頭盒(AssayCups/AssayTips Combimagazine M),4884，貨號(hào) 12102137 Elecsys 廢物盒(wasiner)，貨號(hào)03023150 Elecsys 系統(tǒng)液支架(SysClean Adapter M)，貨號(hào)03027651各種分析儀均適用的材料 Elecsys 系統(tǒng)液（SysClean），5100ml，貨號(hào)11298500僅在提供: Elecsys CYFRA21-1 三個(gè)濃度的定標(biāo)檢查物 (Calcheck) 貨號(hào)11776789【方法】按儀

12、器操作說明進(jìn)行操作。檢查試劑與消耗品是否充足。使用前自動(dòng)混勻混勻微粒。儀器通過掃描試劑盒條形碼自動(dòng)輸入測(cè)試所需的特異性參數(shù)，不需手工輸入。如果特殊情況下儀器無法閱讀條形碼，可以手工輸入 15 位數(shù)字。按儀器操作說明進(jìn)行操作。檢查試劑與消耗品是否充足。使用前自動(dòng)混勻混勻微粒。儀器通過掃描試劑盒條形碼自動(dòng)輸入測(cè)試所需的特異性參數(shù)，不需手工輸入。如果特殊情況下儀器無法閱讀條形碼，可以手工輸入 15 位數(shù)字。Elecsys2010 和 E170：將冷藏試劑預(yù)溫到 20后放置于儀器的試劑盤上，避免產(chǎn)生試劑溫度和開/關(guān)試劑瓶蓋。Elecsys1010：將冷藏試劑預(yù)溫到 2025后放置于儀器的樣品/試劑盤上

13、（室溫 2025），避。儀器自動(dòng)控制免產(chǎn)生8。使用前手工打開試劑瓶蓋，使用后手工關(guān)閉試劑瓶蓋并放回 2【定標(biāo)】Elecsys CYFRA21-1 用酶法來標(biāo)定 13。每批 CYFRA21-1 試劑有一條形碼，含有該批試劑定標(biāo)所需的特殊信息。應(yīng)用CYFRA21-1CalSet 定標(biāo)液定標(biāo)校正母定標(biāo)曲線。定標(biāo)頻率：每批試劑必須用新鮮試劑（試劑經(jīng)儀器即根據(jù)下列要求：E170/Elecsys2010：同一批號(hào)試劑一個(gè)月后（28 天）7 天（放置儀器上的同一試劑盒）Elecsys1010：每一試劑盒做一次 7 天（室溫 2025） 3 天（室溫 2532）各種分析儀均適用的情況：24 小時(shí)以內(nèi)）標(biāo)定一次

14、，如再次標(biāo)定 根據(jù)要求進(jìn)行標(biāo)定：如質(zhì)控結(jié)果超出范圍時(shí)。定標(biāo)確認(rèn):不需要.分析儀的會(huì)自動(dòng)檢查定標(biāo)曲線的有效性有效性及任何偏離?！举|(zhì)控】Elecsys 腫瘤標(biāo)志物質(zhì)控品（Precicontrol Tumor Marker）1 和 2 以及其它合適的質(zhì)控品。各濃度區(qū)域的質(zhì)控至少每 24 小時(shí)或每一次定標(biāo)后測(cè)定一次。質(zhì)控間隔期用于各的具體要求。檢測(cè)值應(yīng)落在確定的范圍內(nèi)，如果出現(xiàn)質(zhì)控值落在范圍以外，每個(gè)個(gè)方案采取校正措施。應(yīng)該有一【計(jì)算】對(duì)每一個(gè)標(biāo)本，E170,Elecsys1010 和 2010 分析儀會(huì)自動(dòng)計(jì)算 CYFRA21-1 含量，單位是 ng/ml 或 ug/l?！?3【干擾該方法不受黃疸（

15、膽紅素65mg/dl）、溶血（血紅蛋白1.5g/dl）、脂血（脂質(zhì)1500mg/dl）和生物素5mg/天）治療的后才能采血 13。，至少要等最后一次攝入生物素 8 小時(shí)CYFRA21-1 濃度高達(dá) 2000ng/ml 也不出現(xiàn)鉤狀效應(yīng)。不受類風(fēng)濕因子干擾（1500U/ml）。28 種常用藥物經(jīng)試驗(yàn)對(duì)本測(cè)定無干擾。試劑含有鼠單克隆抗體,接受過小鼠單抗治療或的會(huì)出現(xiàn)錯(cuò)誤。罕見的例子,由于高濃度的抗鏈酶親和素抗體發(fā)生干擾。Elecsys CYFRA21-1 含的添加物會(huì)有很小的影響。Elecsys CYFRA21-1 測(cè)定結(jié)果應(yīng)結(jié)合斷。病史、臨床其他檢查結(jié)果綜合起來進(jìn)行診【檢測(cè)范圍】130.1005

16、00ng/ml(由 master 定標(biāo)曲線的最低檢測(cè)限與最高檢測(cè)限決定)。如果測(cè)定值低于最低檢測(cè)限,為0.100ng/ml. 如果測(cè)定值高于檢測(cè)范圍,為500ng/ml(結(jié)果達(dá)到 1000ng/ml 樣本應(yīng)作 50 倍稀釋)?！鞠♂尅扛哂跈z測(cè)范圍的標(biāo)本可用通用稀釋液稀釋。建議 1:2 稀釋(E170,Elecsys1010/2010 既可以自動(dòng)稀釋也可以手工稀釋) 。稀釋后的標(biāo)本 CYFRA21-1 含量必須高于 250ng/ml。如用手工稀釋，結(jié)果應(yīng)乘上稀釋倍數(shù)。如果是機(jī)器自動(dòng)稀釋，E170，Elecsys1010/2010會(huì)自動(dòng)計(jì)算結(jié)果?！緟⒖贾怠?3Cutoff 值是 3.3ng/ml

17、時(shí)，特異性為 95%。急性肺病,慢性支氣管炎,間質(zhì)性肺疾病樣本中的 CYFRA21-1 濃度會(huì)明顯增高。肝硬化,腎衰必要，各CYFRA21-1 濃度可能也會(huì)超出正常參考值范圍。應(yīng)根據(jù)自己的群建立一個(gè)自己的正常值范圍?！拘阅茉u(píng)估資料】精密度:下面為從Elecsys分析儀上獲得的評(píng)估資料。不同得出的結(jié)果可能會(huì)不同。用 Elecsys 試劑、人、質(zhì)控物根據(jù)國(guó)際臨床試驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)(National Committeefor Clinical laboratory Sdandards)的修改草案(EP5-A)來檢驗(yàn)它的重復(fù)性：試驗(yàn) 6次共進(jìn)行 10 天實(shí)驗(yàn)(n=60)。用 E170 檢測(cè)批內(nèi)的精密度，n=2

18、1。下面為得到的實(shí)驗(yàn)結(jié)果:E170批內(nèi)精密度總精密度樣本Medianng/mlSDng/mlCV%Medianng/mSDng/mlCV%人12.600.041.52.650.072.7人25.510.061.25.510.132.3Elecsys1010/2010批內(nèi)精密度總精密度樣本Medianng/mlSDng/mlCV%SDng/mlCV%人12.680.062.10.134.7人26.860.142.00.233.3人321.50.361.70.663.1質(zhì)控 TM15.040.102.00.122.4質(zhì)控 TM229.90.491.60.632.1分析靈敏度:(最低檢測(cè)限)0.10

19、ng/mlCYFRA21-1 最低檢測(cè)限代表能夠區(qū)別于零的最低檢測(cè)分析水平。 它的計(jì)算值依賴于最低標(biāo)準(zhǔn)值的兩倍標(biāo)準(zhǔn)差。(master 標(biāo)準(zhǔn)物,標(biāo)準(zhǔn) 1+2SD, 批內(nèi)精密度,n=21)分析特異性:抗角蛋白 19 的單克隆抗體識(shí)別角蛋白 19 多肽的一個(gè)片段。與角蛋白 8 和 18 沒有任何交叉反應(yīng)。方法比較:臨床樣本使用電化學(xué)發(fā)光 CYFRA21-1 檢測(cè)方法的線性(y)與 CYFRA21-1 酶免檢測(cè)方法的線性(x)比較.下面為兩種線性的相關(guān)性：檢測(cè)的樣本量：76Passing/Bablok14-16 y = -0.30 + 0.98xr = 0.99SD (md68) = 0.834線性回

20、歸y = -0.10 + 0.95x r = 0.99Sy.x = 1.0871.0 和 44 ng/ml 之間.樣本濃度大【包裝規(guī)格】【有效期】【生產(chǎn)企業(yè)】【地址】100人份/盒21個(gè)月Roche Diagnostics GmbH,D-68298 Mannheim, Germany【參考文獻(xiàn)】1.Bodenmueller H, Ofenloch-Hhn, Lane EB, Dessauer A.g CancerassotedKeratin19Frag-ments:DevelopmentandBiochemicalCharacterization of the new Serum Assay

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23、56.01.102.0質(zhì)控 TM15.060.112.15.120.132.6質(zhì)控 TM233.40.531.633.90.651.95.Stieb, Hasholzner U, Bodenmueller H, Nagel D, Sundlassmann L,Dienemann H, et al. CYFRA 21-1: A new marker ing cancer. Cancer 1993;72:707713.Van Dalen A. Quality control and standardization of tumormarker-tests. Tumor Biol. 1993;14:

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