反相高效液相色譜法測定當(dāng)歸調(diào)經(jīng)沖劑中阿魏酸的含量

1、反相高效液相色譜法測定當(dāng)歸調(diào)經(jīng)沖劑中阿魏酸的含量【摘要】目的：建立以反相高效液相色譜法測定當(dāng)歸調(diào)經(jīng)沖劑中阿魏酸含量的方法。方法：色譜柱為AgillentDS18柱4.6250，5，流動相為甲醇-0.1%磷酸37:63，檢測波長為316n，柱溫為25，流速為1.0l/in。結(jié)果：阿魏酸進(jìn)樣量在0.02320.2552g內(nèi)線性關(guān)系良好r=0.9999，平均加樣回收率為99.40%RSD=1.60%,n=5。結(jié)論：本法簡便、準(zhǔn)確、專屬性強(qiáng)，重現(xiàn)性好，可用于該制劑的質(zhì)量控制?！娟P(guān)鍵詞】當(dāng)歸調(diào)經(jīng)沖劑阿魏酸反相高效液相色譜DeterinatinfFeruliaidinDangguitiajingGranu

2、lesbyRP-HPL【Abstrat】bjetive:TestablishaRP-HPLethdfrdeterinatinfferuliaidinDangguitiajinggranules.ethds:HPLAgillentDS18(4.6250,5)asusedandethl-0.1%H3P4(37:63)asbliephase.Thedetetiveavelengthassetat316n,thelunteperatureasat25,andtheflrateas1.0l/in.Results:Feruliaidshedagdlinearityintherangef0.02320.25

3、52g(r=0.9999).Theaveragereveryas99.40%,RSDas1.60%(n=5).nlusin:Thissiple,aurateandspeifiethdanbeusedfrqualityntrlfDangguitiajinggranules.【Keyrds】DangguitiajingGranules;feruliaid;RP-HPL當(dāng)歸調(diào)經(jīng)沖劑由當(dāng)歸、熟地黃、川芎、黨參等七味中藥組成，補(bǔ)血助氣，調(diào)經(jīng)。用于貧血衰弱，病后、產(chǎn)后血虛以及月經(jīng)不調(diào)、痛經(jīng)，為婦科臨床常用中成藥。衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)中藥成方制劑第十冊S3-B-1925-95中僅有針對揮發(fā)油的理化鑒別工程，無定性

4、及含量測定工程1，且目前也尚無此方面的文獻(xiàn)報道，為進(jìn)步原制劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，筆者采用反相高效液相色譜法對當(dāng)歸調(diào)經(jīng)沖劑中的阿魏酸進(jìn)展了含量測定，建立了可靠、準(zhǔn)確、專屬性強(qiáng)的質(zhì)量控制方法。1儀器和試藥1.1儀器HP1100高效液相色譜儀，HPheStatin色譜工作站；賽多利斯萬分之一電子天平德國；超聲波清洗機(jī)江蘇昆山超聲儀器。1.2試藥阿魏酸對照品供含量測定用，由中國藥品生物制品檢定所提供，批號：0773-9910，當(dāng)歸調(diào)經(jīng)沖劑及陰性對照樣品本院制劑室提供，批號070105、070111、070119。甲醇為色譜純，水為重蒸水，其余化學(xué)試劑均為分析純。2方法與結(jié)果242.1色譜條件與系統(tǒng)適應(yīng)性試驗色

5、譜柱：Agillent184.6250，5；流動相：甲醇-0.1%磷酸溶液37:63；檢測波長：316n；柱溫：25；流速：1.0l/in，理論塔板數(shù)按阿魏酸峰計算應(yīng)不低于3000。結(jié)果阿魏酸峰與其它化合物峰別離良好，色譜圖見圖1。2.2對照品溶液的制備精細(xì)稱取枯燥至恒重的阿魏酸對照品適量，加70%甲醇溶解制成濃度為23.2g/l的溶液，即得。2.3供試品溶液的制備取裝量差異項下的本品，研細(xì)，取約1.0g，精細(xì)稱定，置錐形瓶中，精細(xì)加70%甲醇溶液20l，密塞，搖勻，稱定重量，超聲處理20分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，用微孔濾膜0.45濾過，取續(xù)濾液，即得。2.4陰性樣品

6、溶液的制備按處方工藝制備不含當(dāng)歸和川芎的陰性樣品，按2.3項一樣方法制成陰性樣品溶液，即得。2.5空白干擾試驗按2.1項下的色譜條件，精細(xì)汲取上述對照品、供試品、陰性樣品溶液各10l進(jìn)樣測定，結(jié)果陰性樣品在與供試品和阿魏酸對照品一樣保存時間處，無干擾峰出現(xiàn)，故可以確定處方中其他藥材成分對阿魏酸的含量測定不產(chǎn)生干擾，色譜圖詳見圖1。2.6線性關(guān)系及標(biāo)準(zhǔn)曲線精細(xì)汲取對照品溶液1、3、5、7、9、11l，按2.1項下色譜條件測定峰面積，以峰面積A對進(jìn)樣量Xg進(jìn)展線性回歸，Y=6146.14x5.72，r=0.9999；阿魏酸在0.02320.2552g內(nèi)線性關(guān)系良好。轉(zhuǎn)貼于論文聯(lián)盟.ll.2.7精細(xì)

7、度試驗精細(xì)汲取對照品溶液10l重復(fù)進(jìn)樣6次，按2.1項下色譜條件測定峰面積，結(jié)果RSD=0.56%，說明本法精細(xì)度良好。2.8穩(wěn)定性試驗精細(xì)汲取供試品溶液10l，分別于0、2、4、8、12小時按2.1項下色譜條件測定5次，結(jié)果RSD=1.64%，說明供試品溶液于12小時內(nèi)根本穩(wěn)定。2.9重現(xiàn)性試驗取同一批樣品批號：0701055份，按2.3項下方法制備供試品溶液，進(jìn)樣10l，并按2.1項下色譜條件測定，結(jié)果平均含量為0.3462g/g，RSD=1.12%，說明本法重現(xiàn)性良好。2.10加樣加收試驗取含量的當(dāng)歸調(diào)經(jīng)沖劑粉末約0.5g批號：070105，精細(xì)稱定，分別精細(xì)參加一定量的阿魏酸對照品，進(jìn)

8、樣10l，按2.3項下方法處理，并按2.1項下色譜條件測定，結(jié)果詳見表1。表1加樣回收率試驗略2.11樣品中阿魏酸含量測定取3批樣品，按2.3項下方法制備供試品溶液，并按2.1項下的色譜方法對三批樣品的阿魏酸含量進(jìn)展測定，結(jié)果見表2表2樣品中阿魏酸的含量測定結(jié)果略3討論方中當(dāng)歸為君藥，川芎為臣藥，而阿魏酸為當(dāng)歸和川芎的主要有效成分，現(xiàn)代藥理研究說明，阿魏酸具有穩(wěn)定紅細(xì)胞膜，抑制補(bǔ)體3bab與紅細(xì)胞膜的結(jié)合，降低補(bǔ)體及H等引起的溶血作用；參與巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞的激活，從而分泌較高活性的紅系造血調(diào)控因子，促進(jìn)紅系造血。與當(dāng)歸調(diào)經(jīng)沖劑的成效相一致，故將阿魏酸作為該制劑的質(zhì)量控制指標(biāo)科學(xué)、合理。阿魏酸

9、可溶于甲醇、乙醇等，故對不同提取溶媒甲醇、無水乙醇、70%甲醇進(jìn)展了考察，結(jié)果采用70%甲醇提取效率最高，同時對阿魏酸提取方法索氏提娶超聲提取及回流提取及提取時間等影響因素進(jìn)展了考察，發(fā)現(xiàn)對該制劑來說，藥典所采用的回流法4提取效果不如超聲法，且僅需20分鐘即可超聲提取完全，極大地簡化了操作步驟。本品藥味較多，成分復(fù)雜，主要有效成分阿魏酸呈酸性，在中性流動相中易發(fā)生離解，使含量偏低且拖尾嚴(yán)重，故須采用離子抑制技術(shù)。通過在流動相中參加一定量的酸來抑制拖尾，曾嘗試對不同配比的甲醇-磷酸溶液以及甲醇-乙酸溶液洗脫系統(tǒng)進(jìn)展了考察，經(jīng)發(fā)復(fù)優(yōu)化，結(jié)果阿魏酸在本色譜條件下別離效果較好，且空白無干擾，重現(xiàn)性良好?！緟⒖嘉墨I(xiàn)】1國家藥典委員會，編衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)中藥成方制劑第十冊北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2001：552趙建平，張玲，張美玲HPL測定風(fēng)濕寧膠囊中阿魏酸的含量J中成藥，2022，2612：10803謝秉湘，陳靜高