臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)：第10章 生物素-親和素放大技術(shù)

1、第十章 生物素-親和素放大技術(shù)(Chapter 10 Biotin-Avidin Immune Amplification Technique)臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)第十章 生物素-親和素放大技術(shù) 生物素-親和素系統(tǒng)（biotin-avidin system）：是基于生物素和親和素既能偶聯(lián)抗原/抗體分子，又能偶聯(lián)酶、熒光素等示蹤物質(zhì)。 BAS具有特異、敏感、穩(wěn)定、靈活等多種優(yōu)勢(shì)，其高親和力和多級(jí)放大效應(yīng)，賦予傳統(tǒng)標(biāo)記免疫分析更高的檢測(cè)敏感度。第一節(jié) 生物素-親和素系統(tǒng)(Section 1 Biotin-Avidin System)一、組成常從含量較高的卵黃和肝組織中提?。挥址Q(chēng)維生素H；環(huán)為咪唑酮環(huán)，結(jié)

2、合親和素；環(huán)為噻吩環(huán)，戊酸側(cè)鏈末端羧基標(biāo)記抗體或其他分子。1生物素（B）一、組成1生物素（B）第一節(jié) 生物素-親和素系統(tǒng)一、組成又稱(chēng)抗生物素蛋白，常從卵白蛋白中提?。挥?個(gè)相同亞基組成的四聚體，可結(jié)合4個(gè)親和素分子的環(huán)；pH913中性質(zhì)穩(wěn)定、耐熱、耐多種蛋白水解酶作用；鏈霉親和素屬弱酸性蛋白，分子結(jié)構(gòu)中不含任何糖基，與固相材料、組織細(xì)胞基質(zhì)非特異結(jié)合較低。2親合素（A）第一節(jié) 生物素-親和素系統(tǒng)二、特點(diǎn)極高的親合力而呈現(xiàn)高度特異性和穩(wěn)定性，明顯降低或避免了非特異性結(jié)合。1高特異性第一節(jié) 生物素-親和素系統(tǒng)二、特點(diǎn)1高特異性2高敏感性1:4生物素化形成許多“觸手”的多價(jià)制劑，使整個(gè)反應(yīng)體系出現(xiàn)多

3、級(jí)放大效應(yīng)，賦予檢測(cè)系統(tǒng)極高的敏感性。第一節(jié) 生物素-親和素系統(tǒng)二、特點(diǎn)1高特異性2高敏感性3強(qiáng)穩(wěn)定性高親合力，解離常數(shù)很小，呈不可逆反應(yīng)；酸、堿、變性劑、蛋白水解酶等不影響其結(jié)合；穩(wěn)定性強(qiáng)，干擾因素少，提高檢測(cè)的精密度。第一節(jié) 生物素-親和素系統(tǒng)二、特點(diǎn)1高特異性2高敏感性3強(qiáng)穩(wěn)定性4強(qiáng)實(shí)用性可與多種示蹤物質(zhì)聯(lián)合，用于多種生物學(xué)反應(yīng)體系；高工作效價(jià)，可降低抗體用量，節(jié)約成本；生物素化標(biāo)記物穩(wěn)定性好，有效期長(zhǎng)。第一節(jié) 生物素-親和素系統(tǒng)第二節(jié) 生物素-親和素系統(tǒng)的應(yīng)用(Section 2 Application of Biotin-Avidin System)一、應(yīng)用于固相載體的包被環(huán)節(jié)第二節(jié) 生物素-親和素系統(tǒng)的應(yīng)用二、應(yīng)用于檢測(cè)系統(tǒng)的信號(hào)放大（一）生物素-親合素-生物素模式（BAB）ABC-ELISA檢測(cè)原理示意圖第二節(jié) 生物素-親和素系統(tǒng)的應(yīng)用二、應(yīng)用于檢測(cè)系統(tǒng)的信號(hào)放大（二）生物素-親合素模式（BA）LAB-ELISA檢測(cè)原理示意圖化學(xué)發(fā)光免疫測(cè)定的臨床應(yīng)用靈敏度高，特異性強(qiáng)；線性范圍寬；標(biāo)記物穩(wěn)定，試劑有效期長(zhǎng)；自動(dòng)化程度高，檢測(cè)菜單齊全。思考題1生物素和