制川烏煎煮時(shí)間和給藥劑量與抗炎鎮(zhèn)痛功效的相關(guān)性研究

1、制川烏煎煮時(shí)間和給藥劑量與抗炎鎮(zhèn)痛成效的相關(guān)性研究【摘要】目的研究制川烏煎煮時(shí)間、給藥劑量與抗炎鎮(zhèn)痛成效的相關(guān)性，確定藥物發(fā)揮成效的最正確煎煮時(shí)間和給藥劑量。方法根據(jù)川烏祛風(fēng)除濕止痛的成效，選擇熱板痛證模型、扭體痛證模型、急性炎證模型、亞急性炎癥模型等，運(yùn)用均勻設(shè)計(jì)和回歸分析方法，確定藥物不同成效的最正確煎煮時(shí)間和最正確給藥劑量。結(jié)果制川烏能明顯抑制二甲苯所致小鼠耳廓腫脹；顯著減少醋酸所致小鼠扭體次數(shù)，延長小鼠扭體埋伏期；明顯延長熱板刺激小鼠舔足埋伏期，進(jìn)步熱板小鼠痛閾值。制川烏發(fā)揮抗炎成效的最正確煎煮時(shí)間為6h，最正確給藥劑量為2.4g/kg；鎮(zhèn)痛成效的最正確煎煮時(shí)間為6h，最正確給藥劑量為

2、2.4g/kg。結(jié)論制川烏具有明顯的抗炎作用和中樞鎮(zhèn)痛作用；煎煮時(shí)間、給藥劑量與抗炎鎮(zhèn)痛成效顯著相關(guān)。發(fā)揮抗炎鎮(zhèn)痛成效的最正確煎煮時(shí)間和劑量為6h，2.4g/kg?！娟P(guān)鍵詞】制川烏；抗炎；鎮(zhèn)痛；煎煮時(shí)間；劑量；均勻設(shè)計(jì)；相關(guān)性StudyntherrelatinshipbeteenDetinTie,AdinistratinDseandtheEffiayfResistingInflaatinandRelievingPainfPreparedSihuanAniteRtAbstrat：bjetiveTinvestigatetherrelatinshipbeteendetintie(DT),adinis

3、tratindse(AD)andtheatinsfresistinginflaatinandrelievingpainfPreparedSihuanAniteRt(PSAR),nfirthebestDTandADfthePSARating.ethdsArdingttheeffiayfthePSARdispellingindanddapnessandrelievingpain,severalanialdels,inludingpain,inflaatindels,unifrdesign(UD)andregressinanalysisereappliedtnfirthebestDTandADfit

4、sdifferentatins.ResultsThePSARbviuslysuppressedtheiesaurilesellinginduedbyxylene,reduedthenuberfiessprainingbdyinduedbyaetiaid,inreasedthEirlateniesfsprainingbdyandstiulatinfhtbard,andiprvedthEIrpainthreshldvalue.ThebestDTandADfrthePSARtresistinflaatinandrelievepainere6hursand2.4g/kgrespetively.nlus

5、inThePSARpssessesevidentatinsfresistinginflaatinandrelievingpain,hiharearkedlyrrelatediththeDTandAD.ThebestDTandADfrPSARtresistinflaatinandrelievepainare6hursand2.4g/kgrespetively.Keyrds：PreparedSihuanAniteRt;Resistinginflaatin;Relievingpain;Detintie;Adinistratindse;Unifrdesign;rrelatin烏頭功能祛風(fēng)除濕、溫經(jīng)止痛

6、，對痹證和痛證具有卓越的臨床療效而被廣泛應(yīng)用，但因毒性較大，臨床屢有用藥不慎導(dǎo)致中毒死亡的報(bào)道14，影響烏頭類藥物毒效發(fā)揮的因素很多，其中以煎煮時(shí)間和藥物劑量最為重要。煎煮時(shí)間應(yīng)多久，藥物劑量應(yīng)多大，才能保證烏頭類有毒藥物最正確成效的發(fā)揮而又不致中毒。對此，筆者應(yīng)用均勻設(shè)計(jì)方法進(jìn)展了一系列烏頭類有毒藥物煎煮時(shí)間、給藥劑量與藥物成效的相關(guān)性研究?，F(xiàn)將制川烏抗炎、鎮(zhèn)痛成效與煎煮時(shí)間、給藥劑量的相關(guān)性研究報(bào)道如下。1挑選實(shí)驗(yàn)1.1材料1.1.1藥物制川烏：受試藥物，購自四川江油，經(jīng)本校生藥鑒定教研室鑒定為烏頭AnituarihaeliDebx.的枯燥母根，當(dāng)年采收。參見2000年版?中國藥典?制劑通

7、那么項(xiàng)，以3倍量水浸泡30in，加至10倍量水煎煮，煎煮時(shí)間分別取煮沸后0.25,0.5,1,2,3,4,6h7個(gè)時(shí)間點(diǎn)，煎煮完畢減壓濃縮為每毫升含原生藥1g。根據(jù)均勻設(shè)計(jì)表，制川烏煎煮15，30in，1，2，3，4，6h7個(gè)時(shí)間點(diǎn)分別取臨床劑量3g60kgd-1的24，3，48，12，1，36和6倍。臨用時(shí)用蒸餾水分別配制成12，1.5，24，6，0.5，18，3的藥液備用。醋酸地塞米松：陽性藥物，浙江仙琚制藥股份消費(fèi)。批準(zhǔn)文號：國藥準(zhǔn)字H33020822。消費(fèi)批號：040209。規(guī)格：0.75g/片。實(shí)驗(yàn)時(shí)用蒸餾水配制成0.015的藥液備用。鹽酸曲馬多片：陽性藥物，石家莊制藥集團(tuán)消費(fèi)。批準(zhǔn)

8、文號：國藥準(zhǔn)字H10960106。消費(fèi)批號：031003。規(guī)格：50g/片。實(shí)驗(yàn)時(shí)用蒸餾水配制成1的藥液備用。1.1.2動(dòng)物昆明種小鼠，由成都中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究中心提供，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物消費(fèi)答應(yīng)證號：04-11。檢疫后備用。1.2實(shí)驗(yàn)方法1.2.1抗炎實(shí)驗(yàn)取體重2530g昆明雄性小鼠90只，隨機(jī)分為模型對照組n10，陽性對照組n10，制川烏15in組n10，30in組n10，1h組n10，2h組n10，3h組n10，4h組n10，6h組n10。按組分別灌胃蒸餾水，0.015地塞米松藥液，12，1.5，24，6，0.5，18，3的制川烏藥液10lkg-1d-1,連續(xù)4d。末次給藥0.5h后，每只小鼠

9、右耳廓滴注0.04l二甲苯，造模后1.5h脫頸椎處死，用6打孔器分別在同一部位摘取小鼠雙耳片，稱重，求兩耳片之差值，即為耳腫脹度。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用SPSS11.0統(tǒng)計(jì)軟件處理，回歸分析采用均勻設(shè)計(jì)1.0專用軟件處理。1.2.2鎮(zhèn)痛實(shí)驗(yàn)扭體實(shí)驗(yàn)：取體重1822g昆明種小鼠雌雄各半90只隨機(jī)分為模型對照組n10、陽性對照組n10、制川烏15in組n10，30in組n10，1h組n10，2h組n10，3h組n10，4h組n10，6h組n10。按組分別灌胃蒸餾水，1曲馬多藥液，12，1.5，24，6，0.5，18，3的制川烏藥液10l/kg。給藥后1h，各鼠腹腔注射0.6%冰乙酸10l/kg，觀察15in內(nèi)

10、各鼠出現(xiàn)扭體反響的埋伏期及扭體次數(shù)。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)資料用SPSS11.0統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)展統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，多組間比擬用單因素方差分析，回歸分析采用均勻設(shè)計(jì)1.0專用軟件處理。轉(zhuǎn)貼于論文聯(lián)盟.ll.熱板實(shí)驗(yàn)：以RB-200型智能熱板鎮(zhèn)痛儀挑選根底痛閾值以小鼠舔后足的時(shí)間作為痛閾在530s的雌性小鼠90只，按根底痛閾值的上下隨機(jī)分為模型對照組n10，陽性對照組n10，制川烏15in組n10，30in組n10，1h組n10，2h組n10，3h組n10，4h組n10，6h組n10。按組分別灌胃蒸餾水，1曲馬多藥液，12，1.5，24，6，0.5，18，3的制川烏藥液10lkg-1d-1，連續(xù)4d。第4天，測定末次給

11、藥后0.5，1，1.5h和2h的痛閾值。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)資料用SPSS11.0統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)展統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，多組間比擬用單因素方差分析，回歸分析采用均勻設(shè)計(jì)1.0專用軟件處理。1.3實(shí)驗(yàn)結(jié)果1.3.1抗炎實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表1及回歸分析。表1對二甲苯致炎小鼠耳廓腫脹的影響(略)1.3.2鎮(zhèn)痛實(shí)驗(yàn)結(jié)果詳見表23和回歸分析。表2對冰乙酸致痛小鼠的影響(略)表3對熱板致痛小鼠痛閾值的影響(略)2驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)2.1材料同挑選試驗(yàn)。2.2方法同挑選試驗(yàn)。2.3結(jié)果2.3.1抗炎實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表4。表4對二甲苯致炎小鼠的影響(略)2.3.2鎮(zhèn)痛實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表56。表5對冰乙酸致痛小鼠的影響(略)表6對熱板致痛小鼠痛閾值的影響(略)3討

12、論均勻設(shè)計(jì)方法是由方開泰教授和數(shù)學(xué)家王元于1978年共同提出5，6。他們根據(jù)多因素多程度實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的要求，分析了正交設(shè)計(jì)“均勻分散、整齊可比的原理，認(rèn)為“均勻分散是實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的本質(zhì)，而“整齊可比只是便于數(shù)據(jù)分析，可以去除，從而可大量增加實(shí)驗(yàn)程度數(shù)，實(shí)驗(yàn)次數(shù)卻增加很少。由于均勻設(shè)計(jì)具有實(shí)驗(yàn)次數(shù)少每個(gè)因素的每個(gè)程度僅做一次實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)范圍可調(diào)，可用計(jì)算機(jī)處理等特點(diǎn)，在藥學(xué)研究中應(yīng)用較多79，包括提取工藝、制劑工藝、炮制工藝以及處方挑選等，大大節(jié)約了研究時(shí)間和經(jīng)費(fèi)。但采用均勻設(shè)計(jì)方法進(jìn)展煎煮時(shí)間、給藥劑量和藥物成效的相關(guān)性研究文獻(xiàn)報(bào)道很少。經(jīng)一系列經(jīng)典抗炎鎮(zhèn)痛實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，制川烏能明顯抑制二甲苯所致小鼠耳廓腫

13、脹；顯著減少醋酸所致小鼠扭體次數(shù)，延長小鼠扭體埋伏期；明顯延長熱板刺激小鼠舔足埋伏期，進(jìn)步熱板小鼠痛閾值，即具有顯著的抗炎作用和中樞鎮(zhèn)痛作用?；貧w分析和驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)說明，制川烏抗炎鎮(zhèn)痛成效與煎煮時(shí)間、給藥劑量具有顯著的相關(guān)性，發(fā)揮抗炎成效的最正確煎煮時(shí)間為6h，最正確給藥劑量為2.4g/kg；鎮(zhèn)痛成效的最正確煎煮時(shí)間為6h，最正確給藥劑量為2.4g/kg。川烏中主要含脂溶性生物堿烏頭堿、中烏頭堿和次烏頭堿，具有很強(qiáng)的毒性，同時(shí)又具有較強(qiáng)的抗炎鎮(zhèn)痛成效，但其不耐熱，加熱后極易水解為毒性很小的烏頭原堿等。煎煮6h后脂溶性有毒生物堿幾乎完全水解，提示，制川烏在最正確煎煮時(shí)間、劑量下發(fā)揮抗炎鎮(zhèn)痛成效的物質(zhì)根底并非烏頭堿類有毒生物堿，但是否就是其水解產(chǎn)物，或其它抗炎鎮(zhèn)痛成分，尚需進(jìn)一步研究。【參考文獻(xiàn)】1張新龍.草烏中毒致死1例報(bào)告J.山西臨床醫(yī)藥雜志，2000，910：777.2吳國炎.草烏中毒致心律失常死亡1例報(bào)告J.急診醫(yī)學(xué)，1997，61：51.3范存富.12例制川烏中毒報(bào)告與分析J.中國醫(yī)院藥學(xué)雜志,1995,15(10):476.4靳昌山.服川烏中毒死亡二那么分析J.河北中醫(yī),1996,18(6):22.5方開泰.均勻設(shè)計(jì)數(shù)論方法在試驗(yàn)設(shè)計(jì)中的應(yīng)用J.應(yīng)用數(shù)學(xué)學(xué)報(bào)，19