微生物第二十章雙股dna病毒

1、第二十章 雙股 DNA雙股 DNA是指：組核酸為雙股 DNA 的。主要包括以下：痘科非洲豬瘟科與虹彩科皰疹科其中痘科、非洲豬瘟科、皰疹科、腺病原科包含腺科了獸醫(yī)學(xué)上重要的多瘤科與瘤科嗜肝 DNA科桿狀科：為昆蟲(chóng)及甲殼動(dòng)物的第一節(jié) 痘科（Poxviridae）本科可引起人和許多動(dòng)物的痘病，由持續(xù)較長(zhǎng)時(shí)間的輕癥至嚴(yán)重癥狀的致死染。(“Pox”來(lái)自英語(yǔ),意“痘”或“膿皰”)一、痘科的分類根據(jù)的特征、自然宿主和特異性抗原，痘科可分為 2 個(gè)亞科。二、各屬的關(guān)系1、各種禽痘之間在抗原性上存在抗原交叉；2、各種哺乳動(dòng)物的痘之間也存在抗原交叉；3、禽痘和哺乳動(dòng)物的痘之間不存在交叉。三、生物學(xué)特性1、形態(tài)：（

2、1）多為磚形(250nm250nm200nm)；少數(shù)為卵圓形(260nm160nm) 副痘；（2）衣殼復(fù)雜對(duì)稱，具有囊膜。2、主要特性：（1）組單分子的線狀雙股 DNA，約 200kb；（2）細(xì)胞漿內(nèi)；（3）主要以胞漿膜出芽方式并獲得囊膜；（4）能在上皮細(xì)胞漿中形成胞漿包涵體。3、抵抗力：（1）怕熱：55，20min 或 37，24h 喪失力；（2）怕日光和紫外線: 可迅速滅活；（3）抗冷，抗干燥； （4）病灶干痘痂，毒力可保存幾個(gè)月。（6）.對(duì)脂溶劑敏感4、培養(yǎng)：（1）1012 日齡雞胚絨尿膜接種；多數(shù)在膜上可形成痘斑，痘大小以及形成時(shí)間也不同。的種類不同，痘斑的形態(tài)、顏色、（2）雞胚成細(xì)胞

3、培養(yǎng)，產(chǎn)生 CPE，并形成空斑。四、致病性痘可引起各種動(dòng)物的急性和熱性傳染病，特征是皮膚和粘膜發(fā)生特殊的丘疹和皰疹。兔痘所。致的疾病為傳染性皮膚瘤和粘液瘤。禽痘所引起的疾病特點(diǎn)是在上皮組織產(chǎn)生增生性和腫瘤五、（1）分離：采取無(wú)菌的清朗庖液或取痘斑研磨后，加雙抗處理后，雞胚絨毛接種，在 37孵育 57d，可見(jiàn)絨尿膜上形成增生性、壞死性痘皰。（2）病理切片：將絨尿膜固定制作切片，用蘇木素和伊紅染色，在上皮細(xì)胞的胞漿內(nèi)可以見(jiàn)到嗜酸性包涵體。六、常見(jiàn)痘1、雞痘（1）禽痘屬成員。（2）某些毒株具有血凝素：雞、其它禽類、綿羊等的紅細(xì)胞。（3）能在雞胚中增殖絨尿膜上產(chǎn)生白色痘包，也能在雞胚成細(xì)胞中增殖（4）

4、抗原性與血凝性：與其他禽痘有共同抗原，與哺乳動(dòng)物的痘沒(méi)有共同抗原（3）致病性：可分為三種病型，即皮膚型、白喉型和混合型。 皮膚型：在雞冠、肉髯和眼皮等處，產(chǎn)生一種特殊的痘子。 白喉型：主要在口腔和咽喉部分，先在粘膜上生成一種黃白色小結(jié)節(jié)，后逐漸融合形成一層黃白色干酪樣的假膜。2、綿羊痘（1）致病性：自然條件下只綿羊，致全身性皰疹，肺常出現(xiàn)特征性干酪性結(jié)節(jié)，各率 550%不等。人由于直接接觸病羊污染的物質(zhì)也種綿羊?qū)d羊痘可。的易感性不同，（2）培養(yǎng)：可在雞胚絨毛顯的 CPE。上、綿羊、犢牛細(xì)胞培養(yǎng)中生長(zhǎng)，并產(chǎn)生明（3）預(yù)防：定期接種，常用羊痘氫氧化鋁苗或雞胚化羊痘弱。3、痘（1）該與綿羊痘之間存

5、在共同抗原。（2）在自然條件下僅，表現(xiàn)為發(fā)熱、有粘液性、膿性鼻漏及全身性皮膚丘疹。這兩種是同一屬的兩種不同，具有共同的抗原科與虹彩科（Asfarviridae and Iridoviridae）第二節(jié) 非洲豬瘟虹彩科：分為 4 個(gè)屬，其中 2 個(gè)屬與魚(yú)類和兩棲類疾病相關(guān)。非洲豬瘟科：僅有一個(gè)成員，即非洲豬瘟（African swine fever，ASFV）。這兩科的均為：線狀雙股 DNA，20 面體對(duì)稱，有囊膜。一、非洲豬瘟1、為非洲豬瘟的病原體：僅家豬易感；以急性高熱為特征，全身，病程短，率高；由呼吸道扁桃體和鼻粘膜附近淋增殖血流（血癥，紅細(xì)胞及白細(xì)胞中含毒）。2、的特點(diǎn)（1）175215

6、nm； 2）雙股 DNA，190kb；有囊膜，20 面體對(duì)稱 （3）是唯一已知的核酸為 DNA 的蟲(chóng)媒。4）血細(xì)胞吸附現(xiàn)象：白細(xì)胞ASFV 后，表面有一種特異抗原，能吸附正常豬的紅細(xì)胞，這種可被抗本的免疫所抑制；血細(xì)胞吸附試驗(yàn)具株特異性。3、培養(yǎng)：（1）初始分離的 ASFV 僅在豬單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞中；（2）適應(yīng)后可在豬腎細(xì)胞(PK15)、Vero 細(xì)胞等生長(zhǎng)。4、IE的方法（1）分離和鑒定；（2）血細(xì)胞吸附實(shí)驗(yàn)：可區(qū)別非洲豬瘟與豬瘟；（3）直接熒光抗體試驗(yàn)檢測(cè)抗原；（4）的 PCR 檢測(cè)。5、免疫本各個(gè)毒株之間免疫原性很低，對(duì)同株的免疫力也是短暫的，目前尚無(wú)有效可用。注意：我國(guó)目前沒(méi)有非洲豬

7、瘟，必須嚴(yán)加防范！；（第三節(jié) 皰疹科（Hesviridae）一組具有包膜的 DNA。 現(xiàn)有 70 多種。因代表種單純皰疹能引起匐行性皰疹而得名。皰疹可引起多種動(dòng)物的疾病，包括哺乳類（綿羊除外）、鳥(niǎo)類、爬行類、兩棲類、昆蟲(chóng)以及軟體動(dòng)物。該科均為：線狀雙股 DNA，20 面體對(duì)稱，有囊膜。一、分類二、主要特征1、組為單分子線狀雙股 DNA，約 125235kb。2、直徑 150nm，162 個(gè)殼粒組成的 20 面體對(duì)稱，有囊膜，囊膜上有糖蛋白的纖突。3、衣殼在細(xì)胞核內(nèi)和裝配，可形成巨大的包涵體，后經(jīng)核膜以芽生方式獲得囊膜；三、與養(yǎng)殖業(yè)密切相關(guān)的幾個(gè)皰疹偽狂犬（Pseudorrabies）禽傳染性喉

8、氣管炎（Avian infectiouslaryngotracheitis）馬立克病（Mareks disease，MDV）鴨瘟（Duck）1、偽狂犬（1）分類地位：為皰疹甲亞科成員，又名豬皰疹1 型。僅一個(gè)型（2）致病性 豬為原始宿主，也可馬、牛、綿羊、及多種野生動(dòng)物?？諝怙w沫是主要的水平方式 主要癥狀成年豬多為隱染，少數(shù)出現(xiàn)輕微發(fā)熱和神經(jīng)癥狀；幼豬后呈發(fā)熱、麻痹、等癥狀，率很高； 懷孕母豬、死胎或木乃伊胎； 其它動(dòng)物后率很高，特征癥狀為體軀某部奇癢。（3）分布與動(dòng)物排毒情況分布：最初位于扁桃體，24hr 內(nèi)可從頭部神經(jīng)節(jié)、脊髓及橋腦中分離到 排毒：康復(fù)豬可通過(guò)鼻腔物及唾液持續(xù)排毒，但糞、尿

9、不帶毒。（4）培養(yǎng) 易在雞胚絨毛上生長(zhǎng)，接種后 3-4d 能形成大小不一的隆起的白色痘斑 可在細(xì)胞培養(yǎng)中生長(zhǎng)： 兔、豬和倉(cāng)鼠的腎細(xì)胞（可產(chǎn)生 CPE 和空斑，形成包涵體）；兔和豚鼠細(xì)胞；雞胚成細(xì)胞。（）抵抗力：一般的劑都有效（） 微生物學(xué) 動(dòng)物試驗(yàn)：12mL 適當(dāng)稀釋的病腦組織懸液皮下接種兔；25d 后于接種部位出現(xiàn)奇癢癥狀，最后麻痹致死。分離：常用豬腎細(xì)胞系(PK-15)，接種后 2472h，出現(xiàn) CPE（細(xì)胞層折光性，最后脫落，形成合胞體）。鑒定：可用特異性抗做中和試驗(yàn)、免疫熒光試驗(yàn)鑒定；ELISA（國(guó)際貿(mào)易指定試驗(yàn)）：能迅速檢測(cè)大量樣品；PCR 技術(shù)：鑒定偽狂犬，多用于隱染。（6）預(yù)防滅

10、活苗弱毒苗缺失苗，在計(jì)劃根除偽狂犬病的國(guó)家，可選用此類。2、禽傳染性喉氣管炎（1）分類地位：為皰疹甲亞科成員，又名禽皰疹1 型，僅 1 個(gè)型。（2）致病性 自然對(duì)象為雞；各種雞均可被，僅以成年雞的癥狀最典型?？祻?fù)雞可部分成為帶毒雞，成為傳染的來(lái)源。 主要癥狀：病雞呈現(xiàn)呼吸和咳性滲出物；產(chǎn)蛋下降，蛋殼褪色，產(chǎn)軟殼蛋。 主要病變：主要發(fā)生在喉頭和氣管部分，氣管黏膜腫脹、黃白色滲出物 。、壞死和形成糜爛，氣管內(nèi)的血樣或（3）培養(yǎng) 僅能在雞胚：絨尿膜接種，在絨毛上形成大小不等的灰白色痘斑 能在雞胚肝、腎和肺細(xì)胞上繁殖，并引起 CPE（4）抵抗力 對(duì)熱敏感，-20-60或凍干條件下可長(zhǎng)期保存，至少 10

11、 年； 對(duì)一般藥抵抗力不強(qiáng)。在 3%來(lái)或 1%苛性鈉溶液中，不到 1min 即。（5） 微生物學(xué)分離病料：發(fā)病早期的氣管滲出物、氣管粘膜及肺組織。雞胚接種：絨尿膜接種，第 3d 開(kāi)始形成痘斑, 56d。雛雞接種：易感雛雞接種后 34d 出現(xiàn)明顯的癥狀和病變。 包涵體的檢查：發(fā)病早期，取發(fā)病雞氣管、喉頭、眼結(jié)膜上皮組織、經(jīng)姬薩姆染色可檢出典型的核內(nèi)嗜酸性包涵體學(xué)試驗(yàn)：常用間接熒光抗體技術(shù)、瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)、中和試驗(yàn)、ELISA 試驗(yàn)等動(dòng)物實(shí)驗(yàn)：取病雞氣管的滲出物，涂擦易感雞泄殖腔黏膜，4-5 天后觀察是否出現(xiàn)紅腫分子生物學(xué)方法：聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)、可檢測(cè)并區(qū)分強(qiáng)度和弱毒（6） 防治：接種（從未發(fā)生過(guò)本病

12、的地區(qū)，不宜進(jìn)行接種） 中等毒力：泄殖腔黏膜涂擦日齡接種 1 次即可 弱：滴鼻或滴眼 油乳劑滅活苗，80-100（三）馬立克?。?）分類地位：皰疹亞科成員/馬立克氏病屬，又名禽皰疹2 型。（2）體對(duì)稱。特性：組為線狀雙股 DNA，大小 166184kb，有囊膜，為傳染性核酸；核衣殼 20 面（3） 毒株分類：分為1、2、3 型，不同毒株的 MDV 毒力差別很大。1 型：包括所有致瘤強(qiáng)弱不同的致瘤毒株2 型：包括所有的不致瘤毒株，SB1，301 B/1，Z4（江蘇農(nóng)學(xué)院）。3 型：包括所有的火雞皰疹，如：FC-126，LS 等。（4）培養(yǎng) 雞胚培養(yǎng)：卵黃囊接種 4 日齡雞胚，18 日齡左右可看到

13、絨尿膜上形成白色痘皰，從針尖大到直徑 12 mm 不等。 細(xì)胞培養(yǎng)：雛雞腎細(xì)胞(CK)和鴨胚成細(xì)胞(DEF)適于 MDV1 型的初次分離，適應(yīng)后可在雞胚成纖維細(xì)胞(CEF)上生長(zhǎng)，并產(chǎn)生 CPE；2 型和 3 型 MDV 在 CEF 上生長(zhǎng)良好。（5） 傳染性雞群的墊料和羽毛具有傳染性：含有從羽囊上皮細(xì)胞來(lái)的，傳染性在室溫可保持48 個(gè)月，在 4至少保持 10 年，但常用化學(xué)劑作用 10min 就能使之滅活。 不能垂直。（6） 致病性 MDV 為細(xì)胞結(jié)合毒，靶細(xì)胞T 淋巴細(xì)胞。 主要雞和火雞，鵪鶉、稚雞、鷓鴣也能。以淋巴細(xì)胞增生和腫瘤形成為特征，潛伏期較長(zhǎng)。一般以 23 月齡的雞發(fā)病最為嚴(yán)重。

14、根據(jù)病變發(fā)生的主要部位和臨診癥狀，可分為 4 種致病類型：神經(jīng)型（古典型）內(nèi)臟型（急性）眼型皮膚型（7） 微生物學(xué)病料與分離：用病雞的腫瘤組織或抗凝血作為接種材料；分離 1 型用 DEF 或CK 細(xì)胞單層，分離 2 型、3 型用 CEF 單層。學(xué)試驗(yàn)：常用瓊擴(kuò)試驗(yàn)；流行期，常用高免檢測(cè)病雞羽囊上皮中的，流行后期，可用已知抗原檢查病雞中的抗體。 熒光抗體試驗(yàn)（8） 免疫預(yù)防： 1 日齡雛雞免疫接種4、鴨瘟（1）分類地位：皰疹甲亞科成員，又名鴨皰疹1 型，僅 1 個(gè)型（2）培養(yǎng)：能在 9-14 日齡鴨胚和 13-15 日齡鵝胚中繁殖，并能引起胚胎，能在 DEF 中生長(zhǎng)，傳代后可產(chǎn)生，形成空斑和核內(nèi)

15、包涵體（）致病性 以消化道為主。主要引起 1 月齡以上成年鴨的鴨瘟；也可鵝和其他雁形目禽類。 病鴨肝、脾、腦、食道和泄殖腔等組織含毒量最高。 主要癥狀：高熱，兩腳麻痹，腹瀉，排出綠色稀糞，流淚和頭頸部腫大，俗稱“大頭瘟”；病鴨表現(xiàn)為腸炎、脈管炎、廣泛的局灶性壞死，產(chǎn)蛋率下降 2540%，亡）。5100%，率很高（病鴨多數(shù)死（）抵抗力：陽(yáng)光直射下。毒力，對(duì)熱敏感，對(duì)低溫的抵抗力較強(qiáng)，對(duì)乙醚和氯仿敏感（） 微生物學(xué) 禽胚接種：絨尿膜接種 914 日齡鴨胚，4d 后，胚體表面輕度充血和小點(diǎn)，絨尿膜水腫增厚并有灰白色壞死灶，肝臟表面有特征性灰白色或灰黃色針頭大壞死灶。雞胚內(nèi)不能生長(zhǎng)。 能在 DEF 中

16、生長(zhǎng)，自第 6 代起可引起明顯的細(xì)胞病變，形成核內(nèi)包涵體和空斑。 動(dòng)物接種：無(wú)菌病料接種易感小鴨和免疫對(duì)照鴨；前者而后者不，即可確診。（） 防治 免疫接種：鴨瘟鴨胚化弱、鴨瘟雞胚化弱。 防止帶毒野生水禽進(jìn)入鴨群。第四節(jié) 腺科（Adenoviridae）一、分類哺乳動(dòng)物腺屬（Mastadeno）和禽類腺屬（Aviadeno）二、一般特性1、各種動(dòng)物的腺形態(tài)基本相同，衣殼結(jié)構(gòu)清晰，在細(xì)胞核內(nèi)的粒子經(jīng)常排列成結(jié)晶狀。2、腺?zèng)]有囊膜，核衣殼的直徑為 7080nm，呈二十面體對(duì)稱。內(nèi)為線狀的雙股 DNA。DNA 被包于蛋白外殼即衣殼內(nèi)。3、纖突直徑為 2nm，長(zhǎng)約 1031nm隨腺型而不同。4、在細(xì)胞核

17、內(nèi)轉(zhuǎn)錄、核內(nèi)裝配；通過(guò)細(xì)胞裂解。三、抵抗力1、腺對(duì)酸的抵抗力較強(qiáng)，腺對(duì)酸穩(wěn)定，適宜 pH 為 69，能耐 pH35，pH 在 2 以下和 10 以上不穩(wěn)定。能通過(guò)胃腸道而繼續(xù)保持活性。2、由于沒(méi)有脂質(zhì)囊膜，常用劑可滅活3、腺對(duì)溫度的耐受范圍較寬，在冷凍狀態(tài)下保存非常穩(wěn)定，于 4存活 70 天，222314 天，367天；但 50經(jīng) 1020 分鐘或 56 255 分鐘可以滅活。四、致病性與免疫性1、以糞口為主途徑，也可通過(guò)呼吸道或污染物品。2、在咽、結(jié)膜尤其是小腸上皮細(xì)胞內(nèi)增殖，偶爾波及其他臟器，隱染常見(jiàn)。3、疾病一般為自限染后可獲得長(zhǎng)期持續(xù)的型特異性免疫力，中和抗體損傷作用重要。4、哺乳動(dòng)物

18、腺有共同的可溶性補(bǔ)體結(jié)合性抗原。五、微生物學(xué)檢查1、分離：采取標(biāo)本，迅速接種敏感細(xì)胞，根據(jù)特征性細(xì)胞病變及抗原性鑒定。2、學(xué)檢查：取急性期和恢復(fù)期進(jìn)行補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)，抗體升高 4 倍或以上，可判斷為近期。3、中和試驗(yàn)和血凝抑制試驗(yàn)可定型別。減蛋綜合征（EDS76）1、最早分離于 1976 年，除雞外，家鴨、野鴨及鵝也發(fā)病。2、具有三種型（1）第一種引起經(jīng)典的 EDS，許多國(guó)家均有發(fā)生；發(fā)生于澳大利亞的雞。（2）第二種僅發(fā)生于英國(guó)的鴨；（3）第三種3、致病性（1）產(chǎn)蛋母雞的產(chǎn)蛋量下降和蛋的質(zhì)量降低危害種、蛋雞 的重要傳染病之一。 產(chǎn)蛋下降一般持續(xù) 410w 逐漸恢復(fù) 蛋色變淡、蛋殼粗糙不平，軟殼蛋、薄殼蛋、破蛋。（2）可垂直，口腔接種易感雞可