2012年度院所生物安全培訓(xùn)課件

1、 實驗室生物平安2021.09實驗室生物平安實驗室生物平安實驗室生物平安Laboratory Biosafety 是指以實驗室為科研和工作場所時，防止危險生物因子造成實驗室人員暴露、向?qū)嶒炇彝鈹U散并導(dǎo)致危害的綜合措施。 當(dāng)實驗室工作人員所處理的實驗對象含有致病的微生物及其毒素時，通過使用個體防護裝置一級屏障、實驗室的設(shè)計建造二級屏障和嚴格遵從標(biāo)準化的工作及操作程序三級屏障等綜合措施: 1確保實驗室工作人員不受實驗對象侵染。 2確保周圍環(huán)境不受其污染。實驗室感染相關(guān)事故1941年美國發(fā)生74例實驗室相關(guān)的吸入性布氏桿菌感染事故1974年丹麥某醫(yī)院臨床生化檢驗室的工作人員肝炎發(fā)病率比普通人群高出

2、7倍1976年英國某醫(yī)學(xué)實驗室的工作人員體檢時發(fā)現(xiàn)結(jié)核菌感染者比其他人員高5倍1992年美國報告職業(yè)性感染艾滋病者13例，其中1例是實驗室工作者，12例是臨床醫(yī)護人員實驗室感染相關(guān)事故1993年國內(nèi)某醫(yī)院報告225名醫(yī)院工作人員醫(yī)生、護士、食堂工作人員、檢驗人員HBV檢測結(jié)果，其中檢驗人員感染率最高，陽性率為81.2%1998年，我國某高校學(xué)生在用大白鼠進行試驗時，有兩名學(xué)生被大白鼠咬傷，還有一些學(xué)生在解剖的過程中，未按照要求戴手套操作，結(jié)果在29名實驗人員中，有9人感染了流行性出血熱2004年新加坡、中國臺灣、中國CDC SARS實驗室感染2021年東北農(nóng)業(yè)大學(xué)28名師生因動物實驗使用了未經(jīng)

3、檢疫的山羊感染了布魯氏菌病 中國醫(yī)務(wù)人員職業(yè)感染途徑 (n=1891) 調(diào)查時間：年年最常報告的感染：乙型肝炎、肺結(jié)核、傷寒、委內(nèi)瑞拉馬腦炎、布魯氏菌病我國HIV職業(yè)暴露事故統(tǒng)計19972005年 中國輸血雜志 , 2006，19(6) : 449-451. 實驗室生物平安事故原因工作人員主觀麻痹大意；未遵守實驗室生物平安規(guī)那么和程序；生物平安實驗室存在平安隱患；實驗室感染可控性可控性：只要重視，加強實驗室平安監(jiān)督管理，認真對待是可以防止此類事故發(fā)生的。例如： 領(lǐng)導(dǎo)重視：生物平安意識、態(tài)度和責(zé)任； 科學(xué)管理：條例、完善、預(yù)案、可行性； 可靠的硬件：設(shè)施過硬、設(shè)備齊全、驗證； 高素質(zhì)的隊伍：堅持

4、、培養(yǎng)、提高； 標(biāo)準和程序：不斷完善的技術(shù)和SOP。生物平安管理體系相關(guān)法規(guī)、條例組織機構(gòu) 管理體系相關(guān)法規(guī)、條例法規(guī) 國務(wù)院?病原微生物實驗室生物平安管理條例?中華人民共和國傳染病防治法中華人民共和國國境衛(wèi)生檢疫法突發(fā)公共衛(wèi)生事件應(yīng)急條例醫(yī)療廢物管理條例相關(guān)法規(guī)、條例技術(shù)標(biāo)準國家標(biāo)準?實驗室生物平安通用要求?GB19489-2004 ?生物平安實驗室建筑技術(shù)標(biāo)準?GB50346 -2004 ?微生物和生物醫(yī)學(xué)實驗室生物平安通用準那么?WS 233-2002 ?人間傳染的病原微生物名錄?WS 2006?可感染人類的高致病性病原微生物菌毒種或樣本運輸管理規(guī)定? WS 第45號 2006生物恐怖的

5、法規(guī)文件2001年，?刑法?第三次修訂案，把生物恐怖活動定為犯罪。2002年，國務(wù)院令第365號，?中華人民共和國生物兩用品及相關(guān)設(shè)備和技術(shù)出口管制條例?及其管制清單。2006年，管制清單進行了修訂和補充，增加了SARS病毒等13種病菌毒種等。2005年12月商務(wù)部、海關(guān)總署公布了?兩用物項和技術(shù)進出口許可證管理方法?。組織機構(gòu) 我國實驗室生物平安管理實行法人責(zé)任制及實驗室主任和工程負責(zé)人責(zé)任制設(shè)立生物平安領(lǐng)導(dǎo)小組和生物平安委員會負責(zé)生物平安工作實驗室設(shè)置專職或兼職平安監(jiān)督員 最高管理者法定代表人生物平安委員會實驗室主任(生物平安負責(zé)人)工程負責(zé)人生 物 安 全 防 護 實 驗 室生物平安領(lǐng)導(dǎo)

6、小組相關(guān)職能科室相關(guān)業(yè)務(wù)科室后勤保障部門平安監(jiān)督員平安管理體系組織結(jié)構(gòu)框圖 實驗室生物平安防護三項技術(shù)措施實驗室的操作規(guī)程和技術(shù) 標(biāo)準的操作規(guī)程 特殊的操作規(guī)程 平安設(shè)備一級屏障 特殊設(shè)計和建筑要求二級屏障生物平安分級BSLs生物平安實驗室硬件:實驗室設(shè)計建造 實驗設(shè)備的配置 個人防護裝備軟件:管理規(guī)程 標(biāo)準化的操作程序確保: 工作人員 周圍環(huán)境 實驗因子實驗室生物平安防護 三項技術(shù)措施樣品隔離技術(shù)機械、氣幕，防止傳染因子進入環(huán)境接觸人體定向流技術(shù)三級負壓系統(tǒng)，防止傳染因子擴散消毒滅菌技術(shù)物理、化學(xué)，滅活傳染因子實驗室生物平安一級屏障primary barrier是操作者和被操作對象之間的隔離

7、，也稱一級隔離如生物平安柜 分3級-I、II、III級個體防護裝備 口罩、面具、眼鏡，防護衣、帽、褲、鞋、靴、襪、手套、正壓服等個人防護裝備PPE一級屏障 一級屏障 生物平安柜BSC-Biosafety cabinet一級屏障-生物平安柜生物平安柜的作用防護實驗對象、人員和環(huán)境。處理感染性物質(zhì)特別是高濃度感染性物質(zhì)。進行有可能產(chǎn)生氣溶膠的操作時，如離心，研磨，劇烈震動，超聲破碎，翻開內(nèi)外壓力不同的感染性物質(zhì)的容器，動物鼻腔接種等。一級屏障-生物平安柜生物平安柜與超凈臺生物平安柜提供了對樣品、人、環(huán)境的保護超凈臺僅提供對樣品的保護生物平安柜類別級別工作口平均進風(fēng)速m/s循環(huán)風(fēng)比例（%）排風(fēng)比例（

8、%）連接方式I級0.360100密閉連接II級A10.380.517030可排到房間或設(shè)置局部排風(fēng)罩A20.517030可排到房間或設(shè)置局部排風(fēng)罩B10.513070密閉連接B20.510100密閉連接III級/0100密閉連接級生物平安柜 保護工作人員和環(huán)境 不保護試樣。級生物平安柜級生物平安柜一級屏障-生物平安柜平安柜操作要點將實驗器具放置于平安柜中，紫外滅菌15分鐘后，通風(fēng)10-15分鐘。檢測氣流是否正常。標(biāo)準有序進行試驗，防止手臂頻繁進出平安柜紊亂氣流，同時防止實驗材料擋住風(fēng)口。實驗完畢清潔平安柜內(nèi)部。紫外滅菌15分鐘，通風(fēng)10-15分鐘后關(guān)閉平安柜。一級屏障-生物平安柜本卷須知HEP

9、A濾器不能截留化學(xué)氣體，同時，揮發(fā)的化學(xué)品可能損壞HEPA濾器。濾器風(fēng)扇以及平安柜內(nèi)插座可能產(chǎn)生電火花，如果在平安柜中操作易燃易揮發(fā)液體易引起火災(zāi)或者爆炸。實驗室生物平安二級屏障(secondary barrier) 生物平安實驗室和外部環(huán)境的隔離，也稱二級隔離 實驗室的設(shè)施結(jié)構(gòu)通風(fēng)空調(diào)系統(tǒng) 給水排水電氣和控制系統(tǒng)二級隔離的防護能力取決于實驗室分區(qū)和定向氣流 一般按照實驗因子污染的概率把實驗室分為潔凈、半污染和污染三個區(qū) 實驗室生物平安水平分級根據(jù)所操作的生物因子的危害程度和采取的防護措施，將實驗室生物平安防護水平biosafety level，BSL分為4級，I級防護水平最低，IV級防護水平

10、最高以BSL-1、BSL-2、BSL-3、BSL-4表示實驗室的相應(yīng)生物平安防護水平以ABSL-1、ABSL-2、ABSL-3、ABSL-4表示動物實驗室的相應(yīng)生物平安防護水平一級生物平安實驗室 適用于實驗對象對健康成年人無致病作用，對實驗室工作人員和環(huán)境的潛在危害很小。一級生物平安實驗室 舉例：大腸桿菌耐格里原蟲感染性犬肝炎病毒枯草芽孢桿菌一級生物平安實驗室減少含微生物液體噴濺和氣溶膠的形成每日清潔實驗臺面，及時清理實驗廢棄物標(biāo)準的微生物學(xué)實驗操作限制實驗區(qū)人員走動嚴禁在實驗區(qū)飲食防止使用口吸式移液實驗服/乳膠手套/防護面具、眼鏡。二級生物平安實驗室 適用于實驗對象對人和環(huán)境具有 中等潛在危

11、害。二級生物平安實驗室乙肝病毒 沙門氏菌 HIV血清學(xué)檢測麻疹病毒舉例：* 有有效的疫苗或治療措施二級生物平安實驗室人員實行限制進入制度，實驗中限制出入；應(yīng)設(shè)可關(guān)閉的帶鎖的門，可使用感應(yīng)式、肘開式或腳踏式等非手動操作水龍頭；洗眼裝置；配備消毒滅菌的設(shè)備；實驗室工作區(qū)域外應(yīng)有存放備用物品的條件。* 特別要警惕污染的針頭或者銳器三級生物平安實驗室 適用于實驗對象是通過呼吸途徑使人感染導(dǎo)致嚴重的甚至是致死性疾病的致病微生物或其毒素。三級生物平安實驗室例如： 結(jié)核桿菌 炭疽桿菌 鼠疫桿菌通常已有預(yù)防疫苗四級生物平安實驗室 適用于實驗對象是對人具有高度危險性，表現(xiàn)出通過氣溶膠途徑傳播或傳播途徑不明的目前

12、尚無有效的疫苗和治療措施的致病微生物及其毒素。四級生物平安實驗室有暴露于通過氣溶膠傳播或者傳播途徑不明確的致病菌潛在可能感染可能致死 例如：黃病毒埃博拉病毒SNV中歐蜱傳腦炎病毒病原微生物實驗室生物平安傳染病的巨大危害生物武器的潛在威脅。生物恐怖的現(xiàn)實威脅。生物技術(shù)的非和平應(yīng)用微生物學(xué)實驗室的平安隱患。 病原微生物實驗室生物平安的核心是防擴散和防感染！十八大實驗室生物平安重點病原微生物危害等級(GB 19489)GB 19489-2004?實驗室 生物平安通用要求? 2004年10月1日實施分級依據(jù)微生物的致病性；傳播方式和宿主范圍；具有的有效預(yù)防措施；具有的有效治療措施分級3.1 危害等級I

13、 低個體危害，低群體危害3.2 危害等級 (中等個體危害，有限群體危害)3.3 危害等級 III 高個體危害，低群體危害3.4 危害等級 (高個體危害，高群體危害)微生物危害等級(國務(wù)院條例)?病原微生物實驗室生物平安管理條例? 分級依據(jù)病原微生物的傳染性、感染后對個體或者群體的危害程度將病原微生物分為四類一類是指能夠引起人類或者動物非常嚴重疾病的微生物，以及我國尚未發(fā)現(xiàn)或者已經(jīng)宣布消滅的微生物二類是指能夠引起人類或者動物嚴重疾病，比較容易直接或者間接在人與人、動物與人、動物與動物間傳播的微生物 微生物危害等級(國務(wù)院條例)三類是指能夠引起人類或者動物疾病，但一般情況下對人、動物或者環(huán)境不構(gòu)成

14、嚴重危害，傳播風(fēng)險有限，實驗室感染后很少引起嚴重疾病，并且具備有效治療和預(yù)防措施的微生物四類是指在通常情況下不會引起人類或者動物疾病的微生物第一類、第二類病原微生物統(tǒng)稱為高致病性病原微生物 各種病原微生物的危害等級分類參見衛(wèi)生部?人間傳染的病原微生物名錄?2006.01病原微生物的危險等級分布種類危害等級危害等級 危害等級危害等級病毒185114219細菌311901真菌635寄生蟲1232臨床檢驗相關(guān)病原生物危險等級分布病原微生物運輸運輸包裝要求運輸包裝要求A類：對健康人或動物造成永久性殘疾或致命疾病的感染性物質(zhì)。包裝：三層包裝，并附上完整的危險品申報單，培訓(xùn)運輸人員。運輸包裝要求 B類：不

15、符合列入A類標(biāo)準的感染性物質(zhì)。運輸專用名稱為B類生物物質(zhì)代替 診斷標(biāo)本或臨床標(biāo)本。 包裝：三層包裝,不需要危險品申報單。運輸工具高致病性樣本應(yīng)不少于兩人護送實驗室操作規(guī)程和技術(shù)標(biāo)準 實驗室的運行標(biāo)準儀器設(shè)備的使用標(biāo)準針對感染性材料的試驗操作標(biāo)準個人防護用品的使用標(biāo)準實驗室消毒規(guī)程危險廢棄物的處置規(guī)程鋒利器具的平安操作規(guī)程實驗緊急情況處理規(guī)程 生物危害風(fēng)險評估評估目的生物危害評估是對微生物和毒素可能給人或環(huán)境帶來的危害所進行的評估目的是為確定生物平安防護等級、實驗標(biāo)準操作規(guī)程提供重要依據(jù) 在危害評估的根底上，按不同級別的防護要求選擇適當(dāng)?shù)膫€人防護裝備防止工作人員發(fā)生感染，同時防止過分防護在群眾中

16、造成恐慌 生物危害風(fēng)險評估評估內(nèi)容生物因子的種類的、未知的、基因修飾的或未知傳染性的生物材料來源傳染性、致病性傳播途徑在環(huán)境中的穩(wěn)定性感染劑量、濃度動物實驗數(shù)據(jù)預(yù)防和治療實驗室生物平安管理制度準入制度設(shè)施設(shè)備監(jiān)測、檢測和維護制度健康醫(yī)療監(jiān)督制度生物平安工作自查制度實驗室資料檔案管理制度生物平安管理及實驗室人員培訓(xùn)制度其它必須的制度 生物平安工作自查制度 實驗室生物平安工作應(yīng)定期進行自查形式可以參考質(zhì)量管理體系有關(guān)不符合檢測的控制、內(nèi)審、內(nèi)務(wù)管理等程序必須列出與生物平安相關(guān)的各個環(huán)節(jié)逐一檢查 實驗室人員培訓(xùn)制度 保證所有實驗室 工作人員必需接受培訓(xùn)并經(jīng)考核合格，持證上崗新工作人員經(jīng)過培訓(xùn)通過考核

17、后，還須與有資格的工作人員一同工作1個月，才能獲得上崗證所有人員每年至少要接受一次新的培訓(xùn)對培訓(xùn)內(nèi)容、考核方式也應(yīng)作出規(guī)定建立并保存人員培訓(xùn)和考核記錄檔案 洗手實驗室工作人員在實際或可能接觸了血液、體液或者其他污染材料后，即使戴了手套也應(yīng)立即洗手。摘除手套后、使用衛(wèi)生間前后、離開實驗室前、進食應(yīng)洗手。實驗室生物平安本卷須知六步洗手法標(biāo)準搓揉20s6步法第一步，五指并攏、掌心搓掌心；第二步，手指交錯、掌心搓掌背； 第三步，手指交錯、掌心搓掌心；第四步，兩手互握，互相摩擦；第五步，拇指在掌心旋轉(zhuǎn)； 第六步，指尖摩擦掌心。 防護口罩外科手術(shù)口罩：不是呼吸防護保護他人口罩的存放及效期(通風(fēng)、枯燥，2-

18、3年)呼吸防護口罩強調(diào)適配性，兒童不宜使用前請仔細閱讀說明書佩戴、摘除流程掌握更換時機，不得隨意丟棄提示：N95防護不含油氣溶膠，過濾效果最低可達95 N95是所有認證等級中最低、最根本的一個等級。離心管破碎，應(yīng)立即停機，并于30分鐘后翻開。戴乳膠手套后，再套上厚橡皮手套，用鑷子取出離心碎片。全部碎管和套管等應(yīng)放入無腐蝕性的消毒液中浸泡24小時，或采用高壓滅菌。離心機轉(zhuǎn)頭應(yīng)采用無腐蝕性的消毒液擦拭干凈，擦布也需經(jīng)高壓滅菌。離心機廢棄物處理應(yīng)置于耐用、 防漏容器內(nèi)，密封運出實驗室。 普通廢棄物和含感染性物質(zhì)的廢棄物分別處理。 含感染性物質(zhì)的針頭等鋒利廢棄物應(yīng)放于鞏固的容器中，統(tǒng)一處理。非一次性利

19、器放入厚壁容器中最好高溫高壓蒸氣消毒處理。廢棄物處理禁止將針頭丟棄在塑料袋或普通垃圾箱中蒸汽滅菌壓力蒸汽滅菌器是所有滅菌器中歷史最久、應(yīng)用最廣、價格最廉價的滅菌設(shè)備之一；適用于耐高溫、耐高濕物品的滅菌，也適合處理微生物污染的廢水和固體廢物。物品裝放時，難于滅菌的物品放在上層，較易滅菌的物品放在下層；金屬物品放下層，織物包放上層，上下左右相互間均應(yīng)間隔一定距離以利蒸汽置換空氣。不正確的習(xí)慣廢針頭和碎玻璃不經(jīng)包裝丟棄自己或他人被刺、被感染?；旌厢t(yī)學(xué)垃圾和生活垃圾感染和污染環(huán)境。向下水道排放未經(jīng)徹底消毒的有害病菌或高濃度的有害化學(xué)品致癌物、致畸物、重金屬鹽溶液等。意外暴露的處置 預(yù)防措施處理原那么意外情況處理事故的評估和改進 刺傷、切割傷或擦傷