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1、Welcome to study biology !第三章遺傳與基因工程通過(guò)研究“基因敲除”的耗子將幫助研究人類的癌癥、糖尿病和高血壓等慢性疾病與遺傳的關(guān)系。 轉(zhuǎn)基因羊具有生長(zhǎng)快、毛質(zhì)、肉質(zhì)好、疾病少及耐粗飼料等優(yōu)點(diǎn)。在猴子的未受精卵中加入附加基因,并利用它成功培育出健康活潑的小猴“安迪”。通過(guò)對(duì)“安迪”的研究我們可以簡(jiǎn)單地引進(jìn)如老年性癡呆病的基因、帕金森病基因等,加快針對(duì)這類疾病疫苗的開(kāi)發(fā)研究。 在生物體外對(duì)DNA分子進(jìn)行人工剪切、拼接,對(duì)基因進(jìn)行改造和重新組合,再導(dǎo)入生物體內(nèi)使導(dǎo)入的基因得以表達(dá)?;蚬こ痰谒墓?jié)基因工程簡(jiǎn)介一基因工程的基本內(nèi)容甲生物乙生物取出優(yōu)秀基因“剪切”“拼接”新類型表

2、達(dá)新的生物產(chǎn)品基因敲除技術(shù)轉(zhuǎn)基因技術(shù)生物新類型敲除不利基因新的生物產(chǎn)品什么叫基因工程? 基因工程又叫基因拼接技術(shù)或DNA重組技術(shù)。該技術(shù)是在生物體外,通過(guò)對(duì)DNA分子進(jìn)行人工“剪切”和“拼接”,對(duì)生物的基因進(jìn)行改造和重新組合,然后導(dǎo)入受體細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行無(wú)性繁殖,使重組基因在受體細(xì)胞內(nèi)表達(dá),產(chǎn)生出人類所需要的基因產(chǎn)物。(一)基因工程的概念(一)基因工程的概念基因工程的別名操作環(huán)境操作對(duì)象操作水平基本過(guò)程結(jié)果基因拼接技術(shù)或DNA重組技術(shù)生物體外基因DNA分子水平人類需要的基因產(chǎn)物剪切 拼接 導(dǎo)入 表達(dá)實(shí)質(zhì)基因重組基因操作的工具基因的大小以納米計(jì)算,要對(duì)它進(jìn)行剪切、拼接等操作,沒(méi)有非常精細(xì)的工具是不行的

3、。進(jìn)行基因操作最少需要以下三種工具:、基因的剪刀限制性內(nèi)切酶(限制酶)一種限制酶只能識(shí)別一種特定的核苷酸序列,并在特定的切割點(diǎn)上將DNA 分子切斷。目前已發(fā)現(xiàn)的限制酶有200多種。重播DNA被限制酶切斷后有兩個(gè)反向互補(bǔ)的“黏性末端”。被同一種限制切斷的幾個(gè)DNA具有相同的黏性末端,能夠通過(guò)互補(bǔ)進(jìn)行配對(duì)。、基因的針線DNA連接酶連接酶的作用是:將互補(bǔ)配對(duì)的兩個(gè)黏性末端連接起來(lái),使之成為一個(gè)完整的DNA分子。重播、基因的針線DNA連接酶連接酶的作用是:將互補(bǔ)配對(duì)的兩個(gè)黏性末端連接起來(lái),使之成為一個(gè)完整的DNA分子。3、基因的運(yùn)輸工具運(yùn)載體要讓一個(gè)從甲生物細(xì)胞內(nèi)取出來(lái)的基因在乙生物體內(nèi)進(jìn)行表達(dá),首先

4、得將這個(gè)基因送到乙生物的細(xì)胞內(nèi)去!能將外源基因送入細(xì)胞的工具就是運(yùn)載體。運(yùn)載體必須同時(shí)滿足三個(gè)要求:能與目的基因結(jié)合;能進(jìn)入受體生物細(xì)胞并在受體生物細(xì)胞內(nèi)復(fù)制并表達(dá);比較容易得到。科學(xué)家發(fā)現(xiàn)大腸桿菌、枯草桿菌等的質(zhì)粒能同時(shí)滿足以上三個(gè)要求。目前被較廣泛提取使用的目的基因有:蘇云金桿菌抗蟲(chóng)基因、人胰島素基因、人干擾素基因、種子貯藏蛋白基因、植物抗病基因等?;虿僮鞯幕静襟E、提取目的基因?qū)⑿枰幕驈墓w生物的細(xì)胞內(nèi)提取出來(lái)。供體生物細(xì)胞取出DNA用限制酶剪去多余部分目的基因限制酶提取目的基因的方法用限制酶切斷成許多片段直接分離基因鳥(niǎo)槍法將供體生物的DNA用限制酶切割為許多片段,再用運(yùn)載體將這些

5、片段都運(yùn)載到受體生物的不同細(xì)胞中去。只要有一個(gè)細(xì)胞獲得了需要的目的基因并得以表達(dá),基因工程就算成功了。該法最大的缺點(diǎn)是帶有很大的盲目性,工作量大,成功率低。且不能將真核生物的基因轉(zhuǎn)移到原核生物中去。人工合成基因法DNA合成儀有兩種方法:逆轉(zhuǎn)錄法:以信使RNA為模板,在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下將脫氧核苷酸合成合成DNA(基因)。直接合成法:根據(jù)蛋白質(zhì)的氨基酸順序推算出信使RNA核苷酸順序,再據(jù)此推算出基因DNA的脫氧核苷酸順序。用游離脫氧核苷酸直接合成相應(yīng)的基因。2、目的基因與運(yùn)載體結(jié)合用與提取目的基因相同的限制酶切割質(zhì)粒使之出現(xiàn)一個(gè)切口,將目的基因插入切口處,讓目的基因的黏性末端與切口上的黏性末端互補(bǔ)

6、配對(duì)后,在連拉酶的作用下連接形成重組DNA分子。3、將目的基因?qū)胧?體細(xì)胞并使之?dāng)U增導(dǎo)入擴(kuò)增要讓目的基因表達(dá),必須將它導(dǎo)入受體細(xì)胞并進(jìn)行擴(kuò)增。為獲得目的基因的表達(dá)產(chǎn)物時(shí),通常以大腸桿菌等無(wú)害易得的細(xì)菌為受體。為改進(jìn)某種生物時(shí),將欲改進(jìn)的生物細(xì)胞為受體。為使重組的DNA分子更容易進(jìn)入受體細(xì)胞,通常還要用一些物質(zhì)對(duì)受體細(xì)胞進(jìn)行處理,使受體細(xì)胞具有更大的通透性。4、目的基因的檢測(cè)和表達(dá)前三步的處理十分繁鎖,為保證目的基因得到有效利用,通常用大量的受體細(xì)胞來(lái)接受不多的目的基因。這樣,處理的受體細(xì)胞中真正攝入了目的基因的很少,必須將它從中檢測(cè)出來(lái)。無(wú)表達(dá)產(chǎn)物無(wú)表達(dá)產(chǎn)物有表達(dá)產(chǎn)物無(wú)表達(dá)產(chǎn)物細(xì)菌的檢測(cè),將

7、每個(gè)受體細(xì)胞單獨(dú)培養(yǎng)形成菌落,檢測(cè)菌落中是否有目的基因的表達(dá)產(chǎn)物。淘汰無(wú)表達(dá)產(chǎn)物的菌落,保留有表達(dá)產(chǎn)物的進(jìn)一步培養(yǎng)、研究。多細(xì)胞生物的檢測(cè),將每個(gè)受體細(xì)胞單獨(dú)培養(yǎng)并誘導(dǎo)發(fā)育成完整個(gè)體,檢測(cè)這些個(gè)體是否攝入目的基因,攝入的基因是否表達(dá)(是否表現(xiàn)出相應(yīng)的性狀)。淘汰無(wú)變化的個(gè)體,保留有相應(yīng)變化的個(gè)體進(jìn)一步培養(yǎng)、研究。例:用棉鈴飼喂棉鈴蟲(chóng),如蟲(chóng)吃后不出現(xiàn)中毒癥狀,說(shuō)明未攝入目的基因或攝入目的基因未表達(dá)。如蟲(chóng)吃后中毒死亡,則說(shuō)明攝入了抗蟲(chóng)基因并得到表達(dá)。二基因工程的成果與發(fā)展前景、基因工程與醫(yī)藥衛(wèi)生我國(guó)生產(chǎn)的部分基因工程疫苗和藥物 基因工程藥品的生產(chǎn)許多藥品的生產(chǎn)是從生物組織中提取的。受材料來(lái)源限制產(chǎn)

8、量有限,其價(jià)格往往十分昂貴。微生物生長(zhǎng)迅速,容易控制,適于大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)。若將生物合成相應(yīng)藥物成分的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞內(nèi),讓它們產(chǎn)生相應(yīng)的藥物,不但能解決產(chǎn)量問(wèn)題,還能大大降低生產(chǎn)成本。胰島素是治療糖尿病的特效藥,長(zhǎng)期以來(lái)只能依靠從豬、牛等動(dòng)物的胰腺中提取,100Kg胰腺只能提取4-5g的胰島素,其產(chǎn)量之低和價(jià)格之高可想而知。將合成的胰島素基因?qū)氪竽c桿菌,每2000L培養(yǎng)液就能產(chǎn)生100g胰島素!大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)不但解決了這種比黃金還貴的藥品產(chǎn)量問(wèn)題,還使其價(jià)格降低了30%-50%!干擾素治療病毒感染簡(jiǎn)直是“萬(wàn)能靈藥”!過(guò)去從人血中提取,300L血才提取1mg!其“珍貴”程度自不用多說(shuō)。人

9、造血液、白細(xì)胞介素、乙肝疫苗等通過(guò)基因工程實(shí)現(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn),均為解除人類的病苦,提高人類的健康水平發(fā)揮了重大的作用。人造血液及其生產(chǎn) 基因診斷與基因治療運(yùn)用基因工程設(shè)計(jì)制造的“DNA探針”檢測(cè)肝炎病毒等病毒感染及遺傳缺陷,不但準(zhǔn)確而且迅速。我國(guó)研究人員正在制備用于基因治療的基因工程細(xì)胞通過(guò)基因工程給患有遺傳病的人體內(nèi)導(dǎo)入正常基因可“一次性”解除病人的疾苦。、基因工程與農(nóng)牧業(yè)、食品工業(yè)運(yùn)用基因工程技術(shù),不但可以培養(yǎng)優(yōu)質(zhì)、高產(chǎn)、抗性好的農(nóng)作物及畜、禽新品種,還可以培養(yǎng)出具有特殊用途的動(dòng)、植物。生長(zhǎng)快、耐不良環(huán)境、肉質(zhì)好的轉(zhuǎn)基因魚(yú)(中國(guó))乳汁中含有人生長(zhǎng)激素的轉(zhuǎn)基因牛(阿根廷)轉(zhuǎn)黃瓜抗青枯病基因的甜椒轉(zhuǎn)魚(yú)抗寒基因的番茄轉(zhuǎn)黃瓜抗青枯病基因的馬鈴薯不會(huì)引起過(guò)敏的轉(zhuǎn)基因大豆導(dǎo)入貯藏蛋白基因的超級(jí)羊和超級(jí)小鼠導(dǎo)入人基因具特殊用途的豬和小鼠超級(jí)動(dòng)物特殊動(dòng)物3、基因工程與環(huán)境保護(hù)環(huán)境監(jiān)測(cè):基因工程做成的DNA探針能夠十分靈敏地檢測(cè)環(huán)境中的病毒、細(xì)菌等污染。1t水中只有10個(gè)病毒也能被DNA探針檢測(cè)出來(lái)利用基因工程培育的“指示生物”能十分靈敏地反映環(huán)境污染的情況,卻不易因環(huán)境污染而大量死亡,甚至還可以吸收和轉(zhuǎn)化污染物。環(huán)境污染治理:基因工程做成的“超級(jí)細(xì)菌”能吞食和分解多種污染環(huán)境的物質(zhì)。通常一

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