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1、分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)關(guān)于試劑的防污染:凡是可以進(jìn)行滅菌的試劑與用具都必須要經(jīng)過高壓蒸汽滅菌后進(jìn)行使用,防止雜菌或酶類對(duì)樣品、試劑的污染。Eppendorf管、槍頭等的裝盒或裝瓶過程中都應(yīng)采用鑷子,或戴上一次性手套進(jìn)行操作,不能直接用手去拿。 打開EP管,不要用手接觸管蓋及管口內(nèi)側(cè)。不要對(duì)著暴露的試劑說話、咳嗽或打噴嚏。保持實(shí)驗(yàn)環(huán)境的干凈衛(wèi)生。關(guān)于酶的保存和使用:Taq DNA聚合酶、連接酶、限制性內(nèi)切酶等工具酶保存于50%的甘油中,-20C 可以長(zhǎng)期保存。在需要用酶(一般最后一個(gè)加)的時(shí)候再將酶從冰箱中取出,放在冰盒里,用完后立即放回冰箱。使用過程中,盡量將酶保持在零度以下,取

2、酶時(shí)不能用手指接觸儲(chǔ)存酶的部分。加入后再用槍頭抽吸幾次。關(guān)于EB操作:EB強(qiáng)誘變性,有揮發(fā)性。務(wù)必帶手套進(jìn)入EB操作間,出操作間時(shí)務(wù)必取下手套放在指定紙簍;不得將身體靠在實(shí)驗(yàn)臺(tái)或儀器上。必須帶進(jìn)EB室的器具,注意防EB污染。不得將EB室內(nèi)原有的物件帶出操作間,不得隨意丟棄EB污染的垃圾。其他:實(shí)驗(yàn)中加入任何試劑后應(yīng)注意樣品的混勻,保溫等反應(yīng)后的樣品也應(yīng)低速離心后再進(jìn)行下步的實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)過程中應(yīng)做好每個(gè)樣品的標(biāo)記工作,如樣品的名稱、保存的時(shí)間且一般在EP管上用記號(hào)筆作標(biāo)記時(shí),應(yīng)在兩處(蓋,管身)做好標(biāo)記。 涉及微生物培養(yǎng)的操作,應(yīng)在超凈工作臺(tái)上進(jìn)行。微量移液器的使用:操作步驟:在量程范圍內(nèi),調(diào)節(jié)至

3、所需要的容量刻度。將微量移液器按鈕輕輕壓至第一停點(diǎn)。 垂直握持微量移液器,使吸嘴浸入液樣面下,不要將槍頭直接插到液體底部。緩慢、平穩(wěn)地松開控制按鈕,吸上樣液。否則液體進(jìn)入槍頭太快,導(dǎo)致液體倒吸入移液器內(nèi)部,或吸入體積減少。等一秒鐘后將槍頭提離液面; 排液時(shí),平穩(wěn)地把按鈕壓到第一停點(diǎn),再把按鈕壓至第二停點(diǎn)以排出剩余液體。提起微量移液器,使槍頭在容器壁擦過; 然后按槍頭彈射器除去槍頭。 將移液器恢復(fù)至量程范圍內(nèi)的最大刻度。注意事項(xiàng):未裝槍頭的微量移液器絕對(duì)不可用來吸取任何液體。 一定要在允許范圍內(nèi)設(shè)定體積,千萬不要將容量的調(diào)節(jié)超出其適用的刻度范圍,否則會(huì)造成損壞。 不要橫放或倒放帶有殘余液體槍頭的移液器。 不要用大量程的移液器移取小體積樣品。 實(shí)驗(yàn)守則務(wù)必穿實(shí)驗(yàn)服,帶實(shí)驗(yàn)工具。不得將食物帶入實(shí)驗(yàn)室。嚴(yán)格按操作規(guī)程進(jìn)行實(shí)驗(yàn),及時(shí)記錄實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象及結(jié)果。課后認(rèn)真做好實(shí)驗(yàn)報(bào)告。 正確使用儀器,發(fā)現(xiàn)故障及時(shí)報(bào)告。公用試劑用完后,應(yīng)立即蓋好放回原處。 實(shí)驗(yàn)小組有固定實(shí)驗(yàn)臺(tái),不得隨意改變位置;實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,各小組將小組用具洗刷干凈,集中擺放整齊,并清潔本組實(shí)驗(yàn)臺(tái)。EB操作間:務(wù)必帶手套進(jìn)入,出操作間時(shí)務(wù)必

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