不同劑量hCG對體外受精-胚胎移植

1、不同劑量hCG對體外受精-胚胎移植妊娠結(jié)局的影響唐志霞，洪名云，張玲，何芳，嚴(yán)春（安徽省婦幼保健院生殖中心，安徽醫(yī)科大學(xué)附屬臨床學(xué)院，合肥，230001）摘要目的：探討使用不同劑量人絨毛膜促性腺激素（hCG）對體外受精-胚胎移植（IVF-ET）的結(jié)局及對卵巢過度刺激綜合征（OHSS）發(fā)病率的影響。方法：回顧性分析2010年4月至2013年9月在本中心行IVF-ET的374例，按HCG日注射HCG的不同劑量分為A組(4 000 U),B組(5000 U),C組(6 000 U)，D組（8 000 U）和E組（ 10 000 U）。觀察各組IVF結(jié)局及OHSS發(fā)生率等。結(jié)果：E組的獲卵數(shù)、M數(shù)、優(yōu)

2、質(zhì)胚胎數(shù)及冷凍胚胎數(shù)均低于其余各組，且有統(tǒng)計學(xué)差異（P 0.05）。A組的獲卵數(shù)、M數(shù)、優(yōu)質(zhì)胚胎數(shù)均高于其余各組，且有統(tǒng)計學(xué)差異（P 0.05）。A組的冷凍胚胎數(shù)均高于其余各組，與除B組之外的各組相比有統(tǒng)計學(xué)差異（P 0.05）。B組的獲卵數(shù)、M數(shù)高于D組和E組，且有統(tǒng)計學(xué)差異（P 0.05）。各組的獲卵率、成熟率、受精率、卵裂率、妊娠率及流產(chǎn)率相比均無統(tǒng)計學(xué)差異（P0.05）。結(jié)論：超促排卵過程中減少使用hCG劑量對卵子的成熟、受精、胚胎質(zhì)量以及移植周期臨床妊娠率無明顯的影響，結(jié)合全胚胎冷凍有效的預(yù)防OHSS的發(fā)生。關(guān)鍵詞：人絨毛膜促性腺激素; 控制性超促排卵; 受精，體外；胚胎移植；Eff

3、ect of hCG at Different Dosages on the Pregnancy Outcomes of IVF-ET. TANG Zhi-xia, HONG Ming-yun, ZHANG Ling, HE Fang, YAN Chun. Reproductive Center, AnHui Province Maternity and Child Health Hospital, Hefei, 230001.【Abstract】Objective：To investigate the effects of hCG at different dosages on the Pr

4、egnancy Outcomes of IVF-ET and rate of ovarian hyperstimulation syndrome (OHSS). Methods：Retrospectively analyzed 374 infertile women undergoing IVF-ET treatment during the period of April 2010 to September 2013, Which were divided into five groups according to the different doses of HCG on hCG inje

5、ction day, Group A (4 000 U), Group B (5000 U), Group C (6 000 U)，Group D（8 000 U）and Group E（ 10 000 U）. We compared the pregnancy outcomes of IVF-ET and the rate of 通訊作者E-mail：OHSS.Results：The number of egg retrieval and M, the number of high quality embryo and frozen embryo of group E was signifi

6、cantly Lower than those of other groups（P0.05). The number of egg retrieval and M, the number of high quality embryo of group A was significantly higher than those of other groups（P0.05). The number of frozen embryo of group A was significantly higher than those of other groups except group B（P0.05)

7、. The number of egg retrieval and Mof group B was significantly higher than those of group D and group E（P0.05). There was no significant difference in the rate of egg retrieval, maturation, fertilization, cleavage，Pregnancy and abortion among five groups（P0.05）. Conclusions：The decreasing dosage of

8、 hCG during IVF -ET has no negative influence on egg maturation，fertilization, embryo quality，and pregnancy outcomes, but can effectively prevent the severe OHSS combining with the whole embryo freezing.【Key words】human chorionic gonadotropin; Controlled ovarian hyperstimulation; fertilization in vi

9、tro; Embryo transfer;在體外受精-胚胎移植(IVF-ET)的過程中,常規(guī)使用外源性人絨毛膜促性腺激素(HCG)5 00010 000 IU促卵泡最后成熟。然而注射外源性HCG有可能誘發(fā)卵巢過度刺激綜合征 (OHSS)。近年來隨著輔助生殖技術(shù)的廣泛開展及促排卵藥物的普遍使用, OHSS的發(fā)生呈上升趨勢。在超排卵過程中HCG日減少HCG劑量促卵子最后成熟引起了人們的重視。本文回顧性分析了374個IVF-ET周期,旨在比較不同劑量HCG在體外受精(IVF/ICSI)胚胎移植的臨床效果，從而尋找最佳的劑量。1 資料和方法1.1研究對象 2010年4月至2013年9月在本中心行IVF

10、/ICSI的不育癥患者中，有374例滿足以下條件：年齡40歲；不孕因素包括子宮內(nèi)膜異位癥、盆腔及輸卵管因素、排卵障礙、不明原因不孕、男方因素(少精、弱精、畸精、無精)、雙方因素；hCG注射日雌二醇（E2）3000pg/L，B超提示兩側(cè)卵巢直徑14 mm的卵泡數(shù)目10個。1.2控制性超排卵的方法 根據(jù)年齡以及卵巢儲備功能狀況制定促排卵方案, 均選用標(biāo)準(zhǔn)長方案，當(dāng)超聲監(jiān)測有兩個以上優(yōu)勢卵泡直徑18mm時,結(jié)合當(dāng)日E2、LH、P值水平,確定HCG給藥時間,并于當(dāng)日21:00肌肉注射HCG 400010 000IU,3436h后取卵。取卵后第3日,在腹部B超引導(dǎo)進行胚胎移植,移植12枚優(yōu)質(zhì)胚胎。剩余優(yōu)

11、質(zhì)胚胎冷凍保存,非優(yōu)質(zhì)胚胎行囊胚培養(yǎng),囊胚形成后冷凍保存。胚胎質(zhì)量評估采用G15分級方法1,分成5個等級:I級:胚胎卵裂球均勻規(guī)則、胞漿均質(zhì)透明,無碎片;級:胚胎卵裂球均勻規(guī)則,有少量碎片(50%)。其中,級、級胚胎為優(yōu)質(zhì)胚胎。1.3分組 根據(jù)HCG日注射HCG的不同劑量分為A組：4 000 U, B組：5000 U, C組：6 000 U，D組：8 000 U和E組：10 000 U1.4觀察指標(biāo)一般臨床資料包括女方年齡、不孕年限、Gn天數(shù)和Gn支數(shù)。主要的觀察指標(biāo)包括獲卵數(shù)、獲卵率、成熟卵子數(shù)、成熟卵子率、受精率、卵裂率、優(yōu)質(zhì)胚胎數(shù)、臨床妊娠率、中重度OHSS發(fā)生率。在我們的分析中定義:獲

12、卵率為獲卵數(shù)與HCG日直徑14 mm的卵泡總數(shù)之比,成熟卵子數(shù)在ICSI中為MII卵子數(shù)、在IVF中為受精卵數(shù)和MII卵子數(shù)之和。成熟卵子率為成熟卵子數(shù)與獲卵數(shù)之比。OHSS的診斷標(biāo)準(zhǔn)參照參考文獻標(biāo)準(zhǔn)2 。1.5 OHSS診斷標(biāo)準(zhǔn) 按1973年WHO的三級分度法：級（輕度）：雙側(cè)卵巢增大，多個HYPERLINK /luanpao_107976/卵泡和HYPERLINK /huangtinangzhong_39425/黃體囊腫，卵巢直徑550.5nmol/24h，血E25505pmol/L，尿P231mol/24h,血P93.6nmol/L；級（中度）：卵巢增大，5cm直徑12cm或有HYPER

13、LINK /luanchaopolie_20294/卵巢破裂，出現(xiàn)胸水、腹水、低血容量，甚至HYPERLINK /xiuke_20144/休克，水及HYPERLINK /dianjie_110075/電解質(zhì)平衡紊亂，HYPERLINK /xueye_48304/血液濃縮，血凝異常甚至HYPERLINK /xueshuanxingcheng_48832/血栓形成。1.6統(tǒng)計學(xué)分析 結(jié)果用x-s表示,數(shù)據(jù)分析應(yīng)用11.0 SPSS軟件包,計量資料采用方差分析(ANOVA),計數(shù)資料采用2檢驗,檢驗水準(zhǔn)=0.05。2 結(jié)果共納入患者475例,患者平均年齡為30.784.04(2040)歲,平均不孕年

14、限為4.412.73(114)年。各組的年齡、不孕年限及Gn天數(shù)相比，均無統(tǒng)計學(xué)差異（P0.05）。E組的Gn支數(shù)明顯高于其余各組，且有統(tǒng)計學(xué)差異（P 0.05）。見表1。E組的獲卵數(shù)、M數(shù)、優(yōu)質(zhì)胚胎數(shù)及冷凍胚胎數(shù)均低于其余各組，且有統(tǒng)計學(xué)差異（P 0.05）。A組的獲卵數(shù)、M數(shù)、優(yōu)質(zhì)胚胎數(shù)均高于其余各組，且有統(tǒng)計學(xué)差異（P 0.05）。A組的冷凍胚胎數(shù)均高于其余各組，與除B組之外的各組相比有統(tǒng)計學(xué)差異（P 0.05）。B組的獲卵數(shù)、M數(shù)高于D組和E組，且有統(tǒng)計學(xué)差異（P 0.05）。各組的獲卵率、成熟率、受精率、卵裂率、妊娠率及流產(chǎn)率相比均無統(tǒng)計學(xué)差異（均P0.05）見表2,3。五組中均無中

15、重度OHSS發(fā)生，B和C組的周期取消率、全胚冷凍率與其余各組相比，均有統(tǒng)計學(xué)差異（P 0.05）見表4. 。表1各組一般臨床資料的比較（x-s）組別 例數(shù)年齡不孕年限Gn天數(shù)Gn支數(shù)OHSS發(fā)生率（輕度）A組 89B組 85C組 136D組 75E組 13030.293.7331.324.1230.513.9930.554.1630.953.894.192.544.202.624.572.744.032.594.612.8411.733.0511.412.0810.932.0811.522.2211.322.0329.848.3930.059.9229.818.8331.019.5731.25

16、10.3110與E組相比，*P 0.05表2各組COH后相關(guān)參數(shù)的比較（x-s）組別 獲卵數(shù)獲卵率(%)M數(shù)成熟率(%) A組 B組 C組 D組 E組 14.097.0114.495.5814.775.3313.954.18 13.515.3190.4720.85*90.1617.31*90.6018.09*92.9615.34*83.1717.6812.023.6712.204.7212.574.7511.834.0911.014.2885.8913.5784.6711.3385.5113.4184.6213.6987.2813.54與E組相比，*P 0.05；與A組相比，P0.05；與B組

17、相比，# P0.05； 表3各組COH后相關(guān)參數(shù)的比較（x-s）組別 受精率(%)卵裂率(%)優(yōu)質(zhì)胚胎數(shù)冷凍胚胎數(shù) A組 B組 C組 D組 E組 85.7616.2082.4218.3282.4018.1083.6018.17 85.7316.6096.5810.3695.7610.8695.9810.2196.928.7694.4612.495.173.88*4.783.49*4.713.86*4.353.21*4.003.144.564.49*4.444.12*4.424.25*3.962.29*3.432.20與E組相比，*P 0.05；與A組相比，P0.05；與B組相比，# P0.05

18、表4各組妊娠結(jié)局的比較組別 周期取消率(%)全胚冷凍率(%)妊娠率(%)流產(chǎn)率(%)A組 B組 C組 D組 E組 66.67（34/51）*#&47.17（25/53）*&41.54（54/130）*&28.00(14/50) *#4.44(4/90) #& 66.67（34/51）*#&47.17（25/53）*&39.23(51/130) *& 28.00(14/50) *#3.33(3/90) #&41.18（7/17）35.71（10/28）37.66（29/77）38.89（14/36）37.21（32/86）14.28（1/7）10.00（1/10）10.34（3/29）14.28

19、（2/14）12.50（4/32）與E組相比，*P 0.05；與A組相比，P0.05；與B、C組相比，# P0.05； 與D相比，& P 0.053 討論OHSS是輔助生育技術(shù)中進行控制性超促排卵(COH)引起的醫(yī)源性并發(fā)癥之一，嚴(yán)重者甚至危及患者的生命。目前,尚缺乏特異性治療措施,預(yù)防其發(fā)生成為關(guān)鍵。其中,取消周期、coasting、全胚冷凍保存、促性腺激素釋放激素激動劑誘發(fā)卵泡成熟等方法可預(yù)防OHSS的發(fā)生，但均有一定的局限性。hCG能刺激血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)的產(chǎn)生,增加血管通透性，從而可導(dǎo)致OHSS的發(fā)生,且與其應(yīng)用劑量密切相關(guān),降低劑量可減少或避免OHSS的發(fā)生3-5。COH時

20、常需注射hCG作為模仿黃體生成素(LH)峰,啟動和促進卵子發(fā)育到最后成熟,使卵母細(xì)胞周圍顆粒細(xì)胞松散,與卵泡壁分離,為卵泡抽吸取卵提供方便。通常劑量為5 000 IU10 000 I。有研究表明6,3 300 IU hCG用于卵巢高反應(yīng)患者的誘發(fā)卵泡成熟并不影響成熟卵子的比例、受精率以及妊娠率,但是不能防止OHSS的發(fā)生;另有研究發(fā)現(xiàn)1000 IU的低劑量hCG能夠在COS過程中誘發(fā)卵泡成熟,不僅適應(yīng)于卵巢反應(yīng)高者,而且也適應(yīng)于卵巢反應(yīng)正常者7。我們的研究結(jié)果顯示：4000 IU hCG不影響卵子的成熟和妊娠結(jié)局，同時結(jié)合行全胚胎冷凍，無一例中重度OHSS發(fā)生。Abdalla等8對非OHSS風(fēng)

21、險患者的研究顯示，減少hCG用量可以明顯降低獲卵數(shù)。本研究中，A組的獲卵數(shù)、M數(shù)、優(yōu)質(zhì)胚胎數(shù)均高于其余各組，且有統(tǒng)計學(xué)差異（P 0.05），考慮是由于A組的平均年齡小于其余各組，但無統(tǒng)計學(xué)差異。但A組的獲卵率、成熟率、受精率均無統(tǒng)計學(xué)差異。提示盡管減少了hCG用量并沒有降低獲卵數(shù)，沒有影響卵子的成熟和受精，以及優(yōu)質(zhì)胚胎數(shù)和冷凍胚胎數(shù)。本研究E組的Gn支數(shù)明顯高于其余各組，且有統(tǒng)計學(xué)差異（P 0.05）。E組的獲卵數(shù)、M數(shù)、卵裂率、優(yōu)質(zhì)胚胎數(shù)及冷凍胚胎數(shù)均低于其余各組，且有統(tǒng)計學(xué)差異（P 0.05）?？紤]可能的原因是由于E組的年齡均高于其余各組，盡管無統(tǒng)計學(xué)差異，但是年齡是影響IVF妊娠結(jié)局的一

22、個重要因素。B和C組的周期取消率、全胚冷凍率與其余各組相比，均有統(tǒng)計學(xué)差異（P 0.05）。不同個體經(jīng)COH后,卵泡LH受體生成量及其功能不同,因此不同個體對HCG的敏感性可能存在差異,因此我們并不認(rèn)為所有病例都應(yīng)使用低劑量HCG,我們建議對有OHSS風(fēng)險的患者采取小劑量HCG(4000U),并且聯(lián)合全胚胎冷凍來預(yù)防OHSS發(fā)生。本研究提示在IVF-ET過程中，對于OHSS高危患者，減少hCG用量結(jié)合全胚胎冷凍是一種有效的預(yù)防中重度OHSS的方法，而對卵子的成熟、受精以及胚胎質(zhì)量沒有明顯的影響，但本研究樣本量有限，仍需要大樣本進一步的研究。參考文獻1Cummins JM, Breen TM,

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