純化大腸桿菌（省一等獎）-完整精講版課件

1、鞏固練習(xí)1.培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿、接種環(huán)、實驗者的雙手、空氣所采用的滅菌、消毒方法依次是( ) 化學(xué)消毒 灼燒滅菌 干熱滅菌 紫外線滅菌 高壓蒸汽滅菌 巴氏消毒法A B C D2.獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是 ( )將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具、培養(yǎng)基等進行滅菌 接種純種細菌 適宜環(huán)境條件下培養(yǎng) 防止外來雜菌的入侵鞏固練習(xí)成分含量成分含量NaNO33 gFeSO40.01 gK2HPO41 g(CH2O)30 g瓊脂15 gH2O1 000 mlMgSO47H2O0.5 g青霉素0.1萬單位3.下表所示為某微生物培養(yǎng)基的配方，請回答： （1）物理性質(zhì)，該培養(yǎng)基屬于_培養(yǎng)基。依用途劃分，則屬于_培養(yǎng)基。

2、根據(jù)培養(yǎng)基原料，所培養(yǎng)微生物的同化作用的類型是_。（異養(yǎng)型/自養(yǎng)型）固體選擇異養(yǎng)型實驗操作：純化大腸桿菌純化大腸桿菌1.本實驗所用的培養(yǎng)基是牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基2.本實驗可分成配制培養(yǎng)基和純化大腸桿菌兩個階段。（一）制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基1.計算：根據(jù)配方比例，計算配制100mL培養(yǎng)基的用量2.稱量：3.溶化：將各成分加水溶解并定容至100mL。4.滅菌：培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿5.倒平板：1000ml牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的配方H2O 定容至1000mlNaCl 5g蛋白胨 10g牛肉膏 5g瓊脂20.0g思考3：在制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的稱量操作中，動作要迅速，原因是什么？ （一）制備牛肉膏蛋

3、白胨固體培養(yǎng)基防止牛肉膏吸收空氣中的水分思考4：溶化操作中需要不斷用玻璃棒攪拌的目的是什么？ 防止瓊脂糊底而導(dǎo)致燒杯破裂5.倒平板待培養(yǎng)基冷卻至50左右時在酒精燈火焰附近操作在火焰旁右手拿 _，左手_. 錐形瓶拔出棉塞5.倒平板待培養(yǎng)基冷卻至50左右時在酒精燈火焰附近操作錐形瓶的瓶口_。迅速通過火焰5.倒平板待培養(yǎng)基冷卻至50左右時在酒精燈火焰附近操作左手將培養(yǎng)皿_,右手_,立刻蓋上皿蓋。打開一條縫隙將培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿5.倒平板待培養(yǎng)基冷卻至50左右時在酒精燈火焰附近操作待平板冷卻凝固后，將平板_。倒過來放置5.倒平板思考5：錐形瓶的瓶口通過火焰的目的是什么？ 消滅瓶口雜菌，防止雜菌感染培養(yǎng)基

4、。思考6：倒平板的目的是什么？ 防止培養(yǎng)基冷卻過程中形成的水滴落到培養(yǎng)基表面。思考7：若皿蓋和皿底之間粘有培養(yǎng)基，則該平板能否培養(yǎng)微生物？為什么？ 不能，空氣中的雜菌會在這些粘附培養(yǎng)基上繁殖，并污染皿內(nèi)的培養(yǎng)基。二、純化大腸桿菌1.平板劃線法用帶有微生物的接種環(huán)在固體培養(yǎng)基表面通過連續(xù)劃線而純化分離微生物的一種方法。 1.將接種環(huán)在酒精燈火焰上灼燒直至燒紅 2.在酒精燈火焰旁冷卻接種環(huán)，并打開大腸桿菌的菌種試管的棉塞。二、純化大腸桿菌1.平板劃線法3.將菌種試管口通過火焰達到消滅試管口雜菌的目的 4.將冷卻的接種環(huán)伸入到菌液中沾取一環(huán)菌液 二、純化大腸桿菌1.平板劃線法5.將菌種試管口再次通過火焰后塞上棉塞 6.將皿蓋打開一條縫隙，把接種環(huán)伸入平板內(nèi)劃35條平行線，蓋上皿蓋，不要劃破培養(yǎng)基。 二、純化大腸桿菌1.平板劃線法7.灼燒接種環(huán)，冷卻后從第一區(qū)劃線末端開始向第二區(qū)域內(nèi)劃線。重復(fù)上述過程，完成三、四、五區(qū)域內(nèi)劃線。注意不要將第五區(qū)的劃線與第一區(qū)劃線相連。 8.將平板倒置放在培養(yǎng)箱中培養(yǎng) 思考8：取菌種前灼燒接種環(huán)的目的是什么？ 二、純化大腸桿菌消滅接種環(huán)上的微生物。為什么除第一次劃線外，其余劃線前都要灼燒接種環(huán)？ 消滅接種環(huán)上的殘留菌種。取菌種和劃線前都要求接種環(huán)冷卻后進