維持性透析患者高Lp a 水平影響因素探討

1、維持性透析患者高Lp a 程度影響因素討論終末期腎病(esrd)維持性血液透析(hd)患者血中l(wèi)p(a)濃度顯著高于正常人，遺憾的是多數(shù)降血脂的藥物對高lp(a)血癥療效并不顯著，其原因與hd患者高lp(a)血癥的發(fā)活力制未明有關(guān)。本文采用高分辨sds-瓊脂糖電泳連接免疫印跡法檢測hd患者ap(a)表型，針對常見的影響lp(a)程度的因素選擇相應(yīng)的監(jiān)測指標進展分析，討論hd患者高lp(a)血癥發(fā)活力制。1材料與方法1.1研究對象66例hd患者均來自沈陽軍區(qū)總醫(yī)院2022-2022持續(xù)性透析治療兩年以上的患者，男38例，女28例，平均年齡54520歲。51例esrd患者選自沈陽軍區(qū)總醫(yī)院腎內(nèi)科住

2、院病人均沒有經(jīng)過血液透析、腹膜透析及腎移植治療，男30例，女21例，平均年齡49.518歲。兩組患者均除外急性創(chuàng)傷、惡性腫瘤、嚴重肝并糖尿病等疾玻對照組(ntrl)62人均來自安康體檢人群，其中男35例，女27例，平均年齡55.625歲，體檢證實無心、腦、腎、肝等相關(guān)性疾玻1.2主要儀器與試劑perpatuniversalpersupply(bi-rad)，ini-prtein3ell轉(zhuǎn)移電泳槽(bi-rad)，dyp-31d型程度電泳槽(北京六一儀器廠)，aerset全自動生化分析儀(美國雅培)，iag特種蛋白分析儀(美國貝克曼)等。鼠抗人aplipprteinlp(a)單克隆抗體(usbi

3、lgial)，兔抗鼠辣根過氧化物酶標記抗體(北京中杉金橋)，超純瓊脂糖d-5(大連寶生物)，lp(a)、ldl-試劑(日本東紡)，胱抑索(ystatin，ys)(dakytatin)，反響蛋白(-reatinprtein，rp)試劑(美國貝克曼)，白蛋白(alb)、肌酐(rea)試劑(英國朗道)。1.3方法所有被檢者均采集早晨空腹肘靜脈血9l，其中4l低速離心別離血清用于檢測lp(a)、rp、ys、ldl-、aib、rea等指標。另外4l4000rp離心別離血清放-70保存直至檢測ap(a)表型。余下il放入edta-k2抗凝管中，混合均勻用于檢測hb。參照arvinas等采用高分辨sds-瓊

4、脂糖電泳連接免疫印跡法，略有調(diào)整。標準血清通過隨機選取安康人群的血清，每4份血清混合后進展高分辨sds-瓊脂糖電泳連接免疫印跡法檢測ap(a)表型。選擇出含有電泳速度最快和最慢的血清，在同一瓊脂板上電泳，測得電泳速度最快和最慢的條帶之間的間隔 大約為68，由于表型檢測中可區(qū)分的兩個最近表型間隔 為2，把電泳速度最慢的表型稱為1即最大ap(a)表型，而電泳速度最快的表型那么為35即最小ap(a)表型。將含有1和35表型的兩份血清混合作為標準血清?；旌涎鍍?nèi)含(1，15，24，35)表型。參照arvinas和krnenbergf等方法確定ap(a)表型。測混合標準血清條帶中最大ap(a)表型標準1

5、和最小ap(a)表型35間的間隔 (a)，量出待測標本ap(a)蛋白帶中心與最大ap(a)表型標準1的間隔 (b)，按公式(34b)a+1計算確定表型。將只含有15表型的標本稱為高分子量(h)表型，至少含有一個15表型的標本視為低分子量(l)表型。本實驗對ys、rp檢測采用iage免疫化學(xué)分析儀。rea、ldl-、alb、及l(fā)p(a)采用aerset全自動生化分析儀。hb檢測采用貝克曼血液分析儀。實驗參數(shù)按照相應(yīng)產(chǎn)品說明書設(shè)置，操作嚴格按照操作規(guī)程進展。1.4統(tǒng)計學(xué)方法各組計量數(shù)據(jù)中由于lp(a)呈非正態(tài)分布，用中位數(shù)()來表示。并且在兩組間比較時應(yīng)用ann-hitneyu檢驗。其余呈正態(tài)分布

6、的計量數(shù)據(jù)用均數(shù)標準差(sd)表示，兩組間比較用t檢驗。各種生化指標與lp(a)濃度的關(guān)系應(yīng)用spearan相關(guān)分析。在lp(a)濃度經(jīng)對數(shù)轉(zhuǎn)化之后采用多元逐步線性回歸分析。所有統(tǒng)計學(xué)計算通過spss115完成，p0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。2結(jié)果2.1hd、esrd與ntrl組不同分子量ap(a)表型所對應(yīng)lp(a)濃度比較一樣表型不同組間lp(a)中位數(shù)濃度比較如表1所示，h表型中hd組與esrd組和nul組lp(a)中位數(shù)濃度比較均有顯著性差異(p0.05)。l表型中hd組與esrd組lp(a)中位數(shù)濃度無顯著性差異(p0.05)但與ntrl組相比有顯著性差異(p0.05)。2.2hd組

7、、esrd組與ntrl組其他檢測指標比較對hd組、esrd組與ntrl組的一些指標檢測結(jié)果如表2所示。hd組、esrd組分別與ntrl組相比rea、alb、hb、rp、ys檢測結(jié)果均具有顯著性差異(p0.05)，而ldl-結(jié)果無顯著性差異。hd組與esrd組相比rea、rp、ys結(jié)果存在顯著性差異(p0.05)，其他指標那么無統(tǒng)計學(xué)意義。hd組lp(a)濃度程度與這些指標相關(guān)性分析結(jié)果如表3，結(jié)果顯示在l表型中，lp(a)濃度與alb、ys存在相關(guān)性(p0.05)。在h表型中，與lp(a)濃度相關(guān)的指標那么是rp和ys，統(tǒng)計學(xué)檢驗示(p0.01)。但就hd組總體來講，lp(a)濃度那么與alb

8、和ys結(jié)果相關(guān)(p0.01)。2.3hd組影響lp(a)程度的因素回歸分析由于lp(a)濃度在正常人血液中為非正態(tài)分布，因此把所測定的lp(a)濃度結(jié)果對數(shù)轉(zhuǎn)換后作為因變量，以性別、年齡、rea、alb、hb、ldl-、rp、ys為自變量進展多元逐步線性回歸。結(jié)果說明，就hd組總體而言，表型、alb、ys進入了回歸方程，確定系數(shù)為(r2)為0.348。其中表型對應(yīng)的r2為0.121，ys對應(yīng)的r2為0.178，alb對應(yīng)的r2為0.049。也就是說除了基因?qū)p(a)濃度的調(diào)控外，hd組較ntrl組lp(a)的濃度增高的這種變化的34.8可以用這三種因素來解釋(見表4)。3討論lp(a)是一種

9、獨立的特殊的血漿脂蛋白，由ap(a)通過二硫鍵與ldl(ldl)連接而成，是導(dǎo)致動脈粥樣硬化發(fā)生的獨立危險因素。lp(a)程度主要由ap(a)基因中kringle重復(fù)序列的多態(tài)性決定，l表型對應(yīng)高lp(a)濃度程度，hap(a)表型對應(yīng)低lp(a)濃度程度。血液中l(wèi)p(a)的濃度是一個穩(wěn)定的遺傳標志，不受性別、年齡、理化因素及多種降脂藥物影響，但是諸如肝臟功能狀態(tài)、炎癥反響、腎小球去除率等多種因素也可在一定程度上影響其濃度。hd患者血中l(wèi)p(a)濃度顯著高于正常人。hd并發(fā)癥較多，其中動脈粥樣硬化性心腦血管疾病是最主要的并發(fā)癥也是主要的致死原因之一。因此lp(a)在hd患者并發(fā)癥的防治中的作用

10、就越來越受到重視。lp(a)的代謝機制到目前為止仍不是很清楚，krnenbergf通過對腎動、靜脈lp(a)濃度差異確實認證實，腎臟在lp(a)代謝過程中起著重要作用。本實驗研究發(fā)現(xiàn)，lap(a)表型中hd組lp(8)濃度與esrd組相近，但與對照組相比卻有顯著性升高(p0.05)。hap(a)表型中，除了hd組和esrd組lp(a)濃度均高于對照組外，hd組lp(a)濃度程度也明顯高于esrd組lp(a)濃度(p0.05)。由此可見，腎臟功能損害可使lp(a)濃度增高，與上述觀點一致。同時，我們發(fā)現(xiàn)，hd治療的患者lp(a)濃度高于esrd組lp(a)濃度，并且以hap(a)表型的lp(a)

11、濃度增高更為顯著，說明hd治療可以促使hap(a)表型lp(a)增高，其機制可能與lap(a)表型lp(a)存在差異。對于慢性腎功能衰竭患者高lp(a)的濃度的原因，有很多猜測：1、慢性腎功能衰竭患者普遍存在白蛋白程度的降低，這可引起肝臟代償性合成白蛋白的同時合成lp(a)增加。2、腎小球濾過率的降低使lp(a)在腎臟的排泄減少。3、慢性腎功能衰竭患者腎臟損傷后，腎臟分泌的促紅細胞生成素減少是其對lp(a)降低作用減少，同時也是慢性腎功能衰竭患者貧血的一個重要原因。4、急性炎癥反響促使lp(a)升高，因為lp(a)本身就是非常好的急性炎癥反響蛋白。5、lp(a)在某些特定的條件下可通過ldl受

12、體代謝，ldl可以競爭性抑制lp(a)的分解代謝。為了理解這些因素是否影響了hd患者高lp(a)血癥的發(fā)生，我們針對每一種可能引起lp(a)的濃度升高的因素，選擇了相應(yīng)的監(jiān)測指標。對hd組、esrd組與ntrl組的alb、ys、rea、hb、rp、ldl-等指標進展了檢測，與ntrl組相比這些指標除ldl-外，其余均有顯著性差異，其中rea、rp、ys高于ntrl組而alb、hb那么低于ntrl組。與esrd組相比，hd組rea、rp、ys顯著增高。alb、fib及l(fā)dl-所檢測到的結(jié)果與其他報道有所不同，原因可能在于慢性腎功能衰竭患者如今多已經(jīng)注重對高血脂、低蛋白和貧血的治療，都不同程度上服

13、用了相應(yīng)的治療藥物進展了糾正所致。我們對這些檢測指標結(jié)果及性別、年齡等特征指標為自變量，以對數(shù)轉(zhuǎn)化的lp(a)的濃度為因變量做多元逐步線性回歸分析。結(jié)果說明，就hd組總體而言，表型、alb、ys進入了回歸方程，確定系數(shù)為(r2)為0.348。其中表型對應(yīng)的r2為0.121，ys對應(yīng)的r2為0.178，alb對應(yīng)的r2為0.049。也可以說除了基因?qū)p(a)濃度的調(diào)控外，hd組較ntrl組lp(a)的濃度增高的這種變化的348可以用這三種因素來解釋。hd組患者血中高lp(a)的濃度可能是由于低白蛋白血癥，促使肝臟合成白蛋白的同時連帶合成ap(a)。腎小球濾過率的降低也使lp(a)的代謝受到了限制。在lp(a)的合成或分解過程中，由于ap(a)表型的差異，在一定程度上增加了lp(a)的濃度。對于lap(a)表型，進入方程的只有alb(r2為0.209)，觀察lp(a)與其他指標相關(guān)性研究(表3)，我們可以發(fā)現(xiàn)，lap(a)表型中l(wèi)p(a)與ys之間存在相關(guān)性(r=0.379，p0.05)，t但其并沒有進入回歸方程，可能是相對于肝臟合成lp(a)增加的原因，ys所起的作用較小所致。在hap(a)表型回歸中，rp、y