黃酮類(lèi)化合物 (3)PPT

1、關(guān)于黃酮類(lèi)化合物 (3)第一張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月一、黃酮類(lèi)化合物概述 黃酮類(lèi)化合物是在植物中分布最廣的一類(lèi)物質(zhì)，幾乎每種植物體內(nèi)都有，它們常以游離態(tài)或與糖結(jié)合成苷的形式存在，它們對(duì)植物的生長(zhǎng)、發(fā)育、開(kāi)花、結(jié)果以及抵御異物入侵起著重要的作用。由于其分布廣且部分化合物在植物中的含量較高，而且多數(shù)化合物易以結(jié)晶形式獲得，所以它們是較早被人類(lèi)發(fā)現(xiàn)的一類(lèi)天然產(chǎn)物 ，也是中藥中一類(lèi)重要的有效成分。第二張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 據(jù)估計(jì)，經(jīng)植物光合作用所固定的碳約有2%轉(zhuǎn)變?yōu)辄S酮類(lèi)化合物或與其密切相關(guān)的其他化合物。 黃酮類(lèi)化合物實(shí)際存在于植物的所有部分根、心材、

2、邊材、樹(shù)皮、葉、果實(shí)和花中，在花、果實(shí)、葉中較多；且大部分存在于有色植物中，如松樹(shù)皮提取物、綠茶提取物、銀杏葉提取物、紅花提取物等。黃酮類(lèi)化合物概述第三張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月黃酮類(lèi)化合物大部分存在于有色植物中，如松樹(shù)皮提取物、綠茶提取物、銀杏葉提取物、紅花提取物等。松樹(shù)皮綠茶銀杏葉紅花第四張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月黃酮類(lèi)化合物的生理活性：1.對(duì)心血管系統(tǒng)的作用：蘆丁、橙皮苷，d-兒茶素等有Vit P樣作用，能降低血管脆性及異常的通透性,可用作防治高血壓及動(dòng)脈硬化的輔助治療劑。擴(kuò)冠作用橙皮苷第五張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月2.抗肝臟毒

3、作用：兒茶素、水飛薊素作為治療慢性肝炎和保肝藥物在國(guó)內(nèi)外銷(xiāo)售。黃酮類(lèi)化合物的生理活性第六張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月3.抗炎作用: 蘆丁、羥乙基蘆丁、二氫槲皮素。黃酮類(lèi)化合物的生理活性第七張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月4.雌激素樣作用：大豆異黃酮。黃酮類(lèi)化合物的生理活性第八張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月5.抗菌、抗病毒等：木犀草素、黃芩苷、槲皮素、 桑色素、山萘酚等。黃酮類(lèi)化合物的生理活性第九張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月6.解痙作用：異甘草素、大豆素等具有類(lèi)似罌粟堿解除平滑肌痙攣樣的作用大豆苷、葛根黃素，緩解高血壓患者的頭痛7

4、.其他作用：止咳、祛痰、平喘黃酮類(lèi)化合物的生理活性第十張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月葡萄籽提取物多酚（polypheno1）類(lèi)黃酮，由單體（兒茶素、表兒茶素等）、基于此單體的聚合物（ 原花青素proanthocyanidin）和其它酚類(lèi)組成。這一組成分中生物活性最強(qiáng)的部分是低聚（二，三聚體）原花青素，即OPCs（oligomeric proanthocyanidins)原花青素proanthocyanidin, PC, 是一大類(lèi)多酚化合物的總稱，由不同數(shù)目的黃烷-3-醇或黃烷-3，4-二醇聚合而成原花青素在葡萄、山楂、松樹(shù)皮、銀杏、花生、野生刺葵、番荔枝、野草莓、可可豆、貫葉金

5、絲桃、白樺樹(shù)等植物中含量豐富原花青素的抗氧化、心腦血管、抗腫瘤、抗誘變 皮膚的保健作用：抗皺、美白、保濕、抗輻射黃酮類(lèi)化合物的生理活性第十一張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月黃酮類(lèi)化合物在植物界主要分布在雙子葉植物中。常見(jiàn)的科屬有；蕓香科、唇形科、傘形科及豆科等。至1979年止國(guó)內(nèi)外發(fā)表的黃酮類(lèi)化合物共1674(其中苷元902個(gè)，苷722個(gè)，其它為合成產(chǎn)物)。至1993年止：黃酮類(lèi)化合物總數(shù)超過(guò)4000個(gè)。黃酮醇類(lèi)最常見(jiàn)、黃酮類(lèi)其次、其余則較少。第十二張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月黃酮類(lèi)化合物概述1、基本結(jié)構(gòu)和分類(lèi)（1）結(jié)構(gòu) 1952年前，黃酮類(lèi)化合物主要指基本母核

6、為2-苯基色原酮的系列化合物。天然黃酮類(lèi)化合物母核上常有-OH、-OCH3等取代基，由于這些助色基團(tuán)的存在，使黃酮類(lèi)化合物多顯黃色。色原酮2-苯基色原酮注意編號(hào)。第十三張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月現(xiàn)黃酮類(lèi)化合物泛指兩個(gè)苯環(huán)(A與B環(huán))通過(guò)中央三碳鏈相互連接而成的一系列化合物，具C6-C3-C6結(jié)構(gòu)。由15個(gè)碳原子組成的基本結(jié)構(gòu)如下：C6-C3-C6結(jié)構(gòu)第十四張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月例如：槲皮素，具有抗氧化性，檸檬、柚子、柑橘、綠茶中含量高，屬于黃酮類(lèi)化合物。再如：具有抗癌活性的苦參素都是黃酮類(lèi)化合物。“素“A環(huán)上為游離酚羥基或甲氧基。“苷”至少一個(gè)羥基與

7、糖成苷。槲皮素苦參素甘草苷第十五張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月（2）黃酮類(lèi)化合物的分類(lèi)1. 中央三碳鏈的氧化程度2. B環(huán)（苯基）連接位置(2-或3-位) 3. 三碳鏈?zhǔn)欠駱?gòu)成環(huán)狀等特點(diǎn)分類(lèi)如下：根 據(jù)第十六張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月1. 中央三碳鏈的氧化程度2. B環(huán)（苯基）連接位置(2-或3-位) 3. 三碳鏈?zhǔn)欠駱?gòu)成環(huán)狀等特點(diǎn)天然黃酮類(lèi)化合物的分類(lèi)如下：第十七張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 續(xù) 表：黃酮類(lèi)化合物的分類(lèi)第十八張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月一）黃酮和黃酮醇類(lèi) 黃酮類(lèi)： 該類(lèi)化合物中以芹菜素和木犀草素最為常見(jiàn)，

8、黃芩素也是個(gè)代表性化合物。芹菜素木犀草素芹菜素木犀草素黃酮類(lèi)化合物的分類(lèi)第十九張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月黃酮醇類(lèi)：槲皮素槲皮素黃酮類(lèi)化合物的分類(lèi)第二十張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月雙黃酮類(lèi)：13，8雙芹菜素型：銀杏素、白果素銀杏素黃酮類(lèi)化合物的分類(lèi)第二十一張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月二氫黃酮類(lèi)：紫花杜鵑甲素、甘草苷。甘草苷紫花杜鵑甲素黃酮類(lèi)化合物的分類(lèi)第二十二張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月二氫黃酮醇類(lèi)：水飛薊素GYH黃酮類(lèi)化合物的分類(lèi)第二十三張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月查耳酮類(lèi)查耳酮的定位與其他黃酮類(lèi)化合物

9、不同。GYH黃酮類(lèi)化合物的分類(lèi)第二十四張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月異黃酮類(lèi)： 大豆素、大豆苷、葛根素等。豆科植物多見(jiàn)。 大豆素GYH黃酮類(lèi)化合物的分類(lèi)第二十五張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月噢弄類(lèi)（橙酮類(lèi)）： 硫磺菊素，定位與其它黃酮類(lèi)不同。硫磺菊素GYH黃酮類(lèi)化合物的分類(lèi)第二十六張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月花色素類(lèi)： 矢車(chē)菊素、飛燕草素。飛燕草素GYH黃酮類(lèi)化合物的分類(lèi)第二十七張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月黃烷醇類(lèi)： 黃烷-3-醇的衍生物稱兒茶素類(lèi)，(+)兒茶素GYH黃酮類(lèi)化合物的分類(lèi)第二十八張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2

10、022年6月其它黃酮類(lèi)如：口山酮類(lèi)：為苯駢色酮，異芒果素為碳苷。異芒果素GYH黃酮類(lèi)化合物的分類(lèi)第二十九張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月黃酮類(lèi)化合物概述1、基本結(jié)構(gòu)和分類(lèi)2、黃酮苷的構(gòu)成方式黃酮類(lèi)化合物的三種形式：游離黃酮、黃酮苷、與鞣酸（又叫鞣質(zhì)）形成酯，其中黃酮苷種類(lèi)較多，連接方式有兩種：黃酮苷的連接方式：（1）O-糖苷 苷元與糖以C-O-C方式連接，例如單糖形成的黃芩苷、雙糖形成的橙皮苷等。除了單糖基苷類(lèi)外，二糖基黃酮苷類(lèi)在豆科植物中普遍存在。橙皮苷：1分子蕓香糖（雙糖）與黃酮苷元形成的雙糖苷黃芩苷：1分子-D-葡萄糖醛酸與黃酮苷元7-OH成苷（單糖苷）第三十張，PPT共一

11、百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月黃酮苷的構(gòu)成方式（1）O-糖苷（2）C-糖苷除O-糖苷外，天然黃酮類(lèi)還發(fā)現(xiàn)C-糖苷，糖基多數(shù)連接在6位或8位上。例如：牡荊苷的葡萄糖基不通過(guò)氧原子而是直接連接在8位碳上；再如葛根苷，有治療心肌缺血的作用，葡萄糖基也是直接連在8位碳上。88第三十一張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月黃酮苷的構(gòu)成方式（1）O-糖苷（2）C-糖苷（3）構(gòu)成黃酮苷的糖類(lèi)單糖類(lèi) 單糖主要有：D-葡萄糖、D-半乳糖、D-木糖、L-鼠李糖、L-阿拉伯糖、D-葡萄糖醛酸等。如黃芩苷是單糖苷。D木糖（xyl） D核糖 （rib） L阿拉伯糖（ara） L鼠李糖 （rha） D葡萄糖（g

12、lc） D 半乳糖（gal） D 葡萄糖醛酸 D 半乳糖醛酸 第三十二張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月黃酮苷的構(gòu)成方式（1）O-糖苷（2）C-糖苷（3）構(gòu)成黃酮苷的糖類(lèi)單糖類(lèi)雙糖類(lèi)：常見(jiàn)有麥芽糖、乳糖、新橙皮糖、龍膽二糖、蕓香糖（又叫蘆丁糖）等。麥芽糖（兩分子葡萄糖）乳糖（1分子葡萄糖和1分子半乳糖）第三十三張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月（3）構(gòu)成黃酮苷的糖類(lèi)單糖類(lèi)雙糖類(lèi)：常見(jiàn)有麥芽糖、乳糖、新橙皮糖、龍膽二糖、蕓香糖（又叫蘆丁糖）等。第三十四張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月（3）構(gòu)成黃酮苷的糖類(lèi)單糖類(lèi)雙糖類(lèi)：常見(jiàn)有麥芽糖、乳糖、新橙皮糖、龍膽二糖、

13、蕓香糖（又叫蘆丁糖）等。新橙皮糖( neohesperidose ) 槐 糖(sophorose) 第三十五張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月3）構(gòu)成黃酮苷的糖類(lèi)單糖類(lèi)雙糖類(lèi)三糖類(lèi)：主要有龍膽三糖。龍膽三糖（-D-葡萄糖與蔗糖組成）（1分子-D-葡萄糖和1分子-D-果糖0第三十六張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月3）構(gòu)成黃酮苷的糖類(lèi)單糖類(lèi)雙糖類(lèi)三糖類(lèi)?；穷?lèi)：主要有2-乙酰葡萄糖、4-咖啡酰基葡萄糖等。第三十七張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月山柰素黃酮苷中糖的連接位置和苷元的結(jié)構(gòu)有關(guān)，例如：花色苷類(lèi)，多在3-OH上連接1個(gè)糖，或形成3,5-二葡萄糖苷。黃酮

14、醇類(lèi)常形成3-單糖苷、7-單糖苷、3-單糖苷、4-單糖苷或3,7-二糖苷，3,4-二糖苷及7,4-二糖苷等。第三十八張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月二、黃酮類(lèi)化合物的性質(zhì)一、一般性質(zhì)：1.性狀：苷元多為晶性固體，苷類(lèi)多為無(wú)定形粉末。2.顏色:黃酮的色原酮部分無(wú)色，在2-位上引入苯環(huán)后，即形成交叉共軛體系，使共軛鏈延長(zhǎng)，因而呈現(xiàn)出顏色?；ㄉ丶败赵念伾SpH不同而不同，一般顯紅色(pH8.5)等。第三十九張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月黃酮類(lèi)化合物的交叉共軛系統(tǒng)黃酮類(lèi)化合物因存在共軛體系和助色基團(tuán)而顯色，多為黃色或淺黃色第四十張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022

15、年6月黃酮、黃酮醇及其苷類(lèi)多呈灰黃色黃色查耳酮多為黃色橙黃色二氫黃酮、二氫黃酮醇幾乎無(wú)色異黃酮類(lèi)為微黃色。第四十一張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月若黃酮或黃酮醇7位或4位引入OH及OCH3等助色團(tuán)（即供電子基）后，則促進(jìn)電子轉(zhuǎn)移、重排，使光被吸收的強(qiáng)度增加，從而使化合物、的顏色加深。但若OH、OCH3引入其它位置，由于不能發(fā)生上述重排而影響較小。3.旋光性：苷元中，二氫黃酮、二氫黃酮醇、黃烷及黃烷醇具旋光性，其余黃酮類(lèi)無(wú)旋光性。黃酮苷均因分子中含有糖分子，均具旋光性，多為左旋。顏色:第四十二張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月4、 溶解性： 水中溶解度主要取決于分子中極

16、性基團(tuán)的多少，且與分子平面構(gòu)型有關(guān)。游離苷元：難溶或不溶于水，易溶于稀堿及乙醇、乙醚、乙酸乙酯等有機(jī)溶劑中，其中二氫黃酮及二氫黃酮醇等非平面分子苷元為非平面分子，分子間排列不緊密，分子間引力降低，有利于水分子進(jìn)入，在水中溶解度稍大；而一些平面分子，如黃酮、黃酮醇等，分子堆積緊密，分子間作用力大，難溶于水。黃酮類(lèi)苷元分子中羥基數(shù)越多，水中的溶解度越大。黃酮、黃酮醇類(lèi)、查耳酮 難溶于水；二氫黃酮、二氫黃酮醇 水中溶解度稍大。黃酮類(lèi)化合物的性質(zhì)第四十三張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月苷元溶解性之間的比較黃酮、黃酮醇、查耳酮為平面結(jié)構(gòu)，堆砌較緊密，故更難溶于水。平面結(jié)構(gòu)GYH第四十四張，

17、PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月二氫黃酮、二氫黃酮醇等為非平面結(jié)構(gòu)，分子間隙較大，故水溶性更大。非平面結(jié)構(gòu)（半椅式）GYH苷元溶解性之間的比較第四十五張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月花色素：以離子形式存在，水中溶解度較大。黃酮苷：因引入糖，極性增大，水溶性增強(qiáng)，易溶于水、甲醇、乙醇等強(qiáng)極性溶劑中；難溶于或不溶于苯、氯仿、石油醚等有機(jī)溶劑中。其中糖鏈越長(zhǎng)，在水中溶解度越大。而羥基被甲基化增多，黃酮苷類(lèi)溶解性下降越多，弱極性溶劑中可溶解。此外，糖的連接位置不同，在水中溶解度也不相同。如：3-位苷的極性7位苷的極性O(shè)OHOOHOHOHOHOH棉黃素溶解性：黃酮類(lèi)化合物的性質(zhì)第

18、四十六張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 花色素類(lèi)雖為平面型結(jié)構(gòu)，但它是以鹽的形式存在，故具有鹽的通性，水溶度較大。離子型結(jié)構(gòu)GYH溶解性第四十七張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月5、酸堿性（1）酸性： 黃酮類(lèi)化合物由于大多數(shù)都含有酚羥基，故顯示酸性。可溶于堿性水溶液、吡啶、甲酰胺以及N,N-二甲基甲酰胺中。因羥基位置不同，其酸性強(qiáng)弱也不同，一般次序如下： 7,4-二OH 7-OH或4-OH一般位置酚OH5-OH7，4-二羥基者可溶解于NaHCO3水溶液7-或4-OH者可溶解于Na2CO3水溶液其它位置酚羥基者溶于NaOH水溶液5-OH者只溶于濃度較高的NaOH水溶液中

19、此性質(zhì)可用于提純、分離和鑒定工作。黃酮類(lèi)化合物的性質(zhì)第四十八張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月5、酸堿性（1）酸性（2）堿性 黃酮類(lèi)化合物分子中吡喃酮環(huán)上的1位氧原子因具有一對(duì)孤對(duì)電子，可接受質(zhì)子，表現(xiàn)出微弱的堿性，能與強(qiáng)酸生成钅羊鹽，生成的鹽很不穩(wěn)定，加水后即可分解。 GYH黃酮類(lèi)化合物的性質(zhì)第四十九張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月二、顯色反應(yīng)(一) 還原顯色反應(yīng):1. 鹽酸鎂粉（或鋅粉）反應(yīng)：黃酮類(lèi)化合物最常用的鑒別方法之一。 多數(shù)黃酮、黃酮醇、二氫黃酮及二氫黃酮醇類(lèi)化合物在鹽酸-鎂粉作用下，顯橙紅紫紅色，（少數(shù)顯紫藍(lán)色）B環(huán)有-OH或-OCH3取代時(shí)，顏色隨之加

20、深。查耳酮、橙酮、兒茶素類(lèi)不顯色。異黃酮類(lèi)一般不顯色。注意：花色素及部分查耳酮、橙酮等在單純濃鹽酸酸性條件下顏色也會(huì)發(fā)生變化，故須先做空白對(duì)照。方法：將樣品溶于1.0mL甲醇或乙醇中，加入少量鎂粉振搖，滴加幾滴濃鹽酸，12min內(nèi)（必要時(shí)微熱）即可出現(xiàn)顏色。注意(1) 醇液中比水液中反應(yīng)較靈敏、 (2) 保持高濃度的酸 (3) 做對(duì)照實(shí)驗(yàn)，去樣假陽(yáng)性 黃酮類(lèi)化合物的性質(zhì)第五十張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月H+黃酮類(lèi)化合物的性質(zhì)(一) 還原顯色反應(yīng):1. 鹽酸鎂粉（或鋅粉）反應(yīng)：2. 硼氫化鈉反應(yīng)：二氫黃酮和二氫黃酮醇類(lèi)的專(zhuān)屬反應(yīng)NaBH4是對(duì)二氫黃酮類(lèi)化合物專(zhuān)屬性較高的一種還原

21、劑。與二氫黃酮類(lèi)化合物產(chǎn)生紅色紫色。其它黃酮類(lèi)化合物均不顯色，據(jù)此可以區(qū)別。顯色反應(yīng)第五十一張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月(二) 金屬鹽類(lèi)的絡(luò)合顯色反應(yīng): 鋁鹽、鉛鹽、鉻鹽、鎂鹽、鍶鹽、鋯鹽等金屬鹽類(lèi)試劑能與具有3-OH, 5-OH或鄰二酚OH的任一基團(tuán)的黃酮類(lèi)化合物反應(yīng)，生成有色絡(luò)合物。顯色反應(yīng)黃酮類(lèi)化合物的性質(zhì)2-苯基色原酮3-OH5-OH鄰二酚OH第五十二張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月金屬鹽類(lèi)的絡(luò)合顯色反應(yīng): 鋁鹽、鉛鹽、鉻鹽、鎂鹽、鍶鹽、鋯鹽等金屬鹽類(lèi)試劑能與具有3-OH, 5-OH或鄰二酚OH的任一基團(tuán)的黃酮類(lèi)化合物反應(yīng)，生成有色絡(luò)合物。（1）鋁鹽：常

22、用試劑為1%三氯化鋁或硝酸鋁溶液，與具有上述結(jié)構(gòu)的黃酮類(lèi)化合物生成的絡(luò)合物紫外燈下為黃色，max415，并有熒光，可用于定性和定量分析。1% AlCl3或Al(NO3)3絡(luò)合物多為黃色，并有熒光。顯色反應(yīng)黃酮類(lèi)化合物的性質(zhì)第五十三張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月金屬鹽類(lèi)的絡(luò)合顯色反應(yīng): 鋁鹽、鉛鹽、鉻鹽、鎂鹽、鍶鹽、鋯鹽等金屬鹽類(lèi)試劑能與具有3-OH, 5-OH或鄰二酚OH的任一基團(tuán)的黃酮類(lèi)化合物反應(yīng)，生成有色絡(luò)合物。（2） 鉛鹽：常用1%醋酸鉛及堿式醋酸鉛水溶液，可與具有酚羥基的黃酮類(lèi)化合物生成黃紅色沉淀。 中性醋酸鉛可沉淀具有鄰二酚羥基或兼有3-OH, 4=O或5-OH, 4

23、=O的化合物。堿式醋酸鉛對(duì)一般酚類(lèi)化合物均可沉淀。1% Pb(OAc)2水溶液，使含3-OH, 5-OH, 鄰二酚OH產(chǎn)生黃紅色； 1% Pb(OH)(OAc) 可使所有含酚OH的化合物產(chǎn)生紅色，可用于分離；第五十四張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月金屬鹽類(lèi)的絡(luò)合顯色反應(yīng): 鋁鹽、鉛鹽、鉻鹽、鎂鹽、鍶鹽、鋯鹽等金屬鹽類(lèi)試劑能與具有3-OH, 5-OH或鄰二酚OH的任一基團(tuán)的黃酮類(lèi)化合物反應(yīng)，生成有色絡(luò)合物。（3）鋯鹽枸櫞酸顯色反應(yīng)：用于區(qū)別黃酮類(lèi)化合物分子中3或5OH的存在。多用2%二氯氧化鋯（ZrOCl2）甲醇溶液。黃酮類(lèi)化合物分子中有游離的3-或5-OH存在時(shí)，均可反應(yīng)生成黃色

24、的鋯絡(luò)合物。第五十五張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月鋯鹽-枸櫞酸顯色反應(yīng)：用于區(qū)別黃酮類(lèi)化合物分子中3或5OH的存在。第五十六張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月鋯鹽：2%二氯氧化鋯甲醇溶液，可區(qū)別3-OH和5-OH。第五十七張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月金屬鹽類(lèi)的絡(luò)合顯色反應(yīng): （4）鎂鹽：Mg(OAc)2甲醇溶液二氫黃酮、二氫黃酮醇類(lèi)與醋酸鎂的甲醇溶液，加熱可顯天藍(lán)色熒光，若具有C5-OH，色澤更為明顯。而黃酮、黃酮醇及異黃酮類(lèi)等則顯黃橙黃褐色。二氫黃酮(醇類(lèi)) 天蘭色熒光 黃酮(醇)、異黃酮 黃橙黃褐色（C5-OH色澤更明顯）Mg(OAc)2Mg(

25、OAc)2第五十八張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月金屬鹽類(lèi)的絡(luò)合顯色反應(yīng): 鋁鹽、鉛鹽、鉻鹽、鎂鹽、鍶鹽、鋯鹽等金屬鹽類(lèi)試劑能與具有3-OH,5-OH或鄰二酚OH的任一基團(tuán)的黃酮類(lèi)化合物反應(yīng)，生成有色絡(luò)合物。 （5）氨性氯化鍶（SrCl2）顯色反應(yīng)： 用于鑒定鄰二酚羥基的反應(yīng)。 在氨性甲醇溶液中，可與分子中具有鄰二酚羥基結(jié)構(gòu)的黃酮類(lèi)化合物生成綠色棕色乃至黑色沉淀。 SrCl2鄰二酚OH黃酮 綠色棕色乃至黑色第五十九張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月（6）三氯化鐵反應(yīng)：酚類(lèi)顯色劑 多數(shù)黃酮類(lèi)化合物因分子中含有游離酚羥基，與三氯化鐵水溶液或醇溶液可產(chǎn)生陽(yáng)性反應(yīng)，呈現(xiàn)顏色；

26、三氯化鐵水溶液或醇溶液能與幾乎所有酚羥基成正反應(yīng)，生成綠、蘭、黑或紫色。含有3-OH, 5-OH, 鄰二OH時(shí)，可顯紅、綠等較明顯的顏色。當(dāng)含有氫鍵締合的酚羥基時(shí)，顏色更明顯。第六十張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月（三）硼酸顯色反應(yīng) 在無(wú)機(jī)酸或有機(jī)酸存在條件下，5-羥基黃酮及2-羥基查耳酮可與硼酸反應(yīng)，呈亮黃色。在有草酸存在下，顯亮黃色并帶黃綠色熒光。在枸櫞酸-硼酸的丙酮溶液中反應(yīng)，只顯黃色而無(wú)熒光。顯色反應(yīng)黃酮類(lèi)化合物的性質(zhì)(一) 還原顯色反應(yīng):(二) 金屬鹽類(lèi)的絡(luò)合顯色反應(yīng):2-羥基查耳酮5-羥基黃酮第六十一張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月硼酸顯色反應(yīng)第六十二張

27、，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月（四）堿性試劑顯色反應(yīng) 在日光或紫外光下，通過(guò)紙斑反應(yīng)，觀察樣品用堿性試劑（氨蒸氣和其他堿性試劑）處理后的顏色變化的情況，可用于黃酮類(lèi)化合物的鑒別。顯色反應(yīng)黃酮類(lèi)化合物的性質(zhì)二氫黃酮類(lèi)查耳酮第六十三張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月例如：黃酮醇類(lèi)在堿液中先呈黃色，通入空氣后變?yōu)樽厣膳c其他黃酮類(lèi)區(qū)別。二氫黃酮類(lèi)易在堿溶液中開(kāi)環(huán)，可轉(zhuǎn)變?yōu)橄鄳?yīng)的異構(gòu)體查耳酮類(lèi)化合物，顯橙色至黃色。二氫黃酮OH-查耳酮，顯橙 黃色第六十四張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月當(dāng)分子中有鄰二酚羥基取代或3,4-二羥基取代時(shí)，在堿液中很快氧化，最后生成棕

28、綠色沉淀。鄰二酚OH或3，4-OHOH-黃色極易氧化深紅色綠棕色O2堿液中不穩(wěn)定堿性試劑顯色反應(yīng)顯色反應(yīng)黃酮類(lèi)化合物的性質(zhì)第六十五張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 類(lèi)別 反應(yīng)條件黃酮類(lèi) 黃酮醇類(lèi) 可見(jiàn)光 紫外光 黃色棕色,紅或黃棕色 灰黃色亮黃色,黃綠色先氨處理，再可見(jiàn)光 先氨處理，再紫外光 黃色黃綠色,暗紫色藍(lán)色亮黃色先AlCl3處理，再可見(jiàn)光 先AlCl3處理，再紫外光 灰黃色,熒光橙色 黃色黃色,綠色,熒光 先濃H2SO4處理，再可見(jiàn)光先濃H2SO4處理，再紫外光 玉橙色淺黃色 深黃色熒光 (五) 紫外可見(jiàn)光下顯色 下表列出了黃酮及黃酮醇類(lèi)化合物紙上的顯色反應(yīng)。 顯色反應(yīng)第

29、六十六張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月（六）Gibbs反應(yīng)-判斷-OH對(duì)位有無(wú)取代基。有游離的酚羥基，且其對(duì)位無(wú)取代者呈陽(yáng)性。酚羥基對(duì)位無(wú)取代活潑氫的反應(yīng)。生成藍(lán)或藍(lán)綠色。檢查5-OH或8-OH對(duì)位未被取代的黃酮。將樣品溶于吡啶中，加入Gibbs試劑顯藍(lán)或藍(lán)綠色。Gibbs試劑:甲液：0.5%2,6-二氯苯醌-4氯亞胺的乙醇溶液。乙液：硼酸-氯化鉀-氫氧化鉀緩沖液（pH9.4）顯色反應(yīng)黃酮類(lèi)化合物的性質(zhì)第六十七張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月三、黃酮類(lèi)化合物的提取與分離溶解性:極性小的苷元: Et2O, CHCl3, EtOAc等；苷及極性較大的苷元: MeOH,

30、EtOH, Me2CO, EtOAc, H2O等；多糖苷: H2O第六十八張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月黃酮類(lèi)化合物的提取與分離一、提?。?、 溶劑萃取法原理：利用黃酮類(lèi)化合物與混入的雜質(zhì)極性不同，選用不同溶劑進(jìn)行萃取而達(dá)到精制純化目的 。極性較小的游離黃酮苷元：氯仿、乙酸乙酯、甲醇、甲醇：水（1：1）連續(xù)萃?。粯O性較大的黃酮苷元：用家村、甲醇：水（1:1）、乙醇：水（1:1）、等提取。多糖黃酮苷：極性大，直接用沸水提取高甲氧基的黃酮類(lèi)化合物：極性小，用苯直接提取。 第六十九張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月溶劑萃取Et2O水層CHCl3CHCl3Et2O總黃酮苷回

31、收溶劑EtOAc層EtOAc(或n-BuOH)萃取總黃酮回收溶劑層萃取水層石油醚液(葉綠素,蠟, 胡蘿卜素等)加入少量水、石油醚萃取黃酮苷(黃酮苷可用7%酚/水洗下)(酚)除去酚類(lèi)濃縮液水液萃取濃縮液減壓濃縮DCBAA沸水洗B沸MeOH洗C 7%酚/水D 15%酚/醇洗活性碳適用于苷類(lèi)活性碳吸附至上清液檢不出黃酮類(lèi)化合物直接柱色譜濃縮液回收溶劑醇提取液MeOH或EtOH提取原料系統(tǒng)溶劑萃取法第七十張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月2、 堿提酸沉法：適用于含游離酚OH的黃酮類(lèi) 含有游離酚OH的黃酮類(lèi)化合物易溶于堿水中，可先用堿性水提取，堿性提取液加酸后（pH56）黃酮即可沉淀析出。常

32、用的堿是石灰水，常用的酸是鹽酸。原料 堿水液 總黃酮 (稀堿) (苷元及苷)注意：(1) 堿性不能太高，一般pH 89;(2) H+不宜過(guò)強(qiáng)，以免生成 钅羊鹽;(3)用石灰乳或石灰水代替其它堿性水溶液，使果膠、粘液質(zhì)等雜質(zhì)生成鈣鹽沉淀，利于黃酮的純化。此法簡(jiǎn)單易行，橙皮苷、蘆丁、黃芩苷等都用此法提取。一、提取：黃酮類(lèi)化合物的提取與分離石灰水提取H+第七十一張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月例：從槐花米中提取蘆丁 槐花米（槐樹(shù)的花蕾）加約6倍量水,煮沸,在攪拌下緩緩加入石灰乳至pH89,在此pH條件下微沸20-30min,趁熱抽濾,殘?jiān)显偌?倍量水煎1次,趁熱抽濾。合并濾液在60

33、700C下,用濃鹽酸調(diào)至pH=5,攪勻,靜置24h,抽濾。沉淀物水洗至中性，60oC干燥得蘆丁粗品，于沸水中重結(jié)晶，7080oC干燥得蘆丁純品。堿提酸沉法：黃酮類(lèi)化合物的提取第七十二張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月原料水提液加入EtOH過(guò)濾沉淀(蛋白質(zhì)等)濾液n-BuOH萃取n-BuOH層(多糖苷)水液H2O,黃酮類(lèi)化合物的提取與分離3、 水提法：適合于多糖苷的提取一、提取：第七十三張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月（二）分離 由于黃酮類(lèi)化合物的性質(zhì)不同，分離原理有：（1）極性大小不同，利用吸附能力或分配原理進(jìn)行分離（2）酸性強(qiáng)弱不同，利用梯度pH萃取法分離（3）分子

34、大小不同，利用葡聚糖凝膠色譜分離（4）分子中某些特殊結(jié)構(gòu)，利用與金屬鹽絡(luò)合能力的不同分離 常用分離方法有柱色譜、高效薄層色譜、高效液相色譜等。黃酮類(lèi)化合物的提取與分離第七十四張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月1溶劑萃取法 用醇或沸水提取液，進(jìn)行濃縮除去溶劑得浸膏或濃水液，可采用不同極性的有機(jī)溶劑，極性由低至高依次分別進(jìn)行萃取，根據(jù)“相似相溶原則“得到不同極性的提取物?？赡苁管蘸蛙赵靡苑蛛x，不同極性的苷元之間也可能得到分離，甚至得到單體。 GYH黃酮類(lèi)化合物的分離第七十五張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月2. pH梯度萃取法：適合于酸性強(qiáng)弱不同的黃酮苷元的分離。利用黃酮

35、類(lèi)化合物具有酸性酚羥基的特點(diǎn)，能溶于堿液，在酸性條件下又游離出來(lái)，能與其它雜質(zhì)得以分開(kāi)，達(dá)到純化精制之目的。原理：利用黃酮苷元中酚OH數(shù)目及位置不同, 其酸性強(qiáng)弱不同的性質(zhì)來(lái)分離。方法：總黃酮溶于乙酸乙酯，依次用5%NaHCO3（萃取出7，4二OH黃酮）5%Na2CO3（萃取出7或4OH黃酮）0.2%NaOH（萃取出具有一般酚羥基黃酮）4%NaOH（萃取出5OH黃酮）。黃酮類(lèi)化合物的分離第七十六張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月3、鉛鹽法 在黃酮類(lèi)成分的混合物中，具有鄰二酚羥基的成分與無(wú)此結(jié)構(gòu)的成分，可用鉛鹽法分離。 與黃酮類(lèi)混存的其它物質(zhì)，如含-COOH的樹(shù)膠、粘液、果膠、有機(jī)酸

36、、蛋白質(zhì)、氨基酸或含鄰二酚OH的鞣質(zhì)等可與Pb(OAc)2形成除雜質(zhì)的目的。黃酮類(lèi)化合物的分離第七十七張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月4、柱層析法分離黃酮類(lèi)化合物的柱層析常用吸附劑是硅膠、聚酰胺、纖維素粉、氧化鋁、活性炭等。(1)硅膠柱層析非極性與極性化合物都能用，應(yīng)用較廣，已被用于分離黃酮類(lèi)、黃酮醇類(lèi)、二氫黃酮類(lèi)、二氫黃酮醇類(lèi)、異黃酮和高度甲基化了的（或乙?；说模S酮和黃酮醇，氯仿甲醇混合溶劑作洗脫劑。各種洗脫劑的洗脫能力：石油醚四氯化碳苯氯仿乙醚乙酸乙酯吡啶丙酮正丙醇乙醇甲醇水黃酮類(lèi)化合物的分離第七十八張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月硅膠的活度與應(yīng)用 _ 含H

37、2O量 活度 應(yīng)用 0% I級(jí) 適用于分離：異黃酮、二氫 5% II級(jí) 吸附色譜 黃酮(醇)及高度甲基化(或乙 15% III級(jí) ?；?的黃酮及黃酮醇類(lèi)。 25% IV級(jí) 分配色譜 適用于多羥基黃酮醇及其苷類(lèi) 38% V級(jí) 黃酮類(lèi)化合物的分離第七十九張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月吸附色譜洗脫劑：C6H6, CHCl3, CH2Cl2, EtOAc/少量MeOH分配色譜洗脫劑：EtOAc: 丁酮: HCOOH: H2O(5:3:1:17, 上層)丁醇: HOAc: H2O (BAW) (4:1:5 上層)硅膠柱層析黃酮類(lèi)化合物的分離第八十張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年

38、6月（2） 聚酰胺色譜：分離羥基黃酮類(lèi)化合物 聚酰胺色譜適用于分離極性和非極性物質(zhì)，如：黃酮體、酚類(lèi)、醌類(lèi)、有機(jī)酸、生物堿、萜類(lèi)、甾體、苷類(lèi)、糖類(lèi)、氨基酸衍生物、核苷類(lèi)等。尤其對(duì)黃酮體、酚類(lèi)、醌類(lèi)物質(zhì)的分離，遠(yuǎn)比其它方法優(yōu)越。 對(duì)黃酮類(lèi)化合物來(lái)說(shuō)，聚酰胺柱色譜是目前最有效最簡(jiǎn)便的分離方法。黃酮類(lèi)化合物的分離第八十一張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月吸附力大小取決于黃酮類(lèi)化合物中所具有的酚羥基的數(shù)目和位置以及溶劑與黃酮類(lèi)化合物或與聚酰胺之間形成氫鍵的能力的大小。聚酰胺色譜第八十二張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月黃酮類(lèi)化合物從聚酰胺上被洗脫時(shí)有如下一些規(guī)律(含水醇洗脫劑)

39、 ：1)苷元相同：三糖苷雙糖苷單糖苷苷元(易難)2)黃酮類(lèi)化合物分子中酚羥基數(shù)目越多，形成氫鍵多，吸附力越強(qiáng)，越難被洗脫。3）當(dāng)母核上酚OH數(shù)目相同時(shí)，能形成分子內(nèi)氫鍵者易洗脫。如鄰二酚羥基（分子內(nèi)氫鍵）比對(duì)或間二酚羥基易被洗脫。，4)不同類(lèi)型黃酮: 異黃酮二氫黃酮黃酮黃酮醇(易難)5)分子中芳香化程度高，共軛雙鍵多者則吸附力強(qiáng)，難洗脫。如：二氫黃酮比查耳酮易被洗脫。聚酰胺色譜法各種溶劑在聚酰胺柱上的洗脫能力由弱至強(qiáng),可大致排列成下列順序:水甲醇丙酮?dú)溲趸{水溶液甲酰胺二甲基甲酰胺尿素水溶液 第八十三張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月(3)氧化鋁柱層析 氧化鋁通常在分離黃酮類(lèi)化合物

40、中用的較少，這是因?yàn)殇X離子與具有4酮基5羥基或4酮3羥基結(jié)構(gòu)以及鄰二酚羥基結(jié)構(gòu)的黃酮類(lèi)化合物形成絡(luò)合物而被緊緊地吸附在氧化鋁柱上，難以洗脫。若沒(méi)有上述結(jié)構(gòu)或上述結(jié)構(gòu)被甲基化，也可用氧化鋁柱進(jìn)行分離。例如葛根中異黃酮的分離。黃酮類(lèi)化合物的分離第八十四張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月（4)葡聚糖凝膠(sephadex gel)柱層析 固定相葡聚糖凝膠（Sephadex-LH20）是具有許多孔隙的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)固體，有分子篩的性質(zhì)，葡聚糖凝膠用于黃酮苷和苷元的分離，但機(jī)理不同表現(xiàn)為雙重性：分離黃酮苷元時(shí)，主要是靠吸附作用，吸附能力的強(qiáng)弱與黃酮苷元所含有的酚羥基數(shù)目多少成正比。苷元的羥基數(shù)越多

41、，越難以洗脫。 分離黃酮苷時(shí)，主要是分子篩的性能，苷的分子量越大（分子篩）, 其上連結(jié)糖的數(shù)目越多, 越容易洗脫。 洗脫時(shí)黃酮苷按分子量由大至小依次流出。分離黃酮苷和苷元時(shí)：苷比苷元先洗脫（分子篩性能）。常用的洗脫劑： 堿性水溶液，含鹽水溶液醇、含水醇 含水丙酮, 甲醇/氯仿如用葡聚糖凝膠柱色譜分離蕓香苷和槲皮素：甲醇溶解后上柱子，甲醇洗脫，蕓香苷在190250mL流分中，槲皮素在390460mL流分中。黃酮類(lèi)化合物的分離第八十五張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月葡聚糖凝膠(sephadex gel)柱層析分離黃酮苷和苷元時(shí)：苷比苷元先洗脫（分子篩性能）。第八十六張，PPT共一百七

42、十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月（5）活性炭吸附法（主要用于黃酮苷類(lèi)的精制） 活性炭來(lái)源容易，價(jià)格便宜，在水中吸附能力大，在有機(jī)溶劑中吸附能力小；對(duì)大分子化合物的吸附大于對(duì)小分子化合物的吸附能力，主要用于黃酮苷類(lèi)的精制工作。在植物中用甲醇萃取得到的提取液，經(jīng)過(guò)碳柱，依次加沸水、甲醇、7%酚/水，大部分黃酮被洗下，15%酚/醇，洗脫液減壓濃縮至小體積，用乙醚萃取除去殘留酚，余下部分家呀濃縮得到較純黃酮苷類(lèi)。黃酮類(lèi)化合物的分離第八十七張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月（6）離子交換法提取、分離、純化一步完成，適用于稀釋倍數(shù)大的黃酮，可除去黃酮類(lèi)化合物中的水溶性雜質(zhì)。先用陰（或陽(yáng)）離子交換樹(shù)

43、脂吸附黃酮，然后用水洗滌柱子，吧水溶性雜質(zhì)除去，再用甲醇把黃酮類(lèi)化合物依次洗脫下來(lái)。黃酮類(lèi)化合物的分離第八十八張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月四、 黃酮類(lèi)化合物的檢識(shí)與結(jié)構(gòu)鑒定（一）色譜在黃酮類(lèi)化合物鑒定中的應(yīng)用:1.紙色譜：采用雙向紙色譜。雙向紙色譜法：在紙層析時(shí)通過(guò)兩次不同方向的流動(dòng)相展開(kāi)，以期獲得樣品的進(jìn)一步分離的方法。一般是在第一次層析分離后，變換90方向用不同的溶劑系統(tǒng)進(jìn)行第二次層析。雙向紙色譜適合于分離各種天然黃酮類(lèi)化合物及其苷類(lèi)的混合物?；旌衔锏蔫b定要得到較好的效果常采用雙向?qū)游龇?。第八十九張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月層析行為: Rf值: 苷元單糖

44、苷雙糖苷 一般: 苷元在0.70以上,而苷則小于0.7。主要根據(jù)分配作用進(jìn)行分離n-BuOH: HOAc:H2O=4:1:5 上層t-BuOH: HOAc: H O=3:1:1水飽和n-BuOHoooooooooo.第一次展開(kāi)樣品第一相展開(kāi)采用醇性展開(kāi)劑雙向紙色譜分離檢識(shí)黃酮類(lèi)化合物第九十張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月主要根據(jù)吸附作用進(jìn)行分離第二相展開(kāi)采用水性展開(kāi)劑如：26% HOAc水溶液 3% NaCl 水溶液HOAc:濃HCl:H2O = 30: 3 : 10層析行為: 連接糖鏈越長(zhǎng), Rf越大(0.5); 苷元Rf較小，有的留在原點(diǎn)。苷元: 平面型分子: 黃酮(醇)、查

45、耳酮的Rf小,幾乎留在原點(diǎn)不動(dòng)(Rf5-OH(黃酮)5-OH(二氫黃酮)鄰二酚OH3-OH(二氫黃酮) 對(duì)HCl穩(wěn)定 HCl不穩(wěn)定,可分解 在NaOAc中不穩(wěn)定加入診斷試劑后，根據(jù)UV光譜的變化可推測(cè)酚羥基等取代基的位置和數(shù)目第一百一十一張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月三氯化鋁+鹽酸光譜與甲醇光譜比較可確定有無(wú)5-OH或3-OH。診斷試劑AlCl3+HCl 圖譜與MeOH圖譜比較歸屬甲醇光譜與三氯化鋁+鹽酸光譜比較AlCl3+HCl 圖譜與MeOH圖譜相同無(wú)3-OH和5OHAlCl3+HCl 圖譜與MeOH圖譜不同可能有3-OH或5OH峰帶I紅移35-55nm示只有5OH峰帶I紅

46、移60nm示只有3OH峰帶I紅移5060nm示可能3及5OH峰帶I紅移1720nm除5OH外，有6含氧取代紅移有一定的加和性。如:有3-OH,又有A環(huán)鄰二酚OH，則紅移8085nm。第一百一十二張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月診斷試劑AlCl3+HCl 圖譜與AlCl3圖譜比較歸屬三氯化鋁光譜與三氯化鋁+鹽酸光譜比較AlCl3+HCl 圖譜與AlCl3圖譜相同無(wú)鄰二酚羥基結(jié)構(gòu)AlCl3+HCl 圖譜與AlCl3圖譜不同可能有鄰二酚羥基峰帶I紫移30-40nm示B環(huán)有鄰二酚羥基峰帶I紫移50-65nm示A、B環(huán)可能均有鄰二酚羥基三氯化鋁+鹽酸光譜與甲醇光譜比較可確定有無(wú)鄰二酚羥基。

47、第一百一十三張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月此外，鄰二酚羥基還可以通過(guò)氨性氯化鍶（SrCl2）顯色反應(yīng)：加以區(qū)別：3-OH或5-OH還可借助鋯鹽枸櫞酸顯色反應(yīng)區(qū)別。SrCl2鄰二酚OH黃酮 綠色棕色乃至黑色第一百一十四張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月例：根據(jù)UV推斷OH取代位置： 帶II 帶I MeOH： 253 349 +NaOAc： 269 384 +NaOAc/H3BO3： 257 370 +AlCl3： 274 426 +AlCl3/HCl： 275 385 +ZrOCl2黃色+枸櫞酸黃色退去： +SrCl2/氨性甲醇 。鄰二酚羥基鄰二酚羥基B環(huán)鄰二酚OH7

48、-OH5-OH加醋酸鈉：帶紅移5-20nm，示有7-OH加醋酸鈉/硼酸：帶紅移1230nm：說(shuō)明 B環(huán)有鄰二酚OH。帶紅移510nm ：說(shuō)明A環(huán)有鄰二酚OH(6, 7-或7,8-不包括5, 6-)。第一百一十五張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月(一)A環(huán)質(zhì)子1. 5,7-二羥基黃酮類(lèi)化合物H-6和H-8分別以雙重峰(J=2.5Hz)出現(xiàn)在6.95.7ppm之間?；衔颒6H8黃酮黃酮醇6.2-6.0ppm(q,J=2.5Hz)6.5-6.3ppm (d,J=2.5Hz)1H-NMR在黃酮結(jié)構(gòu)分析中的應(yīng)用:氫核磁共振己成為黃酮類(lèi)化合物結(jié)構(gòu)分析的一種重要方法。所用溶劑有氘代氯仿(CDC

49、l3)、氘代二甲基亞砜(DMSO-d6)、氘代吡啶(C5D5N)第一百一十六張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月7-羥基黃酮類(lèi)化合物：有三個(gè)芳香質(zhì)子H-5、H-6和H-8?；衔颒5H6H8黃酮黃酮醇8.2-7.3ppm(d, J=9Hz)7.1-6.7 ppm(q,J=9,2.5Hz)7.0-6.7ppm (d,J=2.5Hz)第一百一十七張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月4-氧取代黃酮類(lèi)化合物B環(huán)有四個(gè)質(zhì)子H-2、 H-6及H-5、 H-3 兩組,出現(xiàn)在6.507.90處.(二)B環(huán)質(zhì)子化合物H2,-5 (ppm)H-3,6 (ppm)黃酮類(lèi)黃酮醇類(lèi)7.9-7.7 (

50、d,J=8.5Hz)8.17.9(d,J=8.5Hz) 7.1-6.5 (d,J=8.5Hz) 7.1-6.5 (d,J=8.5Hz)第一百一十八張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月3、4-二氧化黃酮類(lèi)化合物H-5,H-2,H-6通常在7.2-7.9 ppm之間?；衔颒5H2H6黃酮7.1-6.7ppm(d, J=8.5Hz)7.2 ppm(d,J=9,2.5Hz)7.9ppm (q,J=8.5,2.5Hz)第一百一十九張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 3,4,5三氧取代黃酮類(lèi)化合物：質(zhì)子345三OH3或5-OH被取代H2 7.56.5ppm, sd, J=2HZH6

51、d, J=2Hz第一百二十張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月黃酮類(lèi)：H3常以一個(gè)尖銳的單峰出現(xiàn)在約6.3 ppm 處。(三)C環(huán)質(zhì)子第一百二十一張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月第一百二十二張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月異黃酮類(lèi)H-2為一尖銳單峰，出現(xiàn)在7.87.6ppm，比一般芳香質(zhì)子較低的磁場(chǎng)區(qū)。第一百二十三張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月化合物H3H26.3ppm, s, (尖銳單峰)7.8-7.6ppm, s, (尖銳單峰)第一百二十四張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月二氫黃酮及二氫黃酮醇第一百二十五張，PPT共一百七十

52、六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月化合物H-2(ppm)H-3(ppm)二氫黃酮5.5-5.0 (q,J=11, 5Hz)近 2.8 q二氫黃酮醇5.0-4.8 (d, J=11Hz)4.3-4.1 (d, J=11Hz)二氫黃酮和二氫黃酮醇中H-2和H-3的化學(xué)位移第一百二十六張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月GYH第一百二十七張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月單糖苷類(lèi)：形成苷時(shí)，糖上H1化學(xué)位移值與其它位置上的H相比，一般處在較低的磁場(chǎng)區(qū)。如：3O苷，H1的值處于5.8 ppm;其它位置苷，H1的值均小于5.2 ppm， 故很容易相區(qū)別。(四)糖基上質(zhì)子第一百二十八張，PP

53、T共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月第一百二十九張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月苷鍵構(gòu)型的判斷天然黃酮類(lèi)化合物葡萄糖苷中，H1和H2為二直立鍵偶合系統(tǒng)，均為a鍵，Ja,a7Hz，H1顯示為二重峰。而天然黃酮類(lèi)化合物L(fēng)鼠李糖苷上，H1與H2系二平伏鍵(e,e)偶合系統(tǒng)，故Je,e2Hz，分別為d峰。第一百三十張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月黃酮類(lèi)化合物GYH第一百三十一張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月1、酚羥基質(zhì)子：10ppm左右;但5-OH為12ppm左右。2、C6及C8CH3質(zhì)子： 芳香甲基質(zhì)子化學(xué)位移值為2.3 ppm 左右。 6位略高于8位 0

54、.2 ppm。3、乙酰氧基上的質(zhì)子：糖上乙酰氧基上甲基質(zhì)子信號(hào)位于；1.652.10 ppm苷元上乙酰氧基上甲基質(zhì)子信號(hào)位于；2.302.50 ppm(五)其他質(zhì)子GYH第一百三十二張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月甲氧基質(zhì)子：一般出現(xiàn)在 3.54.1 ppm 處。酚羥基質(zhì)子：處在低場(chǎng)約10 ppm左右。重水(D2O)交換，這些信號(hào)峰即消失。GYH第一百三十三張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月13C-NMR在黃酮類(lèi)化合物結(jié)構(gòu)鑒定中的應(yīng)用：(一) 黃酮類(lèi)化合物的13C譜定位：第一百三十四張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月黃酮類(lèi)化合物的碳峰分布在40200之間，

55、分為四個(gè)區(qū)域： c 指定4085 1)二氫黃酮,異二氫黃酮,二氫黃酮 醇的C-2或C-3 2)OCH3的C90110 1)C-3(黃酮) 2)黃酮,異黃酮,二氫黃酮(醇)中的某 些C-6和C-8 3)上述化合物中B環(huán)被三取代后的 另外兩個(gè)未被取代碳第一百三十五張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月110140 B環(huán)雙取代或單取代后其它碳, A環(huán)未取代的碳135200 1)烯碳(=C-O) 135168 C-2黃酮,C3-OH黃酮醇,苯環(huán)上O取代的碳 2)羰基碳(C=O) 168200第一百三十六張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月(二) 取代基的影響：1.當(dāng)A、B環(huán)引入取代基

56、時(shí)： X Zi(本身C) Zo Zm Zp OH 26.6 -12.8 1.6 -7.1OCH3 31.4 -14.4 1.0 -7.8 當(dāng)4單取代時(shí):第一百三十七張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月2.A環(huán)引入取代基時(shí)，位移影響將只局限于A環(huán)，但C5引入OH 使C4的+4.5, C2的+0.87，而C3-1.99。第一百三十八張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月3. 5, 7-二OH黃酮類(lèi)中的C-6及C-8信號(hào)的特征：1)C-6, C-8信號(hào)在90100范圍內(nèi)出現(xiàn)；2)C-6的信號(hào)總比C-8信號(hào)位于較低的磁場(chǎng)，在黃酮及黃酮醇中差別4.8 (較大),二氫黃酮差別較小約0.9

57、。3)當(dāng)C-6及C-8被甲基、-OH取代時(shí)，有取代的C將向低場(chǎng)位移6.09.6，而另一個(gè)未被取代的C則無(wú)多大改變。第一百三十九張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月(三) 黃酮苷類(lèi)化合物：1. 糖的苷化位移: 酚性苷中,糖的C-1: +4 +6 7-, 2, 3, 4-OH苷化時(shí), 糖的C-1：100102.5。 5-O-glu苷 C-1=104.3 7-O-rha苷 99.0雙糖苷或低聚糖苷C-1在98109。當(dāng)糖上的羥基苷化時(shí)將使該OH所在碳原子產(chǎn)生一個(gè)相當(dāng)大的低場(chǎng)位移(+4+10)。如：例 外第一百四十張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月苷第一百四十一張，PPT共一百七

58、十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 2. 苷元的苷化位移：通常：苷元糖苷化后本身C向高場(chǎng)位移，其鄰、對(duì)位碳原子向低場(chǎng)位移，對(duì)位C的位移幅度最大而又比較穩(wěn)定。苷元Ipso-C（本身C）的對(duì)位及鄰位碳原子的苷化位移比本身的苷化位移具有更確切的指導(dǎo)意義第一百四十二張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月一般地： A. C-3-OH糖苷化后，對(duì)C-2引起的苷化位移比一般鄰位效應(yīng)要大得多； B. C-7-OH及/或C-3-OH與鼠李糖成苷時(shí)，C-7或C-3信號(hào)的苷化位移比一般糖苷要大一些，據(jù)此也可與一般糖苷相區(qū)別。 C. 5-OH糖苷化后, C-2, C-4信號(hào)明顯地向高場(chǎng)位移，而C-3信號(hào)則移向低場(chǎng)

59、。第一百四十三張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月質(zhì)譜在黃酮類(lèi)結(jié)構(gòu)測(cè)定中的應(yīng)用: 一般，MS測(cè)定采用電子轟擊法（electron impact ionization，簡(jiǎn)稱EI），故稱El- MS.測(cè)定EI-MS時(shí)，需要先將樣品加熱氣化，使之進(jìn)入離子化室，而后才能電離。故容易發(fā)生熱分解的化合物或難于氣化的化合物，如醇、糖苷和部分羧酸等，往往測(cè)不到分子離子峰，看到的只是其碎片峰。而一些大分子物質(zhì)，如糖的聚合物和肽類(lèi)等，也因難于氣化而無(wú)法測(cè)定。故近來(lái)多將一些對(duì)熱不穩(wěn)定的樣品，如糖類(lèi)和醇類(lèi)等，進(jìn)行乙?；蛉谆柰榛═MS化），制成對(duì)熱穩(wěn)定性好的揮發(fā)性衍生物后再進(jìn)行測(cè)定。另外，還開(kāi)發(fā)了使樣

60、品不必加熱氣化而直接電離的新方法，如化學(xué)電離（chemical ionization，簡(jiǎn)稱CI）、場(chǎng)致電離（field ionization簡(jiǎn)稱FI）、場(chǎng)解析電離（field desorption ionization，簡(jiǎn)稱FD）、快速原子轟擊電離（fast atom bombardment，簡(jiǎn)稱FAB）和電噴霧電離（electrospray ionization，簡(jiǎn)稱ESI）等，為對(duì)熱不穩(wěn)定的化合物的研究提供了方便。第一百四十四張，PPT共一百七十六頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月質(zhì)譜在黃酮類(lèi)結(jié)構(gòu)測(cè)定中的應(yīng)用:苷元用EI-MS（電子轟擊離子源-質(zhì)譜聯(lián)用）可得到分子離子峰(強(qiáng), 往往為基峰)；苷用FD