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文檔簡介
1、關(guān)于染色體與DNA第一張,PPT共九十頁,創(chuàng)作于2022年6月第二章 染色體與DNA 第一節(jié) 染色體第二節(jié) DNA的結(jié)構(gòu)第三節(jié) DNA的復(fù)制概述第四節(jié) 原核生物和真核生物DNA復(fù)制特點第五節(jié) DNA的修復(fù)第六節(jié) DNA的轉(zhuǎn)座第二張,PPT共九十頁,創(chuàng)作于2022年6月第一節(jié) 染色體染色體概述真核細(xì)胞染色體的組成原核生物基因組特征第三張,PPT共九十頁,創(chuàng)作于2022年6月原核生物( Prokaryote )真核生物( Eukaryote)第四張,PPT共九十頁,創(chuàng)作于2022年6月細(xì)胞周期19世紀(jì)中葉,發(fā)現(xiàn)染色體。當(dāng)細(xì)胞分裂時,每一條染色體都復(fù)制生成一條與母鏈完全一樣的子鏈,形成同源染色體對。
2、 1 染色體概述第五張,PPT共九十頁,創(chuàng)作于2022年6月染色體(chromosome): 細(xì)胞在有絲分裂時遺傳物質(zhì)存在的特定形式,是間期細(xì)胞染色質(zhì)結(jié)構(gòu)緊密包裝的結(jié)果。光學(xué)顯微鏡下看到的棒狀或點狀物質(zhì)。染色質(zhì)(chromatin): 真核生物的染色體在細(xì)胞生活周期的大部分時間里都是以染色質(zhì)的形式存在的。電鏡下為串珠狀細(xì)纖維絲。第六張,PPT共九十頁,創(chuàng)作于2022年6月第七張,PPT共九十頁,創(chuàng)作于2022年6月第八張,PPT共九十頁,創(chuàng)作于2022年6月染色體的數(shù)目:同一物種的染色體數(shù)目是相對穩(wěn)定的;染色體數(shù)目有種屬差異。第九張,PPT共九十頁,創(chuàng)作于2022年6月作為遺傳物質(zhì)的染色體特征
3、:分子結(jié)構(gòu)相對穩(wěn)定能夠自我復(fù)制能夠指導(dǎo)蛋白質(zhì)的合成,從而控制整個生命過程;能夠產(chǎn)生遺傳的變異。第十張,PPT共九十頁,創(chuàng)作于2022年6月第一節(jié) 染色體染色體概述真核細(xì)胞染色體的組成與結(jié)構(gòu)2.1 組成2.2 染色質(zhì)和核小體2.3 真核生物基因組DNA的C值和重復(fù)序列原核生物基因組特點第十一張,PPT共九十頁,創(chuàng)作于2022年6月2.1 染色體組成(1) DNA:約占30%,每條染色體一個雙鏈DNA分子是遺傳信息的載體 (2) 蛋白質(zhì)組蛋白:呈堿性,結(jié)構(gòu)穩(wěn)定;與DNA結(jié)合形成、維持染色質(zhì)結(jié)構(gòu),與DNA含量呈一定的比例非組蛋白:呈酸性,種類和含量不穩(wěn)定;作用還不完全清楚,可能與染色質(zhì)結(jié)構(gòu)調(diào)節(jié)有關(guān),
4、在DNA遺傳信息的表達(dá)中有重要作用(3) 少量的RNA 不到DNA量的10%。2 真核細(xì)胞染色體的組成與結(jié)構(gòu)第十二張,PPT共九十頁,創(chuàng)作于2022年6月染色體中的五種組蛋白組蛋白類別堿性氨基酸Lys Arg酸性氨基酸堿/酸氨基酸殘基數(shù)分子量(dallton)H1極富Lys29.51.355.422321000H2A稍富Lys10.99.3151.412914500H2B稍富Lys166.4131.712513800H3富Arg9.613.3131.813515300H4富Arg10.813.7102.510211300(2)組蛋白第十三張,PPT共九十頁,創(chuàng)作于2022年6月2 真核細(xì)胞染色
5、體的組成與結(jié)構(gòu)2.1 組成2.2 染色質(zhì)和核小體2.3 真核生物基因組DNA的C值和重復(fù)序列第十四張,PPT共九十頁,創(chuàng)作于2022年6月2.2 染色質(zhì)和核小體 染色質(zhì)是一種纖維狀結(jié)構(gòu),叫做染色質(zhì)絲,由最基本的單位核小體(nucleosome)成串排列而成的。 核小體-染色質(zhì)的基本結(jié)構(gòu)單位 串珠狀結(jié)構(gòu),核心顆粒和連結(jié)DNA組成:第十五張,PPT共九十頁,創(chuàng)作于2022年6月第十六張,PPT共九十頁,創(chuàng)作于2022年6月組蛋白八聚體組蛋白H1DNA146bp纏繞1.75圈第十七張,PPT共九十頁,創(chuàng)作于2022年6月螺線管30nm染色質(zhì)絲300 nm核小體10nm染色體 700nm組蛋白DNA2
6、nm中期染色體 1400nm300nm第十八張,PPT共九十頁,創(chuàng)作于2022年6月2 真核細(xì)胞染色體的組成與結(jié)構(gòu)2.1 組成2.2 染色質(zhì)和核小體2.3 真核生物基因組DNA的C值和重復(fù)序列第十九張,PPT共九十頁,創(chuàng)作于2022年6月2.3 真核生物基因組DNA的C值和重復(fù)序列C值 (C Value):指一種生物單倍體基因組的DNA總量。C值是每種生物的一個特征 不同生物之間差別很大。第二十張,PPT共九十頁,創(chuàng)作于2022年6月生物體進(jìn)化程度高低與C值不成明顯線性相關(guān)親緣關(guān)系相近的生物C值卻相差大。 高等生物的C值不一定比低等生物的C值高。C值矛盾:C值和生物結(jié)構(gòu)或組成的復(fù)雜性不一致的現(xiàn)
7、象。C值變化范圍寬意味著生物基因組中含有大量的無編碼功能的重復(fù)序列。第二十一張,PPT共九十頁,創(chuàng)作于2022年6月真核細(xì)胞基因組含有大量的重復(fù)序列, 功能DNA序列大多被非功能DNA所隔開??煞譃?類:(1)不重復(fù)序列 占DNA總量的4080,長約7502000bp。是主要的結(jié)構(gòu)基因。第二十二張,PPT共九十頁,創(chuàng)作于2022年6月(2)中度重復(fù)序列 重復(fù)次數(shù)在10-104,占總DNA的1040,各種rRNA、tRNA、組蛋白基因以及某些結(jié)構(gòu)基因?qū)儆谶@一類。中度重復(fù)序列往往分散在不重復(fù)序列之間。 組蛋白基因rRNA第二十三張,PPT共九十頁,創(chuàng)作于2022年6月(3)高度重復(fù)序列衛(wèi)星DNA
8、占總DNA的1060,由6100個bp組成,在DNA鏈上串聯(lián)重復(fù)高達(dá)數(shù)百萬次。不轉(zhuǎn)錄序列。第二十四張,PPT共九十頁,創(chuàng)作于2022年6月衛(wèi)星DNA:這類高度重復(fù)序列的堿基組成與其他部分的不同,浮力密度也不同,用等密度梯度離心法可將其與主體DNA分開 。等密度梯度離心法 浮力密度 第二十五張,PPT共九十頁,創(chuàng)作于2022年6月衛(wèi)星 DNA序列螃蟹2ATATAT.果蠅5ATAATATAAT.老鼠9GAAAAATGAGAAAAATGA重復(fù)堿基數(shù) 序列 第二十六張,PPT共九十頁,創(chuàng)作于2022年6月 原核生物無重復(fù)序列 低等真核生物 10-20% 高等植物 80% 重復(fù)序列 高等動物 50%不同
9、生物的非重復(fù)基因占基因組的比例差別很大;第二十七張,PPT共九十頁,創(chuàng)作于2022年6月第一節(jié) 染色體染色體概述真核細(xì)胞染色體的組成原核生物基因組特點第二十八張,PPT共九十頁,創(chuàng)作于2022年6月原核生物的染色體特點:原核生物DNA一般位于類核體上。細(xì)菌DNA是一條共價、閉合雙鏈分子,通常也稱為染色體。大腸桿菌一般情況下含有一條染色體。原核細(xì)胞都是單倍的。大腸桿菌細(xì)胞中基因組DNA的電鏡顯微照片第二十九張,PPT共九十頁,創(chuàng)作于2022年6月3.1 原核生物基因組特點1)原核生物的基因組很小,大多只有一條染色體,且DNA含量少,沒有重復(fù)序列。染色體外遺傳基因:即細(xì)菌的質(zhì)粒、真核生物的線粒體、
10、高等植物的葉綠體等所含有的DNA和功能基因。 第三十張,PPT共九十頁,創(chuàng)作于2022年6月2)結(jié)構(gòu)簡練:原核DNA分子的絕大部分是用來編碼蛋白質(zhì)的,只有非常小的一部分不轉(zhuǎn)錄。而且,這些不轉(zhuǎn)錄DNA序列通常是控制基因表達(dá)的調(diào)控序列。3)存在轉(zhuǎn)錄單元:原核DNA序列中功能相關(guān)的基因叢集在基因組的特定部位,形成轉(zhuǎn)錄單元,它們可被一起轉(zhuǎn)錄為可翻譯多個蛋白質(zhì)的mRNA分子,這種mRNA叫多順反子mRNA。第三十一張,PPT共九十頁,創(chuàng)作于2022年6月原核生物的mRNA是多順反子mRNAPromoterGene 1Gene 2Gene 3TerminatorDNATranscriptionmRNA31
11、235TranslationProteins123第三十二張,PPT共九十頁,創(chuàng)作于2022年6月 真核生物mRNA是單順反子mRNA一個編碼基因轉(zhuǎn)錄生成一個轉(zhuǎn)錄生成一個mRNA 。TranslationTranscriptionmRNADNAProteinPromoterGene35第三十三張,PPT共九十頁,創(chuàng)作于2022年6月4)有重疊基因:在一些細(xì)菌和動物病毒中同一段DNA能攜帶兩種不同蛋白質(zhì)的信息。重疊基因的發(fā)現(xiàn):1977年,Sanger,F(xiàn)eir X 174 DNA全長:5375個核苷酸 編碼的9種蛋白全長:2026個氨基酸; 3*2026 = 6078核苷酸第三十四張,PPT共九
12、十頁,創(chuàng)作于2022年6月噬菌體G4、MS2和SV40中都發(fā)現(xiàn)了重疊基因 原核生物的重疊基因第三十五張,PPT共九十頁,創(chuàng)作于2022年6月 1)基因內(nèi)基因 : 如:B基因在A基因內(nèi), E基因在D基因內(nèi)。 2) 部分重疊 K基因和C基因的重疊 3) 前后兩基因首尾重疊: 例1: 如:基因D 終止 X174DNA序列:5TAATG3 重疊一個堿基 基因J 起始基因重疊的方式 第三十六張,PPT共九十頁,創(chuàng)作于2022年6月3.2 真核生物基因組的結(jié)構(gòu)特點真核基因組龐大 3109bp、染色質(zhì)、核膜存在大量的重復(fù)序列90%以上為非編碼序列 轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為單順反子斷裂基因,含有內(nèi)含子有大量順式作用元件(見
13、第八章)存在大量的DNA多態(tài)性具有端粒結(jié)構(gòu)DNA多態(tài)性:DNA序列中發(fā)生變異而導(dǎo)致 的個體間核苷酸序列的差異。第三十七張,PPT共九十頁,創(chuàng)作于2022年6月第二章 染色體與DNA 第一節(jié) 染色體第二節(jié) DNA的結(jié)構(gòu)第三節(jié) DNA的復(fù)制概述第四節(jié) 原核生物和真核生物DNA復(fù)制特點第五節(jié) DNA的修復(fù)第六節(jié) DNA的轉(zhuǎn)座第三十八張,PPT共九十頁,創(chuàng)作于2022年6月第二節(jié) DNA的結(jié)構(gòu)1 核酸的化學(xué)組成2 DNA 的一級結(jié)構(gòu)3 DNA 的二級結(jié)構(gòu)4 DNA的三級結(jié)構(gòu)5 DNA的理化性質(zhì)-變性和復(fù)性第三十九張,PPT共九十頁,創(chuàng)作于2022年6月mRNArRNA第四十張,PPT共九十頁,創(chuàng)作于2
14、022年6月DNA主要存在于細(xì)胞核,是染色質(zhì)的主要成分;原核生物DNA主要存在于類核中;在核外也存在有少量DNA,如線粒體DNA、葉綠體DNA以及細(xì)菌的質(zhì)粒。RNA 主要存在于細(xì)胞質(zhì)(90%),少量存在于核仁中 mRNA 存在于細(xì)胞質(zhì)中,占總RNA的510%。 tRNA 存在于細(xì)胞質(zhì)中,占總RNA的1015% rRNA 存在于核糖體中, 占總RNA的7580%;第四十一張,PPT共九十頁,創(chuàng)作于2022年6月嘧啶嘌呤1 核酸的化學(xué)組成 堿基 第四十二張,PPT共九十頁,創(chuàng)作于2022年6月DNA: D-2-脫氧核糖 A,G,C,TRNA: D-2-核糖 A,G,C,U 核酸的元素組成C、H、O
15、、N、P(9-10%) 核酸 核苷酸 磷酸 核苷 戊糖 堿基第四十三張,PPT共九十頁,創(chuàng)作于2022年6月第四十四張,PPT共九十頁,創(chuàng)作于2022年6月DNA的一級結(jié)構(gòu): 指四種核苷酸(dAMP、dCMP、dGMP、dTMP)按照一定的排列順序,通過磷酸二酯鍵連接形成的多核苷酸,也稱為堿基順序。第四十五張,PPT共九十頁,創(chuàng)作于2022年6月DNA一級結(jié)構(gòu)的兩種縮寫方式: 線條式: pTpGpCpApT pT-G-C-A-T TGCAT 文字式:第四十六張,PPT共九十頁,創(chuàng)作于2022年6月第二節(jié) DNA的結(jié)構(gòu)1 核酸的化學(xué)組成2 DNA 的一級結(jié)構(gòu)3 DNA 的二級結(jié)構(gòu)4 DNA的三級
16、結(jié)構(gòu)5 DNA的理化性質(zhì)-變性和復(fù)性第四十七張,PPT共九十頁,創(chuàng)作于2022年6月DNA雙螺旋模型的提出維持DNA雙螺旋的力雙螺旋結(jié)構(gòu)的基本形式3 DNA的二級結(jié)構(gòu) 定義:指兩條多核苷酸鏈反向平行盤繞所產(chǎn)生的雙螺旋結(jié)構(gòu)。 第四十八張,PPT共九十頁,創(chuàng)作于2022年6月3.1.1 研究背景:1950年,Chargaff從大量的不同來源的DNA樣品的分析中發(fā)現(xiàn)了DNA組成的當(dāng)量規(guī)律,即AT,GC,AGCT。不同生物種屬的DNA堿基組成不同,同一個體不同器官、不同組織的DNA具有相同的堿基組成。3.1 DNA雙螺旋模型的提出第四十九張,PPT共九十頁,創(chuàng)作于2022年6月理論化學(xué)家L. Paul
17、ing運用化學(xué)的簡單定律來推理,研究了蛋白質(zhì)-螺旋結(jié)構(gòu),此方法啟發(fā)了Watson和 Crick。M. Wilkins、R. Franklin等在DNA的X射線晶體結(jié)構(gòu)方面作出了重大的貢獻(xiàn)。第五十張,PPT共九十頁,創(chuàng)作于2022年6月1953年沃森和克里克提出DNA分子雙螺旋結(jié)構(gòu)模型。3.1.2 DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)模型的提出:第五十一張,PPT共九十頁,創(chuàng)作于2022年6月Fig. 2-5 Watson and Cricks paper in Nature 1953.第五十二張,PPT共九十頁,創(chuàng)作于2022年6月3.1.3 DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)模型的要點: 脫氧核糖和磷酸通過3,5磷酸二酯鍵交互連
18、接,成為螺旋鏈的骨架。兩條鏈方向以反向平行的方式組成右手雙螺旋。第五十三張,PPT共九十頁,創(chuàng)作于2022年6月第五十四張,PPT共九十頁,創(chuàng)作于2022年6月 堿基互補配對:只有A和T配對,G和C配對才能滿足正常螺旋(直徑2 nm )的要求和chargaff的當(dāng)量規(guī)律。嘧啶 嘌呤 第五十五張,PPT共九十頁,創(chuàng)作于2022年6月 螺旋參數(shù)螺旋直徑nm。螺旋每旋轉(zhuǎn)一周10對堿基,每個堿基的旋轉(zhuǎn)角度為36螺距3.4nm;堿基平面之間的距離為0.34nm。第五十六張,PPT共九十頁,創(chuàng)作于2022年6月 大溝小溝 大溝(2. 2nm)小溝(1. 2nm)對于遺傳上有重要功能的蛋白質(zhì)識別DNA雙螺旋
19、結(jié)構(gòu)上的特定信息是非常重要的。第五十七張,PPT共九十頁,創(chuàng)作于2022年6月DNA雙螺旋模型的提出維持DNA雙螺旋的力雙螺旋結(jié)構(gòu)的基本形式3 DNA的二級結(jié)構(gòu)第五十八張,PPT共九十頁,創(chuàng)作于2022年6月3.2 維持DNA雙螺旋的力3.2.1 氫鍵GC之間有三條氫鍵,AT之間有兩條氫鍵,這是DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)的重要特征之一,DNA的許多物理性質(zhì)如變性、復(fù)性以及Tm值等都與此有關(guān)。第五十九張,PPT共九十頁,創(chuàng)作于2022年6月3.2.2 堿基堆集力 包括疏水作用力和范德華力。1) 疏水作用力:不溶于水或難溶于水的兩個分子在水中具有相互聯(lián)合,成串聯(lián)地結(jié)合在一起的趨勢。嘌呤和嘧啶具有疏水性,雙螺
20、旋結(jié)構(gòu)內(nèi)部形成一個強(qiáng)大的疏水區(qū),使DNA相鄰的堿基有相互堆集在一起的趨勢,這是形成堿基堆集力的重要因素之一。第六十張,PPT共九十頁,創(chuàng)作于2022年6月2) 范德華力:存在于分子間的一種吸引力; DNA雙鏈中嘌呤和嘧啶的范環(huán)德華的半徑是0.17nm左右 ,其累積的范德華力是相當(dāng)可觀的,這樣范德華力加強(qiáng)了疏水作用,這是形成堿基堆集力的另一個重要因素。第六十一張,PPT共九十頁,創(chuàng)作于2022年6月 氫鍵與堿基堆集力的協(xié)同作用維持DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定已經(jīng)堆集的堿基更容易發(fā)生氫鍵的鍵合,相應(yīng)地已經(jīng)被氫鍵定向的堿基更容易堆集。第六十二張,PPT共九十頁,創(chuàng)作于2022年6月磷酸基團(tuán)間的靜電斥力 帶
21、負(fù)電荷的磷酸基的靜電斥力,所以DNA需要保存在含 Na+ 生理鹽條件 。 堿基分子內(nèi)能 物體的內(nèi)能:物體內(nèi)全部分子的分子動能與分子勢能之和。溫度升高,堿基分子內(nèi)能增加時,堿基的定向排列遭受破壞,消弱了堿基的氫鍵結(jié)合力和堿基的堆集力,會使DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)受到破壞。3.2.3 不穩(wěn)定因素第六十三張,PPT共九十頁,創(chuàng)作于2022年6月 總之: 氫鍵和堿基堆集力有利于DNA維持雙螺旋結(jié)構(gòu),而靜電斥力和堿基分子內(nèi)能則不利于DNA維持雙螺旋結(jié)構(gòu)。 DNA雙螺旋的穩(wěn)定性第六十四張,PPT共九十頁,創(chuàng)作于2022年6月DNA雙螺旋模型的提出維持DNA雙螺旋的力雙螺旋結(jié)構(gòu)的基本形式3 DNA的二級結(jié)構(gòu)第六十
22、五張,PPT共九十頁,創(chuàng)作于2022年6月3.3 雙螺旋結(jié)構(gòu)的基本形式第六十六張,PPT共九十頁,創(chuàng)作于2022年6月 A,B,Z型雙螺旋的特性雙螺旋類型直徑(nm)螺距(nm)每輪堿基數(shù)堿基間距(nm)堿基傾角 ()螺旋扭角()存在的條件溝型相對濕度鹽種類大溝小溝A2.32.8110.26203375%Na+、K+、Cs+窄,深寬,深B2.03.410.40.3403692%Na+低鹽寬,中等深窄,中等深Z1.84.6120.389-3043%Na+、Mg2+高鹽平淺窄,深3.3 雙螺旋結(jié)構(gòu)的基本形式 第六十七張,PPT共九十頁,創(chuàng)作于2022年6月A構(gòu)象: 在相對濕度75以下獲得的DNA的
23、結(jié)構(gòu)。轉(zhuǎn)錄時的DNA-RNA雜交分子和RNA-RNA雙鏈結(jié)構(gòu)均采取A構(gòu)象。Z-DNA的形成是DNA單鏈上出現(xiàn)嘌呤和嘧啶交替排列所造成的,比如CGCGCGCG或CACACACACA。第六十八張,PPT共九十頁,創(chuàng)作于2022年6月Z-DNA有什么生物學(xué)意義呢?Z-DNA在熱力學(xué)上是不利的。帶負(fù)電荷的磷酸根距離太近,產(chǎn)生靜電排斥。DNA鏈的局部不穩(wěn)定區(qū)的存在就成為潛在的解鏈位點。DNA解鏈?zhǔn)荄NA復(fù)制和轉(zhuǎn)錄等過程中必要的環(huán)節(jié),因此Z-DNA的結(jié)構(gòu)與基因表達(dá)調(diào)控有關(guān)。第六十九張,PPT共九十頁,創(chuàng)作于2022年6月第二節(jié) DNA的結(jié)構(gòu)1 核酸的化學(xué)組成2 DNA 的一級結(jié)構(gòu)3 DNA 的二級結(jié)構(gòu)4
24、DNA的三級結(jié)構(gòu)5 DNA的理化性質(zhì)-變性和復(fù)性第七十張,PPT共九十頁,創(chuàng)作于2022年6月4 DNA的超螺旋結(jié)構(gòu)(三級結(jié)構(gòu))DNA的高級結(jié)構(gòu)(超螺旋):指DNA雙螺旋進(jìn)一步扭曲盤繞所形成的特定空間結(jié)構(gòu)第七十一張,PPT共九十頁,創(chuàng)作于2022年6月超螺旋(superhelix or supercoil)的發(fā)現(xiàn)1965年電鏡發(fā)現(xiàn)SV40和多瘤病毒的環(huán)形DNA的超螺旋 第七十二張,PPT共九十頁,創(chuàng)作于2022年6月超螺旋的成因DNA分子中產(chǎn)生額外張力不能釋放,導(dǎo)致DNA分子內(nèi)部的重排,造成扭曲,出現(xiàn)超螺旋。第七十三張,PPT共九十頁,創(chuàng)作于2022年6月環(huán)狀DNA形成的超螺旋第七十四張,PP
25、T共九十頁,創(chuàng)作于2022年6月線狀DNA形成的超螺旋第七十五張,PPT共九十頁,創(chuàng)作于2022年6月拓?fù)洚悩?gòu)酶or溴化乙錠拓?fù)洚悩?gòu)酶or溴化乙錠DNA扭曲與雙螺旋相同(擰緊)DNA扭曲與雙螺旋相反(松開)負(fù)超螺旋松弛DNA正超螺旋超螺旋的類型第七十六張,PPT共九十頁,創(chuàng)作于2022年6月超螺旋形式是DNA分子復(fù)制和轉(zhuǎn)錄的需要; 超螺旋的引入提高了DNA的能量水平,促使DNA雙股鏈分開,或局部熔解。這種結(jié)構(gòu)上的變化對DNA分子復(fù)制和轉(zhuǎn)錄等的啟動很重要。 超螺旋可使DNA分子形成高度致密的狀態(tài)從而 得以容納于有限的空間。超螺旋的意義第七十七張,PPT共九十頁,創(chuàng)作于2022年6月第二節(jié) DNA
26、的結(jié)構(gòu)1 核酸的化學(xué)組成2 DNA 的一級結(jié)構(gòu)3 DNA 的二級結(jié)構(gòu)4 DNA的三級結(jié)構(gòu)5 DNA的理化性質(zhì)-變性和復(fù)性第七十八張,PPT共九十頁,創(chuàng)作于2022年6月5 變性和復(fù)性5.1 變性(denaturation) 1)概念:在某些理化因素作用下,DNA分子互補堿基對之間的氫鍵斷裂,DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)松散,變成單鏈的過程。第七十九張,PPT共九十頁,創(chuàng)作于2022年6月2) 常用的變性方法 熱變性 堿變性應(yīng)用最為廣泛,特別是用于變性動力學(xué)研究 pH11.3時,全部氫鍵被淘汰第八十張,PPT共九十頁,創(chuàng)作于2022年6月3) 核酸變性程度的鑒定紫外測定法:原理:嘌呤堿、嘧啶堿存在共軛雙鍵,堿基、核苷、核苷酸、核酸在240-290nm處有強(qiáng)烈的紫外吸收,最大吸收峰在260nm處。第八十一張,PPT共九十頁,創(chuàng)作于2022年6月紫外光吸收值: 1 雙鏈DNA A260=1.00 2 單鏈DNA A260=1.37 3 自由堿基 A260=1.60第八十二張,PPT共九十頁,創(chuàng)作于2022年6月1.1851.0
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