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1、 /TIANGEN BIOTECH (BEIJING) 版本號: TIANScriptRTKit TIANScript cDNA第一鏈目錄號TIANScriptM-MLV(20025100Oligo(dT)15(1060240Random(1060240-Strand /TIANGEN BIOTECH (BEIJING) 版本號: TIANScriptRTKit TIANScript cDNA第一鏈目錄號TIANScriptM-MLV(20025100Oligo(dT)15(1060240Random(1060240-Strand150500RNase-Free121uredNTPs(2.5m
2、M60240RNasin(4015230-20保存KR104-KR104-產(chǎn)品組25100產(chǎn)品TIANScript RT Kit (cDNA第一鏈成)為產(chǎn)品TIANScript RT Kit (cDNA第一鏈成)為RT-PCR第一制的,的RT-PCR反應(yīng),可以量的總RNApoly(A)+ RNA成第一鏈 mRNA的定的cDNA產(chǎn)品與cDNA第一鏈成反應(yīng)的分,中的TIANScript M-的性,的PCR定量PCR性,PCR熱注本試劑盒注1cDNA成反應(yīng)的液可能DEPC進行,并使。不能,的制液,將液進行2RNADNA3多反RNA,使RNA保中4的成成分應(yīng)-20保存5cDNA產(chǎn)物應(yīng)置-20保存1.
3、的的管中加入下反應(yīng)物1-5g總RNA50-500ng2loligo(dT)1. 的的管中加入下反應(yīng)物1-5g總RNA50-500ng2loligo(dT)152lRandom2pmol引物2luredNTPs(2.5mMRNase-FreeddH2O定14.5l70加熱5min2min。反應(yīng)液加入以下分4l -StrandBuffer(DTT);0.5lRNasin加1 l(200 U)TIANScript M-MLV,液。引物,請將置2510min4250min95加熱5min終反應(yīng),置進行保存RNaseH,進行6。,進行7加RNaseH1l(2U),3720min以RNA。95加熱5min使RNase-FreeddH2O將反應(yīng)體到50l,取2-5l進行PCR擴增反應(yīng)PCR反應(yīng)吸取10%的第一鏈反應(yīng)液(2 l)進行PCR反應(yīng);不能增加其擴增的產(chǎn)物量,反而可能會抑制PCR反應(yīng)吸取10%的第一鏈反應(yīng)液(2 l)進行PCR反應(yīng);不能增加其擴增的產(chǎn)物量,反而可能會抑制正常的PCR反應(yīng)請將以下成分加入到一PCR管中并使其終反應(yīng)體積為50注:為了得到最好結(jié)果, MgCl2最適濃94加熱變性2min不同的模板-引物對而定設(shè)置15到40個PCR循環(huán)。退火與延伸條件依引物和模板而定10PCR5TaqDNApolymera
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