氨基水楊酸對三硝基苯磺酸誘導(dǎo)的大鼠結(jié)腸炎模型的影響

1、氨基水楊酸對三硝基苯磺酸誘導(dǎo)的大鼠結(jié)腸炎模子的影響張林，夏冰，程虹，李瑾，葉梅【關(guān)鍵詞】結(jié)腸炎；三硝基苯磺酸；白細(xì)胞介素【Abstrat】AI:Tinvestigatetheeffetf4ainsaliyliaid(4ASA)ntrinitrbenzenesulfniaid(TNBS)induedlitisinratsandtlarifytherelatedehanis.ETHDS:litisasinduedinfealeSDratsbyretaladinistratinfTNBSreslvedinethanl.Thelitisratseretreatedith4ASANaithdsesf10

2、0and200g/kgrespetivelyfr2eeks.5ainsaliyliaid(5ASA)andnralsalineereusedasntrlgrups.Thelniinflaatininludingarspiandhistlgialhangesandyelperxidase(P)ativityasevaluated.Superxidedisutase(SD)ativityandalndialdehyde(DA)levelinlniusaeredetetedbybiheialethds.Theexpressinsfinterleukin1(IL1)andturnersisfatr(T

3、NF)RNAsinlniusaeredeterinedbyareversetransriptinplyerasehainreatin(RTPR)ethd.RESULTS:paredithTNBSntrlgrup,thearspiandhistlgialsresandPativityin4ASAtreatedgrupseredereased(P0.05),SDativityasinreased(P0.05),andthelevelfDAinlniusaasreduedsignifiantly(P0.05).TheexpressinsfIL1andTNFRNAsinlniusaerealsdere

4、asedsignifiantly(P0.05).Theintralniadinistratinith4ASAhadnretherapeutieffetthantpialtreatentith5ASA.NLUSIN:Thetpialtreatentith4ASAansignifiantlyattenuatethelnidaageinTNBSinduedlitisinratsanditayberelatedttheantixidantehanisandtheinhibitinftheexpressinfprinflaatryytkinesinludingIL1andTNF.【Keyrds】liti

5、s;trinitrbenzenesulfniaid;interleukin1;turnersisfatr;superxidedisutase;alndialdehyde;Painsaliyliaid【摘要】目的：不雅察4氨基水楊酸4ASA治療三硝基苯磺酸TNBS誘導(dǎo)結(jié)腸炎的療效并探究其作用機(jī)制.要領(lǐng)：直腸賜與雌性SD大鼠TNBS誘導(dǎo)結(jié)腸炎，應(yīng)用4ASANa100,200g/kg對其舉行治療，并以5氨基水楊酸5ASA作為陽性比擬，別離于1k及2k后取結(jié)腸標(biāo)本評價(jià)炎癥程度及指標(biāo)檢測，結(jié)腸炎癥的評價(jià)包羅大要形態(tài)損傷、構(gòu)造學(xué)變革和髓過氧化物酶P活性，生化法檢測超氧化物歧化酶SD活性、丙二醛DA程度，逆

6、轉(zhuǎn)錄多聚酶鏈反響RTPR檢測結(jié)腸構(gòu)造白細(xì)胞介素IL1和腫瘤壞死因子TNFRNA表達(dá)程度.結(jié)果：與模子組比力，4ASA低劑量組和高劑量組的大要和構(gòu)造學(xué)評分均低落P均0.05，P活性低落P0.05，SD活性升高P0.05，DA程度低落P0.05，IL1和TNF程度低落P均0.05.與5ASA組比擬，其療效無明顯性差異.結(jié)論：4ASA對TNBS誘導(dǎo)的大鼠結(jié)腸炎具有精良的療效，其具有抗氧化作用，可淘汰IL1和TNF的天生，從而減輕病癥和結(jié)腸炎性損傷.【關(guān)鍵詞】結(jié)腸炎；三硝基苯磺酸；白細(xì)胞介素1；腫瘤壞死因子；超氧化物歧化酶；丙二醛；P氨基水楊酸0弁言炎癥性腸病(inflaatinbeldisease,

7、IBD)是病因不明的腸道炎性疾病，包羅兩種差異的表示情勢，即潰瘍性結(jié)腸炎u(yù)lerativelitis,U和rhn病.比年來有關(guān)IBD的病因和發(fā)病機(jī)制的研究表白其大概是多因素作用的結(jié)果，包羅遺傳、免疫、熏染、精力和情況因素等1.如今治療IBD的藥物重要有柳氮磺氨吡啶sulfasalazine,SASP、5氨基水楊酸5ainsaliyliaid,5ASA、糖皮質(zhì)激素、免疫按捺劑等.4氨基水楊酸(4ainsaliyliaid,4ASA，又稱對氨基水楊酸，paraainsaliyliaid,PAS是5ASA的同分異構(gòu)體，它作為二線抗結(jié)核藥物被普及用于治療肺結(jié)核.有報(bào)道2-6，4ASA用于治療IBD寧靜

8、、有用，其療效與5ASA相稱，并且患者耐受性較好.但4ASA治療IBD不停未在臨床上普及應(yīng)用，并且其治療機(jī)制不明.我們通過應(yīng)用4ASA治療三硝基苯磺酸(trinitrbenzenesulfniaid,TNBS)誘導(dǎo)的實(shí)行性結(jié)腸炎，不雅察其治療結(jié)果并探究其作用機(jī)制.1質(zhì)料和要領(lǐng)1.1質(zhì)料康健成年雌性SD大鼠50只武漢大學(xué)醫(yī)學(xué)院實(shí)行動物中央，體質(zhì)量180220g.TNBS，鄰聯(lián)二茴香胺，5ASA和4ASANa美國Siga公司；SD,DA檢測試劑盒南京建成生物工程研究所；TrizlReagent美國Invitrgen公司；LV逆轉(zhuǎn)錄酶美國Prega公司；相干引物由北京三博志遠(yuǎn)生物工程合成；十六烷基三

9、甲基溴化銨為國產(chǎn)闡發(fā)純；752型紫外可見分光光度計(jì)上海光譜儀器.1.2要領(lǐng)2結(jié)果2.14ASA對TNBS誘導(dǎo)大鼠結(jié)腸炎各炎癥指標(biāo)的影響動物于造模后24h即出現(xiàn)懶動，進(jìn)食量淘汰，解稀便或糊狀便，便血，體質(zhì)量減輕；肛門以上8結(jié)腸濕質(zhì)量增長；肉眼可見腸黏膜充血水腫，腐敗，潰瘍形成，腸壁增厚；鏡下可見黏膜及黏膜以下淋巴細(xì)胞及中性粒細(xì)胞浸潤.賜與4ASANa(100，200g/kg)治療1k后大鼠腹瀉及便血制止，大便漸漸成形，體質(zhì)量上升P0.05；結(jié)腸濕質(zhì)量、大要與構(gòu)造學(xué)損傷評分及P活性均低落P0.05；治療2k后，大便成形，體質(zhì)量上升，結(jié)腸濕質(zhì)量、大要與構(gòu)造學(xué)損傷評分及P活性低落越發(fā)顯著.與5ASA治

10、療組比力，體質(zhì)量增長，結(jié)腸濕質(zhì)量、大要與構(gòu)造學(xué)損傷評分及P活性無明顯性差異P0.05，表1.表14ASA治療前后各炎癥指標(biāo)2.24ASA對TNBS誘導(dǎo)結(jié)腸炎大鼠結(jié)腸構(gòu)造SD活性及DA程度的影響與正常比擬組比力，模子組大鼠結(jié)腸構(gòu)造SD活性低落，DA程度升高P0.01；經(jīng)4ASANa(100，200g/kg)治療1k后，SD活性升高，DA程度低落P0.05；治療2k后，4ASA對SD活性和DA程度的影響更明顯P0.05，表2.5ASA對結(jié)腸構(gòu)造SD活性及DA程度的影響與4ASA高、低劑量組雷同.表24ASA對結(jié)腸構(gòu)造SD活性、DA程度、IL1及TNFRNA表達(dá)的影響2.34ASA對TNBS誘導(dǎo)結(jié)腸

11、炎大鼠結(jié)腸構(gòu)造IL1及TNFRNA表達(dá)的影響模子組大鼠結(jié)腸構(gòu)造IL1及TNFRNA表達(dá)較正常比擬組明顯增長P0.01；用4ASA高、低劑量治療1k后，IL1及TNF表達(dá)均低落P0.05；治療2k后IL1及TNF表達(dá)低落越發(fā)顯著P0.05，表2，圖1.5ASA組大鼠結(jié)腸構(gòu)造IL1及TNF表達(dá)也低落P0.05.4ASA高、低劑量組與5ASA組比力，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義.3討論如今關(guān)于4ASA是否具有抗氧化作用，存在著兩種差異的見解.Nielsen等11以為4ASA不是一種有用的自由基掃除劑；而Allgayer等12以為4ASA在無細(xì)胞體系中是一種活性氧掃除劑，并可按捺激活的中性粒細(xì)胞產(chǎn)生這些物質(zhì).我們

12、不雅察到，TNBS/乙醇誘導(dǎo)的結(jié)腸炎大鼠結(jié)腸構(gòu)造SD活性低落，DA程度升高；賜與4ASA灌腸治療1k后SD活性升高，DA程度低落；2k后影響更明顯，提示4ASA具有抗氧化作用.IL1是一個關(guān)鍵的促炎細(xì)胞因子，它通過激活免疫細(xì)胞級聯(lián)反響使炎癥反響加重.腹瀉是腸道炎癥的重要病癥，而IL1好似是腹瀉的重要刺激物13.高劑量IL1引起上皮細(xì)胞壞死、水腫、中性粒細(xì)胞浸潤和杯狀細(xì)胞缺失.按捺內(nèi)源性IL1的活性可緩解急性和慢性實(shí)行性結(jié)腸炎及其滿身并發(fā)癥14.TNF在TNBS誘導(dǎo)的結(jié)腸炎的發(fā)病機(jī)制中發(fā)揮緊張作用.TNF是一個具有明顯趨化活性的細(xì)胞因子，在IL1的協(xié)同作用下，使相干的酶激活包羅一氧化氮合酶、磷脂

13、酶A2、環(huán)氧化酶和卵白酶等，從而誘導(dǎo)黏附分子和其他炎性細(xì)胞因子表達(dá)，直接或間接導(dǎo)致黏膜損傷15.本研究表現(xiàn)，炎癥時(shí)大鼠結(jié)腸構(gòu)造IL1及TNFRNA表達(dá)較正常比擬組明顯增長；用4ASA治療1k后，IL1及TNF表達(dá)均低落，治療2k后IL1及TNF表達(dá)低落越發(fā)顯著，提示4ASA可按捺IL1及TNF在結(jié)腸構(gòu)造中表達(dá)，減輕結(jié)腸黏膜損害，改進(jìn)病癥.【參考文獻(xiàn)】1ShanahanF.Inflaatrybeldisease:Iundiagnstis,iuntherapeutisandetherapeutisJ.Gastrenterlgy,2001,120:622-635.2apieri,LanfranhiG

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