弓形蟲動(dòng)物模型磺胺氯吡嗪超微結(jié)構(gòu)抑制性消減雜交庫

1、精品文檔你我共享弓形蟲論文：急性弓形蟲小鼠感染模型的建立與抗動(dòng)物弓形蟲病藥物的初步篩選【中文摘要】弓形蟲病是一種重要的機(jī)會致病性人獸共患寄生蟲病, 能在人和多種哺乳動(dòng)物之間傳播。動(dòng)物感染后不但會影響生產(chǎn)性能, 還將會成為人類弓形蟲病的傳染源 , 因此 , 對該病的防治具有重要的經(jīng)濟(jì)學(xué)價(jià)值和公共衛(wèi)生學(xué)意義。 本研究通過建立急性弓形蟲小鼠感染模型后 , 進(jìn)行抗弓形蟲藥物的篩選 , 擬發(fā)現(xiàn)用于動(dòng)物弓形蟲病防治的藥物 , 并對有效藥物的抗蟲機(jī)制進(jìn)行初步研究 , 為臨床上用于治療動(dòng)物弓形蟲病提供理論依據(jù)。 1. 弓形蟲復(fù)蘇方法及蟲體毒力的摸索及急性弓形蟲小鼠感染模型的建立通過對弓形蟲株經(jīng)不同保存時(shí)間及復(fù)

2、蘇條件后對小鼠致病性的研究 , 評價(jià)蟲體保存方法。使用液氮凍存和體內(nèi)傳代法 , 摸索出了得到毒力穩(wěn)定的蟲體最佳保存時(shí)間、復(fù)蘇代次與接種劑量。在此基礎(chǔ)上 , 確立了急性弓形蟲小鼠感染模型 : 使用本實(shí)驗(yàn)室保存半年以內(nèi)的弓形蟲 RH蟲株速殖子 , 經(jīng)小鼠體內(nèi)傳代 2 次后 ,腹腔接種超過 4 000 個(gè)蟲體 / 鼠/0.2 mL(KM 系、體重 20-24 g), 將保證所有小鼠在 6-10 d 內(nèi)全部死亡。通過模型的建立 , 為后續(xù)弓形蟲蟲體生物學(xué)和藥物篩選研究奠定了基礎(chǔ)。 2. 抗弓形蟲病藥物篩選的研究鑒于目前無專用于動(dòng)物的抗弓形蟲病藥物 , 本研究擬通過選用 11 種已用于抗動(dòng) .【英文摘要

3、】 Toxoplasma gondii is a ubiquitous,apicomplexan parasite of warm-blooded animals, and is one of腹有詩書氣自華精品文檔你我共享the most common parasitic infections of humans. It can spread among humans and a variety of mammals. Infected animals will not only affect performance, but also it will become a sourceof in

4、fection humantoxoplasmosis. So, prevention and treatment of the disease has important value of economics and public health. This study constructed a model of acute toxoplasmosisin mice infected with Toxoplasma gondii and the.【關(guān)鍵詞】弓形蟲 動(dòng)物模型磺胺氯吡嗪超微結(jié)構(gòu)抑制性消減雜交庫【英文關(guān)鍵詞】 Toxoplasma gondii Animal model Sulfac

5、hloropyrazine Ultramicro-structure Suppressed subtractive hybridization【索購全文】聯(lián)系Q1：138113721Q2：139938848【目錄】急性弓形蟲小鼠感染模型的建立與抗動(dòng)物弓形蟲病藥物的初步篩選摘要 6-7Abstract7-8第一章 綜述 15-231.1 弓形蟲動(dòng)物感染模型建立的影響因素16-171.2急性動(dòng)物弓形蟲感染模型的建立17-181.3抗弓形蟲病藥物的研究進(jìn)展18-22化學(xué)合成類藥物研究進(jìn)展18-19抗生素類藥物研究進(jìn)展19-20中草藥研究進(jìn)展 20-21其他藥物及聯(lián)合用藥研究進(jìn)展21-221.4前景和

6、展望22-23第二章 不同保藏時(shí)間與復(fù)蘇代次弓形蟲對小鼠腹有詩書氣自華精品文檔你我共享致病性的研究23-282.1引言 232.2 材料與方法23-24材料 23-24方法 242.3 結(jié)果24-27液氮凍存 2 月后的弓形蟲速殖子對小鼠的致病性24-25液氮凍存 4 月后的弓形蟲速殖子對小鼠的致病性液氮凍存 6 月后的弓形蟲速殖子對小鼠的致病性25-272.4討論 27-28第三章抗弓形蟲病藥物初步篩選的研究 28-37 3.1引言 283.2 材料與方法 28-313.2.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 28 3.2.2蟲株 283.2.3 實(shí)驗(yàn)藥物 28-293.2.4實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)療效評價(jià)指標(biāo)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)分析3

7、0-313.3結(jié)果 31-35藥物對比治療實(shí)驗(yàn)結(jié)果31新增藥物對比治療初步實(shí)驗(yàn)31-32藥物不同劑量實(shí)驗(yàn)之低劑量比較32-34藥物不同劑量實(shí)驗(yàn)之高劑量比較 34-353.4討論 35-37第四章磺胺類藥物抗弓形蟲病療效實(shí)驗(yàn)研究37-434.1引言 374.2 材料與方法37-39實(shí)驗(yàn)動(dòng)物37蟲株 37藥物37-38主要試劑38實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)與試驗(yàn)方法38-394.3結(jié)果 39-41磺胺類藥物對比治療實(shí)驗(yàn)39 4.3.2 磺胺氯吡嗪不同給藥方式療效對比實(shí)驗(yàn)39-41 4.3.3巢氏 PCR 檢測存活小鼠內(nèi)臟組織評價(jià)藥物療效 414.4 討論41-43第五章磺胺氯吡嗪對弓形蟲速殖子超微結(jié)構(gòu)的影響43-4

8、8 5.1引言 43 5.2 材料與方法43-45 5.2.1 實(shí)驗(yàn)蟲株43 5.2.2實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及處理 43 5.2.3弓形蟲蟲體的復(fù)蘇及擴(kuò)增腹有詩書氣自華精品文檔你我共享43實(shí)驗(yàn)藥物43-44主要儀器44弓形蟲蟲體收集、純化及藥物處理44弓形蟲速殖子掃描電鏡觀察弓形蟲速殖子透射電鏡觀察 44-45 5.3 結(jié)果45-47掃描電鏡觀察結(jié)果45透射電鏡觀察結(jié)果45-475.4討論 47-48第六章磺胺氯吡嗪處理弓形蟲速殖子消減文庫的構(gòu)建48-636.1引言 486.2 材料與方法48-59實(shí)驗(yàn)蟲株48實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及處理48弓形蟲的復(fù)蘇擴(kuò)增48主要試劑48-49實(shí)驗(yàn)藥物主要儀器弓形蟲蟲體收集、純化及藥

9、物處理弓形蟲速殖子經(jīng)不同藥物處理后提取總RNA49-50弓形蟲速殖子 mRNA的分離50-51磺胺氯吡嗪處理的弓形蟲速殖子消減文庫的構(gòu)建51-596.3結(jié)果59-61弓形蟲速殖子總RNA 提取 59酶切結(jié)果 59-60消減文庫重組率及所插入片段長度分析60-616.4討論 61-63第七章全文總結(jié)63-64參考文獻(xiàn)64-71致謝 71-72作者簡歷72-73 出師表兩漢：諸葛亮先帝創(chuàng)業(yè)未半而中道崩殂， 今天下三分， 益州疲弊， 此誠危急存亡之秋也。然侍衛(wèi)之臣不懈于內(nèi)，忠志之士忘身于外者，蓋追先帝之殊遇，欲報(bào)之于陛下也。誠宜開張圣聽，以光先帝遺德，恢弘志士之氣，不宜妄自菲薄，引喻失義，以塞忠諫之

10、路也。宮中府中，俱為一體；陟罰臧否，不宜異同。若有作奸犯科及為忠善者，宜付有司論其刑賞，以昭陛下平明之理；不宜偏私，使內(nèi)外異法也。侍中、侍郎郭攸之、費(fèi)祎、董允等，此皆良實(shí)，志慮忠純，是以先帝簡拔以遺陛下：愚以為宮中之事，事無大小，悉以咨之，然后施行，必能裨補(bǔ)闕漏，有所廣益。腹有詩書氣自華精品文檔你我共享將軍向?qū)?，性行淑均，曉暢軍事，試用于昔日，先帝稱之曰“能 ”，是以眾議舉寵為督：愚以為營中之事，悉以咨之，必能使行陣和睦，優(yōu)劣得所。親賢臣， 遠(yuǎn)小人， 此先漢所以興隆也； 親小人， 遠(yuǎn)賢臣， 此后漢所以傾頹也。 先帝在時(shí)，每與臣論此事， 未嘗不嘆息痛恨于桓、 靈也。 侍中、尚書、 長史、 參軍，此悉貞良死節(jié)之臣，愿陛下親之、信之，則漢室之隆，可計(jì)日而待也。臣本布衣，躬耕于南陽，茍全性命于亂世，不求聞達(dá)于諸侯。先帝不以臣卑鄙，猥自枉屈，三顧臣于草廬之中，咨臣以當(dāng)世之事，由是感激，遂許先帝以驅(qū)馳。后值傾覆，受任于敗軍之際，奉命于危難之間，爾來二十有一年矣。先帝知臣謹(jǐn)慎，故臨崩寄臣以大事也。受命以來，夙夜憂嘆，恐托付不效，以傷先帝之明；故五月渡瀘，深入不毛。今南方已定，兵甲已足，當(dāng)獎(jiǎng)率三軍，北定中原