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文檔簡介

1、實驗動物的若干體能測試教學目的 1、了解動物應激反應的定義及動物體能測試的常規(guī)實驗方法 2、了解構建抗應激模型的方法和研究意義 教學內容通過對小鼠負重游泳記錄及密閉空間窒息實驗,及測量血清乳酸脫氫酶,學習動物體能測試的常規(guī)實驗方法, 探究雌雄小鼠體能是否有差異。實驗準備動物:小鼠。要求雌雄、年齡比例均衡。器材:鼠籠、電子天平、50cm30cm25cm的玻璃缸、200ml磨口廣口瓶、負重物、溫度計、秒表、冰箱、恒溫箱。藥品:鈉石灰(或等量的氫氧化鈉和碳酸鈣)、凡士林等。什么是應激反應?應激反應是機體受到各種有害刺激后產生的一種非特異性緊張反應。長期在應激狀態(tài)下生活可導致機體免疫力下降,從而產生各

2、種疾病。引起應激反應的刺激稱為應激原,外界環(huán)境中過度的暴冷或暴熱,內因中過度的驚恐、憤怒等情緒刺激均可構成應激原,使機體處于應激狀態(tài)。(一)小鼠游泳實驗根據游泳時水溫的不同,可分為常溫下游泳,水溫常調制25291;低溫下游泳,水溫可調至5151;高溫下游泳,水溫可調至39451。后兩者是游泳至疲勞,外加應激。本實驗以小鼠游泳時間為小鼠的體能的指標之一?!痉椒ā坎AЦ變燃铀?,水深20cm,水溫保持在200.5,在每只鼠尾部束其體重10%的重物,將小鼠分別放入玻璃缸內游泳,開始計時。注意觀察,當小鼠頭部沉入水中10秒中不能付出水面者即為體力耗竭,即可計時,為小鼠游泳時間。比較不同組小鼠的抗疲勞能力

3、。【注意】1.最好小鼠單只游泳,如果2只以上同時游泳,應注意觀察,不使小鼠彼此靠近,否則會影響實驗結果。2.水溫如升高至2830和小鼠負重物較輕均會使小鼠游泳時間明顯延長。(一)小鼠游泳實驗實驗前準備動物準備:小鼠器材準備:電子天平、玻璃缸、秒表負重物、溫度計、等實驗用水準備:溫水、熱水、冷水準備正式實驗在每只鼠尾部束其體重10%的重物,將小鼠分別放入玻璃缸內游泳,開始計時。注意觀察,當小鼠頭部沉入水中10秒中不能付出水面者即為體力耗竭,即可計時,為小鼠游泳時間。數據分析比較不同組小鼠的抗疲勞能力。體能恢復實驗上述小鼠休息30分后再次入水(二)小鼠耐缺氧實驗【小鼠耐常壓缺氧能力測試方法】將小鼠

4、放入盛有15g鈉石灰的廣口瓶內(每瓶只放1只小鼠),用凡士林涂抹瓶口蓋嚴,使之不漏氣,立即計時。以呼吸停止為標準,觀察小鼠因缺氧而死亡的時間。比較各組小鼠耐缺氧的能力?!咀⒁狻?.每個廣口瓶最好只放一只小鼠,以防互相擾動影響耐缺氧能力測定。2.廣口瓶一定要密封嚴格,以防漏氣,否則會影響實驗結果。3.廣口瓶容積應適當,以小鼠能自由活動為宜。4.具有靜電作用的藥物也能延長缺氧死亡時間。(二)小鼠耐缺氧實驗封口將小鼠放入盛有15g鈉石灰的廣口瓶內(每瓶只放1只小鼠),用凡士林涂抹瓶口蓋嚴,使之不漏氣,立即計時。觀察記錄以呼吸停止為標準,觀察小鼠因缺氧而死亡的時間。結果分析比較各組小鼠耐缺氧的能力。(

5、三)小鼠耐低溫和高溫實驗耐低溫實驗常將小鼠放于-5以下的低溫水箱內;耐高溫實驗則將小鼠放于451的恒溫箱內。觀察小鼠生存時間,比較不同組小鼠的存活百分率?!拘∈蟮哪秃芰y試方法】各組同時將小鼠放入-51冰箱內,開始記時,2小時后將小鼠取出,統(tǒng)計各組小鼠存活數?!咀⒁狻?.冰箱內溫度必須控制在-5左右。2.小鼠放入冰箱時應每個鼠籠只放一只小鼠,以防小鼠互相取暖影響實驗結果?!拘∈蟮哪透邷啬芰y試方法】各組同時將小鼠放入451的恒溫箱內,立即計時、并密切觀察。以呼吸停止為指標,觀察至小鼠半數死亡,取出恒溫箱內全部小鼠,統(tǒng)計各組小鼠存活情況?!咀⒁狻?.恒溫箱的溫度應恒定在451,否則會影響實驗結

6、果。2.因要觀測小鼠在恒溫箱內半數死亡時間,故每次放入恒溫箱內的小鼠數不宜過多。(三)小鼠耐低溫和高溫實驗耐寒能力測試方法各組同時將小鼠放入-51冰箱內,開始記時2小時后將小鼠取出,統(tǒng)計各組小鼠存活數。耐高溫能力測試方法各組同時將小鼠放入451的恒溫箱內,立即計時、并密切觀察。以呼吸停止為指標,觀察至小鼠半數死亡,取出恒溫箱內全部小鼠,統(tǒng)計各組小鼠存活情況實驗數據統(tǒng)計匯總實驗室所有小鼠的體能測試的數據結果,將實驗室所有小鼠按照不同特征或實驗處理(如雌雄、年齡、體重、是非給藥等)分組。計算出各組小鼠的平均游泳時間、平均耐缺氧時間,統(tǒng)計出在耐寒和耐高溫情況下,各組小鼠的存活百分率。有興趣的同學課后可以進行更進一步的統(tǒng)計處理?!局攸c】理解對實驗動物抗應激反應的體能測試中,干擾性因素的排除?!倦y點】練習小鼠的正確抓?。ㄗ龅郊葘嶒?/p>

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