氣相基礎(chǔ)知識講議

1、氣相色譜講座河南省食品藥品檢驗所2009-07-281氣相色譜講座第一章 氣相色譜基礎(chǔ) 2 氣相色譜儀裝置主要由四個部份組成： 、氣源部分， 、進樣裝置， 、色譜柱， 、檢測器和記錄器： FID（氫火焰離子化檢測器） ECD（電子捕獲檢測器） TCD（熱導(dǎo)檢測器）1、氣相色譜的分析裝置3氫氣及空氣發(fā)生器4Anglent 6890 氣相色譜儀5PE 氣相色譜儀6柱 箱 室7毛細管色譜柱82、氣相色譜的分析過程 氣相色譜首先是一種分離技術(shù)。實際工作中要分析的樣品往往是多組分的混合物。對含有未知組分的樣品，首先必須將其分離，然后才能對有關(guān)組分進行進一步的分析。 氣相色譜主要是利用物質(zhì)的沸點、極性和吸

2、附性質(zhì)的差異來實現(xiàn)混合物的分離。92、氣相色譜的分析過程氣相色譜分離過程如下圖：102、氣相色譜圖112、氣相色譜的基本原理123、氣相色譜分離常用的基本公式 a: 分離度 R = 2（t R 2 - t R 1 ）/ W 1 + W 2 tR為相鄰兩峰的保留時間 W為相鄰兩峰的峰寬 133、氣相色譜分離常用的基本公式 b：理論塔板數(shù) n = 5.54 ( tR / W h/2 )2 tR為主峰的保留時間 W h/2 為主峰的半高峰寬143、氣相色譜分離定量常用的基本公式c:外標法 含量（ C X ）= C R AX /AR CX為供試品濃度 AX為供試品峰面積 CR為對照品濃度 AR為對照品

3、峰面積 153、氣相色譜分離定量常用的基本公式d:內(nèi)標法 校正因子（f）= AS CR /CS AR 含量（ C X ）= f AX CS /AS AX為供試品峰面積 CX為供試品濃度 AR為對照品峰面積 CR為對照品濃度 AS為內(nèi)標峰面積 CS為內(nèi)標濃度16 凡是以氣相作為流動相的色譜技術(shù)，通稱為氣相色譜?？砂匆韵聨追矫娣诸悾?1按色譜柱分: 可分為填充柱和開管柱。填充柱內(nèi)要填充上一定的填料，它是“實心”的，而開管柱則是“空心”的，其固定相是附著在柱管內(nèi)壁上的。GC初期使用的都是填充柱，1958年才出現(xiàn)了毛細管柱。而毛細管柱的普遍使用則是1979年出現(xiàn)了彈性石英柱后才開始的。 4、氣相色譜的

4、分類17開管柱又常被稱為毛細管柱，但毛細管柱并不總是開管柱。事實上，毛細管柱也有填充型和開管型之分，只是人們習(xí)慣上將開管柱叫做毛細管柱而已。毛細管柱比填充柱有更高的分離效率。這是因為毛細管柱內(nèi)沒有固體填料，氣阻比填充柱小得多，故可采用較長的柱管和較小的柱內(nèi)徑，以及較高的載氣流速。4、氣相色譜的分類184、氣相色譜的分類再加上采用較薄的固定液膜又在一定程度上抵消了由于載氣流速增大而引起的傳質(zhì)阻力增大、一般來說，一根30m長的毛細管柱很容易達到100 000的總理論塔板數(shù)而根3m長的填充柱卻最多只有4 500的總柱效。194、氣相色譜的分類2按固定相狀態(tài)分： 按固定相狀態(tài)分可分為氣固色譜和氣液色譜

5、。前者采用固體固定相，其分離主要是基于吸附機理。后者則為液體固定相，分離主要基于分配機理，在實際GC分析中，90%以上的應(yīng)用為氣液色譜。 3、按進樣方式分：按進樣方式分可分為常規(guī)色譜、頂空色譜和裂解色譜等。20氣相色譜講座第二章 氣相色譜儀器 及操作 21第節(jié) 儀器的基本配置 1、氣路系統(tǒng) 包括載氣和檢測器所用氣體的氣源(氮氣、氫氣、壓縮空氣或氣體發(fā)生器，氣流管線)以及氣流控制裝置(壓力表、針型閥、電子流量計)2、進樣系統(tǒng) 其作用是有效地將樣品導(dǎo)入色譜柱進行分離，如手動進樣，自動進樣器，頂空進樣器。22第節(jié) 儀器的基本配置 3、柱系統(tǒng) : 包括柱加熱箱、色譜柱以及與進樣口和檢測器的接頭。其中色

6、譜柱本身的性能是分離成敗的關(guān)鍵。 4、檢測系統(tǒng): 用各種檢測器檢測色譜柱的流出物，如熱導(dǎo)檢測器(TCD)、火焰離子化檢測器(FID)、氮磷檢測器(NPD)、電子俘獲檢測器(ECD)等。 5、數(shù)據(jù)處理系統(tǒng) :即對GC原始數(shù)據(jù)進行處理，畫出色譜圖，并獲得相應(yīng)的定性定量數(shù)據(jù).23氣相色譜儀的氣路系統(tǒng) ，是一個載氣連續(xù)運行、管路密閉的系統(tǒng)。GC常用的氣體有：氮氣、氦氣、氫氣、壓縮空氣等，都要求使用高純度（99.99%），這是因為氣體中雜質(zhì)會使檢測器的噪聲增大，還可能對色譜柱的性能有影響，嚴重的會污染檢測器。通常這些氣體都要經(jīng)過凈化、穩(wěn)壓和控制、測量流量?？傊?，氣路系統(tǒng)關(guān)鍵的問題就是要保證氣路系統(tǒng)中各個

7、接頭部位不要漏氣。 第二節(jié) 氣路系統(tǒng) 24進樣就是有效地將分析樣品定量的加到色譜柱進行分離。進樣量的大小，進樣時間的長短，試樣氣化速度，試樣濃度等都會影響色譜分離效率，以及定量結(jié)果的準確度和重現(xiàn)性。一、氣化室溫度。氣化室的作用，是將所進樣品在此氣化室溫度下讓其瞬間氣化為蒸氣而不分解。氣化室溫度一般比柱溫高10-50即可。 第三節(jié) 進樣系統(tǒng) 25二、進樣口隔墊和襯管1、進樣口隔墊：使用時間長了有老化漏氣的問題，所以，要注意選擇適當耐高溫的隔墊，并定期檢查是否漏氣，需要時要及時更換，以保證分析的正常進行。第三節(jié) 進樣系統(tǒng)26進 樣 口27隔墊、密封墊、石英棉28第三節(jié) 進樣系統(tǒng)（隔墊）市售隔墊一般

8、有三種類型，普通型(可耐溫200)、優(yōu)質(zhì)型(可耐溫300)和高溫型(可耐溫400)。耐高溫或抗老化性能越好、壽命越長，價格就越高。常規(guī)分析實驗室(汽化溫度不超過300)選擇優(yōu)質(zhì)型隔墊就可以了，做高溫GC分析時最好用高溫型隔墊。 29第三節(jié) 進樣系統(tǒng) （襯管）2、進樣口襯管：多為玻璃或石英材料制成。這里強調(diào)幾個普遍性的問題： 30襯 管31第三節(jié) 進樣系統(tǒng) （襯管）襯管能起到保護色譜柱的作用。在分流不分流進樣時，不揮發(fā)的樣品組分會滯留在襯管中而不進入色譜柱。如果這些污染物在襯管內(nèi)積存一定量后，就會對分析產(chǎn)生直接影響。比如，它會吸附極性樣品組分而造成峰拖尾，甚至峰分裂，還會出現(xiàn)鬼峰。因此，一定要保

9、持襯管干凈，注意及時清洗和更換。32第三節(jié) 進樣系統(tǒng) （襯管）襯管中是否應(yīng)填充填料，要依具體情況而定。一般填少量經(jīng)硅烷化處理的石英玻璃毛可防止注射器針尖的歧視作用，加速樣品汽化；還可避免顆粒物質(zhì)堵塞色譜柱。33第三節(jié) 進樣系統(tǒng)（手動進樣）1手動進樣應(yīng)注意的問題： (1) 注射速度快： 注射速度慢時會使樣品的汽化過程變長，導(dǎo)致樣品進入色譜柱的初始譜帶變寬。正確注射方法是：取樣后，一手持注射器(防止汽化室的高氣壓將針芯吹出)，另一只手保護針尖 (防止插入隔墊時彎曲)，先小心地將注射針頭穿過隔墊，隨即以最快 的速度將注射器插到底，與此同時迅速將樣品注入汽化室(注意不要使針芯彎曲)，然后快速拔出注射器

10、。注射樣品所用時間及注射器在汽化室中停留的時間越短越好，且每次注射的過程越重現(xiàn)越好。 34第三節(jié) 進樣系統(tǒng)（手動進樣）(2)取樣準確而重現(xiàn) ：即取樣量要準確，抽取樣品的速度要重現(xiàn)，以保證進樣的重現(xiàn)性。特別是黏度大的樣品，要避免在注射器中形成氣泡。這跟護士打針時避免將空氣注射進體內(nèi)的道理是一樣的。也是這樣倒置注射器，使視線與針管中的液面處于同一水平上，然后推壓針芯到所需刻度。至于針尖外面粘附的一部分樣品，可用一片濾紙快速檫拭而除去(注意不能讓濾紙吸去針管內(nèi)的樣品)。35第三節(jié) 進樣系統(tǒng)（手動進樣）(3)避免樣品之間的相互干擾 ： 如果進樣時注射器內(nèi)有上一個樣 品的殘留組分，就會干擾下一個樣品的分

11、析，帶來定量誤差。在色譜 中這叫做記憶效應(yīng)，是必須消除的。具體辦法是洗針。取樣前先用樣品溶劑洗針至少3次(抽滿針管的三分之二，再排出)。再用要分析的 樣品洗針至少3次，然后取樣(多次上下抽動)，這樣基本上可消除記 憶效應(yīng)。36第三節(jié) 進樣系統(tǒng)2、自動進樣器自動進樣器實現(xiàn)了進樣量的重現(xiàn)，避免了很多人為誤差。但它的缺點就是價格比較貴。 37第四節(jié) 色譜柱系統(tǒng)色譜柱是色譜分離的心臟，應(yīng)該說是氣相色譜分析過程中最重要的組成部分。在氣相色譜分析中，某一多組份混合物能否完全分離開，主要取決于色譜柱的效能和選擇性，后者在很大程度上取決于固定相選擇是否得當。因此，固定相的選擇就成為色譜分析中的關(guān)鍵問題。38第

12、四節(jié) 色譜柱系統(tǒng)（固定相）氣相色譜固定相大致分為兩類：即液體固定相和固體固定相。而液體固定相又是由固定液和載體組成的，在氣相色譜分析中液體固定相應(yīng)用較為廣泛。39第四節(jié) 色譜柱系統(tǒng)（固定液）二、固定液的分類：按固定液的化學(xué)類型分類。1、烴類：包括烷烴和芳烴，是極性最弱的一類固定液。烷烴，常用的有角鯊?fù)?、石蠟油等，屬非極性固定液。2、醇類和醚類：是一類極性很強的固定液。聚乙二醇分子中含有醚基，故屬于氫鍵型固定液。商品名有Carbowax-20M 。40第四節(jié) 色譜柱系統(tǒng)（固定液）3、硅氧烷類：是目前使用最為廣泛的色譜固定液。屬弱極性固定液，商品名有SE-30，OV-1等。苯基硅氧烷：由于硅原子上

13、引入了苯基，故對芳香性組份溶解度增大，對極性組份保留值升高。按照引入苯基的含量（%）不同，又可分為低苯基硅氧烷如SE-52 ，中苯基硅氧烷如OV-17 ，高苯基硅氧烷如OV-25 。隨苯基的含量增高，固定液極性也增高4、酯類：是一類中強極性的固定液。包括酯類和聚酯類。如丁二酸二乙二醇酯，它含有極性和非極性基團，是線型脂肪族固定液。商品名有DEGS。41第四節(jié) 色譜柱系統(tǒng)（填充柱） (1)填充柱：內(nèi)徑24毫米，長度110米，常用13米柱?？捎刹讳P鋼、玻璃和聚四氟乙烯管制成。因玻璃柱價格便宜，透明，便于觀察到填充的固定相分布狀態(tài)，光滑易于填充成密實的高效柱，故較常用。 42第四節(jié) 色譜柱系統(tǒng)（填充

14、柱）要制備一根分離效能較高的色譜柱，必須把載體涂上一層薄而均勻的液膜，再把涂好的固定相均勻而緊密地填充到色譜柱中 。由于目前市場上已有涂漬好的各種類型的固定相商品，我們只需要買來自已裝一下柱子就成了。43第四節(jié) 色譜柱系統(tǒng)（毛細管柱）四、毛細管色譜柱的類型與選擇：毛細管色譜柱，內(nèi)徑0.20.8毫米，長度30300米，其柱材料大多用熔融石英，即所謂彈性石英柱。柱內(nèi)徑越小，分離效率越高，但細的色譜柱柱容量小，容易超載。就常規(guī)分析來說，0.20-0.32mm內(nèi)徑的毛細管柱沒有太大差別。大口徑柱（0.53mm）是一類特殊的毛細管柱，它的液膜厚度一般較大，故有較大的柱容量，不少人傾向于用大口徑柱替代填充

15、柱。大口徑柱的局限性可能是柱成本較填充柱高。 44第四節(jié) 色譜柱系統(tǒng)（毛細管柱）毛細管柱的選擇原則同填充柱。一般來說，有這樣四根柱子：OV-1，SE-54，OV-17，PEG-20M，就可以應(yīng)付95%的GC分析任務(wù)。所以，我們建議有GC色譜儀的實驗室起碼要購置這幾根毛細管柱。下表為不同廠商毛細管色譜柱的牌號對照?，F(xiàn)在市場上的毛細管柱多為固定液交聯(lián)的色譜柱，熱穩(wěn)定性好。 45第四節(jié) 色譜柱系統(tǒng)（毛細管柱）46第四節(jié) 色譜柱操作注意事項1、色譜柱安裝：當把毛細管柱安裝在色譜儀上時，需要將其兩端分別與進樣口和檢測器相連接。原理都是用一個石墨密封墊，通過接頭壓緊而達到固定和密封的目的。安裝時將石墨墊套

16、在柱頭后，應(yīng)將柱頭截去l2cm。儀器帶有專門的柱切割器，在柱管上輕輕劃一下，然后用手別斷。這樣做可以保證柱端是整潔的，又避免了柱頭污染物對分析的干擾。 47第四節(jié) 色譜柱操作注意事項第二，柱端伸出密封墊的長度，不同儀器有不同的規(guī)定，應(yīng)嚴格按儀器說明書規(guī)定。檢測器一端則是柱出口盡量接近檢測點（如FID的火焰），以避免死體積造成的柱外效應(yīng)。 第三，接頭不要擰得太緊，以免將色譜柱壓裂或壓碎。原則上每次安裝色譜柱都要用新的石墨墊，不過同一色譜柱拆下再安裝，可重復(fù)使用石墨墊，但重復(fù)使用的次數(shù)不要超過3次，否則會失去密封性。 48第四節(jié) 色譜柱的維護色譜柱在使用時，要輕拿輕放，防止斷裂。當開GC儀器時，一

17、定要記住先開載氣，如在沒有載氣流動的情況下，在較高溫度下加熱色譜柱，很短的時間內(nèi)就可使色譜柱報廢。 49第四節(jié) 色譜柱的維護安裝新色譜柱后，都要在進樣前進行老化。老化方法是：先接通載氣，然后將柱溫從50左右以5-10min的速率程序升溫到色譜柱的最高使用溫度以下30，并在高溫時恒溫30-120分鐘。當色譜柱內(nèi)殘留一些高沸點組分時，這時基線可能出現(xiàn)波動或出鬼峰。解決此問題的辦法也是老化。 50第四節(jié) 色譜柱的維護暫時不用的色譜柱從儀器上卸下后，柱兩端應(yīng)當用一塊硅橡膠墊堵上。每次關(guān)機前都應(yīng)將柱溫箱溫度降到100以下，然后再關(guān)電源和載氣。溫度高時切斷載氣，可能會因空氣（氧化）擴散進入柱管中而造成固定

18、液的氧化降解。每次新安裝了色譜柱都應(yīng)當記著重新設(shè)定柱子的最高使用溫度。當超過了柱子的最高使用溫度時，儀器會自動停止柱溫箱加熱。以確保柱溫箱溫度不超過色譜柱的最高使用溫度，對色譜柱起到保護作用。 51第四節(jié) 色譜柱的修理色譜柱壽命完結(jié)的主要標志是固定液流失太多而失去了分離能力。柱管堵塞或斷裂也是導(dǎo)致色譜柱失效的原因。當色譜柱分離能力不好時，可先用在高溫下老化柱子的辦法，用載氣將污染物沖洗出來。若這樣柱效仍不能恢復(fù)時，可將柱頭載去10cm或更長，因為柱頭是最容易被污染的地方，再安裝上測試。這是常用的柱性能恢復(fù)措施。如還不起作用，修復(fù)就比較麻煩了。如色譜柱不小心斷裂了，那修理就更不容易，所以在使用時

19、要盡量注意上面我們講到的一些注意事項，以延長色譜柱的使用壽命。 52第五節(jié) 檢測器系統(tǒng) 如果說色譜柱是色譜分離的心臟，那么檢測器就是色譜儀的眼睛。無論色譜峰分離的效果多么好，若沒有好的檢測器就“看” 不到分離結(jié)果。因此，高靈敏度、高選擇性的檢測器一直是色譜儀發(fā)展的關(guān)鍵技術(shù)。53第五節(jié) 檢測器系統(tǒng)藥品檢驗中最常用的是FID和ECD檢測器。下面我們分別介紹。FID檢測器：是利用氫火焰作電離源，使有機物電離，產(chǎn)生微電流而響應(yīng)的檢測器。它突出的優(yōu)點是對幾乎所有的有機物均有響應(yīng)，特別是對烴類靈敏度高且響應(yīng)與碳原子數(shù)成正比。它對水、二氧化碳、和二硫化碳等無機物不敏感。主要缺點是需要三種氣源及流速控制系統(tǒng)。

20、54第五節(jié) 檢測器系統(tǒng)ECD檢測器：是靈敏度最高的氣相色譜檢測器，同時也是最早出現(xiàn)的選擇性檢測器。它僅對含有電負性比較大的元素的化合物敏感，如鹵代烴，含N、O和S等雜原子的化合物有響應(yīng)。主要用于有機氯農(nóng)藥殘留檢查。 55 FID使用注意事項（1） FID是用氫氣和空氣中燃燒所產(chǎn)生的火焰使被測物質(zhì)離子化的，故應(yīng)注意安全問題。在未接上色譜柱時，不要打開氫氣閥門，以免氫氣漏入柱溫箱中，發(fā)生爆炸。同理，在卸色譜柱前，要檢查一下，氫氣是否已關(guān)。提示：在卸換色譜柱時，最好是在未開機的情況下卸換。56 FID使用注意事項（3） FID的靈敏度與氫氣、空氣和氮氣的比例有直接關(guān)系，因此要注意優(yōu)化。一般三者的比例

21、應(yīng)接近或等于1：10：1 ，如氫氣30-40ml/min ，空氣300-400ml/min ，氮氣30-40ml/min 。57 FID使用注意事項（4） 為防止檢測器被污染，檢測器溫度設(shè)置不應(yīng)低于色譜柱實際工作的最高溫度，F(xiàn)ID溫度設(shè)定一般都大于150。一旦檢測器被污染，輕則靈敏度明顯下降或噪聲增大，重則點不著火。消除污染的辦法是清洗，主要是清洗噴嘴表面和氣路管道。 58第七節(jié) 氣相色譜工作者的良好習(xí)慣（1）按儀器說明書規(guī)程操作：認真閱讀有關(guān)說明書，嚴格按操作規(guī)程操作。這是做好儀器分析的前提條件。（2）及時更換毛細管柱密封墊： 石墨密封墊漏氣是GC最常見的故障之一。一定不要在不同的柱上重復(fù)使

22、用同一密封墊。如果裝上色譜柱后發(fā)現(xiàn)漏氣再來更換密封墊，就要花費更多的時間。59第七節(jié) 氣相色譜工作者的良好習(xí)慣（3）使用高純度的氣體：載氣一定要用高純級的，以避免干擾分析和污染色譜柱或檢測器。（4）使用性能可靠的壓力調(diào)節(jié)閥：裝在鋼瓶上的減壓閥一 定要用質(zhì)量好的。有些新閥也會有漏氣的情況，所以，經(jīng)常檢漏，隨時發(fā)現(xiàn)問題是一個好的習(xí)慣。60第七節(jié) 氣相色譜工作者的良好習(xí)慣（5）定期更換進樣口隔墊： 進樣口隔墊漏氣是另一個GC常見故障。儀器若有自動檢漏功能當然好一些，但也不能保證發(fā)現(xiàn)微小的漏氣，更別說無自動檢漏功能 的儀器了。隔墊使用太久，隔墊的老化降解也會給分析帶來干擾。比如其碎屑掉進汽化室內(nèi)就可能

23、導(dǎo)致鬼峰。 61第七節(jié) 氣相色譜工作者的良好習(xí)慣至于多長時間換一次隔墊，則要看所分析的樣品性質(zhì)和分析條件而定。無論如何，一個隔墊的連續(xù)使用時間不要超過一周。（6）及時清洗注射器：干凈的注射器能避免樣品的交叉干擾。更換樣品時要清洗。一支注射器暫時不用時(比如下班)，更要徹底清洗，否則殘留在其中的樣品可能將針芯粘牢，造成注射器報廢。使用自動進樣器的用戶也應(yīng)注意此間題，最好是經(jīng)常更換和清洗注射器。62第七節(jié) 氣相色譜工作者的良好習(xí)慣（7）定期檢查并清洗進樣口襯管： 儀器長期使用后，會發(fā)現(xiàn)襯管內(nèi)積有焦油狀物質(zhì)，這是樣品中的不揮發(fā)成分造成的。此外還會有顆粒狀物質(zhì)積存(隔墊碎屑、樣品中的固體物質(zhì))，這些都

24、會干擾分析的正常進行。因此要定期檢查，及時清洗。（8）保留完整的儀器使用記錄： 這是儀器的履歷，應(yīng)逐日記錄，包括操作者、分析樣品及條件、儀器工作狀態(tài)等。一旦儀器出現(xiàn)問題，這是查找原因的重要資料。63氣相色譜講座第三章 其 它64第一節(jié) 程序升溫氣相色譜法 程序升溫是重要的色譜技術(shù)之一。一臺較好的色譜儀大都帶有 程序升溫控制器，使其應(yīng)用范圍更廣。 氣相色譜過程中，如試驗時柱溫是固定不變的，叫恒溫色譜。對于一個分析樣品，各組份都有一個最佳柱溫，在填充柱上，大約在組份的沸點左右，在毛細管柱上，大約比沸點低50左右為最佳柱溫。如果樣品組份較少，沸點范圍不大，一般都采用恒溫操作，效果良好65第一節(jié) 程序

25、升溫氣相色譜法但是對于沸程很寬，組份數(shù)目較多的樣品，柱溫只能選在其平 均沸點左右。顯然這是一種折衷辦法。而所選擇的柱溫對于大部分 組份，不是太高就是太低。其結(jié)果是低沸點組份因柱溫太高很快流 出，色譜峰重疊，緊擠在一起，分不開。而高沸點組份則因柱溫太低，流出時間很長，峰很寬且矮平，有的甚至在一次分析中不能流出，而在隨后的分析中作為基線噪音出現(xiàn)，或作為無法說明的“鬼峰”出現(xiàn)，增加了測量、鑒定的困難。 66第一節(jié) 程序升溫氣相色譜法程序升溫色譜法主要的特點和優(yōu)點就是通過選擇適當?shù)纳郎厮俾剩垢邷睾偷蜏氐某煞侄极@得良好的分離和漂亮的峰形，縮短總分析時間。67第二節(jié) 頂空氣相色譜法一、頂空氣相色譜的概

26、念：頂空氣相色譜(GC headspace Analysis)是指對液體或固體中的揮發(fā)性成分進行氣相色譜分析的一種間接測定法，它是在熱力學(xué)平衡的蒸氣相與被分析樣品同時存在于一個密閉系統(tǒng)中進行的。例如測定血液中的乙醇，把血樣置于一個密閉恒溫的樣品瓶中，測定恒溫后樣品瓶蒸氣相中的乙醇濃度，通過校準曲線計算血樣中的乙醇含量。這一方法從氣相色譜儀角度講，是一種進樣系統(tǒng)，即“頂空進樣系統(tǒng)”。68第二節(jié) 頂空氣相色譜法 頂空氣相色譜分析用一個簡單的玻璃瓶就可以進行分析，要求的全部條件只是兩相(液-氣，或固-氣)間達到平衡，以及在取樣時仍能保持這種平衡。但一般來講作定量分析時在每個頂空瓶中只能取一次樣。如果

27、再取第二次，結(jié)果就會不同于第一次的分析結(jié)果，這是因為第一次取樣后樣品組成已經(jīng)發(fā)生了變化。這就是靜態(tài)頂空氣相色譜分析的缺點，即在日常分析時要處理大量的玻璃器皿，另外要達到平衡就要有一定的等待時間。69頂空玻璃瓶70頂空裝置71頂空裝置72第三節(jié) 殘留溶劑測定法在殘留溶劑測定中我們常采用靜態(tài)頂空這種進樣方式。藥品中的殘留溶劑系指在原料藥或輔料的生產(chǎn)中，以及在制劑制備過程中使用的，但在工藝過程中未能完全去除的有機溶劑 。73第三節(jié) 殘留溶劑測定法藥品中常見的殘留溶劑分為四類。第一類溶劑（應(yīng)該避免使用）：共5種。如苯、四氯化碳等。第二類溶劑（應(yīng)該限制使用）：共27種。如甲醇、三氯甲烷，乙二醇等。74第

28、三節(jié) 殘留溶劑測定法第三類溶劑（藥品GMP或其它質(zhì)量要求限制使用）：共27種。如丙酮、乙醇、乙酸乙酯等。第四類溶劑（尚無足夠毒理學(xué)資料）：共10種。如石油醚、三氯醋酸等。75第三節(jié) 殘留溶劑測定法在附錄 P 殘留溶劑測定法中共收載69種殘留有機溶劑及其限度規(guī)定，在附表1中可查看。維生素C中甲醇量測定，可用內(nèi)標法，正丙醇作內(nèi)標物質(zhì)。也可用外標法測定。76第四節(jié) 試 驗 舉 例在殘留溶劑測定中我們常采用靜態(tài)頂空這種進樣方式。如2004二部藥典增補本收載品種鹽酸左氧氟沙星測定二氯甲烷和甲苯殘留量就是用靜態(tài)頂空氣相色譜進樣分析的。見試驗附圖。77鹽酸左氧氟沙星甲苯與二氯甲烷測定色譜條件：進樣口溫度：1

29、50，檢測器溫度 ：180 ，柱溫：40保持3分20/min升溫至150保持3分。理論板數(shù): 按甲苯與二氯甲烷峰計算均應(yīng)不低于 10000。分離度：分離度應(yīng)大于 1.5標準規(guī)定：甲苯、二氯甲烷的含量分別不得過0.089%與0.06% 78鹽酸左氧氟沙星甲苯與二氯甲烷測定內(nèi)標溶液的制備：精密稱取無水乙醇適量，加水制成每1ml中含0.1mg的溶液作為內(nèi)標溶液。對照溶液的制備：分別取甲苯、二氯甲烷適量，精密稱定，加內(nèi)標溶液制成每1ml中含甲苯0.089mg與二氯甲烷0.06mg的溶液，作為對照溶液。供試品溶液的制備：取本品適量，精密稱定，加內(nèi)標溶液制成每1ml中約含100mg的溶液,作為供試品溶液。

30、測定法：分別精密量取供試品溶液及對照溶液5ml，分置20ml頂空瓶中，密封，85平衡30分鐘，取樣注入氣相色譜儀，記錄色譜圖；按內(nèi)標法以峰面積比值計算，即得。79鹽酸左氧氟沙星甲苯與二氯甲烷測定色譜圖80第四節(jié) 試 驗 舉 例順便我們也附上常規(guī)進樣或稱直接進樣方法的試驗舉例。如二部藥典收載品種復(fù)方地塞米松乳膏中樟腦、薄荷腦的測定以及一部藥典收載品種冰片中冰片的含量測定等。見試驗附圖。81冰片（合成龍腦）含量測定 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗 以聚乙二醇（PEG）-20M為固定相，涂布濃度為10%；柱溫為140。理論板數(shù)按龍腦峰計算應(yīng)不低于1900。標準規(guī)定：本品含龍腦（C10H18O）不得少于55

31、.0%。 82冰片（合成龍腦）含量測定校正因子測定：取水楊酸甲酯適量，精密稱定，加醋酸乙酯制成每1ml含5mg的溶液，作為內(nèi)標溶液。另取龍腦對照品50mg，精密稱定，置10ml量瓶中，加內(nèi)標溶液溶解并稀釋至刻度，搖勻，吸取1l，注入氣相色譜儀，計算校正因子。 測定法：取本品約50mg，精密稱定，置10ml量瓶中，用內(nèi)標溶液溶解并稀釋至刻度，搖勻，吸取1l，注入氣相色譜儀，測定，即得。 83冰片含量測定色譜圖84第五節(jié) 試驗中常遇到的問題排除方法 可能的原因及應(yīng)采用的排除方法一、不出峰1.注射器有毛病，用新注射器驗證。2.未接入檢測器，或檢測器不起作用，檢查設(shè)定值3.汽化室溫度太低，樣品不能汽化

32、，檢查溫度，升高汽化溫度4.柱箱溫度太低，檢查溫度，并根據(jù)需要調(diào)整85第五節(jié) 試驗中常遇到的問題排除方法5.無載氣流，檢查壓力調(diào)節(jié)器，并檢查泄漏，若載氣管路堵塞，需疏通管路，若載氣鋼瓶氣用盡，則更換鋼瓶。6.柱斷裂，如果柱斷裂是在柱進口端或檢測器末端，是可以補救的，切去柱斷裂部分，重新安裝7、檢測器、放大器或記錄器電源開關(guān)未開或引線脫落。打開電源或把引線接好。8、氫焰滅火，重新點火86第五節(jié) 試驗中常遇到的問題排除方法二、前沿峰1.柱超載，減少進樣量2.兩個化合物共洗脫，提高靈敏度和減少進樣量，使溫度降低10-20度，以使峰分開3.樣品冷凝，檢查進樣口和柱溫，如有必要可升溫4.樣品分解，采用失活化進樣器襯管或調(diào)低進樣器溫度87第五節(jié) 試驗中常遇到的問題排除方法三、拖尾峰1.進樣器襯管或柱吸附活性樣品：更換襯管。如不能解決問題，就將柱進氣端