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1、檢驗(yàn)標(biāo)本的采集與保存第1頁(yè),共60頁(yè),2022年,5月20日,5點(diǎn)54分,星期四 前言 臨床檢驗(yàn)的目的是為臨床提供準(zhǔn)確可靠的實(shí)驗(yàn)診斷數(shù)據(jù),為了保證實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的可靠性,在檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)中必須堅(jiān)持全面質(zhì)量控制(total quality control,TQC),全過(guò)程質(zhì)控包括實(shí)驗(yàn)前、實(shí)驗(yàn)中、實(shí)驗(yàn)后三個(gè)階段的質(zhì)量控制。在實(shí)驗(yàn)誤差中實(shí)驗(yàn)前誤差占總誤差的70%左右,應(yīng)引起醫(yī)務(wù)工作者的重視。第2頁(yè),共60頁(yè),2022年,5月20日,5點(diǎn)54分,星期四臨床對(duì)檢驗(yàn)科的要求準(zhǔn)確-結(jié)果準(zhǔn)確,恒定的準(zhǔn)確及時(shí)-回報(bào)和信息反饋及時(shí)有用-對(duì)治療或診斷有幫助第3頁(yè),共60頁(yè),2022年,5月20日,5點(diǎn)54分,星期四送檢程序驗(yàn)檢
2、申請(qǐng)標(biāo)本采集分析前處理申請(qǐng)單提出采樣,運(yùn)送接收,編排,處理第4頁(yè),共60頁(yè),2022年,5月20日,5點(diǎn)54分,星期四橋梁-紐帶醫(yī),護(hù),技三者關(guān)系:醫(yī)生護(hù)士技師第5頁(yè),共60頁(yè),2022年,5月20日,5點(diǎn)54分,星期四送檢過(guò)程(樣本采集)采樣要求:時(shí)間,部位,狀況,體位,飲食,容器,添加劑及用量;運(yùn)送要求:采樣后處理,保存條件,運(yùn)送條件,送達(dá)時(shí)間;標(biāo)本信息:采樣時(shí)間,特殊狀況記錄第6頁(yè),共60頁(yè),2022年,5月20日,5點(diǎn)54分,星期四 一 生物學(xué)因素的影響及其控制第7頁(yè),共60頁(yè),2022年,5月20日,5點(diǎn)54分,星期四年齡:新生兒,乳酸脫氧酸(LD)、蘋果酸脫氫酶(MD)(成人12-
3、50U/L)異檸檬酸脫氫酶(ICD)(成人:238-686U/L)高于成人2-3倍,以ALP和ACP為例隨年齡增長(zhǎng)其結(jié)果發(fā)生的變化見表1:第8頁(yè),共60頁(yè),2022年,5月20日,5點(diǎn)54分,星期四表1:不同年齡組血清磷酸酶的活性(U/L )年齡 ALP ACP新生兒 35-105 3-6一個(gè)月 70-250 6.5-111-3歲 70-210 6.5-113-10歲 70-180 3.5-910-16歲 100-275 3-10成人 21-92 5.5第9頁(yè),共60頁(yè),2022年,5月20日,5點(diǎn)54分,星期四2.妊娠的影響妊娠:妊娠期由于胎兒的生長(zhǎng)發(fā)育影響,其血漿生化指示變化見表2第10頁(yè)
4、,共60頁(yè),2022年,5月20日,5點(diǎn)54分,星期四表2:妊娠期主要血漿變化指標(biāo)及其機(jī)制機(jī)制變化血漿運(yùn)輸?shù)鞍籽合♂岓w重及代謝增加凝血系統(tǒng)機(jī)能需要增加造成相對(duì)缺乏CRP甲狀腺素脂類、銅和鐵蛋白質(zhì)量TP,ALB降低腎小球?yàn)V過(guò)率、肌酐清除率上升凝血因子活性 PT、APTTFIB 鐵、鐵蛋白缺乏血沉加快第11頁(yè),共60頁(yè),2022年,5月20日,5點(diǎn)54分,星期四3.飲食的影響(1)進(jìn)食:血清中多數(shù)酶不受飲食影響,對(duì)ALP、AST影響較大,ALP增加20%,AST增加50%,TG增加50%,SB、P增加15%,ALT,K+增加40%,TP、ALB、BUN、Ca、T-ch增加50%左右,尤其是采血的
5、前一天晚上暴飲暴食,對(duì)很多結(jié)果會(huì)產(chǎn)生明顯的影響,主要影響生化儀的比色系統(tǒng)第12頁(yè),共60頁(yè),2022年,5月20日,5點(diǎn)54分,星期四3.飲食的影響(2)饑餓:48小時(shí)可使膽紅素升高24%,做糖耐量試驗(yàn)前3天內(nèi),飲食中碳水化合物不得少于300g/日,否則糖耐量曲線可能偏高;還可使TG,TC,TP,apo,BUN降低,Cr,UA 升高。第13頁(yè),共60頁(yè),2022年,5月20日,5點(diǎn)54分,星期四3.飲食的影響(3)飲酒:飲酒可引起血清谷氨酸脫氫酶(GLD)、亞鐵氧化酶(CP)AST、ACT、 UA,乳酸,r-GT升高,降低GLU;長(zhǎng)期大量飲酒使AST升高40%,ALT20%、r-GT52-75
6、%、CK43%。第14頁(yè),共60頁(yè),2022年,5月20日,5點(diǎn)54分,星期四4.運(yùn)動(dòng)的影響原因:出汗和激素濃度變化 GLU, WBC, CK, CKMB, UA, Cr升高,可在數(shù)日內(nèi)消失。劇烈運(yùn)動(dòng)可使脂肪酸迅速下降,繼爾升高,丙酮酸、乳酸升高300%,PCO2下降,pH升高。而劇烈肌肉運(yùn)動(dòng)可使血清中多種酶活性增高,以健康人劇烈運(yùn)動(dòng)后,休息時(shí)間酶活性變化為例,ALT在2小時(shí)最先增高,CK在11小時(shí)達(dá)到峰值(正常值10-180U/L)增高達(dá)116%,CK最高可達(dá)7000U/L,持續(xù)60小時(shí)后才恢復(fù)正常,AST在5小時(shí)增加41%第15頁(yè),共60頁(yè),2022年,5月20日,5點(diǎn)54分,星期四采血時(shí)
7、間的選擇應(yīng)在何時(shí)采樣?上次采樣后多長(zhǎng)時(shí)間?一天內(nèi)的什么時(shí)間?上次飲食后多長(zhǎng)時(shí)間?服藥后多長(zhǎng)時(shí)間?第16頁(yè),共60頁(yè),2022年,5月20日,5點(diǎn)54分,星期四采血時(shí)間的選擇K 上午比下午低;T3夏季比冬季低;V-D3在夏季較高;SB,Fe清晨最高,血C a中午最低。第17頁(yè),共60頁(yè),2022年,5月20日,5點(diǎn)54分,星期四表3:部分檢驗(yàn)指標(biāo)的晝夜變化檢驗(yàn)指標(biāo)峰值期(H)低值期(H)增加幅度%促腎上腺皮質(zhì)激素腎上腺皮質(zhì)激素睪酮促甲狀腺激素催乳素醛固酮血管緊張素血紅蛋白鐵鉀白細(xì)胞計(jì)數(shù)6-105-82-420-25-72-40- 66-1014-1814-1614-200- 421-320-24
8、7-1310-1212-1410-1222-242-423-14-10150-200180-20030-505-1580-10060-80120-1408-1550-705-1050-100第18頁(yè),共60頁(yè),2022年,5月20日,5點(diǎn)54分,星期四采血方式的選擇止血帶的使用:止血帶的使用不當(dāng),會(huì)影響某些指標(biāo)的濃度;使用時(shí)間過(guò)長(zhǎng): Alb,Ca,ALP,AST等510%,BUN;PH;細(xì)胞內(nèi)K外移,引起假性增高;病人反復(fù)攥拳會(huì)使血K上升0.8mmol/L.建議:止血帶使用應(yīng)少于1分鐘!第19頁(yè),共60頁(yè),2022年,5月20日,5點(diǎn)54分,星期四采血方式的選擇體位的變化 坐位與臥位相比,靜脈
9、滲透壓增加; 臥位:血容量相對(duì)較大,血液中物質(zhì) 被稀釋,濃度下降。建議:為使檢驗(yàn)結(jié)果具有可比性,應(yīng)統(tǒng)一采血體位,保證血液相對(duì)平衡。第20頁(yè),共60頁(yè),2022年,5月20日,5點(diǎn)54分,星期四對(duì)檢驗(yàn)有影響的治療和操作手術(shù):CRP,Alb,CK,BUN.輸液和輸血:Hb,K,LDH.穿刺,活檢,注射,觸診,全身按摩內(nèi)窺鏡第21頁(yè),共60頁(yè),2022年,5月20日,5點(diǎn)54分,星期四對(duì)檢驗(yàn)有影響的治療和操作透析體能應(yīng)激測(cè)力,負(fù)荷訓(xùn)練,心電圖安慰劑,藥品精神緊張: 改變激素水平,Alb,GlU,FC,TC第22頁(yè),共60頁(yè),2022年,5月20日,5點(diǎn)54分,星期四標(biāo)本種類血液:全血,血漿,血清;尿
10、液:晨尿,隨機(jī)尿,24h尿,餐 后尿體液:腦脊液,胸腹水,胃液大便:晨便,隨機(jī)便其它第23頁(yè),共60頁(yè),2022年,5月20日,5點(diǎn)54分,星期四檢驗(yàn)?zāi)康?生化 微生物 常規(guī) 特檢 免疫第24頁(yè),共60頁(yè),2022年,5月20日,5點(diǎn)54分,星期四對(duì)標(biāo)本的要求,取決于檢驗(yàn)?zāi)康牡?5頁(yè),共60頁(yè),2022年,5月20日,5點(diǎn)54分,星期四、細(xì)胞內(nèi)外液中化學(xué)成份的變化靜脈血與毛細(xì)管血的區(qū)別:毛細(xì)管中葡萄糖高于靜脈血,而乳酸及丙酮酸靜脈血高于毛細(xì)血管血。靜脈血葡萄糖可與毛細(xì)血管血差別22%,其他變化不明顯。全血與血漿的區(qū)別:只有RBC中待測(cè)物濃度與血漿中相似時(shí)才可以用全血分析,血漿中含水約93%,全
11、血中含水約81%,某些溶于水的物質(zhì)如GLU、BUN,血漿會(huì)比全血高,紅細(xì)胞壓積顯著升高者,其差別會(huì)更大。第26頁(yè),共60頁(yè),2022年,5月20日,5點(diǎn)54分,星期四血液標(biāo)本的采集-一般原則1.用血清/選擇合適的抗凝劑;2.避免用溶血標(biāo)本;3.不用脂血;4.空腹1214小時(shí);第27頁(yè),共60頁(yè),2022年,5月20日,5點(diǎn)54分,星期四血液標(biāo)本的采集-5.在輸液和治療前采血/最早在停止輸液后1小時(shí)采血;6.盡可能在上午79點(diǎn)采樣;7.輸入脂肪乳和營(yíng)養(yǎng)制劑,應(yīng)在8小時(shí)以后采血;8.在病歷和申請(qǐng)單上記錄樣本采集的準(zhǔn)確時(shí)間第28頁(yè),共60頁(yè),2022年,5月20日,5點(diǎn)54分,星期四溶血的影響1.細(xì)
12、胞內(nèi)外成分不同;K,LDH,ACP,AST2.溶血產(chǎn)生的色素干擾測(cè)定;特別干擾波長(zhǎng)300-500nm物質(zhì)顯色的測(cè)定;3.細(xì)胞內(nèi)某些酶的釋放,參與反應(yīng)。第29頁(yè),共60頁(yè),2022年,5月20日,5點(diǎn)54分,星期四溶血的分類顯性: 肉眼可見,Hb可達(dá)20mg/dl;隱性: PLT,WBC被破壞,Hb 未釋放,可使K,ACP,Mg升高第30頁(yè),共60頁(yè),2022年,5月20日,5點(diǎn)54分,星期四4.臨床化學(xué)指標(biāo)在紅細(xì)胞和血漿中濃度的差異項(xiàng)目單位 紅細(xì)胞 血漿 紅細(xì)胞/血漿LDACPASTALTKMgCrCO2NaClU/L 58000 360 600U/L 200 3.0 67.0U/L 1000
13、 25 40.0U/L 167 25 6.7mmol/L 100 4.4 22.7mmol/L 5.0 2.2 2.4mmol/L 159 97.2 1.6mmol/L 19.0 26.0 0.78mmol/L 16.0 140 0.11mmol/L 52.0 104 0.55第31頁(yè),共60頁(yè),2022年,5月20日,5點(diǎn)54分,星期四溶血的原因1.采血后血從注射器快速注入試管,2.混勻含添加劑的試管時(shí)用力過(guò)猛;3.定位不準(zhǔn),采血不順;4.止血帶使用時(shí)間過(guò)長(zhǎng),血管內(nèi)溶血;第32頁(yè),共60頁(yè),2022年,5月20日,5點(diǎn)54分,星期四溶血的原因5.血液與抗凝劑比例不當(dāng);6.采血點(diǎn),器具不潔;7
14、.采血過(guò)程有空氣進(jìn)入;8.全血放置時(shí)間太長(zhǎng);9.離心力過(guò)大。第33頁(yè),共60頁(yè),2022年,5月20日,5點(diǎn)54分,星期四防止溶血的建議標(biāo)準(zhǔn)化操作 正確和合理使用抗凝劑!第34頁(yè),共60頁(yè),2022年,5月20日,5點(diǎn)54分,星期四脂血的干擾產(chǎn)生原因 高蛋白飲食 空腹時(shí)間不夠 輸入脂肪乳及營(yíng)養(yǎng)制劑;干擾機(jī)制 脂類取代水, 濁度干擾,光吸收增加,第35頁(yè),共60頁(yè),2022年,5月20日,5點(diǎn)54分,星期四正確使用抗凝劑目的:需血漿或全血特別注意: 種類 劑量 比例:多血球破裂 少-部分凝集第36頁(yè),共60頁(yè),2022年,5月20日,5點(diǎn)54分,星期四不抗凝血標(biāo)本的采集普通生化 肝炎類激素,腫瘤
15、標(biāo)志物第37頁(yè),共60頁(yè),2022年,5月20日,5點(diǎn)54分,星期四血液標(biāo)本的采集-生化檢驗(yàn)特殊生化檢測(cè):蛋白電泳-必須用血清-不得反復(fù)凍溶;血氨-置于無(wú)氨的玻璃器皿中,放于冰水中,快速送檢;乳酸-用全血或血漿,不可用止血帶;血?dú)夥治?采集動(dòng)脈血2.0ml,肝素抗凝;第38頁(yè),共60頁(yè),2022年,5月20日,5點(diǎn)54分,星期四血液標(biāo)本的采集-生化檢驗(yàn)特殊生化檢測(cè)糖耐量:按要求抽5次空腹,30,60,120,180-普通管肌酐廓清:留24小時(shí)尿,同時(shí)抽血2.0ml。第39頁(yè),共60頁(yè),2022年,5月20日,5點(diǎn)54分,星期四選擇合適的抗凝劑血常規(guī):EDTA-Na2/EDTA-K2:靜脈采血2
16、.0ml;血沉:枸櫞酸鈉抗凝,采血1.6ml.(蔗糖水試驗(yàn)同)酸溶血(Hams)試驗(yàn):普通管2ml.(查狼瘡細(xì)胞,24小時(shí)血塊退縮同)堿性磷酸酶(AKP)積分:送化驗(yàn)單!第40頁(yè),共60頁(yè),2022年,5月20日,5點(diǎn)54分,星期四選擇合適的抗凝劑血凝及血栓分析(包括D-二聚體):枸櫞酸鈉/檸檬酸鈉空腹采血4.0ml,4小時(shí)內(nèi)測(cè)定;血流變:肝素抗凝,空腹采血4.5ml,2小時(shí)內(nèi)作完;細(xì)菌培養(yǎng):取靜脈血510ml,以無(wú)菌手續(xù)立即注入專用培養(yǎng)瓶,輕輕搖勻,立即送檢保溫!第41頁(yè),共60頁(yè),2022年,5月20日,5點(diǎn)54分,星期四選擇合適的抗凝劑流式細(xì)胞項(xiàng)目 一般要求:EDTA-K3抗凝,采血0.
17、52ml;6h內(nèi)測(cè)完-冷藏保存。活化血小板分析:不扎止血帶,棄去前1.0ml血,輕搖勻后立即送檢。第42頁(yè),共60頁(yè),2022年,5月20日,5點(diǎn)54分,星期四標(biāo)本的保存及運(yùn)輸標(biāo)本處置不當(dāng),可因血細(xì)胞的代謝,蒸發(fā),化學(xué)反應(yīng),微生物降解,滲透壓改變,氣體逸散等,使某些指標(biāo)發(fā)生變化; Glu,CO2:降低; K,TP,Cl:升高; SB,CK被光分解。第43頁(yè),共60頁(yè),2022年,5月20日,5點(diǎn)54分,星期四正確保存及運(yùn)送標(biāo)本1.減少標(biāo)本在室溫下的放置時(shí)間不超過(guò)一小時(shí);2.及時(shí)送檢;3.選者合適的存放/運(yùn)輸條件-低溫或室溫;4.盡量避光;5.避免劇烈碰撞或搖動(dòng)。第44頁(yè),共60頁(yè),2022年,
18、5月20日,5點(diǎn)54分,星期四尿液標(biāo)本的收集1.尿常規(guī):晨尿/飯后23小時(shí)尿不超 過(guò)2小時(shí);2.尿沉渣:晨尿!不得少于10ml.3.培養(yǎng):留取晨尿中段尿無(wú)菌-專用管!4.尿生化定量:24小時(shí)尿,記尿量;5.尿液蛋白分析:晨尿。第45頁(yè),共60頁(yè),2022年,5月20日,5點(diǎn)54分,星期四表5:尿液常規(guī)檢驗(yàn)標(biāo)本的采集:標(biāo)本類型檢查內(nèi)容應(yīng)用理由 晨尿蛋白質(zhì)長(zhǎng)時(shí)間濃縮標(biāo)本、陽(yáng)性率高鏡檢尿液的濃度及滲透壓高,細(xì)胞形態(tài)保存好細(xì)菌、亞硝酸鹽、葡萄糖消耗試驗(yàn)?zāi)蛞褐邪螂變?nèi)停留時(shí)間長(zhǎng),細(xì)菌有足夠的生長(zhǎng)時(shí)間,能充分對(duì)亞硝酸鹽和糖起作用隨意尿下午2-4小時(shí)尿留24小時(shí)尿留12小時(shí)尿空腹尿餐后尿尿常規(guī)尿膽原代謝物定量
19、aDIS計(jì)數(shù)葡萄糖葡萄糖方便、實(shí)用臨床意義大避免尿液成分的時(shí)間差別尿沉渣定量糖尿病診斷糖尿病診斷第46頁(yè),共60頁(yè),2022年,5月20日,5點(diǎn)54分,星期四尿液標(biāo)本的收集 防污染:特別注意: 容器清潔 停止用藥3天1周; 計(jì)量準(zhǔn)確!第47頁(yè),共60頁(yè),2022年,5月20日,5點(diǎn)54分,星期四尿液細(xì)菌培養(yǎng)標(biāo)本的采集:A:標(biāo)本的收集:需在應(yīng)用抗菌藥物之前或停用抗菌藥5d之后留取標(biāo)本,尿液在膀胱內(nèi)停留6-8h以上。 (1)清潔排尿法:女性患者用肥皂或碘優(yōu)清洗外陰,然后以清水沖洗尿道口周圍,擦干并排出前段尿液后,留取中段尿;男性患者應(yīng)翻轉(zhuǎn)包皮沖洗,用2%紅汞或1:1000新潔爾滅消毒尿道口。 (2
20、)膀胱穿刺法:穿刺時(shí)膀胱應(yīng)充盈,皮膚嚴(yán)格消毒后用19號(hào)或20號(hào)針頭的注射器在恥骨聯(lián)合距臍1/3處穿刺。膀胱穿刺適應(yīng)癥有:有尿路感染的臨床癥狀,但中段尿細(xì)菌總數(shù)很低,又難確定感染源;嬰幼兒新生兒不能用導(dǎo)管者;懷疑有厭氧菌感染。第48頁(yè),共60頁(yè),2022年,5月20日,5點(diǎn)54分,星期四糞便的留取新鮮,足量,防污染!留取有粘液,膿液的部分常規(guī),細(xì)菌培養(yǎng);疑有2號(hào)病者,糞便培養(yǎng)取液樣部分,并立即送檢以便及時(shí)接種,不能延誤。第49頁(yè),共60頁(yè),2022年,5月20日,5點(diǎn)54分,星期四痰及上呼吸道標(biāo)本的采集:A:標(biāo)本的采集:自然咳痰,要求患者清晨留取,留取前用清水漱口3次,之后用力咳出??忍道щy者用
21、霧化蒸氣吸入以利痰液咳出。幼兒可以用手指輕叩胸骨柄上方以誘發(fā)咳痰;要求:1.在用抗菌藥前采集; 2.上呼吸道標(biāo)本:通常采用無(wú)菌棉拭子。 B:氣管穿刺法:僅用于昏迷患者,由臨床醫(yī)師進(jìn)行。 C:纖維支氣管鏡抽吸:通常用于在給患者行纖維支氣管鏡檢查時(shí)順便抽取。 D:胃液抽取法:多用于可疑患有肺結(jié)核的患者在有可能將痰液咽下的情況時(shí)采取。第50頁(yè),共60頁(yè),2022年,5月20日,5點(diǎn)54分,星期四血液培養(yǎng)1.采集時(shí)間: 一般在發(fā)熱初期或發(fā)熱高峰時(shí)采集,原則上選擇在抗菌藥物應(yīng)用之前,對(duì)已用藥而因病情不允許停藥的患者,也應(yīng)在下次用藥前采集;第51頁(yè),共60頁(yè),2022年,5月20日,5點(diǎn)54分,星期四血液
22、培養(yǎng)2.采集的部位和采集頻率: 增加采樣頻率和多部位采樣,可提高陽(yáng)性率,至少24小時(shí)內(nèi)不同部位采集3次或更多次;3.標(biāo)本采集的容量:采血量以每瓶810ml為宜,兒童和嬰幼兒,分別采集樣本35mL和12mL不等,骨髓采集量一般為12mL。第52頁(yè),共60頁(yè),2022年,5月20日,5點(diǎn)54分,星期四血液培養(yǎng)注意事項(xiàng):1.推薦每份標(biāo)本最少同時(shí)做二種培養(yǎng),需氧和厭氧;2.培養(yǎng)瓶必須溫度平衡致室溫;3.無(wú)菌程序采取病人血樣本,先將標(biāo)本注入?yún)捬跗?,再注入需氧瓶,?yán)格防止將空氣注入?yún)捬跗恐?。?3頁(yè),共60頁(yè),2022年,5月20日,5點(diǎn)54分,星期四血液培養(yǎng)注意事項(xiàng):4.注入標(biāo)本后的血培養(yǎng)瓶務(wù)必立即送至細(xì)菌室,切勿放冰箱存放;5.采集
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