阪崎腸桿菌的測定

1、阪崎腸桿菌的檢測GB4789.40-2010講解人：冷靜1阪崎腸桿菌的概述1961 英國2例產(chǎn)黃色素陰溝腸桿菌(阪崎腸桿菌)致新生兒腦膜炎1980 將產(chǎn)黃色素的陰溝腸桿菌重新分類命名為阪崎腸桿菌（Enterobacter sakazakii） 2002年，國際食品微生物學(xué)規(guī)格委員會(huì)（ICMSF）將阪崎腸桿菌歸類為“對(duì)特殊人群具有嚴(yán)重危害，威脅生命或者產(chǎn)生器質(zhì)性慢性后遺癥、長期影響”的微生物2004年2月，WHO/FAO就嬰兒配方奶粉含阪崎腸桿菌課題共同召開專家會(huì)議，做了初步的危險(xiǎn)評(píng)估，將阪崎腸桿菌歸類于“A”類微生物，與嚴(yán)重的沙門氏菌相提并論2004年3月，CAC食品衛(wèi)生委員會(huì)（CCFH）同意

2、盡快進(jìn)行修訂嬰幼兒食品衛(wèi)生操作國際標(biāo)準(zhǔn)，包括阪崎腸桿菌及相關(guān)微生物的微生物學(xué)標(biāo)準(zhǔn)2阪崎腸桿菌的分布1.環(huán)境原油、切削液、蒼蠅、食品加工廠（奶制品、谷類、巧克力、馬鈴薯粉），醫(yī)院（空氣、聽診器、臨床食品）、家庭、溫泉、鼠、沉積物、沼澤地、土壤2.食品及相關(guān)用品啤酒杯、干酪、嬰兒配方奶粉和豆粉、嬰兒配方粉沖調(diào)用品（攪拌器、勺子、甁刷），普通奶粉、碎牛肉、肉類、香腸、發(fā)酵面包、豆腐、蔬菜、水（管道、生物膜）、調(diào)味品3嬰兒配方粉中的污染狀況公共衛(wèi)生關(guān)注的嬰兒配方粉中阪崎腸桿菌的來源包括以下2種情況：內(nèi)在污染二次污染如：加工環(huán)境中微生物的存在；加工裝置的表面微生物的存在，熱處理后，與干燥基粉混合的加入成

3、分中存在的微生物。外源性污染配方粉中調(diào)制環(huán)境和調(diào)制器皿受阪崎污染的配方粉或調(diào)制配方在較高溫度下存放，食用前不加熱或加熱不徹底，喂食時(shí)間較長等都可導(dǎo)致阪崎有機(jī)會(huì)生長繁殖，增加患病的危險(xiǎn)性。4阪崎腸桿菌的危害嬰兒：1. 腦膜炎2. 壞死性小腸結(jié)腸炎3. 菌血癥 嚴(yán)重的神經(jīng)系統(tǒng)后遺癥成人：局部感染、菌血癥、術(shù)后骨髓炎5阪崎腸桿菌的生物學(xué)特征1、G，周身鞭毛，兼性厭氧2、腸桿菌科克羅諾桿菌屬3、在647范圍內(nèi)均可生長，最適35374、平均繁殖時(shí)間在23為40min，10為4.98h，冷藏條件下可以生長5、在TSA培養(yǎng)基上產(chǎn)生黃色色素6、產(chǎn)生-葡萄糖苷酶，其它腸桿菌均不產(chǎn)生；7、較強(qiáng)的耐干燥性，耐高滲透

4、壓， “干燥逆境抗性”比其他，大多數(shù)乳品中分離得到的腸桿菌更加耐熱，但標(biāo)準(zhǔn)的高溫短時(shí)巴氏殺菌可消滅6 易感人群 阪崎腸桿菌可引起各年齡段的感染，但從報(bào)道病例的年齡分布來看，高危人群主要是嬰兒（即1歲的兒童），新生兒（28天）、尤其是早產(chǎn)兒、低出生體重或免疫力下的嬰兒，發(fā)生嚴(yán)重感染的危險(xiǎn)性最高。 母親HIV陽性的嬰兒7主要感染渠道雖然現(xiàn)在還不能確定阪崎腸桿菌的宿主和傳播模型，但在多起新生兒阪崎腸桿菌感染事件的調(diào)查中發(fā)現(xiàn)嬰幼兒配方粉是主要的感染渠道8阪崎檢測步驟1前增菌2選擇性增菌3平板分離4平板確認(rèn)5 生化鑒定9阪崎腸桿菌檢驗(yàn)前增菌操作：100g樣品+900mL增菌液，培養(yǎng)18h2hGB使用的增

5、菌液為BPW主要作用：營養(yǎng)豐富，更利于食品檢驗(yàn)具有緩沖體系 未混勻 混合均勻10阪崎腸桿菌檢驗(yàn)選擇性增菌增菌操作：1ml樣液+10mL增菌液， 440.5培養(yǎng)24h2h培養(yǎng)基的作用改良月桂基硫酸鹽胰蛋白胨加萬古霉素增菌液(mLST-Vm)，Vm有效抑制G+，同時(shí)能在高溫下長的更好。而較高溫度可以抑制其他細(xì)菌生長mLST含鹽高，利于篩選高滲透壓的阪崎因前增菌優(yōu)化，僅使用1mL前增菌液即可注：mLST-Vm，滅菌后使用前加Vm，放置不超24h要求44培養(yǎng)，溫度波動(dòng)0.511阪崎腸桿菌檢驗(yàn)平板分離操作：各取培養(yǎng)物一環(huán)，接種顯色平板，培養(yǎng)24h2h培養(yǎng)基作用顯色培養(yǎng)基顯色培養(yǎng)基利用阪崎特異性-葡萄糖苷酶原理，分解底物形成藍(lán)綠色菌落，選擇性極佳12阪崎顯色培養(yǎng)基13阪崎腸桿菌檢驗(yàn)平板確認(rèn)操作：挑取15個(gè)典型或疑似菌落，劃線于胰蛋白胨大豆瓊脂（T