醫(yī)學(xué)檢驗本科班分子生物學(xué)檢驗技術(shù)試卷

1、醫(yī)學(xué)查驗本班分子生物學(xué)查驗技術(shù)試卷一.選擇題（在備選答案中選擇一個最正確答案,每題2分,共20分）:1.在核酸提取時,常需要使用氯化鈉,醋酸鈉等鹽溶液,真實的目的是（）A.中和核酸的負(fù)離子,使其易于積淀B.調(diào)理PH值C.保持核算的完好性D.提升核酸的濃度E.無特定目的2.在一個DNA分子中,如G所占摩爾比為%,則A所占摩爾比為（）A.%B.%C.%D.%E.沒法計算3.以下那項不是擴增反響所必要的（）A.引物和模板B.dNTPC.Mg+D.DNaseE.緩沖液4.以下那項是分子生物學(xué)技術(shù)形成的理論基礎(chǔ)（）A.基因構(gòu)造與功能的關(guān)系B.基因構(gòu)造變異與疾病的關(guān)系C.病原微生物的基因構(gòu)造特點D.基因的

2、表達.調(diào)控與疾病的關(guān)系E.以上皆是5.分子生物學(xué)查驗技術(shù)主要包含那些技術(shù)（）A.核酸分子雜交技術(shù)B.DNA測序技術(shù)C.PCR技術(shù)D.DNA重組技術(shù)E.以上全部是6.以下哪項檢測需應(yīng)用分子生物學(xué)查驗技術(shù)（）A.肝功能檢測B.乙肝兩對半檢測C.乙肝病毒DNA(HBV-DNA)檢測D.腫瘤細(xì)胞培育E.病原微生物培育7.在核酸的分別純化過程中,為保證其一級構(gòu)造的完好性,應(yīng)采納（）A.盡量簡化分別步驟,縮短提取時間B.適合延伸提取時間C.在37攝氏度條件下進行D.加入Mg+,Ca+等二價金屬離子E.以上全部是8.有一核酸樣品,測得A260/A280=,請問該樣品屬于哪種核酸樣品（）A.DNAB.RNAC

3、.是DNA,但有蛋白質(zhì)污染D.是RNA,但有蛋白質(zhì)污染E.DNA和RNA9.在RNA提取和純化過程中,為防止Rnase污染而致使RNA的降解,應(yīng)采納（）A.在干凈的實驗室里操作B.帶手套和口罩C.所用器械高壓消毒或DEPC辦理D.冰浴下操作E.以上皆是10.隨機引物標(biāo)志法全程標(biāo)志DNA時,需采納以下哪一種酶（）A.DNA多聚酶I的Kelnow片段B.TaqDNA聚合酶C.限制性內(nèi)切酶D.DNA連結(jié)酶E.尾端轉(zhuǎn)移酶二.判斷題：(你以為以下表達正確的請在題后括號內(nèi)打,錯誤的打，每題2分,共6分)1.雙脫氧核酸鏈停止法是最常用的DNA測序技術(shù)（）TapDNA聚合酶的作用是催化DNA合成，但因為缺少3

4、5外切酶活性，無校訂功能，因此在復(fù)制合成新鏈過程中可能會發(fā)生堿基錯配，致使PCR產(chǎn)物的錯誤（）3.采納加熱煮沸法可使RNase完好失活（）三：填空題(每空格2分,共24分):1.在選擇核酸的分別純化方法，應(yīng)按照的總原則是：一是保證核酸（一級構(gòu)造的完好性）；二是盡可能（清除其余分子的污染，保證核酸樣品的純度）。2.在PCR反響中，Mg+是個至關(guān)重要的要素，濃度（過低）會降低酶的活性，濃度（過高）又會致使非特異性擴增。用于核酸雜交的一般硝酸纖維素膜最大的長處是（本底低），因此最簡單檢測雜交信號，弊端是（脆性大）易破碎，且隊bp的核酸結(jié)協(xié)力低。4整個核酸雜交反響主要由（預(yù)雜交）、（雜交）和（洗脫）三

5、個步驟構(gòu)成。5.轉(zhuǎn)移到硝酸纖維素膜或尼龍膜上的核酸，其與濾膜的聯(lián)合是松懈的，需做進一步的固定，常用的固定方法是（烘烤）、（紫外線固定）和（堿固定）。三.名詞解說：(每題4分,共20分):融點曲線剖析技術(shù)：是依據(jù)野生型序列和突變序列因不一樣Tm而產(chǎn)生不一樣的融點曲線而設(shè)計的。2.探針:指全部能與特定的靶分子發(fā)生特異性的互相作用，并能夠被檢測的分子。Tm值：DNA溶化溫度，指把DNA的雙螺旋構(gòu)造降解一半時的溫度。轉(zhuǎn)染:將外源DNA直接導(dǎo)入真核生物細(xì)胞的過程稱為轉(zhuǎn)染。轉(zhuǎn)變:將重組的DNA分子導(dǎo)入細(xì)菌，使其在細(xì)菌體內(nèi)擴增及表達的過程稱為轉(zhuǎn)變。四.問答題:（每題10分，共30分）簡述限制性內(nèi)切酶的定義、

6、命名原則和分類。答：定義：限制性內(nèi)切酶是能辨別和水解雙鏈DNA分子內(nèi)特異序列的核酸水解酶類。命名：往常由3個斜體字母表示，第1個大寫字母為根源微生物的屬名第1個字母，第2、第3個小寫子母取微生物種名的頭兩個字母。分類：依據(jù)酶分子構(gòu)成及裂解方式的不一樣，將限制性內(nèi)切酶分3類，類和類限制性內(nèi)切酶在同一酶分子中兼有修飾（甲基化）作用和依靠于ATP的限制水解活性，類限制性內(nèi)切酶能辨別并水解特異性的核苷酸序列是DNA重組技術(shù)中最重要的工具。2.PCR引物的設(shè)計應(yīng)按照哪些原則。答：1.用于PCR反響的引物需要兩條，分別設(shè)在被擴增目的的片段的兩頭，并分別與模版正負(fù)鏈序列互補。引物的長度一般以18-25個核苷

7、酸為宜，引物過長簡單產(chǎn)生寡核苷酸的鏈內(nèi)互補，形成發(fā)夾狀構(gòu)造，影響引物和模板之間的互補。兩條引物之間特別在3端的序列不可以有互補，免得形成引物二聚體。引物的堿基構(gòu)成應(yīng)均衡，防止出現(xiàn)嘌呤、嘧啶堿基聚積。擴增中的退火溫度是依據(jù)引物的Tm值而決定的，兩條引物的Tm值不可以差太大。依據(jù)需要，可在合成引物時于其5端加修飾成分。試述及時熒光PCR水解探針法的實驗原理？答：原理：PCR反響系統(tǒng)中除有兩條引物外還需要一條熒光素標(biāo)志的探針。探針的5端和3端分別標(biāo)志熒光報告基團R和熒光淬滅基團Q，當(dāng)探針完好時R基團與Q基團分別位于探針的兩頭，Q基團克制R基團使其不可以發(fā)射熒光。PCR過程中，TaqDNA聚合酶沿著模板移