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1、1Literatures Review報(bào)告人:xxCalcium Phosphate Hybrid Nanoparticles: Self-Assembly Formation,Characterization, and Application as an Anti- cancer Drug Nanocarrier(磷酸鈣雜化納米粒子的自組裝形成,表征,以及作為抗癌藥物納米載體的應(yīng)用)2Literature source3ContentsIntroduction 12 Experimental section1 Conclusions234Results and discussion41. I
2、ntroduction納米結(jié)構(gòu) 磷酸鈣粒子CaPs在生物醫(yī)藥領(lǐng)域的應(yīng)用基因和藥物傳遞生物成像抗癌治療優(yōu)點(diǎn)藥物負(fù)載 能力強(qiáng)生物降解性pH控制藥 物釋放生物相容性適合負(fù)載 功能性分子5CaPs的傳統(tǒng)合成方法水解沉淀水熱 法微波超聲輻射外表活性劑輔助缺點(diǎn)尺寸形貌不均一分散性差步驟繁瑣有毒性的添加劑6本文獻(xiàn)的方法聚二甲基二烯丙基氯化銨PDADMAC+PO43-聚丙烯酸鈉PAS+Ca2+磷酸鈣納米結(jié)構(gòu)粒子CaP-HNPs靜電作用形成復(fù)合物雙模板自組裝指根本結(jié)構(gòu)單元分子,納米材料,微米或更大尺寸物質(zhì)同時(shí)自發(fā)發(fā)生關(guān)聯(lián),并集合在一起形成穩(wěn)定的有序整體的一種技術(shù)7反響示意圖細(xì)胞吞噬pH控制藥物釋放8 Exper
3、imental section292. Experimental section以帶有相反電荷的聚電解質(zhì)PDADMAC和PAS作為雙模板。2.1 合成CaP-HNPsCaCl20.110g+去離子水10ml+PAS溶液1ml,重量比1%A溶液磁力攪拌去離子水洗2次Na2HPO42H2O0.215g+去離子水50ml+PDADMAC溶液1ml,重量比20%混合B溶液A逐滴參加到B中磁力攪拌 5min離心CaP-HNPs60烘干無水乙醇洗2次102.2合成CaP-PAS和CaP-PDADMAC對(duì)照實(shí)驗(yàn)合成方法同2.1,其中反響試劑分別去掉PDADMAC和PAS2.3體外抗癌藥物Dtxl負(fù)載與pH控
4、制藥物釋放CaP-HNPs180mg粉末+Dtxl的乙醇溶液18ml,40mg/ml懸浮液140rpm,37,振蕩24h離心烘干熱重分析CaP-HNPs-Dtxl5mg粉末+磷酸緩沖溶液8ml,pH=4.537,140rpm+磷酸緩沖溶液8ml,pH=7.437,140rpm每隔一定時(shí)間取該溶液400uL進(jìn)行紫外可見分析,每次取完參加等體積新鮮磷酸緩沖液,平行試驗(yàn)三次CaP-HNPs-Dtxl112.4體外細(xì)胞存活率試驗(yàn)置于96孔微量分析板培養(yǎng)24h人體胃癌細(xì)胞+10%胎牛血清+1%青霉素鏈霉素37+CaP-HNPs濃度分別為0.1ug/ml,1ug/ml,10ug/ml,100ug/ml+C
5、aP-HNPs-Dtxl濃度分別為0.1ug/ml,1ug/ml,10ug/ml,100ug/ml+Dtxl濃度分別為0.1ug/ml,1ug/ml,10ug/ml,100ug/ml培養(yǎng)24hMTT測(cè)試細(xì)胞存活率1223Results and discussion133. Results and discussion3.1 XRD測(cè)試以PAS作為單模板以PDADMAC作為單模板由XRD測(cè)試可以看出以PDADMAC和PAS作為雙模板合成出具有晶體結(jié)構(gòu)的HA,而以PAS和PDADMAC作為單模板合成出的HA具有不定型結(jié)構(gòu)HA)以PDADMAC和PAS作為雙模板143. Results and di
6、scussion3.2 SEM和TEM測(cè)試1.以PDADMAC和PAS作為雙模板SEM測(cè)試TEM測(cè)試由SEM測(cè)出粒子平均直徑為7213.7nm尺寸分布窄固態(tài)球形形貌分散性好153. Results and discussion2.分別以PDADMAC和PAS作為單模板(對(duì)照試驗(yàn))SEMTEM只以PDADMAC做單模板只以PAS做單模板得到團(tuán)聚的無規(guī)那么的片狀納米結(jié)構(gòu)得到團(tuán)聚共生的納米球結(jié)構(gòu)163. Results and discussion3.3 動(dòng)態(tài)光散射DLS測(cè)定粒子尺寸大小分布a.以PDADMAC和PAS作為雙模板b.以PAS作為單模板c.以PDADMAC作為單模板平均尺寸104.0
7、nm平均尺寸261.5 nm平均尺寸336.6 nm173. Results and discussion3.4 紅外光譜測(cè)試以PDADMAC做單模板以PAS做單模板以PDADMAC和PAS作為雙模板吸附水的伸縮振動(dòng)CH伸縮振動(dòng)C=O伸縮振動(dòng)COO-對(duì)稱伸縮振動(dòng)CH彎曲振動(dòng)COO-不對(duì)稱伸縮振動(dòng)CH2伸縮振動(dòng)+N-CH3對(duì)稱彎曲振動(dòng)COO-不對(duì)稱彎曲振動(dòng)CH2伸縮振動(dòng)+N-CH3彎曲振動(dòng)PO42-伸縮振動(dòng)183. Results and discussion3.5 熱重分析以PDADMAC和PAS作為雙模板以PAS作為單模板以PDADMAC作為單模板在較低溫度200以下的失重是由于吸附水和結(jié)晶
8、水的脫除而在較高溫度(200-500)的失重是由于PDADMAC和PAS分解導(dǎo)致的 (c)中有機(jī)物含量約為18.1%; (b)中有機(jī)物含量約為10.9%; (a)中有機(jī)物含量約為8.9%;193. Results and discussion3.6 Zeta電位測(cè)試35.9-20.021.3CaP-HNPs雙模板法的Zeta電位最大,說明其膠體穩(wěn)定性最高,有利于作為藥物納米載體203. Results and discussion3.7 粒子尺寸大小與時(shí)間的關(guān)系由DLS測(cè)得粒子尺寸開始為104nm,24h后增加到175nm,之后粒子尺寸穩(wěn)定變化不大,說明了雙模板法合成的CaP-HNPs膠體穩(wěn)定
9、性高,適合在藥物傳遞上應(yīng)用104nm175nm213. Results and discussion3.8 CaP-HNPs藥物釋放能力測(cè)試pH改變?cè)诓煌琾H下,隨著時(shí)間的推移,藥物釋放增多,最終趨于穩(wěn)定,相比之下pH低比pH高時(shí)的藥物釋放能力更好,這是由于pH低時(shí)CaP-HNPs溶解,導(dǎo)致負(fù)載的藥物得以釋放而造成的223. Results and discussion3.9 對(duì)細(xì)胞毒性的測(cè)試MTT法不同濃度下,CaP-HNPs對(duì)人類胃癌細(xì)胞均未表現(xiàn)出毒性,說明CaP-HNPs的生物相容性高, 濃度相同的CaP-HNPs-Dtxl 和Dtxl, CaP-HNPs-Dtxl中的細(xì)胞存活率更低,說明CaP-HNPs-Dtxl藥物傳遞系統(tǒng)的生物相容性好,藥物釋放效率高233. Results and discussion3.10 光學(xué)顯微鏡對(duì)細(xì)胞形貌的觀察0.1ug/ml1ug/ml10ug/mlCaP-HNPsCaP-HNPs-Dtxl紡錘形,說明細(xì)胞生理狀態(tài)好,CaP-HNPs生物相容性好球形,說明細(xì)胞生理狀態(tài)差,CaP-HNPs-Dtxl釋放了Dtxl影響了細(xì)胞存活,意味著該系統(tǒng)有良好的抗癌效果24 Conclusions4254. conclusions該實(shí)驗(yàn)利用雙模
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