桑螵蛸及其粗提物對四氧嘧啶糖尿病小鼠的影響

1、桑螵蛸及其粗提物對四氧嘧啶糖尿病小鼠的影響【摘要】目的研究桑螵蛸及其粗提物對四氧嘧啶糖尿病小鼠的影響。方法用四氧嘧啶致糖尿病小鼠模型，分別觀察桑螵蛸及其粗提物對小鼠的血糖、體重、飲水量以及一般狀況的影響。結(jié)果與模型組相比擬，桑螵蛸高、中、低劑量組都能降低四氧嘧啶致糖尿病小鼠的血糖程度(P0.01)，改善其“三多一少的糖尿病病癥；桑螵蛸的石油醚提取物、水提物和醇提物均能降低四氧嘧啶致糖尿病小鼠的血糖程度，但石油醚提取物的作用最為顯著P0.01，其次是水提物P0.05，醇提物的作用最不明顯。結(jié)論桑螵蛸對四氧嘧啶糖尿病小鼠具有良好的治療作用，且其活性成分主要存在于石油醚提取物中。【關(guān)鍵詞】桑螵蛸粗提

2、物四氧嘧啶小鼠血糖Abstrat:bjetiveTbservetheeffetsftheaantidisanditsextratsnallxan-indueddiabetiie.ethdsThedelfdiabetiieasinduedbyallxan,andtheeffetsftheaantidis()anditsextratsnbldsugar,Eight,ater-intakeandgeneralstatuserebserved.Results(1)Thehighdsegrup,theiddledsegrupandtheldsegrupfallulddereasethebldsugarf

3、ieinduedbyallxan(P0.01),syptssuhasplydipsia,diabetesandplyphagiaabated.(2)paredithntrlgrups,theaterextrat(P0.05),theethanlextratandthepetrleuetherextrat(P0.01)fallulddereasethebldsugarfieinduedbyallxan,buttheeffetftheethanlextratasntbvius.nlusintheaantidishasagdtherapeutieffetnallxan-indued-diabetii

4、e,anditsativepnentstlyexistsinthepetrleuetherextratfrtheaantidis.Keyrds:theaantidis;Extrats;Allxan;ie;Bldsugar我國中藥典籍中所提到的“桑螵蛸是用以入藥的螳螂卵鞘的總稱，它具有補腎壯陽、固精縮尿的作用，同時也是用斂精固澀法治療糖尿病的復(fù)方中藥中出現(xiàn)頻率較高的一味動物藥，它具有有效減少糖尿病人的尿量以及減少尿糖排出的作用，是臨床藥方中經(jīng)常選用的一味中藥1。但桑螵蛸單方是否具有降低血糖的作用，國內(nèi)尚未有這方面的研究報道。我們采用桑螵蛸及其粗提物對實驗性糖尿病小鼠進(jìn)展降血糖的研究,為桑螵蛸的研

5、究、開發(fā)和臨床應(yīng)用提供理論參考。1材料與儀器1.1動物昆明種小鼠128只，體重1722g，雄性，由湖北省疾病預(yù)防控制中心實驗動物部提供。室溫控制在2227，自由采食和飲水，小鼠飼料為普通優(yōu)質(zhì)飼料。1.2試劑及儀器四氧嘧啶美國Siga公司0.5g裝；葡萄糖測定試劑盒上海名典生物工程,批號016082；達(dá)美康天津華津制藥廠，批號H10910053；752N型紫外可見分光光度計(上海精細(xì)科學(xué)儀器)。1.3藥材桑螵蛸，由湖北省同濟(jì)堂藥店提供。2方法2.1桑螵蛸對四氧嘧啶糖尿病小鼠的影響桑螵蛸用水煎煮后，過濾濃縮成1g/l的藥液，放入4冰箱保存，待測時用蒸餾水稀釋。對46只小鼠腹腔注射四氧嘧啶(270g

6、/kg),72h后從空腹小鼠尾尖取血2測血糖程度，選用血糖程度在11.1l/L以上3的小鼠37只，體重(19.80.8)g，隨機(jī)分成糖尿病模型組(蒸餾水)，桑螵蛸低、中、高劑量處理組83.3，416.7，833.3g/kg，分別是成人日服用量的1，5，10倍量，成人體重按60kg計算。另取10只正常小鼠作正常對照(蒸餾水)。各組分別灌胃給藥，1次/d，連續(xù)給藥15d。于末次給藥后1h取血測定血糖程度，給藥前測定體重，連續(xù)給藥15d后，測定體重和72h內(nèi)的飲水量用SPSS軟件對結(jié)果進(jìn)展方差分析，比擬各處理組效果。2.2桑螵蛸粗提物對四氧嘧啶糖尿病小鼠的影響桑螵蛸分別用水、95%的乙醇和石油醚提取

7、，用水和95%的乙醇高溫回流，過濾枯燥后濃縮成浸膏，分別作為供試品1和2，用石油醚那么過夜提取，待揮去石油醚后，殘留物作為供試品3，放入4冰箱保存，待使用時用蒸餾水稀釋。將62只小鼠隨機(jī)分成糖尿病模型組(蒸餾水)、桑螵蛸水提物處理組、醇提物處理組、醚提物處理組以及陽性藥物對照組，腹腔注射四氧嘧啶(270g/kg),72h后從空腹小鼠尾靜脈取血測血糖程度，選用血糖程度在11.2l/L以上的小鼠51只，體重(21.00.5)g，另取10只正常小鼠做正常對照(蒸餾水)，分別灌胃給藥每天給予各提取物83.3g/kg，成人日服用量，給予正常對照組和糖尿病模型組相應(yīng)量的蒸餾水，給予陽性對照組達(dá)美康9.6g

8、/kg成人日服用量，體重按60kg計算，1次/d，連續(xù)給藥15d。于末次給藥后1h取血測定血糖程度，給藥前測定體重，連續(xù)給藥15d后，測定體重和72h內(nèi)的飲水量。用SPSS軟件對結(jié)果進(jìn)展方差分析，比擬各處理組效果。3結(jié)果3.1桑螵蛸對四氧嘧啶糖尿病小鼠的影響3.1.1桑螵蛸對四氧嘧啶糖尿病小鼠血糖的影響與糖尿病模型組小鼠相比，桑螵蛸低、中、高劑量處理組小鼠血糖程度明顯降低P0.01。在血糖降低的絕對值方面，各劑量組與糖尿病模型組均存在顯著差異P0.05，與正常對照組比擬，各處理組降低小鼠血糖程度與正常對照小鼠有較小的差距，而此差距是隨著桑螵蛸劑量的降低而逐漸加大的。見表1。表1桑螵蛸的不同劑量

9、對四氧嘧啶糖尿病小鼠血糖的影響略與糖尿病模型組比擬，*P0.05，*P0.013.1.2桑螵蛸對四氧嘧啶糖尿病小鼠體重以及飲水量的影響結(jié)果顯示，桑螵蛸低、中、高劑量處理組小鼠給藥后的72h飲水量與糖尿病模型組相比差異極顯著P0.01；而在小鼠體重方面，與糖尿病模型組相比，桑螵蛸低、中、高劑量處理組小鼠平均體重均明顯較低，其中低劑量處理組差異顯著P0.05，中、高劑量處理組差異極顯著P0.01。結(jié)果見表2。表2桑螵蛸的不同劑量對四氧嘧啶糖尿病小鼠的平均體重略與糖尿病模型組比擬，*P0.05，*P0.01轉(zhuǎn)貼于論文聯(lián)盟.ll.3.1.3四氧嘧啶糖尿病小鼠一般狀況的觀察46只小鼠注入四氧嘧啶后，第3

10、天造模動物比照于正常對照組在進(jìn)食、飲水、尿量的方面均有增加，即“三多一少的病癥，第4天后，有3只死亡，6只不達(dá)模型標(biāo)準(zhǔn)。連續(xù)給藥后7d后，桑螵蛸低、中、高劑量處理組精神逐漸好轉(zhuǎn)，皮毛逐漸恢復(fù)光澤，飲水、飲食、尿量逐漸降低，身體逐漸變胖；而糖尿病模型組那么情況較差，皮毛粗亂且無光澤，無活力，身體瘦弱，飲水、飲食和尿量增加較多。給藥15d以后上述情況更加明顯。3.2桑螵蛸粗提物對四氧嘧啶糖尿病小鼠的影響3.2.1桑螵蛸粗提物對四氧嘧啶糖尿病小鼠血糖的影響與糖尿病模型組小鼠相比，桑螵蛸水提取物處理組、乙醇提物處理組以及石油醚提取物處理組的小鼠血糖程度均有所降低，且以石油醚提取物處理組最為明顯P0.0

11、1，其次是水提取物處理組P0.05，乙醇提物處理組那么差異不顯著。而與陽性對照組比擬，各處理組除正常對照組降低小鼠血糖程度均有差異，其中石油醚提取物處理組與其差異顯著P0.05，其它處理組均有極顯著差異。在血糖降低的絕對值方面，石油醚提取物處理組與陽性對照組無顯著差異，與糖尿病模型組有極顯著差異P0.01。結(jié)果見表3。表3桑螵蛸的不同粗提物對小鼠的血糖濃度的影響略與糖尿病模型組比擬，*P0.05，*P0.01；與陽性對照組比擬，#P0.05，#P0.013.2.2桑螵蛸粗提物對四氧嘧啶糖尿病小鼠體重以及飲水量的影響與糖尿病模型組小鼠相比，桑螵蛸水提取物處理組、石油醚提取物處理組小鼠的72h飲水

12、量均明顯較少P0.01，而與陽性對照組相比，乙醇提取物處理組差異最顯著P0.01，其次是水提取物P0.05，石油醚提取物處理組那么不明顯。在體重方面，石油醚提取物處理組與糖尿病模型組差異最顯著P0.01，而與陽性對照組差異不明顯。結(jié)果見表4。表4桑螵蛸的不同粗提物對小鼠平均體重和72h內(nèi)平均飲水量的影響略與糖尿病模型組比擬，*P0.05，*P0.01；與陽性對照組比擬，#P0.05，#P0.013.2.3四氧嘧啶糖尿病小鼠一般狀況的觀察60只小鼠注入4氧嘧啶后,第1天和第2天均比擬正常，第3天開場，個別造模動物開場死亡，至第4天為止，死亡4只，不達(dá)模型標(biāo)準(zhǔn)的7只。連續(xù)給藥7d后，桑螵蛸石油醚提

13、取物處理組以及陽性對照組的小鼠精神逐漸好轉(zhuǎn)，皮毛逐漸恢復(fù)光澤，飲水、飲食和尿量逐漸降低，水提取物處理組和乙醇提取物處理組小鼠稍有好轉(zhuǎn)；而模型組一般情況較差，皮毛粗亂且無光澤，體力衰減，飲水、尿量增加較多。連續(xù)給藥15d后上述情況更加明顯。4討論本實驗結(jié)果說明桑螵蛸可以顯著P0.01降低四氧嘧啶糖尿病小鼠的血糖程度，增加小鼠體重(P0.05)和減少飲水量P0.01，減輕小鼠“三多一少的糖尿病病癥，使其逐步好轉(zhuǎn)，并隨著桑螵蛸濃度的增加，顯示此作用呈一定的劑量依賴關(guān)系。用各種溶劑對桑螵蛸進(jìn)展進(jìn)一步的提取，發(fā)現(xiàn)桑螵蛸的石油醚提取物對四氧嘧啶糖尿病小鼠的降血糖作用最顯著P0.01，且明顯P0.01增加小

14、鼠體重和減少飲水量，有效改善“三多一少的糖尿病病癥，其次是桑螵蛸的水提物(P0.05)有降血糖作用，而醇提物作用均不明顯。說明具有治療糖尿病作用的活性成分主要存在于桑螵蛸的石油醚提取物中，有少局部存在于水提物中。近年來，人們研究的用于治療糖尿病的中藥活性成分主要有生物堿、黃酮、多糖、皂苷、萜類等4。而石油醚提取出的一般是甾體、萜類、脂肪油等，所以桑螵蛸降血糖的有效成分可能是石油醚提物中的甾體皂苷或萜類物質(zhì)。事實上，關(guān)于含有皂苷或萜類物質(zhì)的中藥治療糖尿病的研究很多，上海瑞金醫(yī)院通過研究就說明了人參皂苷抗糖尿病及其對胰島素的增敏作用5，而另有研究證明萜類物質(zhì)山茱萸環(huán)烯醚萜總苷的降血糖作用可能與抑制

15、非酶糖基化終產(chǎn)物的形成以及阻止其對超氧化物歧化酶的破壞作用等有關(guān)6。因此，桑螵蛸降血糖作用機(jī)理可能與這兩種機(jī)理相似。另外，比照于陽性藥物，桑螵蛸的石油醚提取物對四氧嘧啶糖尿病小鼠的降血糖作用仍有一定差距，這可能與桑螵蛸的石油醚提取物的濃度有關(guān)，濃度的上下可能影響其將血糖的作用?！緟⒖嘉墨I(xiàn)】1李德珍施今墨治療糖尿病探析J.中醫(yī)雜志，2001，425：261.2S.avalher-ahad,.TavaresdeLia,A.S.Daaz,etal.Dn-regulatinfastellativatinandairayreativityindiabetirats:rlefinsulinJ.EurRespirJ,2022,24:552.3uXin-li,LuJin-liang,uTa.AntihyperglyeiativityfHypglyeiZiyabitiTabletinnralanddiabetiieJ.hineseTraditinalPatentediine,2022,27(8):926.4楊懷瑾，劉立超，黃洪林抗糖尿病中藥活性