食品的前處理方法

1、樣品前辦理條件的優(yōu)化前辦理是剖析方法的重點一環(huán)，樣品前辦理的目的是使樣品能合適剖析方法的要求。往常包含消化和提取、分別和凈化等步驟?；一瘶悠窌r選擇適合的溫度和時間，必需時可加助熔劑；濕法消化選擇適合的酸和溫度。提取要選擇提取效率高的提取劑和提取方法。提取條件的選擇一般以加標樣品或陽性樣品用不一樣溶劑和方法提取，將樣品與標準溶液的測定結果進行比較，計算提取率。分別和凈化是為了去除擾亂成分?？捎肅18柱、硅鎂吸附劑、D101大孔吸附樹脂等吸附分別，對洗脫條件進行優(yōu)化，選擇適合洗脫劑和洗脫時間。二、食品樣品的前辦理pretreamentoffoodsamples）指食品樣品在測定前除去擾亂成分，濃縮

2、待測組分，使樣品能知足剖析方法要求的操作過程。1.無機化辦理采納高溫或高溫下強氧化條件，使食品樣品中的有機物分解并呈氣體逸出，而待測組分被保存下來用于剖析的一種樣品前辦理方法。1）濕法消化（wetdigestion）加入氧化性強酸，加熱損壞有機物，使待測的無機成分開釋出來，以便剖析測定。方法特色.長處：分解有機物速度快、所需時間短；加熱溫度低，減少待測組分的揮發(fā)損失。弊端：消化過程產(chǎn)生大批有害氣體，操作一定在通風櫥中進行；試劑用量較大，有時空白值高；消化早期，反響激烈產(chǎn)生大批泡沫，樣品可能溢出；樣品可能出現(xiàn)炭化，使待測組分損失。常用的氧化性強酸a）硝酸濃硝酸（6568%,14mol/L),沸點

3、121.8擁有較強的氧化能力，能將樣品中有機物氧化成CO2和H2O，自己復原成NO2。獨自使用硝酸不可以完整分解有機物，所以經(jīng)常與其余酸配合使用。幾乎所有的硝酸鹽都溶于水，但易與錫和銻形成難溶的偏錫酸H2SnO3）和偏銻酸（H2SbO3）或其鹽。b）高氯酸（65%70%，11mol/L）能與水形成恒沸溶液，沸點203。熱的高氯酸是強氧化劑，氧化能力較硝酸和硫酸強，幾乎所有的有機物都能被它分解。高氯酸沸點適中，氧化能力長久，用于消化食品樣品速度快，過度的高氯酸易除去。但一般不獨自用高氯酸氧化樣品，而使用硝酸和高氯酸的混淆酸分解有機物。除K和NH4鹽外，一般高氯酸鹽都溶于水。c）硫酸稀硫酸沒有氧化

4、性，熱的濃硫酸（98%，18mol/L）有較強氧化性，對有機物有激烈的脫水作用，可使食品中的蛋白質氧化脫氨。.硫酸沸點高（338），不易揮發(fā)損失。硫酸的氧化能力不如高氯酸和硝酸強，硫酸與堿土金屬（Ca、Mg、Ba和Pb）形成的鹽在水中溶解度較小。常用消化方法a）硫酸消化法凱氏定氮法測定食品中蛋白質含量采納硫酸消化法，同時加入硫酸鉀和硫酸銅，蛋白質中的氮轉變?yōu)榱蛩徜@留在消化液中，不會進一步氧化成氮氧化物而損失。b）硝酸高氯酸消化法可采納兩種方式：一是先加硝酸消化，待大批有機物分解后再加高氯酸；二是預先以必定比率（一般為HNO3HClO44+1）配制混淆酸，將樣品浸泡留宿，第二天消化。該法氧化能力

5、強，消化速度快，消化溫度較低，揮發(fā)損失少。消化時應特別注意安全。含酒精和含油脂許多組分，不宜采納此法。c）硝酸硫酸消化法加入兩酸混淆液或先加硫酸，加熱使有機物分解、炭化，而后不停補加硝酸。此法不宜做食品中堿土金屬的剖析。對含大批脂肪和蛋白質的樣品，消化后期可加入少許高氯酸或過氧化氫，加快消化速度。消化操作技術a）敞口消化法：往常在凱氏燒瓶或硬質錐瓶中進行，是最常用的消化方法。b）回流消化法.測定含揮發(fā)性成分的樣品時，可在回流消化妝置中進行，防止被測組分揮發(fā)損失。c）冷消化法又稱低溫消化。將樣品與消化液混淆后置于室溫或3740烘箱內，擱置留宿。低溫消化可防止易揮發(fā)元素的損失。僅適于含有機物較少的

6、樣品。d）密封罐消化法采納壓力密封消化罐和少許消化液，在必定壓力下對樣品消化。將密封罐置于150烘箱中保溫2h。因為在密閉容器中消化液的蒸氣不可以逸散，產(chǎn)生較高壓力，提升了消化劑的利用率。此法樣品用量一般小于1g，只要加30%的過氧化氫和一滴硝酸即可，空白值較低。e）微波消解法在2450MHz的微波電磁場作用下，微波穿透容器直接輻射到樣品和試劑的混淆液中。汲取微波能量后，使消化介質的分子互相摩擦）干灰化法（dryashing）將樣品置于磁坩堝中，先在電爐上脫水、炭化，再置于500600高溫爐中灼燒灰化。有機物分解，留下無機物供測定。產(chǎn)生高熱。同時交變電磁場使介質分子極化，高頻輻射使極化分子迅速

7、轉動，產(chǎn)生劇烈摩擦、碰撞和震動，使樣品分解。微波消解試劑用量小，空白值低；使用密閉容器，減少了對外界的污染。方法特色操作簡易，基本不加或加極少試劑，因此空白值很低。.提升干灰化法回收率的舉措a）加入助灰化劑為加快有機物氧化，防備某些組分揮發(fā)或被坩堝吸留，可加適當助灰化劑。如測食品中碘時可加氫氧化鉀使碘元素變?yōu)殡y揮發(fā)的碘化鉀，減少損失；測砷時可加氧化鎂和硝酸鎂，使砷轉變?yōu)殡y揮發(fā)的焦砷酸鎂（Mg2As2O7），經(jīng)常將氧化鎂襯墊在坩堝底減少坩堝吸留。b）采納適合的灰化溫度應選擇盡可能低的溫度灰化，但溫度過低會延伸灰化時間。往常選55025灰化4h，一般不超出600。最近幾年發(fā)展了低溫灰化技術，將樣品

8、放在低溫灰化爐中，先將爐內抽至近真空，并通入氧氣，用射頻照耀使氧氣活化，在低于150下即可是有機物所有灰化。但當前低溫灰化爐價錢昂貴，尚難普及。2.擾亂成分的去除測定各樣有機成分時，可采納多種前辦理方法，將待測的有機成分與基體或其余擾亂成分分別后再進行測定。常用分別凈化方法有：1）溶劑提取法依據(jù)相像相溶的原則。一般分為浸提法和液液萃取法。浸提法利用樣品中各組分在某一溶劑中溶解度的差別。包含：振蕩浸漬法、搗碎法、索氏提取法和超聲波提取。液液萃取法.利用溶質在兩種不相溶的溶劑中分派系數(shù)不一樣。如測定動物油脂中的有機氯農(nóng)藥，可先用石油醚萃取，而后加濃硫酸使脂肪磺化生成極性大的親水性物質，加水反萃取可

9、除掉脂肪，有機氯農(nóng)藥留在石油醚層。如測定魚肉中的組胺，是以鹽的形式存在于樣品中，需加堿使之生成組胺，用戊醇萃取至有機相中，再加鹽酸，組胺以鹽酸鹽的形式存在，易溶于水，被反萃取至水相，與樣品中其余組分分別。2）揮發(fā)法和蒸餾法利用待測組分的揮發(fā)性或經(jīng)過化學反響將其轉變?yōu)閾碛袚]發(fā)性的氣體，與樣品基體分別，經(jīng)汲取液采集后用于測定。蒸餾法常壓蒸餾、減壓蒸餾及水蒸氣蒸餾。吹蒸法測定揮發(fā)性有機磷農(nóng)藥，第一用乙酸乙酯提取樣品中的殘留農(nóng)藥。取必定量樣液加入填有玻璃棉、砂子的Storherr管中，將管加熱到180185，用氮氣將農(nóng)藥吹出，經(jīng)聚四氟乙烯螺旋管冷凝，采集到玻璃管中供測定用。樣品中的脂肪、蠟質、色素等高

10、沸點物質仍留在Storherr管中。達到分別、凈化、濃縮的目的。頂空法一般與氣相色譜聯(lián)用。靜態(tài)頂空法：將樣品置于密閉容器中，恒溫加熱一段時間，低沸點組分在容器內揮發(fā)達到蒸氣壓均衡，抽取上層蒸氣用于氣相色譜剖析。.動向頂空法：在頂空裝置中不停通入氮氣，使此中揮發(fā)性成分隨氮氣逸出，采集于吸附柱中，經(jīng)熱解吸或溶劑分析后剖析。此法操作復雜，但敏捷度高。氫化物發(fā)生法用復原劑將待測組分復原成易揮發(fā)的氫化物，從基體中分別出來。氫化物經(jīng)汲取液汲取后）利用顯色反響分光光度法測定；）直接導入原子汲取光譜儀測定。3）固相萃取solidphaseextraction，SPE）1）基來源理和長處基來源理是樣品在固相（吸

11、附劑）和液相（溶劑）之間的分派。其保留或洗脫的體制取決于被分別物與吸附劑表面的活性基團以及被分離物與液相之間的分子作使勁。洗脫模式有兩種：一是目標化合物比擾亂物與吸附劑之間的親和力更強，因此被保存，擾亂物先洗出，而后采納對目標化合物親和力更強的溶劑洗脫目標化合物。二是擾亂物比目標化合物與吸附劑之間的親和力更強，擾亂物質被保留，目標化合物直接被洗脫。采納第一種洗脫方式的許多。2）裝置和操作.主要裝置是固相萃取柱（SPE小柱），外形近似于注射器針筒，往常選玻璃或聚四氟乙烯作柱體。柱體積150ml不等，最常用的是16ml。此中吸附劑的粒徑多為40m。操作步驟分為：萃取柱預辦理上樣洗去擾亂雜質洗脫及采

12、集剖析物與液液萃取對比，固相萃取有以下長處：回收率和富集倍數(shù)高；有機溶劑耗費量低，減少環(huán)境污染；采納高效、高選擇性定性吸附劑，被剖析物與擾亂物分別更有效；易于辦理小體積試樣；操作簡易、花費低，易于實現(xiàn)自動化。柱中填補物除吸附劑外也能夠是離子互換樹脂、凝膠等其余資料，故分別原理能夠有吸附、分派、凝膠過濾、親和萃取等。如測定保健食品中總皂甙，先用水提取，再經(jīng)AXD2大孔樹脂柱分別凈化，用分光光度法測定。有報導將黃曲霉毒素的特異抗體聯(lián)到某載體上制結婚和柱，用于剖析黃曲霉毒素時去除擾亂物。（4）固相微萃取(solidphasemicro-extraction，SPME)上世紀90年月初發(fā)展起來的樣品前

13、辦理技術。1993年美國Supelco企業(yè)第一推出了商品化的SPME裝置，在剖析化學領域惹起了極大反響。1994年威望雜質Research&Development將其評為最優(yōu)異的100項新產(chǎn)品之一。分為萃取和解吸兩個步驟：.萃取過程將萃取針頭插入帶隔閡塞的固相萃取專用樣品瓶內，壓下活塞使萃取頭纖維裸露在樣液中進行萃取，經(jīng)過一段時間后，拉起活塞，萃取頭縮回到不銹鋼針頭中，拔出針頭，達成萃取?？稍跇悠菲恐屑訜o機鹽、調理pH、加熱或磁力攪拌。萃取方式有兩種：一種是將萃取頭直接插入試樣中萃取，合用于液體或氣體樣品中組分的分別。另一種是頂空萃取，合用于各樣基質試樣中揮發(fā)性和半揮發(fā)性組分的分別。影響固相萃

14、取敏捷度的要素有：涂層的種類、待測物性質、基質的種類、試樣pH值、鹽濃度、攪拌和加熱狀況等。解吸過程將萃取針頭插入剖析儀器進樣口，推出石英纖維，進行熱解吸或溶劑解吸。熱解吸合適于氣相色譜法，萃取針頭放入色譜儀爐箱中熱解吸。用合適溶劑注入萃取柱中解吸，解吸液進行后續(xù)剖析。（5）色譜分別法柱色譜：常用硅膠、氧化鋁、離子互換樹脂柱。用熒光法測VB2時,用硅鎂吸附劑柱吸附VB2后洗脫測定。紙色譜法:現(xiàn)有紙色譜分別,將樣點浸出后,再用其余方法測定。剖析合成色素時，常用紙色譜分別.薄層色譜法:黃曲霉毒素B1的測定(GB法),先用薄層色譜分別,再用熒光法測定.（6）超臨界流體萃取（supercritical

15、fluidextraction，SFE）與一般液液萃取或液固萃取相像，也是在兩相之間進行的一種萃取方法，不一樣的是所用萃取劑為超臨界流體。超臨界流體只好存在于超臨界狀態(tài)下，是介于氣態(tài)和液態(tài)之間的一種既非氣態(tài)又非液態(tài)的特別流體。超臨界流體密度較大，與液體相像，可作為溶劑溶解其余物質；超臨界流體粘度小，又與氣體鄰近，傳質速度快，表面張力小，很簡單進入固體樣品內，使目標剖析物易溶于超臨界流體。不一樣的物質達來臨界點要求的溫度和壓力不一樣，改變物質的溫度和壓力，使之超出臨界溫度和臨界壓力，達到超臨界狀態(tài)，即可獲取超臨界流體。超臨界流體仍是“綠色化學”倡導的潔凈溶劑，正漸漸代替實驗室常用的高毒、高污染的

16、有機溶劑。最常用的超臨界溶劑是CO2，其臨界值較低（臨界溫度31.06，臨界壓力7.39MPa）化學性質穩(wěn)固，不易與溶質發(fā)生化學反響，無臭、無毒、沸點低，易與從萃取后的組分中除掉，合適于對熱不穩(wěn)固化合物的萃取。但CO2是非極性分子，不適于極性化合物的萃取。極性化合物的萃取可用NH3或氧化亞氮作萃取劑。超臨界流體萃取常與色譜剖析聯(lián)用SFEGC、SFEHPLC、SFESFC（超臨界流體色譜），.用于食品中多環(huán)芳烴、多氯聯(lián)苯、農(nóng)藥殘留等測定。7）透析法利用高分子物質不可以透過半透膜而小分子或離子能經(jīng)過半透膜的性質，實現(xiàn)大分子與小分子物質的分別。如測定食品中糖精鈉含量，可將食品樣品裝入玻璃紙的透析膜袋中，放在水中透析。因為糖精鈉分子較小，能經(jīng)過半透膜進入水中，而蛋白質、鞣酸、樹脂等高分子雜質不可以經(jīng)過半透膜，仍留在玻璃紙袋中，進而達到分別。8）積淀分別法利用積淀反響進行分別。在試樣中加入合適積淀劑，使被測成分或擾亂成分積淀下來，經(jīng)過濾或離心達到分別目的。如測食品中亞硝酸鹽，先加入堿性硫酸銅或三氯乙酸等積淀蛋白質，使水溶性亞硝酸鹽與蛋白分別。（8）微波協(xié)助樣品前辦理技術微波是波長在1000.1cm的電磁波微波協(xié)助消解微波協(xié)助萃取微波加熱機理：慣例加熱是由外面熱源經(jīng)過熱輻射由表及里的傳導