憂慮康藥對(duì)動(dòng)物抑郁行為和血漿cAMP、cGMP的影響及毒性試驗(yàn)研究

1、憂慮康藥對(duì)動(dòng)物抑郁行為和血漿cAMP、cGMP的影響及毒性試驗(yàn)研究【摘要】目的觀察憂慮康藥浸膏對(duì)腎陰虛型抑郁模型大鼠行為學(xué)和血漿AP、GP的影響及毒性試驗(yàn)。方法采用灌胃甲狀腺素合并慢性不可預(yù)見性應(yīng)激制成腎陰虛抑郁動(dòng)物模型后，隨機(jī)分為空白對(duì)照組、模型組、六味地黃丸組、氟西汀組、憂慮康低、中、高劑量組，觀察各組大鼠敞箱試驗(yàn)和液體消耗試驗(yàn)等行為學(xué)變化，采用放射免疫方法檢測(cè)血漿AP、GP含量。并進(jìn)展急性毒性試驗(yàn)，計(jì)算小鼠最大耐受量。結(jié)果腎陰虛抑郁模型大鼠敞箱試驗(yàn)和液體消耗試驗(yàn)各項(xiàng)指標(biāo)均顯著下降，血漿AP含量顯著升高；憂慮康藥能局部改善大鼠的抑郁行為，六味地黃丸和憂慮康均能顯著降低大鼠血漿AP含量。小鼠

2、灌服憂慮康藥1日最大耐受量為360g/kg，相當(dāng)于人臨床用量1.2g/kg的300倍。結(jié)論呈量效關(guān)系的憂慮康藥影響大鼠行為學(xué)和調(diào)整血漿AP、GP平衡，可能正是其滋陰解郁的作用機(jī)制之一；該藥是平安范圍較大的藥物，提示用于臨床是平安的。【關(guān)鍵詞】憂慮康；腎陰虛；抑郁癥；環(huán)腺苷酸；環(huán)鳥苷酸；急毒TheeffetsandtxiityexperientalresearhfYuLvKangnanialdepressinbehavirandAP,GPintheplasa【Abstrat】bjetiveTbjetivetheeffetsfYuLvKangntheAP、GPintheplasafdelingra

3、tsfllingrenalyindefiienyandnthebehavirftheseanialsandtxiitytest.ethdsRatseredividedintsevengrupsrandly:ntrl,del,LiuEiDiHuangan,fiuxetine,thel、iddleandhigh-dsegrupfYuLvKang.Testablishthedelingratsfllingrenalyindefiienybyexpsingtheanialsthrnistressdepressinandgivingthebyintragastriadinstratin.Tbservet

4、hebehavirhangsinthepen-fieldtestandfluidsuptintest.theplasasaplesfexperientalratseretakenfrAPandGPdeterinatinbyradiiunassay.Tputeaxiallytlerateddsefratsbyautetxiitytest.ResultsAlltheindexesfthedelratsinthepen-fieldtestandfluidsuptintesteresignifiantlydereased,theplasanentratinfAPassignifiantlyelevat

5、ed;YuLvKanganpartlyiprvethebehavirftherats,theplasafAPeresignifiantlydereasedintheLiuEIDiHuanganandYuLvKanggrups.Theaxiallytlerateddsefuseere360g/kgeveryday,equivaent300tiesflinidses1.2g/kg.nlusinneftheehanisfinreasingyinandiprvingdepressinastheeffetsfTheYuLvKangnthebehavirhangsftheratsandnadjusting

6、thebalanebeteentheAPandGP.safetyarginfdrugisbigger,hihsuggestthedrugissafeinlini.【Keyrds】YuLvKang;renalyindefiieny;depressin;AP;GP;autetxiitytest1材料與方法1.1材料1.1.1動(dòng)物安康SD大鼠，雌雄各半，體重170190g購自長沙開福區(qū)東創(chuàng)科技效勞部。昆明小鼠，雌雄各半，體重1822g購自湖南中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，合格證號(hào)：20-001。1.1.2藥物及試劑憂慮康藥臨床用量為每天80g，按處方稱取藥材湖南中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院提供熟地黃15g，何首烏1

7、5g，郁金10g，丹參15g，當(dāng)歸15g，石斛10g等，水煎2次,過濾，合并濾液,濃縮成相應(yīng)濃度浸膏，4保存?zhèn)溆茫涣兜攸S丸湖南省長沙九芝堂股份消費(fèi)，產(chǎn)品批號(hào)：20220219；鹽酸氟西汀膠囊常州華生制藥，產(chǎn)品批號(hào)：80706001；甲狀腺素片濟(jì)南維爾康生化制藥，產(chǎn)品批號(hào)：05055050；環(huán)腺苷酸AP、環(huán)鳥苷酸GP放免分析試劑盒:上海中醫(yī)藥大學(xué)同位素科，消費(fèi)批號(hào)：061120。1.1.3儀器敞箱自制：由不透明材料制成，底面為100100的正方形，被等分為25個(gè)等邊方格，高50；放射免疫計(jì)數(shù)器G-1200放射免疫計(jì)數(shù)器,中國科學(xué)技術(shù)大學(xué)科技實(shí)業(yè)；電子天平型號(hào):ES-600電子天平,湘儀天平儀器

8、；低溫大容量高速離心機(jī)型號(hào)：KD-2046低溫大容量離心機(jī),中國科學(xué)技術(shù)大學(xué)科技實(shí)業(yè)；秒表；止血鉗；恒溫烘箱等。1.2方法1.2.1動(dòng)物分組試驗(yàn)前，進(jìn)展敞箱試驗(yàn)和液體消耗試驗(yàn)，根據(jù)敞箱試驗(yàn)和液體消耗試驗(yàn)的結(jié)果挑選大鼠，共56只，隨機(jī)分為7組：空白對(duì)照組簡稱空白組、模型對(duì)照組簡稱模型組、鹽酸氟西汀組簡稱氟西汀組、六味地黃丸組簡稱地黃丸組、憂慮康液低劑量組簡稱ylk低劑量組、憂慮康液中劑量組簡稱ylk中劑量組、憂慮康液高劑量組簡稱ylk高劑量組，每組8只。1.2.3觀察模型動(dòng)物一般狀態(tài)及體重變化實(shí)驗(yàn)過程中觀察大鼠外表、性情、活動(dòng)情況、飲水量、大便情況，每周測(cè)1次體重。1.2.6血漿AP、GP的測(cè)定

9、實(shí)驗(yàn)第22天，所有動(dòng)物，斷頭采血，取血12l，注入含EDTANa2501的試管中，搖勻放入冰浴中，1h內(nèi)，4離心2000rp離心10in，置于-15-20保存，用于測(cè)定。測(cè)定時(shí)嚴(yán)格按試劑盒說明進(jìn)展操作。轉(zhuǎn)貼于論文聯(lián)盟.ll.1.3急性毒性試驗(yàn)1.3.1預(yù)試?yán)ッ餍∈?只，以憂慮康3g生藥/l的流浸膏可供灌胃的最大濃度3g生藥/l，小鼠可耐受的最大體積0.8l/20g一次性灌胃給藥，灌胃前禁食不禁水12h，給藥后正常飼養(yǎng)，連續(xù)觀察7天。實(shí)驗(yàn)結(jié)果，在給藥當(dāng)天小鼠活動(dòng)、精神狀態(tài)、飲食均正常，一周內(nèi)未見死亡及其他異常現(xiàn)象，處死后主要臟器肝、心、脾、肺、腎未發(fā)現(xiàn)任何異常改變。因此，無法測(cè)出憂慮康液復(fù)方制劑

10、的半數(shù)致死量LD50，故改做小鼠最大給藥量試驗(yàn)。1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)分析SPSS13.0FRinds統(tǒng)計(jì)軟件包作為統(tǒng)計(jì)工具，計(jì)量資料用xs表示，方差齊者用單因素方差分析，方差不齊的采用Tahan分析。2結(jié)果2.1各組大鼠體重及行為學(xué)指標(biāo)的比擬2.1.1應(yīng)激前各組大鼠體重及行為學(xué)指標(biāo)的比擬經(jīng)過挑選分組后，實(shí)驗(yàn)前各組動(dòng)物的體重、敞箱試驗(yàn)得分和液體消耗試驗(yàn)的各項(xiàng)指標(biāo)相近，沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異P0.05。見表1。表1應(yīng)激前各組大鼠體重及行為學(xué)指標(biāo)的比擬注:P0.052.1.2治療前各組大鼠體重及行為學(xué)指標(biāo)的比擬治療前應(yīng)激第7天與空白組相比，各組體重、敞箱試驗(yàn)和液體消耗試驗(yàn)各項(xiàng)指標(biāo)都有下降。敞箱試驗(yàn)中，低劑量組程度得

11、分及各組垂直得分均顯著下降P0.05。液體消耗試驗(yàn)中，各組糖水偏愛%均低于空白組，其中憂慮康低劑量組、高劑量組糖水偏愛%降低有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，提示各組動(dòng)物均出現(xiàn)不同程度的抑郁。見表2。表2治療前各組大鼠體重及行為學(xué)指標(biāo)的比擬注：與空白組比擬，*P0.05，*P0.012.1.3治療后各組大鼠體重及行為學(xué)指標(biāo)的比擬治療14天應(yīng)激第21天，與空白組比擬，模型組體重、敞箱試驗(yàn)和液體消耗試驗(yàn)各項(xiàng)指標(biāo)差異均有顯著性，提示抑郁模型復(fù)制成功；與模型組比擬，氟西汀組在各項(xiàng)指標(biāo)上差異均有顯著性P0.05，憂慮康高劑量程度得分及憂慮康低、中、高劑量組中央格停留時(shí)間顯著減少；與氟西汀陽性對(duì)照組比擬憂慮康各劑量組各指標(biāo)無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，說明憂慮康能局部改善模型動(dòng)物的抑郁行為。見表3。表3治療14天各組大鼠體重及行為學(xué)指標(biāo)的比擬注：與空白組比擬，*P0.05，*P0.01；與模型組比擬，#P0.05，#P0.012.1.4憂慮康液對(duì)模型動(dòng)物血漿AP、GP的影響與空白組比擬，模型組血漿AP含量及AP/GP比值升高差異有顯著性，提示大鼠存在內(nèi)在的腎陰虛；與模型組比擬，地黃丸組、憂慮康低、中、高劑量組都有下降趨勢(shì)，其中地黃丸組、憂慮康中劑量、高劑量組下降有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P0.05。見表4。表4憂慮康液對(duì)肝腎陰虛抑郁模型大鼠血漿AP、GP影響注：與