肝愈膠囊的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究

1、肝愈膠囊的質(zhì)量尺度研究【摘要】目的創(chuàng)立操縱肝愈膠囊的質(zhì)量尺度。要領(lǐng)對肝愈膠囊中重要身分丹參、梔子、黃柏、黃芪、五味子舉行了薄層色譜區(qū)分；接納高效液相色譜法測定黃芩苷的含量。結(jié)果薄層色譜法可以對該制劑中的丹參、梔子、黃柏、黃芪、五味子作出正確區(qū)分；黃芩苷的線性范疇為0.120.58g，r=0.9997，均勻加樣接納率為99.06，RSD為1.40(n=5)。結(jié)論要領(lǐng)敏捷、輕便、重現(xiàn)性好，可作為該制劑的質(zhì)量尺度?！娟P(guān)鍵詞】肝愈膠囊黃芩苷薄層色譜高效液相色譜Keyrds:Ganyuapsule;Baialin;TL;HPL肝愈膠囊由黃芩、丹參、梔子、黃柏、黃芪、五味子等中藥構(gòu)成，具有清熱解毒、益氣活

2、血的成果。主治氣陰兩虛型肝炎。為操縱本品的內(nèi)涵質(zhì)量，本實(shí)行接納TL，HPL等要領(lǐng)對其舉行質(zhì)量尺度研究。1儀器與試藥2要領(lǐng)與結(jié)果2.1薄層區(qū)分取本品內(nèi)容物3g，研細(xì)，加乙醚20l，超聲處置懲罰20in，濾過，濾液揮干，殘?jiān)哟姿嵋阴?l使溶解，作為供試品溶液。另取丹參比較藥材粗粉1g和按處方量從中撤除丹參藥材的陰性比較品粗粉4g，別離同法制成比較藥材溶液和陰性比較液。再取丹參酮A比較品，加醋酸乙酯制成每毫升含0.5g的溶液，作為比較品溶液。照薄層色譜法實(shí)行1，汲取上述4種溶液各6l,別離點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以苯-醋酸乙酯191為睜開劑，睜開，取出，晾干，供試品色譜中，在與比較藥材和比較品色譜

3、相應(yīng)的位置上，顯雷同顏色的斑點(diǎn)，而陰性比較色譜在相應(yīng)的位置上無此斑點(diǎn)。見圖1。取本品內(nèi)容物3g，加乙醇20l，超聲處置懲罰20in，濾過，濾液濃縮至約2l，作為供試品溶液。另取梔子比較藥材粗粉1g和按處方量從中撤除梔子的陰性比較品粗粉3g，別離加乙醇10l和20l,同法制成比較藥材溶液和陰性溶液。再取梔子苷比較品，加乙醇制成每毫升含2g的溶液，作為比較品溶液。汲取上述溶液各5l，別離點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為粘合劑的硅膠G薄層板上，以醋酸乙酯-丙酮-甲酸-水5511為睜開劑，睜開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105加熱至斑點(diǎn)顯色清楚。供試品色譜中，在與比較藥材和比較品色譜相應(yīng)的位置上

4、顯雷同顏色的斑點(diǎn)，而陰性比較色譜中無相應(yīng)的斑點(diǎn)。見圖2。取本品內(nèi)容物2g，加甲醇20l,超聲處置懲罰20in，濾過，濾液濃縮至2l，作為供試品溶液。另取黃柏比較藥材粗粉0.2g和按處方量從中撤除黃柏的陰性比較品粗粉2g，別離加甲醇10l和20l,加熱回流提取15in，過濾，濾液濃縮至干，各加1l甲醇使溶解，別離作為比較藥材溶液和陰性比較溶液。再取鹽酸小檗堿比較品，加甲醇制成每毫升含0.5g的溶液，作為比較品溶液。汲取上述溶液各3l,別離點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為粘合劑的硅膠G薄層板上，以苯-醋酸乙酯-異丙醇-甲醇-濃氨試液631.51.50.5為睜開劑，置氨蒸氣飽和的層析缸內(nèi)，睜開，取出，晾干

5、，置紫外光燈365n下檢視。供試品色譜中，在與比較藥材及比較品色譜相應(yīng)的位置上，顯雷同的熒光斑點(diǎn)。見圖3。取本品內(nèi)容物4g，加正丁醇30l，超聲處置懲罰1h，濾過，濾液用1%氫氧化鈉溶液洗滌3次，20l/次，棄去堿液，用正丁醇飽和的水洗至中性，棄去水液，正丁醇濃縮至干，殘?jiān)蛹状?l使溶解，作為供試品溶液。另取黃芪比較藥材粗粉1g和按處方量從中撤除黃芪的陰性比較品粗粉4g，別離加正丁醇15l和30l，同法制成比較藥材溶液和陰性比較溶液。再取黃芪甲苷比較品，加甲醇制成每毫升含1g的溶液，作為比較品溶液。汲取供試品溶液和陰性比較品溶液各8l，比較藥材溶液6l，比較品溶液4l，別離點(diǎn)于同一以羧甲基纖

6、維素鈉為粘合劑的硅膠G薄層板上，以氯仿-醋酸乙酯-甲醇-水102011510以下安排的下層溶液為睜開劑，睜開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，置105烘至斑點(diǎn)顯色清楚，供試品色譜中，在與比較藥材色譜和比較品色譜相應(yīng)的位置上，顯雷同顏色斑點(diǎn)。見圖4。取本品內(nèi)容物5g，置索氏提取器中，加氯仿30l，回流提取3h，接納氯仿，殘?jiān)勇确?l使溶解，作為供試品溶液。另取五味子比較藥材粗粉2g和按處方量從中撤除五味子的陰性比較品粗粉5g,別離置索氏提取器中，各加氯仿15l和30l，同法制成比較藥材溶液和比較品溶液。再取五味子乙素比較品，加氯仿制成每毫升含1g的溶液，作為比較品溶液。汲取供試品溶液、比較

7、藥材溶液和陰性溶液各5l，比較品溶液3l，別離點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為粘合劑的硅膠GF254薄層板上，以石油醚3060-甲酸乙酯-甲酸1551的上層溶液為睜開劑，睜開，取出，晾干，置紫外光燈254n下檢視。供試品色譜中，在與比較藥材色譜及比較品色譜相應(yīng)的位置上，顯雷同的熒光斑點(diǎn)。見圖5。2.2含量測定色譜柱Krasil182004.6,5,活動相：甲醇-水-冰醋酸55450.5流速1.0l/in；檢測波長280n；柱溫25；理論板數(shù)按黃芩苷峰計(jì)應(yīng)不低于1500。細(xì)密稱取枯燥至恒重的黃芩苷比較品2.92g，置50l量瓶中，加適量甲醇溶解，稀釋至刻度，搖勻，制成每毫升含0.00584g的比較品溶

8、液。別離細(xì)密汲取比較品溶液2，4，6，8，10l，注入液相色譜儀，按上述色譜條件測定峰面積，以黃芩苷進(jìn)樣量微克數(shù)為橫坐標(biāo)，峰面積積分值為縱坐標(biāo)，得不停線，盤算回歸方程為Y=2.43106X-3.74104，r=0.9997n=5.結(jié)果表白黃芩苷在0.11680.5840g范疇內(nèi)線性干系精良。取本品10粒，傾出內(nèi)容物，研細(xì)，取3.0g細(xì)密稱定，置具塞錐形瓶中，細(xì)密參加70%乙醇50l,稱定重量，超聲處置懲罰功率250，頻率40kHz30in，放冷，再稱定重量，用70%乙醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，細(xì)密量取續(xù)濾液2.0l，置10l量瓶中，加70%乙醇至刻度，搖勻后過0.45微孔濾膜，濾液作為供試

9、品溶液。細(xì)密汲取濃度為0.00584g/l的黃芩苷比較品溶液5l，重復(fù)進(jìn)樣5次，均值為609299，RSD=0.90%n=5，結(jié)果表白儀器細(xì)密度精良。細(xì)密汲取供試品溶液5l，注入液相色譜儀，別離于0，1，3，7，12h測定峰面積。結(jié)果表白峰面積的RSD為0.90%，表白供試品溶液在12h內(nèi)根本不變。取樣品和按處方比例不含黃芩的諸藥，按制劑工藝別離制成供試品溶液和陰性比較液，細(xì)密汲取比較品溶液、供試品溶液、陰性比較品溶液各5l，別離注入液相色譜儀，依法測定，結(jié)果陰性比較品溶液在與黃芩苷比較品溶液雷同保存時間處無色譜峰，表白無滋擾。見圖6。取同一批號樣品，按供試品制備要領(lǐng)平行制備5份，依法測定黃芩

10、苷峰面積，別離盤算含量，RSD為1.24%，表白重復(fù)性精良。接納加樣接納法，細(xì)密稱取黃芩苷含量的同一批號樣品(040105)5份，1.6g/份，別離細(xì)密參加黃芩苷比較品8g，按含量測定要領(lǐng)操縱測定，盤算，均勻接納率為99.06%，RSD為1.4%。結(jié)果見表1。表1接納率觀察數(shù)據(jù)略取3批樣品依法制備供試品溶液，細(xì)密汲取比較品溶液和供試品溶液各5l，別離注入液相色譜儀，測定峰面積，盤算樣品中黃芩苷的含量。結(jié)果見表2。表2樣品含量測定命據(jù)略3討論在黃柏的薄層色譜區(qū)分實(shí)行中，黃柏區(qū)分項(xiàng)下1的睜開劑，醋酸乙酯-丁酮-甲酸-水10611舉行實(shí)行，結(jié)果分散結(jié)果欠好，Rf值較小，相鄰斑點(diǎn)分不開。厥后選用黃連區(qū)分項(xiàng)下的睜開劑，顛末屢次調(diào)解，把睜開劑中的水換成濃氨試液，即睜開劑為苯-醋酸乙酯-異丙醇-甲醇-濃氨試液(631.51.50.5)結(jié)果較好，結(jié)果較不變?；顒酉嗟倪x擇“雙黃連顆粒項(xiàng)下1黃芩苷含量測定的活動相，試驗(yàn)結(jié)果創(chuàng)造黃芩苷達(dá)不到基線，保存時間較短，經(jīng)調(diào)解將甲醇比例增大些，醋酸比例縮小，那么到達(dá)基線分散、保存時間符合，故活動相選用甲醇-水-冰醋酸55450.5。接納參考文獻(xiàn)1要領(lǐng)對