藥物累積法測(cè)定四逆湯制劑的藥動(dòng)學(xué)參數(shù)

1、藥物累積法測(cè)定四逆湯制劑的藥動(dòng)學(xué)參數(shù)【關(guān)鍵詞】藥物摘要：目的研究四逆注射劑在大鼠體內(nèi)的藥物動(dòng)力學(xué)過(guò)程。方法采用藥物累積法觀察不同間隔時(shí)間累積給藥的毒性效應(yīng)。結(jié)果在不同間隔時(shí)間累積給藥后，動(dòng)物的死亡率不同，反映出不同大小的毒性效應(yīng)。結(jié)論制劑的毒性效應(yīng)在大鼠體內(nèi)呈一級(jí)動(dòng)力學(xué)過(guò)程，其藥動(dòng)學(xué)參數(shù)0，V，Kel，T1/2，AU，L分別為3520.062gkg-1，1.53406kgkg-1，0.74356h-1，0.93201h，4734.1hgkg-1，1.14066kgkg-1h-1。關(guān)鍵詞：四逆湯；藥物累積法；藥力學(xué)參數(shù)生物效應(yīng)法包括藥理效應(yīng)法、藥物累積法、微生物法對(duì)中藥藥動(dòng)學(xué)的研究提供了有益的思

2、路，在一定程度上解決了中藥成分復(fù)雜難以定量的困難，對(duì)說(shuō)明中藥的作用機(jī)理，明確其體內(nèi)過(guò)程、闡述其組方原理、制訂質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)、研制開(kāi)發(fā)新產(chǎn)品及合理評(píng)價(jià)藥效等具有重要意義1。四逆湯是張氏?傷寒論?中名方，由制附子、干姜、炙甘草三味藥組成，組方精簡(jiǎn)，療效顯著，為古今中醫(yī)臨床常用方2。本文將采用藥物累積法研究四逆注射劑的毒性效應(yīng)的藥代動(dòng)力學(xué)。1實(shí)驗(yàn)材料1.1實(shí)驗(yàn)用藥制附子、干姜、炙甘草，購(gòu)自清平市場(chǎng)，并經(jīng)中藥鑒定教研室鑒定為藥用正品；四逆注射劑，由微生物制劑工藝研究室研制，并經(jīng)過(guò)初步質(zhì)量檢查及藥效學(xué)研究，證明符合有關(guān)規(guī)定并具有較好的強(qiáng)心作用。1.2實(shí)驗(yàn)動(dòng)物SD大鼠,體重180220g,雌雄各半,由廣東省

3、衛(wèi)生廳實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。2實(shí)驗(yàn)方法2.1LD50的測(cè)定及對(duì)數(shù)劑量-死亡機(jī)率單位曲線的制備經(jīng)反復(fù)預(yù)試，確定其致大鼠全死量D=22000gkg-1，致全不死量Dn=17000gkg-1。取180220g的SD大鼠35只，雌雄不拘，隨機(jī)分為7組,分別按22000，20900，19900，18900，17900gkg-1(r=10.95)尾靜脈注射給藥，觀察7d內(nèi)各組死亡率。結(jié)果見(jiàn)表1。表1四逆注射劑不同劑量與大鼠死亡關(guān)系組略將表1中的數(shù)據(jù)用改進(jìn)寇氏法進(jìn)展計(jì)算，求得LD50=19340.27gkg-1,其95%可信區(qū)間為18719.3219985.27gkg-1。以制劑中含附子藥量作劑量對(duì)數(shù)死亡機(jī)率單

4、位曲線DP直線。見(jiàn)圖1。圖1DP直線其方程為Y=38.3919X-139.3713，相關(guān)系數(shù)r=0.9822.2累積法藥動(dòng)學(xué)研究經(jīng)預(yù)試,確定實(shí)驗(yàn)給藥量以附子生藥量計(jì)為5400gkg-1(相當(dāng)于LD15.2，制劑18000gkg-1,)。取170200g的SD大鼠49只,雌雄不拘，隨機(jī)分為7組，分別按所確定劑量尾靜脈注射給藥，在第1次給藥后，分別于1.5，2，2.5，3，4，6，8h第2次給予一樣劑量，觀察7d內(nèi)動(dòng)物死亡情況，計(jì)算死亡率，查出相應(yīng)機(jī)率單位，并由DP直線計(jì)算出相當(dāng)?shù)母阶芋w存量，按T=DD0式1計(jì)算體存量，式(1)中D為相當(dāng)劑量,D0為第2次給藥劑量。結(jié)果見(jiàn)表2。表2藥物累積法大鼠體

5、內(nèi)附子體存量組別略2.3藥動(dòng)學(xué)參數(shù)計(jì)算將實(shí)驗(yàn)時(shí)間及所得對(duì)應(yīng)的烏頭生物堿體存量用PKP藥動(dòng)學(xué)軟件在586兼容機(jī)上進(jìn)展處理，擬合藥時(shí)曲線并將各種模型結(jié)果進(jìn)展比擬，選擇其中相關(guān)系數(shù)最正確及AI值最小者定為四逆注射劑中烏頭生物堿等總成分的正式藥時(shí)曲線。結(jié)果說(shuō)明：該藥總成分在大鼠體內(nèi)呈一級(jí)動(dòng)力學(xué)消除,符合靜脈注射后的開(kāi)放一房室模型(R=0.971S=0.0573)特征,所得各項(xiàng)藥動(dòng)學(xué)參數(shù)如表3。擬合藥物體存量隨時(shí)間變化的動(dòng)力學(xué)方程為:=0.25531e-0.60965t式2。轉(zhuǎn)貼于論文聯(lián)盟.ll.表3藥物累積法所測(cè)四逆注射劑在大鼠體內(nèi)的藥動(dòng)學(xué)參數(shù)參數(shù)名略3討論3.1實(shí)驗(yàn)的創(chuàng)新性與意義本研究對(duì)四逆注射劑進(jìn)

6、展毒性藥動(dòng)學(xué)研究，對(duì)于開(kāi)發(fā)研制四逆湯的新劑型，更好地指導(dǎo)臨床按不同途徑給藥有較大的指導(dǎo)意義。3.2實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇一般中藥制劑的毒性較低，急性毒性實(shí)驗(yàn)常用小鼠作為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。本實(shí)驗(yàn)中選用大鼠，因?yàn)椋?本制劑的一定劑量即可以使大鼠致死；2為了與血藥濃度法及以后要進(jìn)展的血清藥效動(dòng)力學(xué)方法保持動(dòng)物一致，克制不同實(shí)驗(yàn)方法的動(dòng)物種屬差異；3為了克制動(dòng)物不同種屬、批次給實(shí)驗(yàn)結(jié)果帶來(lái)的差異，本實(shí)驗(yàn)由廣東省衛(wèi)生廳實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心購(gòu)置了同一批次SD大鼠進(jìn)展研究。3.3實(shí)驗(yàn)方法的選擇一般認(rèn)為，藥物累積法適用于含有毒成分中藥制劑的研究。本制劑中君藥制附子中的烏頭生物堿既是有效成分同時(shí)又具毒性，適于進(jìn)展此法的研究4。3.4實(shí)

7、驗(yàn)用藥量的選擇在LD50的測(cè)定中，發(fā)現(xiàn)動(dòng)物對(duì)四逆注射劑在一定劑量如17000gkg-1時(shí)耐受力較強(qiáng)，給藥速度、環(huán)境溫度對(duì)動(dòng)物的影響較小，而大于此劑量如18900gkg-1以上，給藥速度、環(huán)境溫度的改變即可引起動(dòng)物的死亡，因此，實(shí)驗(yàn)操作的純熟程度在實(shí)驗(yàn)中是非常重要的，可能會(huì)影響到DP直線的準(zhǔn)確性，從而對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生較大影響。在本課題中，經(jīng)過(guò)反復(fù)預(yù)試,確定了累積法18000gkg-1的給藥劑量,僅相當(dāng)于LD15.2，而未采用文獻(xiàn)報(bào)道的1/2LD90量3，選擇給藥最短時(shí)間間隔為1.5h，是為了防止微小的劑量改變等因素及體液在短時(shí)間內(nèi)驟增而影響心臟功能，從而導(dǎo)致毒性的明顯變化，保證結(jié)果的真實(shí)和可靠，減少其它因素引起的動(dòng)物死亡。3.5方法學(xué)討論藥物累積法不拘泥于中藥制劑在體內(nèi)的吸收過(guò)程，可以較方便地研究藥物在動(dòng)物體內(nèi)的單一時(shí)量關(guān)系，模擬其表觀藥動(dòng)學(xué)過(guò)程，為臨床用藥提供有價(jià)值的資料，也可以為建立中藥制劑的PK-PD模型提供一定的參考根據(jù)；但該方法同時(shí)忽略了機(jī)體對(duì)藥物的吸收及首過(guò)效應(yīng)對(duì)動(dòng)力學(xué)過(guò)程的影響，且此法的研究只可能用動(dòng)物進(jìn)展，無(wú)法明確藥物在體內(nèi)的代謝過(guò)程，提供更有說(shuō)服力的數(shù)據(jù)。參考文獻(xiàn)：1周莉玲,李銳.中藥制劑的動(dòng)力學(xué)研究討論J.中成藥研究,1986,8(1):3.2陳奇.中成藥名方藥理與臨床.北京：人民