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1、關(guān)于實(shí)驗(yàn)一油鏡的使用和細(xì)菌形態(tài)觀察及革蘭氏染色第1頁(yè),共24頁(yè),2022年,5月20日,22點(diǎn)8分,星期三實(shí) 驗(yàn) 要 求堅(jiān)持課前預(yù)習(xí)不遲到,不早退,更不能無(wú)故缺課;嚴(yán)格按正確規(guī)范實(shí)驗(yàn)方法進(jìn)行實(shí)驗(yàn),作好記錄;保持實(shí)驗(yàn)室整潔注意安全事實(shí)求是地、獨(dú)立地寫好實(shí)驗(yàn)報(bào)告第2頁(yè),共24頁(yè),2022年,5月20日,22點(diǎn)8分,星期三實(shí)驗(yàn)報(bào)告姓名、班級(jí)和學(xué)號(hào)實(shí)驗(yàn)題目實(shí)驗(yàn)原理(略寫)實(shí)驗(yàn)操作( (略寫)實(shí)驗(yàn)結(jié)果畫圖文字描述分析和討論思考題第3頁(yè),共24頁(yè),2022年,5月20日,22點(diǎn)8分,星期三實(shí)驗(yàn)一、顯微鏡油鏡的使用和細(xì)菌形態(tài)的觀察、細(xì)菌的革蘭氏染色 教學(xué)目標(biāo)或要求:鞏固和掌握顯微鏡油鏡的正確使用;學(xué)習(xí)細(xì)菌制
2、片和單染色技術(shù);對(duì)人體微生物染色檢查,初步建立無(wú)菌操作的概念。學(xué)習(xí)細(xì)菌的革蘭氏染色方法 第4頁(yè),共24頁(yè),2022年,5月20日,22點(diǎn)8分,星期三顯微鏡油鏡的使用油鏡頭的識(shí)別和重要參數(shù)油鏡物鏡的工作原理油鏡的使用方法和注意事項(xiàng)第5頁(yè),共24頁(yè),2022年,5月20日,22點(diǎn)8分,星期三油鏡頭的識(shí)別和重要參數(shù)放大倍數(shù)數(shù)值孔徑工作距離第6頁(yè),共24頁(yè),2022年,5月20日,22點(diǎn)8分,星期三油鏡物鏡的工作原理使用油質(zhì)作為玻片與接物鏡之間的介質(zhì)油浸系可以增加顯微鏡的放大倍數(shù)可以增加視野的照明度可以增大顯微鏡的分辨率第7頁(yè),共24頁(yè),2022年,5月20日,22點(diǎn)8分,星期三油鏡的使用方法和注意事
3、項(xiàng)1、用低倍鏡對(duì)光。最大光圈2、低倍鏡觀察(尋找觀察目標(biāo))。適當(dāng)縮小光圈3、高倍鏡觀察(選取理想的觀察目標(biāo))。4、油鏡觀察:高倍鏡觀察后- 上升鏡筒-油鏡轉(zhuǎn)至正下方,在載玻片上加一小滴油-小心地下降鏡筒使鏡頭浸在油里-用粗螺旋將鏡筒緩慢上升,尋找目標(biāo)(物象)用細(xì)螺旋調(diào)節(jié),使物象清晰-觀察記錄。最大光圈5、觀察完畢。上升鏡筒,轉(zhuǎn)動(dòng)物鏡轉(zhuǎn)換器,使油鏡物鏡偏位。用干凈擦鏡紙擦去鏡頭上的油跡,再取一張擦鏡紙醮上二甲苯擦去鏡頭上殘留的香柏油,最后再用一張干凈的擦鏡紙擦去殘留在鏡頭上的二甲苯。6、將顯微鏡各部分還原,放回箱中。第8頁(yè),共24頁(yè),2022年,5月20日,22點(diǎn)8分,星期三細(xì)菌的制片與染色單染
4、色復(fù)染色第9頁(yè),共24頁(yè),2022年,5月20日,22點(diǎn)8分,星期三染 料堿性染料(basic dye)帶正電染料。其陽(yáng)離子部分為發(fā)色基團(tuán),可與細(xì)胞中帶負(fù)電的組分結(jié)合。如結(jié)晶紫沙黃, 甲基藍(lán),堿性復(fù)紅等。酸性染料(Acid dye)帶負(fù)電染料。其陰離子部分為發(fā)色基團(tuán),可與細(xì)胞中帶正電的組分結(jié)合。如剛果紅、酸性復(fù)紅 等。脂溶性染料如Sudan black。 多數(shù)染料都是中性有機(jī)鹽。據(jù)著色基的不同可分為以下類型:第10頁(yè),共24頁(yè),2022年,5月20日,22點(diǎn)8分,星期三涂片干燥固定染色12min水洗、吸干鏡檢細(xì)菌的單染色第11頁(yè),共24頁(yè),2022年,5月20日,22點(diǎn)8分,星期三步驟:結(jié)果:
5、 陽(yáng)性菌紫色 陰性菌紅色結(jié)晶紫初染碘液媒染乙醇脫色番紅復(fù)染涂片固定由丹麥醫(yī)生Hans Christian Gram于1884年創(chuàng)立。革蘭氏染色法(Gram Stain)第12頁(yè),共24頁(yè),2022年,5月20日,22點(diǎn)8分,星期三革蘭氏染色法操作步驟涂片干燥固定結(jié)晶紫1min水洗I-KI 1min水洗95%乙醇脫色約1020s水洗沙黃或石炭酸復(fù)紅 1min水洗干燥鏡檢第13頁(yè),共24頁(yè),2022年,5月20日,22點(diǎn)8分,星期三革蘭氏染色注意事項(xiàng)p45第14頁(yè),共24頁(yè),2022年,5月20日,22點(diǎn)8分,星期三實(shí)驗(yàn)內(nèi)容1、用美藍(lán)對(duì)蘇云金芽孢桿菌進(jìn)行單染色,在顯微鏡油鏡下觀察形態(tài);2、用混合涂
6、片的方法對(duì)大腸桿菌、蘇云金芽孢桿菌進(jìn)行革蘭氏染色3、自選材料:用牙簽挑取牙垢觀察第15頁(yè),共24頁(yè),2022年,5月20日,22點(diǎn)8分,星期三實(shí)驗(yàn)報(bào)告繪出革蘭氏染色后大腸桿菌和蘇云金芽孢桿菌的形態(tài)圖并說(shuō)明染色結(jié)果思考題:你認(rèn)為那些環(huán)節(jié)會(huì)影響革蘭氏染色結(jié)果的正確性?其中最關(guān)鍵的環(huán)節(jié)是什么?如何使你的染色結(jié)果可信?第16頁(yè),共24頁(yè),2022年,5月20日,22點(diǎn)8分,星期三第17頁(yè),共24頁(yè),2022年,5月20日,22點(diǎn)8分,星期三第18頁(yè),共24頁(yè),2022年,5月20日,22點(diǎn)8分,星期三第19頁(yè),共24頁(yè),2022年,5月20日,22點(diǎn)8分,星期三第20頁(yè),共24頁(yè),2022年,5月20日,22點(diǎn)8分,星期三第21頁(yè),共24頁(yè),2022年,5月20日,22點(diǎn)8分,星期三第22頁(yè),共24頁(yè),20
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