DNA的粗提取與鑒定生物選修一知識點(diǎn)考點(diǎn)

1、DNA的粗提取與鑒定生物選修一知識點(diǎn)考點(diǎn) 高中生物學(xué)學(xué)問往往環(huán)環(huán)相扣，上一個學(xué)問的學(xué)習(xí)就是為下一個學(xué)問的學(xué)習(xí)奠定理論和學(xué)問基礎(chǔ)，下面是小偏整理的DNA的粗提取與鑒定生物選修一學(xué)問點(diǎn)考點(diǎn)，感謝您的每一次閱讀。 DNA的粗提取與鑒定生物選修一學(xué)問點(diǎn)考點(diǎn) 提取DNA的溶解性原理包括DNA在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同;DNA不溶于酒精。 DNA在不同濃度NaCl溶液中溶解度的特點(diǎn)：在0.14mol/L時溶解度最小;要使DNA溶解，需要較高濃度?要使DNA析出，又需要0.14mol/L的濃度? 在溶解細(xì)胞中的DNA時，人們通常選用2mol/LNaCl溶液;將DNA分子析出的方法是向溶有DNA的Na

2、Cl溶液中緩慢注入蒸餾水，以稀釋NaCl溶液。酒精是一種常用有機(jī)溶劑，但DNA卻不能溶于酒精(特殊是95%冷卻酒精)，但細(xì)胞中蛋白質(zhì)可溶于酒精。 從理論上分析，預(yù)冷的乙醇溶液具有以下優(yōu)點(diǎn)。一是抑制核酸水解酶活性，防止DNA降解;二是降低分子運(yùn)動，易于形成沉淀析出;三是低溫有利于增加DNA分子柔韌性，削減斷裂。 采納DNA不溶于酒精的原理，可以達(dá)到的目的是：將DNA和蛋白質(zhì)進(jìn)一步分別。 提取DNA還可以利用DNA對酶、高溫柔洗滌劑的耐受性原理。利用該原理時，應(yīng)選用蛋白酶，由于酶具有專一性，蛋白酶只水解蛋白質(zhì)而不會對DNA產(chǎn)生影響。溫度值為6080，由于該溫度值蛋白質(zhì)變性沉淀，而DNA不會變性。

3、補(bǔ)充：DNA的變性是指DNA分子在高溫下解螺旋，其溫度在80以上，如在PCR技術(shù)中DNA變性溫度在95。 當(dāng)鑒定提取出的物質(zhì)是否是DNA時，需要使用什么指示劑進(jìn)行鑒定? 答：在沸水浴條件下，DNA遇二苯胺呈現(xiàn)藍(lán)色。 原理總結(jié)：通過利用不同濃度NaCl溶液溶解或析出DNA，可以從細(xì)胞中提取和提純DNA;再利用酒精進(jìn)一步將DNA與蛋白質(zhì)分別開來，達(dá)到提純的目的;最終利用二苯胺試劑鑒定提取的物質(zhì)是否是DNA。 試驗(yàn)材料的選?。?不同生物的組織中DNA含量不同。在選取材料時，應(yīng)本著DNA含量高、材料易得、便于提取的原則。 本試驗(yàn)用雞血細(xì)胞做試驗(yàn)材料有兩個緣由。一是由于雞血細(xì)胞核的DNA含量豐富，材料易

4、得;二是雞血細(xì)胞極易吸水脹破，而用動物肝臟細(xì)胞作試驗(yàn)材料經(jīng)常需要勻漿和離心，對設(shè)備要求較高，操作繁瑣，歷時較長。 雞血細(xì)胞破裂以后釋放出的DNA，簡單被玻璃容器吸附，所以在提取過程中為了削減DNA的損失，最好使用塑料的燒杯和試管盛放雞血細(xì)胞液。 破裂細(xì)胞，獵取含DNA的濾液： 若選用雞血和洋蔥作試驗(yàn)材料，則怎樣獵取含DNA的濾液? 答：在雞血細(xì)胞液中加入肯定量蒸餾水并用玻棒攪拌，過濾后收集濾液;切碎洋蔥，加入肯定量洗滌劑和食鹽，攪拌研磨，過濾后收集濾液。 為什么加入蒸餾水能使雞血細(xì)胞裂開? 答：蒸餾水對于雞血細(xì)胞來說是一種低滲液體，水分可以大量進(jìn)入血細(xì)胞內(nèi)，使血細(xì)胞脹裂，再加上攪拌的機(jī)械作用，

5、就加速了雞血細(xì)胞的裂開(細(xì)胞膜和核膜的裂開)，從而釋放出DNA。 在以上試驗(yàn)中，加入蒸餾水、洗滌劑和食鹽的作用分別是什么? 答：過濾時應(yīng)當(dāng)選用(濾紙、尼龍布)。血細(xì)胞在蒸餾水中大量吸水而張裂;洗滌劑瓦解細(xì)胞膜;食鹽溶解DNA物質(zhì);選用尼龍布進(jìn)行過濾。 在處理植物組織時需要進(jìn)行研磨，其目的是什么?研磨不充分產(chǎn)生什么結(jié)果? 答：破裂細(xì)胞壁，使核物質(zhì)簡單溶解在NaCl溶液中;研磨不充分會使DNA的提取量削減，影響試驗(yàn)結(jié)果，導(dǎo)致看不到絲狀沉淀物、用二苯胺鑒定不顯示藍(lán)色等。詳細(xì)做法。10mL雞血+20mL蒸餾水同方向攪拌3層尼龍布過濾濾液。 為什么反復(fù)地溶解與析出DNA，能夠去除雜質(zhì)? 答：用高鹽濃度的

6、溶液溶解DNA，能除去在高鹽中不能溶解的雜質(zhì);用低鹽濃度使DNA析出，能除去溶解在低鹽溶液中的雜質(zhì)。因此，通過反復(fù)溶解與析出DNA，就能夠除去與DNA溶解度不同的多種雜質(zhì)。 最初獲得的DNA濾液含有蛋白質(zhì)、脂質(zhì)等雜質(zhì)，需要進(jìn)一步提純DNA。 方案一的原理是DNA在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同; 方案二的原理是蛋白酶分解蛋白質(zhì)，不分解DNA; 方案三的原理是蛋白質(zhì)和DNA的變性溫度不同。 方案二與方案三的原理有什么不同? 答：方案二是利用蛋白酶分解雜質(zhì)蛋白，從而使提取的DNA與蛋白質(zhì)分開;方案三利用的是DNA和蛋白質(zhì)對高溫耐受性的不同，從而使蛋白質(zhì)變性，與DNA分別。 析出與鑒定： 在濾液中

7、仍舊含有一些雜質(zhì)，怎樣除去這些雜質(zhì)呢?得到的DNA呈何顏色? 答：濾液與等體積的冷卻酒精混合勻稱，靜置23分鐘，析出的白色絲狀物就是DNA。DNA呈白色。 怎樣鑒定析出的白色絲狀物就是DNA呢? 答：詳細(xì)做法：試管2支，編號甲乙各加等量5mLNaCl溶液甲中放入少量白色絲狀物，使之溶解各加4mL二苯胺，混合勻稱沸水浴5min觀看顏色變化。 試驗(yàn)操作： 制備雞血細(xì)胞液：加檸檬酸鈉，靜置或離心 破裂細(xì)胞，釋放DNA：加蒸餾水，同一方向快速通方向攪拌過濾，除去細(xì)胞壁、細(xì)胞膜等。 溶解核內(nèi)DNA：加入NaCl至2mol/L，同一方向緩慢攪拌 DNA析出：加蒸餾水至0.14mol/L，過濾，在溶解到2m

8、ol/L溶液中除去細(xì)胞質(zhì)中的大部分物質(zhì)。 DNA初步純化：與等體積95%冷卻酒精混合，析出白色絲狀物除去核蛋白、RNA、多糖等。 DNA鑒定：二苯胺，沸水浴，呈現(xiàn)藍(lán)色 留意事項(xiàng)：在雞血中加入檸檬酸鈉防止凝固;雞血靜置或離心以提高細(xì)胞懸液濃度;使用塑料燒杯;使用尼龍布過濾;玻棒沿同一方向攪拌;玻棒攪拌要緩慢(細(xì)胞裂開快速攪拌);玻棒不要遇到燒杯壁;二苯胺試劑要現(xiàn)用現(xiàn)配等。 思維導(dǎo)圖在高中生物教學(xué)中的詳細(xì)應(yīng)用 1.思維導(dǎo)圖在新授課中的應(yīng)用 思維導(dǎo)圖的應(yīng)用，不僅能優(yōu)化教學(xué)內(nèi)容，還能提高教學(xué)效率，讓同學(xué)的學(xué)習(xí)有的放矢，削減學(xué)習(xí)的盲目性。因此，在新授課的課堂導(dǎo)入環(huán)節(jié)中，老師可借助思維導(dǎo)圖構(gòu)建學(xué)問之間的聯(lián)

9、系，讓同學(xué)明確生物學(xué)習(xí)的內(nèi)容以及學(xué)習(xí)的目的，從而引起同學(xué)對生物學(xué)習(xí)的重視。例如，在細(xì)胞的物質(zhì)輸入和輸出的新授課中，為了讓同學(xué)對本章內(nèi)容有所了解，老師預(yù)先借助繪圖軟件繪制了思維導(dǎo)圖，將完整的學(xué)問脈絡(luò)呈現(xiàn)給同學(xué)。以“細(xì)胞的物質(zhì)輸入和輸出”為一級主題，進(jìn)行學(xué)問點(diǎn)之間的發(fā)散構(gòu)建，二級主題包括物質(zhì)跨膜運(yùn)輸?shù)膶?shí)例、生物膜的流淌鑲嵌模型、物質(zhì)跨膜運(yùn)輸?shù)姆绞?，也就是生物課程中每節(jié)的主題內(nèi)容。接下來，連續(xù)以二級主題為核心進(jìn)行三級主題的拓展物質(zhì)跨膜運(yùn)輸?shù)膶?shí)例包括細(xì)胞的吸水和失水、物質(zhì)跨膜運(yùn)動的其他實(shí)例、選擇透過性膜;生物膜的流淌鑲嵌模型包括對生物膜結(jié)構(gòu)的探究歷程、流淌鑲嵌模型基本內(nèi)容;物質(zhì)跨膜運(yùn)輸?shù)姆绞桨ㄐ》肿?/p>

10、物質(zhì)或離子跨膜運(yùn)輸方式、大分子物質(zhì)或顆粒狀物質(zhì)進(jìn)出細(xì)胞的方式。這些是在教學(xué)內(nèi)容的基礎(chǔ)上進(jìn)行的規(guī)律構(gòu)建。此外，老師還要把學(xué)習(xí)本章的意義和功能、學(xué)習(xí)的方法等同作為一級標(biāo)題與之并列，讓同學(xué)在學(xué)習(xí)前對本章的內(nèi)容、學(xué)習(xí)方法和重要性有充分的熟悉，為同學(xué)接下來的學(xué)習(xí)奠定基礎(chǔ)。 2.思維導(dǎo)圖在復(fù)習(xí)課中的應(yīng)用 高中生物學(xué)學(xué)問往往環(huán)環(huán)相扣，上一個學(xué)問的學(xué)習(xí)就是為下一個學(xué)問的學(xué)習(xí)奠定理論和學(xué)問基礎(chǔ)，強(qiáng)調(diào)同學(xué)學(xué)習(xí)思維的規(guī)律性，這就需要老師在教學(xué)中構(gòu)建學(xué)問網(wǎng)絡(luò)構(gòu)圖。對此，老師可通過手工方式來繪制思維導(dǎo)圖，并在教學(xué)中進(jìn)行應(yīng)用，尤其是在復(fù)習(xí)課中進(jìn)行應(yīng)用，這樣不僅能提高復(fù)習(xí)效率，還能減輕同學(xué)的學(xué)習(xí)負(fù)擔(dān)。例如，老師在組織同學(xué)復(fù)

11、習(xí)高中生物內(nèi)容時，可以第一、二章走近細(xì)胞組成細(xì)胞的分子為單位，第三、四章(細(xì)胞的基本結(jié)構(gòu)細(xì)胞的物質(zhì)輸入和輸出)為單位等進(jìn)行思維導(dǎo)圖的繪制。老師在繪制思維導(dǎo)圖的整個過程中要與同學(xué)一起共同完成，讓同學(xué)跟著老師的思維完成學(xué)問網(wǎng)絡(luò)的構(gòu)建，將同學(xué)頭腦中零散的學(xué)問點(diǎn)整合起來。細(xì)胞是生命的基本單位，這是第一章的主要內(nèi)容，老師在繪制思維導(dǎo)圖時要以此為起點(diǎn)引導(dǎo)同學(xué)對細(xì)胞種類、細(xì)胞生命的意義等學(xué)問點(diǎn)進(jìn)行回顧，并由此引出細(xì)胞的組成結(jié)構(gòu);而對組成細(xì)胞的成分：元素和化合物、蛋白質(zhì)、核酸、糖類和脂類、無機(jī)物等學(xué)問點(diǎn)的介紹，應(yīng)由同學(xué)來完成。繪制思維導(dǎo)圖的過程即同學(xué)復(fù)習(xí)學(xué)問的過程，也是查缺補(bǔ)漏的過程。 3.思維導(dǎo)圖在同學(xué)筆記中的應(yīng)用 俗話說：“好記性不如爛筆頭?！庇浌P記是高中生普遍應(yīng)用的一種學(xué)習(xí)方式，但記筆記往往會演化成抄老師的板書，許多時候同學(xué)急于跟上老師的節(jié)奏而快速記錄，根本不知道自己寫的是什么，失去了記筆記的意