北京版生物高考總復(fù)習(xí)專題25基因工程（試題練）教學(xué)講練

1、高中生物總復(fù)習(xí)PAGE PAGE 21成功的大門為你而開。第十一單元現(xiàn)代生物科技專題專題25基因工程探考情悟真題【考情探究】考點考向5年考情預(yù)測熱度高考示例素養(yǎng)要素難度1基因工程的工具與操作程序基因工程的工具2017北京理綜,5,6分科學(xué)思維科學(xué)探究易基因工程的操作程序2019北京理綜,4,6分中2PCR技術(shù)及基因工程的應(yīng)用PCR技術(shù)2016北京理綜,31,16分科學(xué)思維科學(xué)探究易基因工程的應(yīng)用與蛋白質(zhì)工程3電泳電泳2018北京理綜,5,6分科學(xué)探究中分析解讀“基因工程”不僅在現(xiàn)代生物專題中占有重要地位,在高考命題中也是一大熱點,并且近年來也有考點加深的趨勢。重點考查內(nèi)容包括基因工程的工具和基

2、本步驟,以及PCR的相關(guān)知識。在基因工程中常常運用電泳技術(shù)來觀察鑒定實驗產(chǎn)物,所以電泳結(jié)果示意圖的考查也經(jīng)常在題目中出現(xiàn),復(fù)習(xí)時應(yīng)注意加強綜合能力的訓(xùn)練?！菊骖}探秘】破考點練考向考點一基因工程的工具與操作程序【考點集訓(xùn)】考向1基因工程的工具1.研究人員用圖1中質(zhì)粒和圖2中含目的基因的片段構(gòu)建重組質(zhì)粒(圖中標(biāo)注了相關(guān)限制酶切割位點),將重組質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌后進行篩選及PCR鑒定。以下敘述不正確的是()圖1圖2A.構(gòu)建重組質(zhì)粒的過程應(yīng)選用Bcl和Hind 兩種限制酶B.使用DNA連接酶將酶切后的質(zhì)粒和目的基因片段進行重組C.含有重組質(zhì)粒的大腸桿菌可以在添加氨芐青霉素的培養(yǎng)基上生存D.利用PCR鑒定

3、含目的基因的大腸桿菌時應(yīng)選用引物甲和引物丙答案C2.科研人員通過PCR技術(shù)獲得肝細胞特異性啟動子白蛋白啟動子,將該啟動子與Cre重組酶基因結(jié)合構(gòu)建表達載體,培育出在肝細胞特異性表達Cre重組酶的轉(zhuǎn)基因小鼠。下列敘述正確的是()A.將該表達載體導(dǎo)入肝細胞以獲得轉(zhuǎn)基因小鼠B.PCR技術(shù)獲得白蛋白啟動子需設(shè)計特異性的引物C.構(gòu)建該表達載體需要限制酶和DNA聚合酶D.通過核酸分子雜交技術(shù)檢測目的基因是否完成表達答案B考向2基因工程的操作程序3.蚯蚓富含金屬硫蛋白(MT)等重金屬結(jié)合蛋白,能選擇性吸收土壤中的鎘。利用基因工程技術(shù)將蚯蚓MT基因轉(zhuǎn)入煙草,流程如圖所示,下列相關(guān)敘述不正確的是()A.過程需使

4、用逆轉(zhuǎn)錄酶B.過程需使用解旋酶和PCR技術(shù)獲取目的基因C.過程使用的感受態(tài)細胞可用CaCl2溶液制備D.過程可利用DNA分子雜交鑒定目的基因是否已導(dǎo)入受體細胞答案B4.利用人胰島B細胞構(gòu)建cDNA文庫,然后通過核酸分子雜交技術(shù)從中篩選目的基因,篩選過程如圖所示。下列說法錯誤的是()A.cDNA文庫的構(gòu)建需要用到逆轉(zhuǎn)錄酶B.圖中的菌落是通過稀釋涂布平板法獲得的C.核酸分子雜交的原理是堿基互補配對D.從該文庫中可篩選到胰高血糖素基因答案D考點二PCR技術(shù)及基因工程的應(yīng)用【考點集訓(xùn)】考向1PCR技術(shù)1.在體外進行DNA復(fù)制(PCR)過程中需要用到的酶是()A.解旋酶 B.DNA聚合酶C.RNA聚合酶

5、D.逆轉(zhuǎn)錄酶答案B2.在核酸分子雜交技術(shù)中,常常使用已知序列的單鏈核酸片段作為探針。為了獲得B鏈作探針(如圖),可應(yīng)用PCR技術(shù)進行擴增,應(yīng)選擇的引物種類是()A.引物1與引物2B.引物3與引物4C.引物2與引物3D.引物1與引物4答案C3.實驗室常用PCR技術(shù)對DNA進行體外擴增,下列相關(guān)敘述正確的是()A.需要解旋酶和耐高溫的DNA聚合酶B.反應(yīng)過程包括變性復(fù)性延伸C.95 時DNA的磷酸二酯鍵斷開D.引物與模板結(jié)合后向5方向延伸答案B考向2基因工程的應(yīng)用與蛋白質(zhì)工程4.DNA分子由兩條反向平行的脫氧核苷酸鏈組成。DNA復(fù)制時,一條子鏈?zhǔn)沁B續(xù)合成的,另一條子鏈?zhǔn)遣贿B續(xù)合成的(即先形成短鏈片

6、段再相互連接),這種復(fù)制方式稱為半不連續(xù)復(fù)制,如圖1。(1)DNA復(fù)制時,子鏈延伸的方向為 (DNA單鏈中具有游離磷酸基團的一端稱為5末端),這一過程需要 酶催化,該酶作用的機理是。(2)半不連續(xù)復(fù)制是1968年日本科學(xué)家岡崎提出的。為驗證假說,他進行了如下實驗:讓T4噬菌體在20 時侵染大腸桿菌70 min后,將同位素3H標(biāo)記的脫氧核苷酸添加到大腸桿菌的培養(yǎng)基中,在2秒、7秒、15秒、30秒、60秒、120秒后,分離T4噬菌體DNA并通過加熱使DNA分子全部變性后,再進行密度梯度離心,以DNA單鏈片段分布位置確定片段大小(分子越小離試管口距離越近),并檢測相應(yīng)位置DNA單鏈片段的放射性,結(jié)果

7、如圖2。在T4噬菌體DNA中能夠檢測到放射性,其原因是。研究表明,富含GC堿基對的DNA分子加熱變性時需要的溫度較高。推測其原因是。圖2中,與60秒結(jié)果相比,120秒結(jié)果中短鏈片段的量,原因是。研究還發(fā)現(xiàn)提取的T4噬菌體DNA上緊密結(jié)合了一些小RNA,根據(jù)PCR反應(yīng)所需條件推測,RNA的作用是。答案(1)53DNA聚合降低反應(yīng)的活化能(2)3H標(biāo)記的脫氧核苷酸被大腸桿菌吸收,為T4噬菌體DNA復(fù)制提供原料DNA分子中GC堿基的比例高,氫鍵較多,分子結(jié)構(gòu)更加穩(wěn)定減少短鏈片段連接成長鏈片段作為子鏈延伸的引物考點三電泳【考點集訓(xùn)】考向電泳1.用PCR方法檢測轉(zhuǎn)基因植株是否成功導(dǎo)入目的基因時,得到以下

8、電泳圖譜。其中1號為DNA標(biāo)準(zhǔn)樣液(Marker),10號為蒸餾水,PCR時加入的模板DNA如圖所示。據(jù)此作出的分析不合理的是()A.PCR產(chǎn)物的分子大小在250500 bp之間B.3號樣品為不含目的基因的載體DNAC.9號樣品對應(yīng)植株不是所需的轉(zhuǎn)基因植株D.10號確定反應(yīng)體系等對結(jié)果沒有干擾答案B2.(2015福建理綜,33)GDNF是一種神經(jīng)營養(yǎng)因子,對損傷的神經(jīng)細胞具有營養(yǎng)和保護作用。研究人員構(gòu)建了含GDNF基因的表達載體(如圖1所示),并導(dǎo)入到大鼠神經(jīng)干細胞中,用于干細胞基因治療的研究。請回答:圖1圖2(1)在分離和培養(yǎng)大鼠神經(jīng)干細胞的過程中,使用胰蛋白酶的目的是。(2)構(gòu)建含GDNF

9、基因的表達載體時,需選擇圖1中的限制酶進行酶切。(3)經(jīng)酶切后的載體和GDNF基因進行連接,連接產(chǎn)物經(jīng)篩選得到的載體主要有3種:單個載體自連、GDNF基因與載體正向連接、GDNF基因與載體反向連接(如圖1所示)。為鑒定這3種連接方式,選擇Hpa酶和BamH酶對篩選得到的載體進行雙酶切,并對酶切后的DNA片段進行電泳分析,結(jié)果如圖2所示。圖中第泳道顯示所鑒定的載體是正向連接的。(4)將正向連接的表達載體導(dǎo)入神經(jīng)干細胞后,為了檢測GDNF基因是否成功表達,可用相應(yīng)的與提取的蛋白質(zhì)雜交。當(dāng)培養(yǎng)的神經(jīng)干細胞達到一定密度時,需進行培養(yǎng)以得到更多數(shù)量的細胞,用于神經(jīng)干細胞移植治療實驗。答案(1)使細胞分散

10、開(2)Xho(3)(4)抗體傳代煉技法提能力方法基礎(chǔ)判斷類比較法分析基因工程的相關(guān)概念【方法集訓(xùn)】1.據(jù)圖所示,有關(guān)工具酶功能的敘述不正確的是()A.限制性核酸內(nèi)切酶可以切斷a處B.DNA聚合酶可以連接a處C.解旋酶可以使b處解開D.DNA連接酶可以連接c處答案D2.下列物質(zhì)或過程不影響磷酸二酯鍵數(shù)目變化的是()A.RNA聚合酶、反轉(zhuǎn)錄酶、Taq酶B.DNA聚合酶、DNA連接酶、DNA酶C.遺傳信息的翻譯、PCR中DNA解鏈D.cDNA文庫的構(gòu)建、基因突變過程答案C3.某種線性DNA含有限制性核酸內(nèi)切酶EcoR的1個酶切位點。該DNA樣品(甲)經(jīng)EcoR酶切后,在DNA連接酶催化下形成產(chǎn)物乙

11、。則反應(yīng)液中產(chǎn)物乙共有()5GAATTC3 5G AATTC33CTTAAG53CTTAA + G5樣品甲5GAATTC33CTTAAG5產(chǎn)物乙A.1種B.2種C.3種D.4種答案C【五年高考】A組自主命題北京卷題組考點一基因工程的工具與操作程序1.(2017北京理綜,5,6分)為了增加菊花花色類型,研究者從其他植物中克隆出花色基因C(圖1),擬將其與質(zhì)粒(圖2)重組,再借助農(nóng)桿菌導(dǎo)入菊花中。下列操作與實驗?zāi)康牟环氖?)A.用限制性核酸內(nèi)切酶EcoR和連接酶構(gòu)建重組質(zhì)粒B.用含C基因的農(nóng)桿菌侵染菊花愈傷組織,將C基因?qū)爰毎鸆.在培養(yǎng)基中添加卡那霉素,篩選被轉(zhuǎn)化的菊花細胞D.用分子雜交方法檢

12、測C基因是否整合到菊花染色體上答案C考點二PCR技術(shù)及基因工程的應(yīng)用2.(2016北京理綜,31,16分)嫁接是我國古代勞動人民早已使用的一項農(nóng)業(yè)生產(chǎn)技術(shù),目前也用于植物體內(nèi)物質(zhì)轉(zhuǎn)運的基礎(chǔ)研究。研究者將具有正常葉形的番茄(X)作為接穗,嫁接到葉形呈鼠耳形的番茄(M)砧木上,結(jié)果見圖1。圖1圖2(1)上述嫁接體能夠成活,是因為嫁接部位的細胞在恢復(fù)分裂、形成組織后,經(jīng)形成上下連通的輸導(dǎo)組織。(2)研究者對X和M植株的相關(guān)基因進行了分析,結(jié)果見圖2。由圖可知,M植株的P基因發(fā)生了類似于染色體結(jié)構(gòu)變異中的變異,部分P基因片段與L基因發(fā)生融合,形成P-L基因(P-L)。以P-L為模板可轉(zhuǎn)錄出,在上翻譯出

13、蛋白質(zhì),M植株鼠耳葉形的出現(xiàn)可能與此有關(guān)。(3)嫁接體正常葉形的接穗上長出了鼠耳形的新葉。為探明其原因,研究者進行了相關(guān)檢測,結(jié)果見下表。 實驗材料檢測對象 M植株的葉X植株的葉接穗新生葉P-L mRNA有無有P-L DNA有無無檢測P-L mRNA需要先提取總RNA,再以mRNA為模板出cDNA,然后用PCR技術(shù)擴增目的片段。檢測P-L DNA需要提取基因組DNA,然后用PCR技術(shù)對圖2中(選填序號)位點之間的片段擴增。a. b.c.d.(4)綜合上述實驗,可以推測嫁接體中P-L基因的mRNA 。答案(1)愈傷細胞分化(2)重復(fù)mRNA核糖體(3)反轉(zhuǎn)錄c(4)從砧木被運輸?shù)浇铀胄律~中,發(fā)

14、揮作用,影響新生葉的形態(tài)考點三電泳3.(2018北京理綜,5,6分)用Xho和Sal兩種限制性核酸內(nèi)切酶分別處理同一DNA片段,酶切位點及酶切產(chǎn)物分離結(jié)果如圖。以下敘述不正確的是()圖1酶切位點圖圖2電泳結(jié)果示意圖A.圖1中兩種酶識別的核苷酸序列不同B.圖2中酶切產(chǎn)物可用于構(gòu)建重組DNAC.泳道中是用Sal處理得到的酶切產(chǎn)物D.圖中被酶切的DNA片段是單鏈DNA答案DB組統(tǒng)一命題、省(區(qū)、市)卷題組考點一基因工程的工具與操作程序1.(2019江蘇單科,33,8分)圖1是某基因工程中構(gòu)建重組質(zhì)粒的過程示意圖,載體質(zhì)粒P0具有四環(huán)素抗性基因(tetr)和氨芐青霉素抗性基因(ampr)。請回答下列問

15、題:圖1(1)EcoR 酶切位點為GATATCCTATAG(2)用Taq DNA聚合酶進行PCR擴增獲得的目的基因片段,其兩端各自帶有一個腺嘌呤脫氧核苷酸。載體P1用酶處理,在兩端各添加了一個堿基為的脫氧核苷酸,形成P2;P2和目的基因片段在酶作用下,形成重組質(zhì)粒P3。(3)為篩選出含有重組質(zhì)粒P3的菌落,采用含有不同抗生素的平板進行篩選,得到A、B、C三類菌落,其生長情況如下表(“+”代表生長,“-”代表不生長)。根據(jù)表中結(jié)果判斷,應(yīng)選擇的菌落是(填表中字母)類,另外兩類菌落質(zhì)粒導(dǎo)入情況分別是、。菌落類型 平板類型ABC無抗生素+氨芐青霉素+-四環(huán)素+-氨芐青霉素+四環(huán)素+-(4)為鑒定篩選

16、出的菌落中是否含有正確插入目的基因的重組質(zhì)粒,擬設(shè)計引物進行PCR鑒定。圖2所示為甲、乙、丙3條引物在正確重組質(zhì)粒中的相應(yīng)位置,PCR鑒定時應(yīng)選擇的一對引物是。某學(xué)生嘗試用圖中另外一對引物從某一菌落的質(zhì)粒中擴增出了400 bp片段,原因是。圖2答案(1)平(2)胸腺嘧啶(T)DNA連接(3)BA類菌落含有P0C類菌落未轉(zhuǎn)入質(zhì)粒(4)乙丙目的基因反向連接2.(2018課標(biāo)全國,38,15分)回答下列問題:(1)博耶(H. Boyer)和科恩(S. Cohen)將非洲爪蟾核糖體蛋白基因與質(zhì)粒重組后導(dǎo)入大腸桿菌細胞中進行了表達。該研究除證明了質(zhì)?？梢宰鳛檩d體外,還證明了(答出兩點即可)。(2)體外重

17、組的質(zhì)?？赏ㄟ^Ca2+參與的方法導(dǎo)入大腸桿菌細胞;而體外重組的噬菌體DNA通常需與組裝成完整噬菌體后,才能通過侵染的方法將重組的噬菌體DNA導(dǎo)入宿主細胞。在細菌、心肌細胞、葉肉細胞中,可作為重組噬菌體宿主細胞的是。(3)真核生物基因(目的基因)在大腸桿菌細胞內(nèi)表達時,表達出的蛋白質(zhì)可能會被降解。為防止蛋白質(zhì)被降解,在實驗中應(yīng)選用的大腸桿菌作為受體細胞,在蛋白質(zhì)純化的過程中應(yīng)添加的抑制劑。答案(1)體外重組的質(zhì)?？梢赃M入受體細胞;真核生物基因可在原核細胞中表達(2)轉(zhuǎn)化外殼蛋白(或答噬菌體蛋白)細菌(3)蛋白酶缺陷型蛋白酶考點二PCR技術(shù)及基因工程的應(yīng)用3.(2019江蘇單科,16,2分)下列生

18、物技術(shù)操作對遺傳物質(zhì)的改造,不會遺傳給子代的是()A.將胰島素基因表達質(zhì)粒轉(zhuǎn)入大腸桿菌,篩選獲得基因工程菌B.將花青素代謝基因?qū)胫参矬w細胞,經(jīng)組培獲得花色變異植株C.將腸乳糖酶基因?qū)肽膛Ｊ芫?培育出產(chǎn)低乳糖牛乳的奶牛D.將腺苷酸脫氨酶基因轉(zhuǎn)入淋巴細胞后回輸患者,進行基因治療答案D4.(2019天津理綜,9,12分)B基因存在于水稻基因組中,其僅在體細胞(2n)和精子中正常表達,但在卵細胞中不轉(zhuǎn)錄。為研究B基因表達對卵細胞的影響,設(shè)計了如下實驗。據(jù)圖回答:(1)B基因在水稻卵細胞中不轉(zhuǎn)錄,推測其可能的原因是卵細胞中(單選)。A.含B基因的染色體缺失B.DNA聚合酶失活C.B基因發(fā)生基因突變

19、D.B基因的啟動子無法啟動轉(zhuǎn)錄(2)從水稻體細胞或中提取總RNA,構(gòu)建文庫,進而獲得B基因編碼蛋白的序列。將該序列與Luc基因(表達的熒光素酶能催化熒光素產(chǎn)生熒光)連接成融合基因(表達的蛋白質(zhì)能保留兩種蛋白質(zhì)各自的功能),然后構(gòu)建重組表達載體。(3)在過程、轉(zhuǎn)化篩選時,過程中T-DNA整合到受體細胞染色體DNA上,過程在培養(yǎng)基中應(yīng)加入卡那霉素。(4)獲得轉(zhuǎn)基因植株過程中,以下鑒定篩選方式正確的是(多選)。A.將隨機斷裂的B基因片段制備成探針進行DNA分子雜交B.以Luc基因為模板設(shè)計探針進行DNA分子雜交C.以B基因編碼蛋白的序列為模板設(shè)計探針與從卵細胞提取的mRNA雜交D.檢測加入熒光素的卵

20、細胞中是否發(fā)出熒光(5)從轉(zhuǎn)基因植株未成熟種子中分離出胚,觀察到細胞內(nèi)僅含一個染色體組,判定該胚是由未受精的卵細胞發(fā)育形成的,而一般情況下水稻卵細胞在未受精時不進行發(fā)育,由此表明。答案(1)D(2)精子cDNA(3)(4)BCD(5)B基因表達能使卵細胞不經(jīng)受精直接發(fā)育成胚5.(2017天津理綜,9,20分)玉米自交系(遺傳穩(wěn)定的育種材料)B具有高產(chǎn)、抗病等優(yōu)良性狀,但難以直接培育成轉(zhuǎn)基因植株,為使其獲得抗除草劑性狀,需依次進行步驟、試驗。.獲得抗除草劑轉(zhuǎn)基因玉米自交系A(chǔ),技術(shù)路線如下圖。(1)為防止酶切產(chǎn)物自身環(huán)化,構(gòu)建表達載體需用2種限制酶,選擇的原則是(單選)。Ti質(zhì)粒內(nèi),每種限制酶只有

21、一個切割位點G基因編碼蛋白質(zhì)的序列中,每種限制酶只有一個切割位點酶切后,G基因形成的兩個黏性末端序列不相同酶切后,Ti質(zhì)粒形成的兩個黏性末端序列相同A.B.C.D.(2)下表是4種玉米自交系幼胚組織培養(yǎng)不同階段的結(jié)果。據(jù)表可知,細胞脫分化時使用的激素是,自交系的幼胚最適合培養(yǎng)成愈傷組織作為轉(zhuǎn)化受體。激素 結(jié)果 自交系2,4-D(2.0 mg/L)6-BA(0.5 mg/L)IBA(2.0 mg/L)愈傷組織形成率(%)芽的分化率(%)根的誘導(dǎo)率(%)甲991390乙858087丙888312丁168583(3)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化愈傷組織時,T-DNA攜帶插入其內(nèi)的片段轉(zhuǎn)移到受體細胞。篩選轉(zhuǎn)化的愈傷組織

22、,需使用含的選擇培養(yǎng)基。(4)轉(zhuǎn)化過程中,愈傷組織表面常殘留農(nóng)桿菌,導(dǎo)致未轉(zhuǎn)化愈傷組織也可能在選擇培養(yǎng)基上生長。含有內(nèi)含子的報告基因只能在真核生物中正確表達,其產(chǎn)物能催化無色物質(zhì)K呈現(xiàn)藍色。用K分別處理以下愈傷組織,出現(xiàn)藍色的是(多選)。A.無農(nóng)桿菌附著的未轉(zhuǎn)化愈傷組織B.無農(nóng)桿菌附著的轉(zhuǎn)化愈傷組織C.農(nóng)桿菌附著的未轉(zhuǎn)化愈傷組織D.農(nóng)桿菌附著的轉(zhuǎn)化愈傷組織(5)組織培養(yǎng)獲得的轉(zhuǎn)基因植株(核DNA中僅插入一個G基因)進行自交,在子代含G基因的植株中,純合子占。繼續(xù)篩選,最終選育出抗除草劑純合自交系A(chǔ)。答案(1)A(2)2,4-D乙(3)除草劑(4)BD(5)1/3【三年模擬】時間:30分鐘分值:

23、55分一、選擇題(每題5分,共40分)1.(2019北京海淀一模,4)從自然界中的生物體內(nèi)分離得到的天然酶,在工業(yè)生產(chǎn)環(huán)境中催化效率往往較低。科研人員通過如圖所示的流程改造天然酶,已改進酶的功能。對這一改造過程的分析,不合理的是()A.過程產(chǎn)生的基因突變是隨機的B.過程中受體菌應(yīng)處理為感受態(tài)C.過程篩選突變酶依賴于抗生素D.多次重復(fù)循環(huán)導(dǎo)致酶的定向進化答案C2.(2019北京東城二模,5)如圖為農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒的T-DNA區(qū)段結(jié)構(gòu)示意圖。農(nóng)桿菌附著植物細胞后, T-DNA首先在農(nóng)桿菌中從右邊界到左邊界被剪切、復(fù)制,然后進入植物細胞并整合到其染色體上,繼而誘發(fā)細胞異常生長和分裂,形成植物腫瘤。以下

24、有關(guān)敘述不正確的是()A.Ti質(zhì)粒存在于農(nóng)桿菌的擬核DNA之外B.植物腫瘤的形成與A、B兩個基因的表達有關(guān)C.清除植物腫瘤組織中的農(nóng)桿菌后腫瘤不再生長D.利用T-DNA進行轉(zhuǎn)基因時需保留LB、RB序列答案C3.(2019北京西城二模,5)酵母菌細胞壁的主要成分是幾丁質(zhì)。釀酒酵母產(chǎn)酒精能力強,但沒有合成淀粉酶的能力;糖化酵母能合成淀粉酶,但酒精發(fā)酵能力弱?？蒲腥藛T通過兩種途徑改良酵母菌種,實現(xiàn)以淀粉為底物高效生產(chǎn)酒精的目的。下列敘述正確的是()A.途徑需用纖維素酶處理酵母菌,再利用PEG誘導(dǎo)融合B.途徑需要以淀粉酶基因作為目的基因構(gòu)建表達載體C.途徑和途徑最終獲得的目的酵母菌染色體數(shù)目相同D.以

25、淀粉轉(zhuǎn)化為還原糖的效率作為最終鑒定目的菌的指標(biāo)答案B4.(2019北京海淀二模,5)為提高大豆對磷元素的吸收能力,研究人員利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將水稻的耐低磷基因OsPTF轉(zhuǎn)移到大豆植株中。如圖為重組Ti質(zhì)粒上T-DNA的序列結(jié)構(gòu)示意圖,下列相關(guān)敘述不正確的是()A.以水稻RNA為模板通過反轉(zhuǎn)錄及PCR擴增可獲取大量OsPTF基因B.RNA聚合酶與啟動子1識別并結(jié)合后,啟動抗除草劑基因的轉(zhuǎn)錄C.可通過含除草劑的選擇培養(yǎng)基篩選含有目的基因的大豆愈傷組織D.用EcoR、BamH雙酶切重組Ti質(zhì)粒后,經(jīng)電泳分離至少得到兩條帶答案B5.(2019北京豐臺二模,5)甲基對硫磷是常見的農(nóng)藥污染物?？蒲腥藛T嘗試改

26、造并分離得到能夠降解甲基對硫磷的微生物。下列操作中不必要的是()A.構(gòu)建含有甲基對硫磷分解酶基因的表達載體B.將甲基對硫磷分解酶基因表達載體導(dǎo)入受體菌C.用甲基對硫磷為唯一碳源的培養(yǎng)基選擇所需工程菌D.提取工程菌的質(zhì)粒并檢測甲基對硫磷基因的含量答案D6.(2019北京海淀零模,5)為增加玉米抗旱性,研究者構(gòu)建含有某微生物抗旱基因 E的重組質(zhì)粒,采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法轉(zhuǎn)入玉米幼胚組織細胞中,用E蛋白的抗體進行抗原抗體雜交檢測后,經(jīng)進一步鑒定,篩選出抗旱的轉(zhuǎn)基因玉米。下列相關(guān)敘述不正確的是()A.提取該微生物 mRNA 反轉(zhuǎn)錄為 cDNA,通過PCR擴增可獲得大量目的基因B.將重組質(zhì)粒置于經(jīng) CaCl2 處理的農(nóng)桿菌懸液中,可獲得轉(zhuǎn)化的農(nóng)桿菌C.用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將E基因轉(zhuǎn)入玉米幼胚組織細胞需要嚴(yán)格無菌操作D.用E蛋白的抗體進行抗原抗體雜交,可在個體水平檢測轉(zhuǎn)基因玉米的抗旱性狀答案D7.(2019北京平谷一模,5)關(guān)于轉(zhuǎn)基因鯉魚培育過程的敘述,正確的是()A.構(gòu)建表達載體需要限制酶和DNA連接酶B.以幼小鯉魚的肝臟細胞為受體細胞C.可用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法導(dǎo)入生長激素基因D.可用二苯胺檢測受體細胞是否含生長激素基因答案A8.(2018北京朝陽一模,3)熒光定量PCR技術(shù)可定量檢測樣本中某種DNA含量。其原理:在PCR反應(yīng)體系中每加入一對引物的同時加