醫(yī)用顯微鏡簡介課件

1、醫(yī)用顯微鏡簡介2015.05.27顯微鏡的概念 顯微鏡是用于放大微小物體使人肉眼能夠看到的光學(xué)儀器，是人類進入原子時代的標志。顯微鏡的發(fā)展簡史16世紀 荷蘭的眼鏡商詹森（Zaccharias Janssen）和他的顯微鏡 世界上最早的一臺顯微鏡顯微鏡的發(fā)展簡史17世紀羅伯特 虎克（Robert Hook）改進了顯微鏡，并發(fā)現(xiàn)了細胞 列文虎克（Antony van Leeuwenhoek）首次用顯微鏡發(fā)現(xiàn)微生物顯微鏡的發(fā)展簡史17世紀顯微鏡分類光學(xué)顯微鏡電子顯微鏡光學(xué)顯微鏡可分為: 普通光學(xué)顯微鏡暗視野顯微鏡相差顯微鏡熒光顯微鏡倒置顯微鏡體視顯微鏡偏光顯微鏡等10多種。 顯微鏡分類光學(xué)顯微鏡可把

2、物體放大2000倍，分辨的最小極限達0.1微米?？吹郊毎筒糠旨毎?，如線粒體和葉綠體，但只能看到其存在，看不到細胞器的具體結(jié)構(gòu)（如葉綠體的基粒、線粒體的脊就不能看到） 電子顯微鏡最大放大倍率超過300萬倍，可以看到細胞器的精細結(jié)構(gòu)，甚至可以看到病毒這種最小生物的結(jié)構(gòu)，更甚至可以看到大分子，如蛋白質(zhì)普通光學(xué)顯微鏡原理 普通光學(xué)顯微鏡由光學(xué)系統(tǒng)、機械裝置和照明系統(tǒng)三部分組成。光學(xué)系統(tǒng)由物鏡和目鏡組成，目鏡和物鏡都是凸透鏡，焦距不同。物體通過物鏡成倒立、放大的實像。目鏡相當于普通的放大鏡，該實像又通過目鏡成正立、放大的虛像。經(jīng)顯微鏡到人眼的物體都成倒立放大的虛像。普通光學(xué)顯微鏡構(gòu)造機械部分：鏡座、

3、鏡臂、鏡筒、物鏡轉(zhuǎn)換器、載物臺、粗準焦螺旋、細準焦螺旋照明部分：反光器、聚光器光學(xué)部分：目鏡、物鏡普通光學(xué)顯微鏡用途 普通光學(xué)顯微鏡在醫(yī)學(xué)中主要是用來生物切片、細胞、細菌以及活體組織培養(yǎng)、流質(zhì)沉淀等的觀察和研究。普通光學(xué)顯微鏡檢驗中的應(yīng)用 在臨床檢驗中，普通光學(xué)顯微鏡的使用頻率高，其中臨床檢驗基礎(chǔ)、血液學(xué)檢驗、微生物學(xué)檢驗等都要用到顯微鏡。體液室：尿常規(guī)復(fù)查鏡檢、糞便常規(guī)鏡檢、胸腹水常規(guī)細胞計數(shù)、腦脊液常規(guī)細胞計數(shù)、腦脊液細胞學(xué)、1小時尿細胞計數(shù)及尿紅細胞形態(tài)等；臨檢室：血常規(guī)有20%左右的標本需要進行顯微鏡復(fù)檢；微生物室：細菌涂片、真菌涂片、結(jié)核菌涂片、培養(yǎng)標本菌落涂片、血培養(yǎng)報陽涂片、墨汁

4、染色等普通光學(xué)顯微鏡保養(yǎng)防潮防塵防腐蝕防震與放熱機械部件的清潔 可用面紗或綢布擦拭，不能使用乙醇、乙醚等有機溶劑擦拭，以免損傷漆面光學(xué)系統(tǒng)的清潔 如鏡片表面有擦不掉的污物、油漬或手指印鏡片生霧長霉時，可用20%左右的酒精和80%左右的乙醚配置清洗劑進行清洗。清洗時應(yīng)用軟毛刷或棉球沾有少量清洗劑，從鏡頭中心向外做圓運動。切忌把這類鏡頭浸泡在清洗劑中清洗，清洗鏡頭時不要用力擦拭，否則會損傷增透膜，損壞鏡頭嚴禁用干棉球、干布塊或干鏡頭紙擦拭鏡頭表面，否則會刮傷鏡頭表面，嚴重損壞鏡頭；也不能用水擦拭鏡頭，否則會留下水漬，而且會滋生真菌，損壞鏡頭暗視野顯微鏡原理 暗視野顯微鏡是在普通光學(xué)顯微鏡的基礎(chǔ)上構(gòu)

5、成的，其用強而窄的斜射光束照射標本，而又不讓光束進入物鏡。在沒有光進入物鏡時，視野是黑暗的，故叫暗視野顯微鏡。而標本中的微粒受光照射后能夠散射光線，當散射光線進入物鏡時，在顯微鏡中能夠看到微粒的散射光點，好象微粒本身在發(fā)光一樣。暗視野顯微鏡用途 暗視野顯微鏡常用來觀察未染色的透明樣品。這些樣品因為具有和周圍環(huán)境相似的折射率，不易在一般明視野之下看的清楚，于是利用暗視野提高樣品本身與背景之間的對比。但只能看到物體的存在、運動和表面特征，不能辨清物體的細微結(jié)構(gòu)。 暗視野顯微鏡常用于檢查梅毒螺旋體，對早期梅毒的診斷有十分重要的意義。相差顯微鏡原理 光波有振幅（亮度）、波長（顏色）及相位（指在某一時間

6、上光的波動所能達到的位置）的不同。當光通過物體時，如波長和振幅發(fā)生變化，人們的眼睛才能觀察到，這就是普通顯微鏡下能夠觀察到染色標本的道理。而活細胞和未經(jīng)染色的生物標本，因細胞各部微細結(jié)構(gòu)的折射率和厚度略有不同，光波通過時，波長和振幅并不發(fā)生變化，僅相位有變化，而這種微小的變化，人眼是無法加以鑒別的，故在普通顯微鏡下難以觀察到。而相差顯微鏡可以把相差變?yōu)檎穹顏碛^察活細胞和未染色的標本。相差顯微鏡用途 相差顯微鏡主要用于觀察活細胞或不染色的組織切片，有時也可用于觀察缺少反差的染色樣品。可以觀察到透明標本的細節(jié)，適用于對活體細胞生活狀態(tài)下的生長、運動、增殖情況及微細結(jié)構(gòu)的觀察。熒光顯微鏡原理 熒光

7、顯微鏡是以紫外線為光源， 用以照射被檢物體， 使之發(fā)出熒光， 然后在顯微鏡下觀察物體的形狀及其所在位置。細胞中有些物質(zhì)，受紫外線照射后可發(fā)熒光；另有一些物質(zhì)本身雖不能發(fā)熒光，但如果用熒光染料或熒光抗體染色后，經(jīng)紫外線照射亦可發(fā)熒光，熒光顯微鏡就是對這類物質(zhì)進行定性和定量研究的工具之一。 電子顯微鏡是根據(jù)電子光學(xué)原理，用電子束和電磁透鏡代替光束和光學(xué)透鏡，作用于被檢樣品的電子束經(jīng)電磁透鏡放大后打到熒光屏上成像，使物質(zhì)的細微結(jié)構(gòu)在非常高的放大倍數(shù)下成像。電子顯微鏡成像原理鏡筒：電子槍、電子透鏡、樣品架、熒光屏和照相機構(gòu)真空系統(tǒng)：機械真空泵、擴散泵和真空閥門等電源柜：高壓發(fā)生器、勵磁電流穩(wěn)流器和各種調(diào)節(jié)控制單元組成電子顯微鏡構(gòu)造電子顯微鏡用途電子顯微鏡下的紅細胞電子顯微鏡下的血凝塊電子顯微鏡缺點電子顯微鏡購買和維護的價格都比