同型半胱氨酸的檢測(cè)及臨床應(yīng)用

1、 新區(qū)檢驗(yàn)科 劉礦歌同型半胱氨酸檢測(cè)及臨床應(yīng)用1目錄一、同型半胱氨酸（HCY）的研究歷史二、同型半胱氨酸（HCY）生物化學(xué)原理三、同型半胱氨酸（HCY）的作用機(jī)制四、影響同型半胱氨酸（HCY）水平的主要因素五、同型半胱氨酸（HCY）的檢測(cè)方法六、同型半胱氨酸（HCY）的臨床應(yīng)用七、同型半胱氨酸（HCY）檢測(cè)適用人群及參考范圍八、同型半胱氨酸（HCY）的預(yù)防及治療九、同型半胱氨酸（HCY）血標(biāo)本采集注意事項(xiàng)2一、同型半胱氨酸（HCY）的研究歷史34同型半胱氨酸尿癥的特點(diǎn)5馬凡樣的表現(xiàn)：-中樞神經(jīng)系統(tǒng)的表現(xiàn)，如智力缺陷骨骼肌的表現(xiàn)：骨質(zhì)疏松癥眼睛的表現(xiàn)：異位晶狀體血管表現(xiàn)：血管閉塞，血栓栓塞6二、

2、同型半胱氨酸(HCY)的生物化學(xué)原理7什么是同型半胱氨酸（HCY）?含有一個(gè)巰基 (SH)的氨基酸巰基是具有反應(yīng)性的，可參與氧化還原反應(yīng)和引起氧化應(yīng)激食物中不含有同型半胱氨酸由蛋氨酸生成其代謝依賴于幾種B族維生素8同型半胱氨酸代謝 - 關(guān)鍵酶和維生素9 1.我們來(lái)看HCy的代謝。首先，蛋氨酸在酶的作用下，通過(guò)腺苷轉(zhuǎn)移、去甲基化、水解三個(gè)主要步驟生成同型半胱氨酸。 2.同型半胱氨酸的代謝主要有再甲基化途徑和轉(zhuǎn)硫途徑兩個(gè)。 1）再甲基化途徑：是指約有50%同型半胱氨酸在蛋氨酸合成酶的作用下，以維生素12為輔酶因子，以N-5-甲基四氫葉酸為甲基供體，發(fā)生再甲基化，重新合成蛋氨酸。 2）轉(zhuǎn)硫途徑：是指

3、另外約有50%同型半胱氨酸在胱硫醚合成酶催化下形成胱硫醚，再在胱硫醚裂解酶的作用下形成半胱氨酸，此過(guò)程需要維生素B6的存在，最后生成丙酮酸、硫酸和水。 3.從圖可以看出同型半胱氨酸的代謝依賴于幾種酶及其輔因子，其中包括四種B族維生素：葉酸、維生素B12、B6和B2。5，10-亞甲基四氫葉酸還原酶（MTHFR）常常存在遺傳變異和多態(tài)性。而同型半胱氨酸尿癥是由于胱硫醚合成酶（CBS）缺陷造成的。血漿中的同型半胱氨酸存在形式10血漿中的同型半胱氨酸分兩種形式存在：1）氧化型同型半胱氨酸和還原型同型半胱氨酸。2）還原型同型半胱氨酸中游離的巰基具有高度活性，其容易氧化，從而形成二硫化物的形式，氧化型是同

4、型半胱氨酸在血漿中的主要存在形式，以二硫化物形式或是與蛋白質(zhì)共價(jià)結(jié)合的形式存在各種形式同型半胱氨酸在血中所占比例11還原型同型半胱氨酸在血中的濃度很低，約有1%，氧化型是血漿中的同型半胱氨酸主要存在形式，與蛋白質(zhì)共價(jià)結(jié)合的HCY約占70-80%，游離的二硫化物形式約占20-30%。有研究發(fā)現(xiàn)在正常人和高HCY血癥患者血漿中，HCY大部分（70）是與蛋白質(zhì)結(jié)合，血漿中與HCY結(jié)合的是白蛋白。HCY在血液中的存在方式: 部分以同型半胱氨酸-半胱氨酸二硫化物存在，微量以還原型同型半胱氨酸存在，大部分通過(guò)二硫鍵與白蛋白結(jié)合而存在。12三、同型半胱氨酸(HCY)的作用機(jī)制1314同型半胱氨酸的致病機(jī)理在

5、Hcy的作用下，破損的血管壁生成了斑塊，促進(jìn)動(dòng)脈粥狀硬化 HCY可使氧化自由基大量產(chǎn)生引起內(nèi)皮細(xì)胞損傷，使脂質(zhì)過(guò)氧化和氧化型的低密度增加,從而對(duì)血管造成的損傷和破壞。 1、內(nèi)皮毒性作用： HCY可引起內(nèi)皮細(xì)胞損傷，尤其合并高血壓時(shí)更易受損，并且破壞血管壁彈力層和膠原纖維。2、刺激血管平滑肌細(xì)胞增生： HCY可直接誘導(dǎo)血管平滑肌細(xì)胞增殖。2022/10/11583、致血栓作用： HCY可促進(jìn)血栓調(diào)節(jié)因子的表達(dá)，激活蛋白C和凝血因子、，血小板內(nèi)前列腺素合成增加，從而促進(jìn)血小板粘附和聚集。2022/10/11694、脂肪、糖、蛋白代謝紊亂： HCY可促進(jìn)脂質(zhì)沉積于動(dòng)脈壁，泡沫細(xì)胞增加，還可改變動(dòng)脈壁

6、糖蛋白分子纖維化結(jié)構(gòu)，促進(jìn)斑塊鈣化。2022/10/117115、干擾谷胱甘肽的合成 ： 谷胱甘肽是一種重要的高氧化劑，它能防止很多細(xì)胞成分的氧化互相作用，對(duì)血管產(chǎn)生保護(hù)作用。HCY干擾谷胱甘肽的合成，從而對(duì)機(jī)體造成危害 。2022/10/118126、影響體內(nèi)的轉(zhuǎn)甲基化反應(yīng) ： HCY濃度的升高會(huì)影響體內(nèi)許多物質(zhì)的甲基化過(guò)程，如核酸（DNA和RNA）、蛋白質(zhì)、髓磷脂、多糖、膽堿和兒茶酚胺類的甲基化；甲基化能力的降低影響細(xì)胞的發(fā)育及分化，這可能是HCY致病的關(guān)鍵因素。 2022/10/11913同型半胱氨酸在血壓調(diào)節(jié)中的作用位點(diǎn)20同型半胱氨酸影響動(dòng)脈血壓導(dǎo)致高血壓的潛在作用位點(diǎn)有很多。生理的

7、血壓調(diào)節(jié)過(guò)程中，涉及的主要器官包括心臟、腦、腎臟、細(xì)動(dòng)脈和腎上腺，其中同型半胱氨酸主要是通過(guò)作用于細(xì)動(dòng)脈和腎上腺使血壓升高的。四、影響同型半胱氨酸（HCY）水平的主要因素21同型半胱氨酸濃度的決定性因素和干擾因素22HCY1.性別與年齡： 國(guó)內(nèi)外不少研究發(fā)現(xiàn)，HCY隨年齡增長(zhǎng)而升高，而且男性女性。女性在絕經(jīng)前的水平較低，絕經(jīng)后顯著升高，認(rèn)為其機(jī)制可能與雌激素水平的變化有關(guān)。23 年齡和性別對(duì)同型半胱氨酸濃度的影響24在一般人群中，同型半胱氨酸濃度為非正態(tài)分布，多表現(xiàn)為正偏態(tài)分布，即向右側(cè)脫尾（高值側(cè)）。分布曲線向右脫尾多是因?yàn)橛邢喈?dāng)大一部分人群的生活方式不健康 。無(wú)論男性還是女性，隨著年齡的增

8、長(zhǎng)，tHcy的血漿濃度增加，在青春期以后，總同型半胱氨酸的平均濃度存在顯著的性別差異。男性總同型半胱氨酸濃度比女性平均高出1-2mol/L。這種性別差異是由于男性肌肉容量較大，此外還有性激素的不同作用。一般而言，雌激素的作用可使同型半胱氨酸濃度降低，而雄激素則使同型半胱氨酸濃度增高。絕經(jīng)期以后，女性與男性的同型半胱氨酸濃度差異開(kāi)始縮小 2.體內(nèi)維生素水平：B族維生素不足可使血漿總同型半胱氨酸明顯升高，最重要的維生素B12和葉酸缺乏。3.糖尿?。禾悄虿?duì)血漿總同型半胱氨酸濃度的影響是不同的。1型糖尿病在早期沒(méi)有出現(xiàn)腎損害時(shí)，可以導(dǎo)致腎小球高濾過(guò)，從而降低血漿總同型半胱氨酸的水平。然而，2型糖尿病

9、通?？偼桶腚装彼崴缴?。當(dāng)出現(xiàn)糖尿病腎病時(shí)，同型半胱氨酸濃度將進(jìn)一步升高。25 4.甲狀腺疾病的影響：雖然原因還不明確，但甲低患者的平均血漿同型半胱氨酸濃度升高，而甲亢患者則降低。5.生活方式的影響：體育鍛煉、飲酒和咖啡、吸煙等生活方式因素都可影響血漿總同型半胱氨酸的濃度。其中最重要的因素就是吸煙。吸煙的只數(shù)與同型半胱氨酸濃度呈明顯的正比例關(guān)系；咖啡的攝入與同型半胱氨酸濃度之間也存在這種關(guān)系，尤其是男性，這種關(guān)系與咖啡是否經(jīng)過(guò)過(guò)濾處理無(wú)關(guān)。2022/10/1266.增殖性疾病的影響：細(xì)胞增殖加快可以使同型半胱氨酸濃度升高，例如慢性炎癥性疾病，以及惡性疾病如急性淋巴細(xì)胞白血病時(shí)都會(huì)出現(xiàn)同型半

10、胱氨酸濃度升高?？焖俚募?xì)胞分裂增加了對(duì)于葉酸的需求可能是造成這種表現(xiàn)的原因之一。7.腎功能的影響：目前對(duì)于腎衰竭患者血漿同型半胱氨酸濃度增加的機(jī)制還不是很清楚。不管原因如何，終末期腎臟病的患者總同型半胱氨酸濃度常顯著升高，并且發(fā)生心血管疾病的危險(xiǎn)性增加。27 8.遺傳因素：幾種相關(guān)的遺傳性酶缺陷導(dǎo)致了同型半胱氨酸水平升高。其中有兩種遺傳缺陷或變異尤其重要： 其一：是胱硫醚合成酶缺陷，這是導(dǎo)致同型半胱氨酸尿癥的主要原因，其純合子形式可使血漿同型半胱氨酸濃度顯著升高。 其二：是，亞甲基四氫葉酸還原酶的C677T多態(tài)性，可導(dǎo)致輕到中度的高同型半胱氨酸血癥2022/10/128同型半胱氨酸濃度的決定性

11、因素和干擾因素29 五、同型半胱氨酸（HCY）的檢測(cè)方法2022/10/130 方法優(yōu)點(diǎn)缺點(diǎn)同位素法靈敏度高，特異性強(qiáng)操作繁瑣且有放射污染色譜法靈敏度、特異性好儀器價(jià)格昂貴熒光偏振免疫測(cè)定對(duì)儀器要求不高，易普及結(jié)果準(zhǔn)確性相對(duì)較差ELISA對(duì)儀器要求不高，易普及但結(jié)果準(zhǔn)確性相對(duì)較差放射免疫法結(jié)果準(zhǔn)確有放射性污染循環(huán)酶法快速、簡(jiǎn)便、靈敏度高，可上全自動(dòng)生化分析儀，適用大批標(biāo)本，臨床應(yīng)用廣泛2022/10/131六、同型半胱氨酸的臨床應(yīng)用2022/10/13218 2022/10/133心血管病防治糖尿病及并發(fā)癥防治預(yù)測(cè)骨折風(fēng)險(xiǎn)優(yōu)生優(yōu)育與母嬰健康腫瘤防治HCY與神經(jīng)系統(tǒng)疾病慢性腎衰并發(fā)癥防治肺血栓栓

12、塞癥防治診斷與監(jiān)測(cè)肝損傷臨床應(yīng)用1、心血管病防治（1）HCY升高與動(dòng)脈粥樣硬化(AS)的關(guān)系： 1969年就曾有人從尸檢中發(fā)現(xiàn)2例血漿HCY濃度超過(guò)正常人幾十倍的病人存在廣泛的動(dòng)脈粥樣硬化和動(dòng)脈血栓。臨床上發(fā)現(xiàn)高胱氨酸尿癥病人早年多因全身動(dòng)脈粥樣硬化和血栓形成死于腦梗塞和心肌梗塞，這與血中HCY升高有關(guān)。2022/10/13419 有學(xué)者在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中觀察到注射HCY后引起高HCY血癥，23個(gè)月后發(fā)生動(dòng)脈粥樣硬化 。認(rèn)為高HCY血癥是發(fā)生動(dòng)脈粥樣硬化的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。2022/10/13520（2）HCY水平與心血管疾病的危險(xiǎn)性 通過(guò)血管內(nèi)超聲觀察AS斑塊情況 ，觀察到血漿HCY 濃度 8umol

13、/L時(shí)，斑塊明顯增大（0.27-1.04，p0.001）,表明與冠狀動(dòng)脈病變程度呈正相關(guān)。2022/10/136* Mayer E L, Robinson K, Jacobsen D W. et al .Low plasm homocyseine levels predic reduced atheroma burden in patient undergoing coronary intervention:Evideence from intravascular ultrsund.J Am Coll Cardiol,1995,25(special issum):81 A.242022/10/

14、137冠動(dòng)脈病變與血漿HCY濃度的關(guān)系冠動(dòng)脈造影例數(shù)年齡血漿HCYP值正常2050.12.610.60.450.02單支病變3045.11.615.51.830.16雙支病變3555.71.617.82.0515umolL為高HCY血癥，普通人群血漿Hey水平升高者只有不到5 ，而在腦卒中患者中可達(dá)3040 。2022/10/14028 美國(guó)研究表明： HCY的升高是與中風(fēng)有重要關(guān)聯(lián)的危險(xiǎn)因子。美國(guó)最新的數(shù)據(jù)顯示中年后期男性中風(fēng)發(fā)病率，處于55-64這個(gè)年齡段的男性相對(duì)于45-54年齡段的男性而言，前者患中風(fēng)的幾率是后者的三倍。中風(fēng)和腦血管疾病雜志2008；17；165-168“美國(guó)中年后期的

15、男性發(fā)生中風(fēng)的相關(guān)因子急劇增加”2022/10/141292022/10/142腦中風(fēng)與血漿HCY濃度的關(guān)系例 數(shù)血漿HCY P值 危 險(xiǎn) 對(duì) 照183212.8/中 風(fēng)182314.776歲）追蹤調(diào)查8年HCY值，結(jié)果：HCY超出14mol/L，患老年性癡呆的危險(xiǎn)性增加1.8倍，患多異古怪癡呆發(fā)生率增加1.6倍。英國(guó)OPTIMA項(xiàng)目研究發(fā)現(xiàn)： HCY水平大于11.2mol/L的病人，三年后隨訪，發(fā)現(xiàn)他們大腦顳葉（包括海馬）快速萎縮。2022/10/143313、糖尿病及并發(fā)癥防治國(guó)內(nèi)外大量研究結(jié)果顯示，血漿HCY水平可作為2-型糖尿病患者患大血管疾病的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。監(jiān)測(cè)糖尿病患者HCY水平有

16、利于對(duì)其預(yù)后的評(píng)估。HCY升高在糖尿病伴腎臟、視網(wǎng)膜及血管并發(fā)癥的患者更為嚴(yán)重高HCY血癥也能促進(jìn)糖尿病微血管并發(fā)癥的發(fā)生與發(fā)展。2022/10/144324、慢性腎衰并發(fā)癥防治慢性腎功能衰竭（CRF）患者普遍有高HCY血癥，其發(fā)生率是正常人33倍。尿毒癥時(shí)一方面肝臟蛋氨酸腺苷轉(zhuǎn)移酶活性升高，導(dǎo)致S-腺苷蛋氨酸水平升高；另一方面腎功能下降使HCY代謝的必需產(chǎn)物絲氨酸合成減少，導(dǎo)致HCY代謝受抑制引起HCY的堆積。2022/10/145335、肺血栓栓塞癥防治研究表明，高HCY血癥（20mol/L）使得深靜脈血栓的危險(xiǎn)性明顯增大，高HCY血癥可使深靜脈血栓發(fā)生率增加4倍。高HCY是我國(guó)漢族人群肺

17、血栓栓塞癥（PTE）發(fā)病的一個(gè)獨(dú)立的危險(xiǎn)因子，降低HCY可降低國(guó)人靜脈血栓栓塞癥（VTE）的危險(xiǎn)。2022/10/146346、預(yù)測(cè)骨折風(fēng)險(xiǎn)美國(guó)和荷蘭的流行病學(xué)研究結(jié)果顯示：高HCY的人容易骨折，高HCY組與低HCY組相比，男性的骨折風(fēng)險(xiǎn)為后者的4倍，女性為1.9倍。研究還顯示：老年人骨折中19%是由高HCY引起的。HCY阻礙骨膠原纖維狀蛋白質(zhì)形成網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的作用可能就是高HCY者容易骨折的原因。2022/10/147357、診斷與監(jiān)測(cè)肝損傷研究結(jié)果顯示：血漿HCY濃度在急性肝病和慢性肝病患者間差異有顯著性；血漿HCY濃度對(duì)于慢性肝損傷的敏感性為91%，特異性為89%。以病理組織切片對(duì)照敏感性為

18、94%，特異性為89%。血漿HCY濃度檢測(cè)還可應(yīng)用于對(duì)普通人群慢性肝病的篩選。2022/10/148368、優(yōu)生優(yōu)育與母嬰健康流行病學(xué)研究報(bào)導(dǎo)：血中HCY值高的婦女容易產(chǎn)生妊娠并發(fā)癥 (32%)；早產(chǎn) (38%)；新生兒體重減低 ( 99%)。孕婦檢測(cè)HCY對(duì)防治妊娠并發(fā)癥與優(yōu)生優(yōu)育（預(yù)防早產(chǎn)、流產(chǎn)、新生兒體重減低、胎兒神經(jīng)管畸型等）具有重要意義。2022/10/149379、腫瘤防治有研究發(fā)現(xiàn)：未服抗葉酸藥物的乳腺癌、卵巢癌和胰腺癌中有許多患者的血清HCY升高。Ueland和Refsum在白血病患者的研究認(rèn)為HCY升高是因腫瘤細(xì)胞的快速增殖所致。許多惡性腫瘤細(xì)胞有對(duì)蛋氨酸的依賴性，蛋氨酸的依賴或高HCY血癥可能是惡性腫瘤一種表型的表達(dá)。2022/10/15038Lily L等在一組未用藥的腫瘤患者中將HCY濃度與主要的腫瘤標(biāo)志物進(jìn)行了比較，發(fā)現(xiàn)HCY血清濃度的變化與血清腫瘤