性能驗證 文檔

1、試劑方法學驗證及性能驗證一、驗證目的：驗證檢測試劑在全自動生化分析儀上的性能表現(xiàn)。1.1評價內(nèi)容準確度（回收試驗）精密度檢測限（靈敏度）參考范圍線性范圍可報告范圍穩(wěn)定性干擾試驗二、評價方法2.1準確度準確度是指單次測量結(jié)果與被測量真值之間的一致程度，受隨機誤差和系統(tǒng)誤差的影 響。準確度一般以不準確度來進行評價，通常以定值血清的靶值范圍、回收率等來進行判斷。 2.2精密度精密度，指在常規(guī)檢測條件下對同一待測物進行檢測所獲得結(jié)果的接近程度。精密度是衡量體外診斷試劑批內(nèi)和批間變異的重要指標，通常包括批內(nèi)和批間不精密度。2.3檢測限（靈敏度）檢測限是指檢測方法可檢測出的最低被測量濃度，也稱檢測低限或最

2、小檢出濃度，有時 也稱為靈敏度。采用5%牛血清白蛋白溶液作為空白樣本，空白樣本應(yīng)不含被測物。在生化分析儀上連 續(xù)檢測20次，記錄檢測結(jié)果。計算20次結(jié)果的均值與標準差SD。以空白均值加兩倍標準 差作為報告方法的檢測限。2.5參考范圍采集體檢正常人樣本50份，和常規(guī)方法一樣進行測定，檢測結(jié)果應(yīng)符合說明書的規(guī)定。2.4線性范圍線性范圍，是指系統(tǒng)最終的輸出值（濃度或活性）與被分析物的濃度或活性成比例的范 圍。線性范圍的測量即測定濃度曲線接近直線的程度，它反映整個系統(tǒng)的輸出特性。驗證說明書標稱線性參數(shù)需測定4-6個濃度水平，推薦使用5個濃度水平，每個濃度水 平重復(fù)測定3-4次。根據(jù)測定結(jié)果與理論值的對

3、比判斷線性是否達到要求。2.6可報告范圍指定量檢測項目向臨床能報告的檢測范圍，可報告范圍包括可報告低限與可報告高限?；颊邩颖究山?jīng)稀釋、濃縮或其他預(yù)處理。2.7穩(wěn)定性試劑(盒)在生產(chǎn)企業(yè)規(guī)定界限內(nèi)保持其特性的能力。打開包裝穩(wěn)定性試驗：將試劑在 生化分析儀試劑倉中或2-8。條件下開口放置一段時間后的穩(wěn)定性試驗。2.8干擾實驗干擾物質(zhì)是體外診斷試劑使用過程中造成測量誤差的一個主要原因，針對體外診斷試劑 進行的干擾實驗是指通過實驗查找出對體外診斷試劑測量結(jié)果產(chǎn)生影響的物質(zhì)的過程。驗證具體要求：2.1準確度2.1.1質(zhì)控結(jié)果定值血清質(zhì)控試驗，質(zhì)控品連續(xù)監(jiān)測三次，結(jié)果滿足質(zhì)控要求。2.1.2回收實驗用待評

4、價方法對回收樣本和基礎(chǔ)樣本進行測定。樣本制備：基礎(chǔ)血清：血清1ml+蒸餾水0.1ml;回收樣本1：血清1ml+0.1ml校準品；回收樣本2：血清1ml+0.1ml校準品；回收樣本測定濃度-加入濃度計算回收率：回收率=加入濃度可接受判斷：比例系統(tǒng)誤差不大于CLIA 88允許總誤差的1/2。2.2精密度批內(nèi)精密度：使用兩個不同濃度水平的質(zhì)控品，采用同一試劑連續(xù)測定20次，計算測定結(jié)果變異系數(shù)CV (%)，結(jié)果應(yīng)符合試劑說明書的規(guī)定。批間精密度：取至少兩個水平的質(zhì)控品，每天測定四次，每次檢測之間間隔2小時，連續(xù)檢測5天，一共收集20個數(shù)據(jù)進行計算，計算CV，SD。結(jié)論：結(jié)果符合產(chǎn)品標準批內(nèi)精密度CV

5、5%的要求。2.3檢測限(靈敏度)采用蒸餾水(5%牛血清白蛋白溶液)作為空白樣本，空白樣本應(yīng)不含被測物。在生化分 析儀上連續(xù)檢測20次，記錄檢測結(jié)果。計算20次結(jié)果的均值與標準差SD。以空白均值加兩倍標準差作為報告方法的檢測限。結(jié)果符合產(chǎn)品標準靈敏度W0.1mmol/L的要求。2.4參考范圍采集體檢正常的患者樣本50份，和常規(guī)方法一樣進行測定，檢測結(jié)果應(yīng)符合說明書的規(guī)定。結(jié)論：結(jié)果符合產(chǎn)品標準參考范圍要求。2.5線性范圍選取一個高值樣本，倍比稀釋5個濃度水平，每個濃度水平重復(fù)測定3-4次。根據(jù)測定 結(jié)果與理論值的對比判斷線性是否達到要求。2.6可報告范圍低值樣本：將待測樣本（含被分析物）用混合

6、人血清（含被分析物濃度水平較低）或 5%牛血清白蛋白生理鹽水溶液進行稀釋，產(chǎn)生接近于方法線性范圍低限濃度水平的樣本，一 般為5個濃度水平，濃度水平間隔應(yīng)小于線性范圍低限的10%。高值樣本：選取含被測物的高值樣本，必要時可添加被分析物的純品，并計算出理論值。 使用混合血清或5%牛血清白蛋白生理鹽水溶液或測定方法要求的稀釋液對高值待測樣本進 行稀釋，使其接近于線性范圍的上1/3區(qū)域內(nèi)，并記錄稀釋倍數(shù)。至少選用三個高濃度樣本， 稀釋倍數(shù)應(yīng)為方法性能標明的最大稀釋倍數(shù)、并適當增加或減小稀釋比例。在一次運行中將低值樣本重復(fù)測定10次，高值稀釋樣本重復(fù)測定3次。分別計算AVE（：）、SD、CV值。對于可報

7、告范圍高限還應(yīng)計算乘以稀釋倍數(shù)后的還原濃度和相對偏差。2.7穩(wěn)定性打開包裝穩(wěn)定性試驗：將試劑在生化分析儀試劑倉中或2-8 r條件下開口放置一段時間 后的穩(wěn)定性試驗。注：橫坐標為2-8 r條件下開口天數(shù)，縱坐標為高低值定值樣本測定濃度。2.8干擾實驗干擾物質(zhì)：結(jié)合膽紅素（CB）:空白對照液（去離子水）、干擾物質(zhì)（干粉）；非結(jié)合膽紅素（FB）：空白對照液（0.1 M NaOH）、干擾物質(zhì)（干粉）；維生素C （Vitc）:空白對照液（去離子水）、干擾物質(zhì)（干粉）；血紅蛋白：空白對照液（去離子水）、干擾物質(zhì)（干粉）；1*乳糜：空白對照液（去離子水）、干擾物質(zhì)（液體）。試驗方法：在兩個分析物檢測濃度水平下，用高濃度干擾樣本和低濃度