腦梗死患者血清NO及tNOSiNOS的測定

1、腦梗死患者血清NO及tNOSiNOS的測定摘要目的：通過觀測正常人及腦梗死患者血清一氧化氮n和一氧化氮合成酶ns程度，n、ns與腦梗死的關(guān)系討論。方法：用硝酸復(fù)原酶法測定血清n。用ns催化l-arg和分子氧反響生成n，n與親核性物質(zhì)生成有色化合物后，再采用比色的方法測定血清ns。測定42例腦梗死患者及18例安康人血清n、tns和ins含量，分析上述指標(biāo)的變化情況。結(jié)果：與安康對照組比較，腦梗死組n含量明顯降低p0.05。結(jié)論：血清n、tns和ins參與了腦梗死的病理生理過程，其測定有助于對腦梗死患者的診斷及康復(fù)治療。關(guān)鍵詞腦梗死；一氧化氮n；一氧化氮合成酶nsdeterinatinfserun

2、itrixide(n)andnitrixidesynthesis(tns,ins)inthepatientsitherebralinfartinuxiahua,yanjinhui,yangxiahui(hangzhuedialllege,hebeiprvine,hangzhu061001,hina)abstratbjetive:bybservingserunitrixide(n)andnitrixidesynthesis(ns)levelsfnralsubjetsandpatientsitherebralinfartin,texplretherelatinshipbeteenn,nsander

3、ebralinfartin.ethds:thelevelsfseruneredeterinedbynitrateredutase.andithnsatalytil-argandleularxygenrespnsetgeneraten,nandpr-nulearsubstanestndutalredpund,thenithlrietriethddeterinatinfseruns.in42patientsitherebralinfartinand18healthyvlunteers,serun,tnsandinsntentseredeterinedandanalysisfhangesinthes

4、eindiatrs.results:parediththehealthyntrlgrup,theserundereasedsignifiantlyininfartingrup(p0.05).nlusin:serun,tnsandinshaveinvlvedinthepathphysilgyferebralinfartin,thedeterinatinuldhelpthediagnsisferebralinfartinandrehabilitatin.keyrdserebralinfartin;nitrixide(n);nitrixidesynthesis(ns)腦梗死發(fā)病與多種因素有關(guān)，由于缺

5、血缺氧，腦組織產(chǎn)生一系列病理改變，引發(fā)“瀑布式自由基連鎖反響，產(chǎn)生大量自由基，造成廣泛且嚴(yán)重的生物膜脂質(zhì)過氧化，使膜通透性增加，構(gòu)造遭到破壞，導(dǎo)致神經(jīng)細(xì)胞、膠質(zhì)細(xì)胞和血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷。目前認(rèn)為自由基是參與腦缺血性損害發(fā)生的重要因素之一1。血管內(nèi)皮功能障礙是多種心腦血管疾病的共同病理機(jī)制，其突出表現(xiàn)為內(nèi)皮依賴性血管舒張功能障礙，主要由n減少及氧自由基增加所致2。本文中筆者檢測急性腦梗死患者血漿一氧化氮n及一氧化氮合成酶ns含量的變化，進(jìn)一步理解n及其合成酶在腦梗死急性期的變化規(guī)律，討論其對腦梗死發(fā)病過程的病理生理意義，有助于對腦梗死患者的診斷及康復(fù)治療。1資料與方法1.1一般資料本組患者均來自于

6、河北省滄州市人民醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科2021年3月4日2021年2月2日的住院患者，且所有病例均經(jīng)過頭顱t或ri檢查確診，診斷符合全國第四次腦血管病會議標(biāo)準(zhǔn)。其中，腦梗死組患者42例，男28例，女14例；年齡最大78歲，最小45歲，平均678歲。對照組18例均為血站安康獻(xiàn)血員，其中，男7例，女11例；平均年齡598歲。所有腦梗死組患者的采血時間，最早為患者入院后第1天，最晚為入院后第24天，且均于清晨臥位時空腹抽取靜脈血2l，于24h內(nèi)通過抗凝、3000r/in離心機(jī)離心15in后提取血清，將每例患者血清均分裝于4個ep離心管中，封存于-80冰箱中成批備用。1.2方法防止反復(fù)凍融影響標(biāo)本質(zhì)量，筆者將n

7、、tns及ins所有指標(biāo)統(tǒng)一測定，并且采用編號雙盲的方法檢測所有標(biāo)本。按照試劑盒標(biāo)注方法配制各種試劑，配置及測定步驟嚴(yán)格按照操作規(guī)程完成，應(yīng)用分光光度儀550n，0.5光徑，采用分光光度儀比色法檢測各管吸光度值。1.3統(tǒng)計學(xué)處理數(shù)據(jù)以均數(shù)標(biāo)準(zhǔn)差xs表示，配比照擬采用t、t檢驗和方差分析。2結(jié)果腦梗死患者血清n、ns含量變化，見表1。與安康對照組比較，腦梗死組n含量明顯降低p0.05。表1腦梗死患者血清n、ns含量變化xstab.1hangefn,nsftheseruinthepatientsitherebralinfartin(xs)與安康對照組比較，p0.05，*p0.05但有降低趨勢，p0

8、.05但有上升趨勢3討論自從n被認(rèn)識以來，其在腦血管病發(fā)病中所起的作用一直是研究的重點。近來研究的結(jié)果有分歧，研究較為一致的觀點認(rèn)為n是由ns催化l-精氨酸生成的一種含氮化合物，可以使血管平滑肌松弛，且能抑制血小板聚集。大量研究說明，內(nèi)皮細(xì)胞可以在生理條件下不斷合成根底量的n，并不斷釋放以抑制血管對收縮因子的反響，抑制血小板聚積和黏附，從而維持血管的舒張狀態(tài)，保持生理程度所需的腦血流量3，但產(chǎn)生過多或過少的n都將導(dǎo)致腦組織的病理性損傷4。ns是合成n的關(guān)鍵因素，在腦缺血中發(fā)揮神經(jīng)元保護(hù)和神經(jīng)毒性的雙重作用5。它有三種亞型，神經(jīng)元型nns、內(nèi)皮型ens、誘導(dǎo)型ins，均已在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中得到實驗

9、證實，神經(jīng)元型nns和內(nèi)皮細(xì)胞型ens在生理狀態(tài)下即有表達(dá)，統(tǒng)稱為原生型酶ns。有多種細(xì)胞可產(chǎn)生ns。在腦缺血時ens活性升高，從而引起n生成增多，致缺血區(qū)腦血管擴(kuò)張，改善缺血區(qū)血供，對缺血腦組織起到保護(hù)作用。相反nns、ins在腦缺血后起損害作用，nns在腦缺血較早階段起損害作用，ins的損害作用發(fā)生在腦缺血稍后階段6。腦梗死患者血清n含量的改變，國內(nèi)報道不一。有研究說明，腦血管病急性期，腦組織缺血后可同時誘導(dǎo)內(nèi)皮性ns和神經(jīng)元性ns的表達(dá)及活性上調(diào)，并合成釋放大量的n，致腦梗死急性期n升高7。也有研究報道，腦梗死組患者血漿n含量較安康對照組顯著降低，尤其在伴有高血壓的腦梗死患者中更為明顯8

10、。本實驗研究顯示，腦梗死患者的血清n含量顯著降低。急性腦血管病患者均具有不同程度的腦動脈血管硬化，其中部分患者還合并有高血壓疾病，這些患者的動脈內(nèi)皮細(xì)胞受到損傷，合成和釋放的n減少9。當(dāng)腦梗死急性發(fā)作時，大腦部分的組織出現(xiàn)缺血、缺氧及細(xì)胞腫脹，進(jìn)一步加重了顱內(nèi)血管內(nèi)皮細(xì)胞的損傷，而缺氧不僅可直接抑制內(nèi)皮細(xì)胞釋放n，還可產(chǎn)生超氧化物等自由基使n滅亡，從而導(dǎo)致n的合成和釋放更進(jìn)一步減少，導(dǎo)致血管痙攣，加重了腦梗死。本實驗顯示ns含量變化不顯著，但是tns有降低趨勢、ins有上升趨勢。有報道提示，廣泛分布于腦組織中的ns受到n的負(fù)反響調(diào)節(jié)10。當(dāng)n含量降低時反響性導(dǎo)致ns的降低減緩或使其有所升高，但

11、也有研究發(fā)現(xiàn)，在腦缺血亞急性期出現(xiàn)的炎性浸潤等改變可以激活ins，而產(chǎn)生大量的n，并且可促使非毒性刺激因素感染、血壓波動、脫水等進(jìn)一步加重腦組織損傷11，而通過應(yīng)用ins抑制劑可阻斷n介導(dǎo)的毒副作用。本研究顯示ns含量變化不明顯，也可能是因為觀察例數(shù)、時間限制所致。有研究人員通過動物實驗發(fā)現(xiàn)，n含量于腦缺血病灶處顯著增多，而多數(shù)報道說明，腦梗死患者腦脊液中的n含量增多，血清中的n含量減少12。本實驗結(jié)果提示，急性腦梗死患者的血清n含量下降，可能是由于腦梗死發(fā)生時血管內(nèi)皮細(xì)胞受到損傷，致ns的活力下降，導(dǎo)致n生成和釋放減少。腦梗死形成過程中產(chǎn)生的大量氧自由基及超氧陰離子可與n反響，生成過氧亞硝酸

12、陰離子，從而縮短n的半衰期4，致使n含量下降。本實驗結(jié)果顯示，腦梗死患者血清n含量明顯降低，ns雖無顯著性改變，但tns有降低趨勢、ins有上升趨勢，提示n及其酶含量的改變參與了腦梗死的病理生理改變過程，促進(jìn)了疾病的發(fā)生和開展。假如能把不同時期的含量變化規(guī)律進(jìn)一步明確，并分期研究，且采取不同措施給予治療，將會帶來重要的臨床意義。例如，已證實體內(nèi)n生成缺乏或n信號的傳導(dǎo)異常與腦血管等多種疾病的形成和開展關(guān)系親密，臨床就可以開展并設(shè)計n供體型藥物的新藥研究13。其重要的臨床意義有待深化研究。參考文獻(xiàn)1王勝文,劉凱.依達(dá)拉奉治療急性腦梗死60例臨床療效觀察j.吉林大學(xué)學(xué)報:醫(yī)學(xué)版,2021,35(6

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