DNA測(cè)序樣品要求

1、各類樣品模板均應(yīng)提供相應(yīng)的模板和引物信息，并清楚地填寫生工生物測(cè)序訂單生工是ULTRAPAGE純化方式捷瑞是PAGE純化方式模板要求未純化PCR產(chǎn)物片段大于200 bp；提供30 p l以上的PCR擴(kuò)增產(chǎn)物（總量1-2 p g）；取2-3 p l樣品，能夠清晰的檢測(cè)出目的條帶；自帶引物。已純化PCR產(chǎn)物PCR產(chǎn)物溶于ddH2O中（請(qǐng)勿溶解在TE溶液中）；濃度大于30 ng/p 1,體積大于10 p 1,長(zhǎng)片段需適當(dāng)增加提供量；電泳檢測(cè)條帶單一明亮；自帶引物。質(zhì)粒質(zhì)粒溶于30-50 p l ddH2O中（請(qǐng)勿溶解在TE溶液中），電泳檢測(cè)濃度大于50 ng/p 1； 20ul 量建議用相關(guān)試劑盒提

2、取質(zhì)粒；如有可能，同時(shí)提供1 ml含有相應(yīng)質(zhì)粒的菌液備用；需注明載體全稱和插入目的片段長(zhǎng)度及測(cè)序要求。菌樣說明載體、抗性類型；我們提供氨芐青霉素，卡那霉素，四環(huán)素及氯霉素四種抗生素；其余類型抗生素需自備并附使用說明；應(yīng)為咼拷貝質(zhì)粒，對(duì)于低拷貝質(zhì)粒，請(qǐng)直接提供約1 p g純化質(zhì)粒；提供1 ml左右過夜培養(yǎng)（12 h）的菌液，加入終濃度為15%的滅菌甘油， 于EP管中封口保存，防止交叉污染或滲漏；大量樣品測(cè)序，建議在一次性塑料培養(yǎng)皿固體培養(yǎng)基上穿刺培養(yǎng)；建議盡量提供穿刺培養(yǎng)或斜面培養(yǎng)的菌種（裝在EP管中）。自帶引物濃度不低于5 pmol/p 1（即5 p mol/L）,體積20-50 p 1,并請(qǐng)

3、注明濃度；隨機(jī)引物（RAPD引物）、簡(jiǎn)并引物、長(zhǎng)度不足15 bp或大于30 bp引物、 有特殊標(biāo)記的引物或不純的引物均不能用于測(cè)序；盡可能提供引物全序列、PCR退火溫度等信息，以供參考。免費(fèi)提供的通用引物M13+即 M13(-47), M13-即 M13(-48), M13(-20), M13(-26), T7promoter,T7 terminator, SP6, T3, BGH,573AOX, a -factor, -96gIII, pBV220+/-, PT5, pEGFP-N5/3, pEGFP-C5,3,pCMV5-F/R, pQE30+/-, 5/3AD,pGEX5/3, pGL3+/-, Pact2F/R, 27F, 1492R, CMV, U6promoter, S-Tag 等通用引物。如您需要的引物不在此列，請(qǐng)電話咨詢或自帶引物，如需生工合成，請(qǐng)注明。溫馨提示：對(duì)于甘油菌