腦傷寧對大鼠腦缺血再灌注損傷的保護作用

1、腦傷寧對大鼠腦缺血再灌注損傷的保護作用【摘要】目的觀察腦傷寧對大鼠腦缺血再灌注腦損傷的保護作用。方法凝閉大鼠雙側椎動脈45h后，夾閉頸總動脈30in，再灌注90in，造成大鼠腦缺血再灌注損傷模型，觀察腦傷寧對腦組織中生化指標及腦電圖的影響。結果缺血再灌注造成腦組織嚴重損傷，腦組織中水、Na+、a2+含量及丙二醛(DA)含量較對照組明顯增高，而超氧化物歧化酶(SD)活力較對照組降低，并伴有腦電圖異常和腦組織構造病理性改變。夾閉頸總動脈前30in腹腔注射腦傷寧能降低腦組織中水、Na+、a2+含量及DA含量，并進步SD活力，對組織學檢查及腦電圖也有所改善。結論腦傷寧對腦缺血再灌注損傷具有保護作用。【

2、關鍵詞】腦傷寧；腦缺血；再灌注損傷；a2+超載Abstrat:bjetiveTstudytheprtetiveeffetsfNashangningreipenbraininjuryinrats.ethdsThebilateralvertebralarteriesfratsereluded,and45hlater,theartidarteriesfratsinthensiusnditinereludedfr30inflledbyreperfusinfr90in.TheeffetsfNashangningreipenthententsfater,Na+,anda2+inrtex,alndialde

3、hyde(DA)ntentandsuperxidedisutase(SD)ativityinbrainheispheres,asellastheEEGativitieserebserved.Results30inisheiaand90inafterreperfusin,thententsfater,Na+,a2+,andDAereinreased,andtheSDativityasreduedithabnralEEGativityandisheiinjuryinthebraintissues.Nashangningreipedereasedtheelevatedater,Na+,a2+,and

4、DAntents,inreasedtheSDativity,reduedtheisheiinjuryfbraintissue,andprtedthereveryfEEGativities.nlusinNashangninghasprtetiveeffetsnerebralisheia-reperfusininjuryinrats.Keyrds:Nashangningreipe;erebralisheia;reperfusininjury;a2+verlading腦傷寧是武漢大學人民醫(yī)院神經(jīng)科王安國教授之經(jīng)歷方，由川芎、當歸、白芍、琥珀、鉤藤、遠志、茯苓、夜交藤等中藥組成，具有活血化瘀、寧心安神

5、、平肝熄風、健脾除濕之成效。早期藥理學研究1說明腦傷寧可使高血黏模型大鼠的全血黏度、血漿黏度及紅細胞壓積明顯降低，為其臨床應用提供初步理論根據(jù)，本實驗進一步研究腦傷寧對急性腦缺血再灌注損傷大鼠的保護作用，并討論其作用機制。1材料和儀器1.1藥材實驗所需中藥材均購自湖北省中藥材公司,由武漢大學人民醫(yī)院藥學部質檢科鑒定。1.2藥物與試劑丁咯地爾注射液，批號01754，法國施維雅藥廠消費。超氧化物歧化酶(SD)試劑盒，批號20221004；丙二醛(DA)試劑盒，批號20220811，均購自南京建成生物制劑研究所。1.4儀器AA-670原子分光光度計日本島津公司，R-6200型多道生理記錄儀日本島津公

6、司。2實驗方法2.1腦傷寧湯劑的制備參照文獻1的方法制備。2.2模型的建立與給藥大鼠50只，隨機分為5組，每組10只：即假手術sha組及單純?nèi)毖俟嘧?IR)組，腦傷寧2個劑量組及丁咯地爾組。四血管結扎全腦缺血模型的制備參考文獻2。大鼠腹腔注射水合氯醛400gkg-1后，固定于立體定位儀，電燒灼凝閉兩側椎動脈，然后別離雙側頸總動脈并置套扣待用。置電極于大鼠額頂，描記腦電圖(EEG)。手術后45h，待大鼠完全清醒后，試驗動物分別腹腔注射25、100gkg-1腦傷寧，或5gkg-1丁咯地爾注射液，30in后扣閉兩側頸總動脈達30in，松扣后再灌注90in。sha組同樣手術，但不阻斷動脈。轉貼于論文

7、聯(lián)盟.ll.2.3檢測指標再灌注完畢時迅速斷頭取出腦組織，去腦干和小腦，將腦組織劃“+分為4個局部，3份立即低溫(-20)保存用于DA含量、SD活性和病理組織學檢查，1份用于測定腦組織水、Na+、a2+含量。其中腦水分用干濕重法，Na+、a2+含量用火焰原子吸收分光光度法3,鄰苯三酚改進法4測定SD活性，硫代巴比妥酸法5測定DA含量。2.4統(tǒng)計學處理實驗數(shù)據(jù)以s表示，對EEG的影響采用Ridit分析，其它采用組間t檢驗進展統(tǒng)計學分析，P0.05為差異有顯著性。3結果3.1對腦缺血再灌注動物死亡率及EEG的影響在整個缺血及再灌注期間，IR組、腦傷寧25gkg-1組及丁咯地爾組分別有3、1、1只動

8、物因缺血損傷引起動物死亡。四血管結扎后大鼠EEG電壓波幅變小，腦電很快抑制變平，按EEG變化程度分為5級6，即到達缺血前波幅100%屬1級，75%以上為2級，75%25%為3級，25%以下為4級，幾乎呈等電位的為5級。sha組在整個缺血及再灌注期間，EEG變化均以級為主。而缺血再灌注組缺血期EEG變化級有3只，級有3只；再灌注期EEG變化級有2只，級有4只，經(jīng)Ridit分析，與sha組比擬差異顯著，P0.05。腦傷寧組EEG改變以級及級為主，經(jīng)Ridit分析，與IR組比擬差異顯著，P0.05或P0.01，說明腦傷寧可顯著改善EEG的恢復程度(見表1)。表1對大鼠腦缺血再灌注后EEG幅度變化的影

9、響略Tab.1EffetnEEGinratsinduedbyerebralisheiareperfusin與假手術組比擬：*P0.05；與缺血再灌注組比擬：#P0.05，#P0.013.2對腦組織水、Na+、a2+、DA含量及SD活性的影響再灌注后IR組腦組織水、Na+、a2+以及DA含量均明顯高于sha組(P0.05或P0.01)。腦傷寧組腦組織水、Na+、a2+，以及DA含量明顯低于IR組(P0.05或P0.01)。而IR組腦組織SD活性低于sha組(P0.01)，腦傷寧組腦組織SD活性明顯高于IR組(P0.01)，與sha組接近(見表2)。3.3對腦組織形態(tài)學改變的影響缺血再灌注造成神經(jīng)

10、元錐體細胞腫脹、變形，乃至核固縮，核溶解，細胞壞死，間質也變得疏松。腦傷寧能顯著減輕這種損傷性改變，使壞死細胞數(shù)目減少，可見到較為完好的錐體細胞，間質也比擬致密。4討論腦缺血再灌注損傷的發(fā)活力理涉及諸多方面，a2+超載與氧自由基的大量產(chǎn)生在其中扮演著重要的角色。本實驗觀察到腦缺血再灌注損傷后大腦皮層a2+累積，DA含量增加，與文獻3報道的結果一致，腦傷寧能明顯降低缺血再灌注后腦組織的a2+和DA含量，增強SD活性，顯示出抗a2+超載及抗氧自由基作用。表2對大鼠腦缺血再灌注后生化指標變化的影響略Tab.2Effetnbiheialindexinduedbyerebralisheiareperfusininrat與假手術組比擬：*P0.05，*P0.01；與缺血再灌注組比擬：#P0.05，#P0.01【參考文獻】1王芳，周珂，余恩欣.腦傷寧治療腦外傷后綜合征的藥效學研究J.廣東藥學院學報，2022，19(3)：249-252.2彭新琦，可君.三重莨菪類藥物在大鼠急性前腦缺血及再灌注損傷中的作用J.中國藥理學報，1992，13(4)：357-361.3趙衛(wèi)國，張?zhí)戾a，施愛芳，等.腦缺血腦水腫的實驗研究-鈣在腦缺血損傷中的作用J.中華神經(jīng)精神科雜志，1991，24(1)：27-30.4靜天玉，趙曉瑜.用終止劑改進超氧化物歧化