血細胞染色體檢查培訓課件

1、血液病診斷要求【內容銜接】形態(tài)學： 骨髓象 骨髓病理活檢免疫學檢驗： 流式細胞術（CD抗原）遺傳學與分子生物學：染色體、基因臨床資料形態(tài)學免疫分型遺傳、分生1血細胞染色體檢查10/4/2022血液病診斷要求【內容銜接】形態(tài)學：臨床資料形態(tài)學免疫分型遺傳血液病診斷要求2血細胞染色體檢查10/4/2022血液病診斷要求2血細胞染色體檢查10/3/2022血液病診斷要求3血細胞染色體檢查10/4/2022血液病診斷要求3血細胞染色體檢查10/3/2022血細胞染色體檢驗【染色體檢驗目的】1.白血?。涸\斷、分型 治療方案制定 復發(fā)監(jiān)測 預后判斷 舉例：急性早幼粒細胞白血病（M3型） 90%會出現t（1

2、5，17），形成PML-RARa融合基因。4血細胞染色體檢查10/4/2022血細胞染色體檢驗【染色體檢驗目的】1.白血?。涸\斷、分型4血血細胞染色體檢驗5血細胞染色體檢查10/4/2022血細胞染色體檢驗5血細胞染色體檢查10/3/2022血細胞染色體檢驗【染色體檢驗目的】2.診斷遺傳性血液病: 血友病-X染色體隱性遺傳 鐮刀狀紅細胞貧血常染色體顯性遺傳 蠶豆病- X染色體6血細胞染色體檢查10/4/2022血細胞染色體檢驗【染色體檢驗目的】2.診斷遺傳性血液病:6血血細胞染色體檢驗【染色體】 光鏡下染色體 電鏡下染色體7血細胞染色體檢查10/4/2022血細胞染色體檢驗【染色體】 血細胞染

3、色體檢驗【染色體】8血細胞染色體檢查10/4/2022血細胞染色體檢驗【染色體】8血細胞染色體檢查10/3/202血細胞染色體檢驗【染色體】染色體：雙股DNA長鏈反復折疊形成 染色體結構展開圖9血細胞染色體檢查10/4/2022血細胞染色體檢驗【染色體】染色體：雙股DNA長鏈反復折疊形成10血細胞染色體檢查10/4/202210血細胞染色體檢查10/3/2022血細胞染色體檢驗【起始】時間：1960年人物：諾維爾Nowell和亨格福德Hungerford地點：美國費城Philadelphia事件：發(fā)現慢粒特異染色體即Ph染色體（費城染色體）意義：開啟了血液遺傳學時代，推動了分物發(fā)展。11血細胞

4、染色體檢查10/4/2022血細胞染色體檢驗【起始】時間：1960年11血細胞染色體檢查血細胞染色體檢驗【發(fā)展史】血細胞染色體檢查經歷了4個階段12血細胞染色體檢查10/4/2022血細胞染色體檢驗【發(fā)展史】血細胞染色體檢查經歷了4個階段12血細胞染色體核型分析技術一.【染色體非顯帶技術】(一)原理:骨髓液分裂中期血細胞染色體為對象,根據形態(tài)特征進行分析，排序，編號在骨髓液中加入秋水仙素，破壞紡錘絲，使細胞停留在分裂中期。然后對細胞進行固定，制片，染色前期中期后期末期13血細胞染色體檢查10/4/2022血細胞染色體核型分析技術一.【染色體非顯帶技術】在骨髓液中加一.染色體非顯帶技術(二)非顯

5、帶染色體命名 中著絲粒染色體 著絲粒 亞中著絲粒染色體.形態(tài)特征 近端著絲粒染色體 隨體：近端著絲粒染色體 短臂的球形小體14血細胞染色體檢查10/4/2022一.染色體非顯帶技術(二)非顯帶染色體命名14血細胞染色體檢一.染色體非顯帶技術(二)非顯帶染色體命名 2.染色體識別的指標：染色體相對長度 臂率：短臂（p）與長臂（q）比例 有無隨體 3 染色體分組 15血細胞染色體檢查10/4/2022一.染色體非顯帶技術(二)非顯帶染色體命名15血細胞染色體檢一.染色體非顯帶技術(二)非顯帶染色體命名16血細胞染色體檢查10/4/2022一.染色體非顯帶技術(二)非顯帶染色體命名16血細胞染色體檢

6、一.染色體非顯帶技術(二)非顯帶染色體命名 3 染色體分組 人類染色體數目：46條（23對） 根據染色體識別指標把染色體從小到大編號：1-22號， 并分為AG七組。 17血細胞染色體檢查10/4/2022一.染色體非顯帶技術(二)非顯帶染色體命名17血細胞染色體檢一.染色體非顯帶技術(二)非顯帶染色體命名4. 染色體核型：通過顯微攝影技術給單個細胞中所有染色體拍照并編號分析得到其核型 染色體正常核型：正常男性核型表示：46，XY正常女性核型表示：46，XX正常男性染色體模式圖（非顯帶）18血細胞染色體檢查10/4/2022一.染色體非顯帶技術(二)非顯帶染色體命名正常男性染色體模式二.染色體常

7、規(guī)顯帶技術(一)原理：染色體經過特殊處理或用熒光染料染色，可是染色體顯示明暗相間的條紋稱顯帶染色體。臨床上最常用的顯帶技術是G顯帶法，R顯帶法。G帶帶型分析19血細胞染色體檢查10/4/2022二.染色體常規(guī)顯帶技術(一)原理：染色體經過特殊處理或用熒光二.染色體常規(guī)顯帶技術(二)顯帶染色體命名 顯帶技術有利于染色體的更好識別，為深入研究染色體異常和基因定位奠定了基礎。 染色體區(qū)：以著絲粒為起始向臂端延伸，依次編號為1區(qū)，2區(qū)，3區(qū)； 染色體帶：染色體上明暗條紋20血細胞染色體檢查10/4/2022二.染色體常規(guī)顯帶技術(二)顯帶染色體命名20血細胞染色體檢二.染色體常規(guī)顯帶技術(二)顯帶染色

8、體命名顯帶染色體表示需四項內容：染色體號、臂號、區(qū)號、帶號21血細胞染色體檢查10/4/2022二.染色體常規(guī)顯帶技術(二)顯帶染色體命名21血細胞染色體檢三.染色體核型分析系統(tǒng)自動染色體核型分析系統(tǒng)為臨床提供了簡單、高效的細胞遺傳學檢測手段。22血細胞染色體檢查10/4/2022三.染色體核型分析系統(tǒng)自動染色體核型分析系統(tǒng)為臨床提供了簡單二.染色體常規(guī)顯帶技術23血細胞染色體檢查10/4/2022二.染色體常規(guī)顯帶技術23血細胞染色體檢查10/3/2022四.常規(guī)顯帶技術的應用（一）染色體數目異常（常見于血液?。?1.多倍體：成倍增加，如三倍體69條 （3n） 2.非整倍體：增減不成倍 亞二

9、倍體（少于46條）- 見于3% ALL 超二倍體（多于46條）- 見于32% ALL 3.嵌合體：多見于先天性異?；颊?。如 45,X/46,XY數目異常描述：染色體前寫“+”或“-” 表示該整條染色體增加或減少， 如 47,xy,+8 69,XXY24血細胞染色體檢查10/4/2022四.常規(guī)顯帶技術的應用（一）染色體數目異常（常見于血液?。邓?常規(guī)顯帶技術的應用25血細胞染色體檢查10/4/2022四.常規(guī)顯帶技術的應用25血細胞染色體檢查10/3/2022四.常規(guī)顯帶技術的應用（二）染色體結構異常 原因：染色體斷裂及重排 常見結構異常： 缺失del 倒位inv 易位t 重復dup 結構異

10、常描述：染色體后寫“+”或“-” 表示染色體部分獲得或缺失。如 46,XY,3p-26血細胞染色體檢查10/4/2022四.常規(guī)顯帶技術的應用（二）染色體結構異常 結構異常描述：染異常核型舉例及練習46，XY, del 6q47, XX, ? +2146, XY, +18, -2146, XY, inv (3) (q21;q26)46，XY, t (9;11) (q21;q26)27血細胞染色體檢查10/4/2022異常核型舉例及練習46，XY, del 6q27血細胞染色血細胞染色體檢驗【課堂小結】 1.了解：血細胞染色體檢驗目的及發(fā)展史 2.掌握：常見異常核型的表示方法及意義28血細胞染色

11、體檢查10/4/2022血細胞染色體檢驗【課堂小結】28血細胞染色體檢查10/3/2四.常規(guī)顯帶技術應用常規(guī)顯帶技術不足之處： 1 只能分析分裂中期細胞 2 染色體質量差，顯帶不佳 3 難于識別微小異常（104kb） 4 無法確定的異常分裂像來自哪種細胞29血細胞染色體檢查10/4/2022四.常規(guī)顯帶技術應用常規(guī)顯帶技術不足之處：29血細胞染色體檢五.染色體原位熒光雜交技術（FISH）FISH 技術 是20世紀80年代在，細胞遺傳學，分子生物學，免疫學基礎上發(fā)展起來的新技術。工具為“探針”： 標記熒光素，可與目的基因通過堿基互補結合的一段DNA或RNA片段。檢測對象：分裂中期或分裂間期的細胞

12、30血細胞染色體檢查10/4/2022五.染色體原位熒光雜交技術（FISH）FISH 技術30血細五.染色體原位熒光雜交技術（FISH）原位熒光雜交原理31血細胞染色體檢查10/4/2022五.染色體原位熒光雜交技術（FISH）原位熒光雜交原理31血五.染色體原位熒光雜交技術（FISH）Bcr/abl 融合基因陽性46， XY， t（9；22)(q34；q11)32血細胞染色體檢查10/4/2022五.染色體原位熒光雜交技術（FISH）Bcr/abl 融合基五.染色體原位熒光雜交技術（FISH）染色體t（3；5）33血細胞染色體檢查10/4/2022五.染色體原位熒光雜交技術（FISH）染色體t（3；5）33六. 多色熒光原位雜交技術（FISH）染色體t（3；5）多色