實(shí)驗(yàn)一(中藥鑒定學(xué))

1、中藥鑒定學(xué)實(shí)驗(yàn)中藥鑒定教研室 劉薇中藥鑒定常用實(shí)驗(yàn)技術(shù)、大黃的鑒定實(shí)驗(yàn)一內(nèi)容提要 顯微鏡的使用 粉末制片法 組織簡(jiǎn)圖、粉末圖的繪制法 實(shí)驗(yàn)報(bào)告的格式 大黃的鑒定 目的要求： 掌握粉末制片方法；掌握大黃的組織、粉末鑒別特征和理化鑒別方法。 熟悉生物顯微鏡使用方法、顯微作圖方法及實(shí)驗(yàn)報(bào)告的書(shū)寫(xiě)格式。一、顯微鏡的使用 顯微鏡是觀察細(xì)胞的主要工具。根據(jù)光源不同，可分為光學(xué)顯微鏡和電子顯微鏡兩大類(lèi)。前者以可見(jiàn)光（紫外線顯微鏡以紫外光）為光源，后者則以電子束為光源。照明系統(tǒng)：包括光源和聚光器。光學(xué)放大系統(tǒng)：由物鏡和目鏡組成， 是顯微鏡的主體。機(jī)械裝置：用于固定材料和觀察方便， 包括載物臺(tái)、推動(dòng)器、調(diào)節(jié) 器

2、和物鏡轉(zhuǎn)換器等。普通生物顯微鏡光學(xué)顯微鏡的構(gòu)造：使用顯微鏡的操作步驟及注意點(diǎn)觀察前的準(zhǔn)備工作正確拿放顯微鏡 檢查各部件是否完整和正常 對(duì)各部件進(jìn)行必要的清潔。低倍鏡的操作方法 調(diào)視野（對(duì)光） 裝片 調(diào)節(jié)焦距 （粗調(diào)節(jié)輪找到物象，細(xì)調(diào)節(jié)輪調(diào)節(jié)物象清晰）高倍鏡的操作方法 低倍鏡下選擇物像，移至視野中心，換轉(zhuǎn)高倍鏡，轉(zhuǎn)動(dòng)細(xì)調(diào)節(jié)輪使物象清晰。 （若高、低倍鏡視野中心不重合，需進(jìn)行校正。）光源的調(diào)節(jié)調(diào)節(jié)反光鏡（或直接調(diào)節(jié)光線的明暗） 、升降聚光器 、調(diào)節(jié)光柵等。注意事項(xiàng)養(yǎng)成雙眼觀察的習(xí)慣；觀察標(biāo)本先低倍后高倍；保持顯微鏡干燥、清潔。瞳距調(diào)節(jié)屈光調(diào)節(jié)二、粉末制片法粉末的制備 方法：粉碎 過(guò)篩 混合均勻備用

3、細(xì)度：中藥材通過(guò)藥典45號(hào)篩（孔徑0.170.25mm） 中成藥通過(guò)藥典6號(hào)篩（孔徑0.15mm）要求：樣品具有代表性；全部過(guò)篩；混合均勻。粉末制片一般裝片：取粉末少許，用蒸餾水或甘油醋酸試液裝片?？捎^察細(xì)胞中的不溶性物質(zhì)如淀粉粒、脂肪油滴、色素顆粒等。凡含淀粉粒的粉末進(jìn)行鑒定時(shí)，必須先按此法進(jìn)行裝片。水合氯醛處理裝片：取粉末少許 ，用水合氯醛試液反復(fù)加熱處理，然后滴加稀甘油封片。水合氯醛試液可除去細(xì)胞中的淀粉，油脂等，增加細(xì)胞壁的折光率，還能使萎縮的細(xì)胞壁膨脹，從而使細(xì)胞的形態(tài)更加清晰。 粉末制片是鑒定中藥材最常用的方法之一，簡(jiǎn)便快速，主要鑒別細(xì)胞的形態(tài)特征。 三、顯微圖的繪制目的：補(bǔ)充文字

4、記述的不足顯微攝影：準(zhǔn)確真實(shí)，但需設(shè)備，且主次不分、視野有限， 使用局限。顯微繪圖：突出主要鑒別特征，可將所有特征集中表示，表 達(dá)清晰，易于記憶。 組織簡(jiǎn)圖顯微圖的類(lèi)型 組織詳圖 粉末圖組織簡(jiǎn)圖的繪制 組織簡(jiǎn)圖是用來(lái)表示在低倍鏡下所見(jiàn)各種組織和某些特征的位置、分布情況和比例關(guān)系的組織構(gòu)造圖。用各種不同的符號(hào)代替各種組織和某些特征。觀察簡(jiǎn)圖能清晰地了解該器官組織構(gòu)造的全貌。繪制組織簡(jiǎn)圖的一般原則：一切結(jié)構(gòu)均用線條來(lái)表示。所有結(jié)構(gòu)線條不能用尺或其他圓規(guī)或曲線板等工具代畫(huà)，必須徒手作圖，以表示生物的自然形態(tài)。顯示立體結(jié)構(gòu)可用透視線條來(lái)表示。各部位應(yīng)先畫(huà)出引線再注文字。圖下需注明圖的名稱(chēng)、部位和放大倍

5、數(shù)。徒手繪圖法的步驟：選擇最典型的標(biāo)本或結(jié)構(gòu)。仔細(xì)觀察各部位的形狀、結(jié)構(gòu)和之間的比例關(guān)系。用較淡的鉛筆(2H) 畫(huà)出各部位的比例關(guān)系和輪廓草圖，反復(fù)對(duì)照修改，再用較濃的鉛筆(HB)繪出修改圖。畫(huà)引線，注字。 薄荷(莖)橫切面簡(jiǎn)圖 1.表皮 2.厚角組織 3.皮層 4.內(nèi)皮層 5.形成層 6.髓部 7.木質(zhì)部 8.韌皮部 9.橙皮苷結(jié)晶粉末圖的繪制 粉末圖是用來(lái)表示高倍鏡下所見(jiàn)細(xì)胞及內(nèi)含物的特征的詳圖。要求細(xì)胞的形狀、壁的厚薄、紋孔和層紋等都要盡可能的繪清楚、準(zhǔn)確，并將顯微鏡下觀察的主要特征按類(lèi)別畫(huà)出來(lái)。番瀉葉粉末圖(1040) 1.表皮細(xì)胞及平軸式氣孔 2.非腺毛 3.晶鞘纖維 4.草酸鈣簇晶

6、 圖的注解：在靠近各類(lèi)組分圖的附近標(biāo)上番號(hào)；圖下注明圖的名稱(chēng)、放大倍數(shù)；按圖中番號(hào)注字，番號(hào)下角用縮寫(xiě)符號(hào)“.”四、實(shí)驗(yàn)報(bào)告的書(shū)寫(xiě)格式實(shí)驗(yàn)次數(shù)及名稱(chēng)學(xué)生姓名 年級(jí)及專(zhuān)業(yè) 學(xué)號(hào) 日期一、材料來(lái)源二、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容（根據(jù)所做實(shí)驗(yàn)，選好如下內(nèi)容） 1性狀鑒定：注意描述次序，主要鑒別特征或?qū)Ρ戎饕b別特征，文字要精簡(jiǎn)，重點(diǎn)要突出。 2顯微鑒定組織：注意由外到內(nèi)的觀察和描述，各部的比例，結(jié)構(gòu)特征及內(nèi)含物的情況等。粉末：首先觀察記錄粉末的顏色、氣味，有的還需注意質(zhì)地。顯微鏡下需注意各組分的特征，如形狀、顏色、大小、多少等，并繪圖表示。 3理化鑒定：著重記錄反應(yīng)條件，反應(yīng)中發(fā)生的現(xiàn)象及產(chǎn)生的結(jié)果。五、大黃的鑒定（

7、一）材料來(lái)源：大黃：蓼科植物掌葉大黃Rheum palmatum L. 的根及根莖（二）實(shí)驗(yàn)內(nèi)容1.組織（根莖橫切面）：注意韌皮部、形成層、木質(zhì)部的特征，黏液腔的分布，詳細(xì)觀察髓部異型維管束的構(gòu)造。 韌皮部散有黏液腔，木質(zhì)部導(dǎo)管稀少，髓部大，其內(nèi)散生內(nèi)韌式的異型維管束，射線呈星狀射出。薄壁細(xì)胞含淀粉粒及大型草酸鈣簇晶。2.粉末：黃棕色，氣特異。 大型草酸鈣簇晶，棱角多短鈍。 大型的網(wǎng)紋導(dǎo)管，非木化或微木化（木化染色：間苯三酚 + 鹽酸紅色）。 眾多的淀粉粒，單粒呈圓球形或長(zhǎng)圓形，臍點(diǎn)多星狀，復(fù)粒由27分粒組成。3.理化鑒別（檢查蒽醌類(lèi)成分） 熒光試驗(yàn)：大黃乙醇浸液于濾紙上 45%乙醇擴(kuò)散 365nm紫外光燈下觀察不得顯持久亮紫色熒光。 加堿試驗(yàn)