川芎嗪對(duì)結(jié)扎犬LAD損傷冠脈內(nèi)皮及心肌的保護(hù)作用

1、川芎嗪對(duì)結(jié)扎犬LAD損傷冠脈內(nèi)皮及心肌的庇護(hù)作用何維來，陳如坤，周汝元【關(guān)鍵詞】心肌庇護(hù)PrtetiveeffetftetraethlpyrazinenrnaryarteryendtheliuandardiausleafterLADligatin【Abstrat】AI:Texplretheprtetiveeffetftetraethlpyrazinentheendtheliuandardiausleafterauteinfartininduedindgsbyligatingtheleftanterirdesendingrnaryartery(LAD).ETHDS:Frtyfiveagedhea

2、lthyrssbreddgs(157)kgeredividedint3grups:tetraethlpyrazine(TP)grup,verapail(Ver)grupandntrlgrup.TheperatinasperfredtligatethenearpartftheLADthrughleftinialthraiinisintblk75%fthebldflrespetively.TheexpressinhangesfendtheliuderivedfatrsN,ET1,sPseletinandTnTbefreligatinandatdifferenttiepintsafterligati

3、neredetetedandPseletingenefardiausleasdeterinedbyesternbltting.RESULTS:Thediffereneassignifiantangthe3grupsatdifferenttiepintsafterligatingLAD(P0.01).TheexpressinfPseletinfardiausleashighlyupregulatedafterligatininVergrupandntrlgrup.NLUSIN:Tetraethlpyrazineaneffetivelyrestraintheinjuryfisheiaandrepe

4、rfusinnendtheliufrnaryarteryandyardialellsafterligatingLADanditigatethestensisfrnaryarteryandyardialinfartin,thuspreventingtherestensisfrnaryarteryafterrnaryarterybypassgraft.【Keyrds】endthlialells;yardialprtetin;ligustrazine;rnarystensis【摘要】目的：探究川芎嗪對(duì)結(jié)扎冠狀動(dòng)脈前落支LAD損傷冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮及心肌的庇護(hù)作用.要領(lǐng)：將45只犬分為川芎嗪TP，維拉帕米V

5、er和比擬組ntrl3組，結(jié)扎LAD阻斷血流75%，別離測(cè)定3組結(jié)扎前及結(jié)扎后差異時(shí)段的排泄型P選擇素sPseletin、內(nèi)皮素1ET1、一氧化氮N及心肌肌鈣卵白TTnT的含量變革，esternbltting法檢測(cè)心肌構(gòu)造Pselentin基因表達(dá)環(huán)境.效果：3組結(jié)扎后N，ET1，sPseletin及TnT的在差異時(shí)段含量變革組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P0.01，Pseletin基因表達(dá)TP組較低，Ver組和ntrl組有明顯表達(dá).結(jié)論：川芎嗪可有用按捺結(jié)扎LAD后缺血再灌注對(duì)冠脈內(nèi)皮細(xì)胞及心肌的損傷，減輕冠狀動(dòng)脈局促和心肌梗死的程度.【關(guān)鍵詞】?jī)?nèi)皮細(xì)胞；心肌庇護(hù)；川芎嗪；冠狀動(dòng)脈局促0弁言內(nèi)皮細(xì)胞損

6、傷是引起冠狀動(dòng)脈搭橋術(shù)后rnaryarterybypassgraft,ABG血管橋再局促的關(guān)鍵緣故原由，ABG術(shù)內(nèi)皮細(xì)胞和心肌庇護(hù)不停沒有明顯打破1.我們接納結(jié)扎犬冠狀動(dòng)脈前落支(leftanterirdeendingrnaryartery,LAD)要領(lǐng)，造成典范的局部冠狀動(dòng)脈局促和心梗模子，應(yīng)用川芎嗪ligustrazinertetraethlpyrazine，TP，與維拉帕米Verapail,Ver及空缺比擬組舉行比擬，闡發(fā)TP對(duì)在體龐大生理狀態(tài)下內(nèi)皮和心肌損傷的按捺作用，探究其對(duì)冠狀動(dòng)脈局促的大概防治作用.1質(zhì)料和要領(lǐng)1.1質(zhì)料TP純度：99%，無錫第七制藥；Ver，上海禾豐制藥.放免法

7、測(cè)定內(nèi)皮活性因子ET1試劑盒及硝酸復(fù)原酶法間接測(cè)定N試劑盒由北京北免東雅生物技能研究所提供，排泄型P選擇素(sPseletin)檢測(cè)試劑盒及esternbltting試劑購自于Sigaheial.，快速一步法檢測(cè)肌鈣卵白T(ardiatrpninT,TnT)試劑盒購自美國(guó)BehringerannhEi公司；Viridia3多成效監(jiān)護(hù)儀德國(guó)產(chǎn),YA32麻醉呼吸機(jī)，放免檢測(cè)儀，AUSN128XP/10彩色多普勒電腦顯像儀美國(guó)產(chǎn)，探頭頻率2.54.0Hz.1.2要領(lǐng)康健雜種犬45只，體質(zhì)量14.86.7kg,牝牡不限,由安徽醫(yī)科大學(xué)實(shí)行動(dòng)物中央提供，隨機(jī)分成3組，TP組、Ver組和ntrl組空缺比擬

8、組，每組各15只.初次用3g/L戊巴比妥鈉30g/kgiv開端麻醉動(dòng)物后，氣管插管接YA32麻醉呼吸機(jī)予機(jī)器通氣，賜與室內(nèi)氣氛混淆氧及氟烷；Viridia3多成效監(jiān)護(hù)儀一連監(jiān)測(cè)心電圖、直接動(dòng)脈壓、中央靜脈壓，左側(cè)第4肋間小暗語進(jìn)胸，打快樂包，尋到LAD，于LAD近端發(fā)出處約0.5，用換瓣線帶針穿過前落支深面，備結(jié)扎阻斷；將AUSN128XP/10彩色多普勒超聲的消毒探頭(2.54.0Hz)直接置于備結(jié)扎處遠(yuǎn)斷冠狀動(dòng)脈外心表，丈量動(dòng)脈的每分血流量2.按照血流量測(cè)定阻斷75%并打結(jié)結(jié)實(shí).別離于阻斷前及阻斷后5,15,30,45和60in經(jīng)右心耳處抽血6L，備測(cè)N,ET1程度，于阻斷前及阻斷后3和6

9、h別離自靜脈置管抽血2L備測(cè)TnT含量，及于阻斷前及阻斷后30in，2，6，12和24h備測(cè)Pseletin含量.于結(jié)扎后2和12h切取結(jié)扎后局部供血區(qū)心肌檢測(cè)心肌構(gòu)造Pseletin基因表達(dá)，并于結(jié)扎前切取正常心肌作為比擬.TP組于結(jié)扎前20in用10g/kgTP注射液iv，手術(shù)后3d一連注射TP注射液10g/(kgd)；Ver組于結(jié)扎前5in用0.5g/kgVer參加生理鹽水溶液中iv，手術(shù)后3d同樣一連注射Ver0.5g/(kgd)；ntrl組接納0.9g/L生理鹽水20Liv.嚴(yán)酷按各試劑盒說明書處置懲罰保存的被測(cè)樣品，按要求接納放免法測(cè)定ET1含量，硝酸復(fù)原酶法測(cè)定N-2/N-3程度

10、，并盤算出N的含量，快速一步法檢測(cè)TnT含量，雙抗體夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)行ELISA法測(cè)定sPseletin含量.低溫下提取心肌構(gòu)造勻漿，緩沖劑(50l/LTris,pH7.5,150l/LNal,2l/LEDTA,1g/L三硝基甲苯X100,10g/L苯基烷硫酰氟化物,1g/L亮肽素,1g/L抑肽酶)處置懲罰，孵育10in，構(gòu)造勻漿離心(3000r/in,5in,4)，上清液于280貯存，樣品(每格100g卵白，bihiniaidassay)，參加十二烷基鈉硫酸聚丙烯纖胺凝膠中電泳(50g/L堆膠,75g/L分散膠)，將印跡從明膠電轉(zhuǎn)移至硝酸纖維薄膜上，關(guān)閉后,印跡加兔多克隆抗體孵育2h，(

11、15000)抗縮氨酸對(duì)應(yīng)于25羧基端，Pseletin氨基酸(31)，羊抗兔抗體與辣根過氧化酶共扼，加二抗，末了沖洗印跡，用EL化學(xué)熒光底物感化，Xray膠片放射自顯影不雅察.統(tǒng)計(jì)學(xué)處置懲罰：計(jì)量資料均以xs表現(xiàn)，應(yīng)用SAS軟件，接納重復(fù)丈量的方差闡發(fā)，以闡發(fā)組間和組內(nèi)差異明顯性.2效果2.1內(nèi)皮活性因子含量的變革TP組在結(jié)扎冠狀動(dòng)脈前落支后血漿N和ET1檢測(cè)含量變革與Ver及ntrl組比擬差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，總模子有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01),丈量時(shí)段間及丈量時(shí)段與組別間交互作用有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01，F(xiàn)ig1,2).2.3TnT檢測(cè)含量變革TP組在結(jié)扎LAD后各時(shí)段檢測(cè)含量變革與Ver及nt

12、rl組比擬差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，總模子具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01),丈量時(shí)段間及丈量時(shí)段與組別間交互作用均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01，F(xiàn)ig5).3討論本實(shí)行效果表現(xiàn)，TP可明顯增長(zhǎng)冠狀動(dòng)脈內(nèi)N含量，按捺ET1天生，與Ver組及ntrl組間差異有明顯性，反響其對(duì)ET1表達(dá)具有有用的調(diào)控作用.TP上調(diào)N/ET1引起其他多種內(nèi)皮因子的表達(dá)變革和一系列連鎖改變，N/ET1上調(diào)對(duì)減輕血管內(nèi)膜增生和心肌損傷有緊張作用.N增長(zhǎng)激活G使GP增長(zhǎng)，或直接作用于K+通道，如大電導(dǎo)的鈣激的鉀通道BKa而發(fā)揮強(qiáng)盛的血管擴(kuò)張作用3.ET1表達(dá)增長(zhǎng)并與特異受體結(jié)合按捺冠狀動(dòng)脈緊縮及減輕末了分支血管阻力，并通過按捺ET1對(duì)血管

13、平滑肌細(xì)胞中的y等原癌基因激活作用及對(duì)抑癌基因p53表達(dá)的按捺作用，而按捺平滑肌細(xì)胞增生和遷徙，及成纖維細(xì)胞合成膠原，減輕內(nèi)膜增厚4.我們創(chuàng)造TP可以明顯按捺血漿中sPseletin增長(zhǎng)，明顯按捺心肌構(gòu)造Pseletin基因表達(dá)，表白其對(duì)缺血再灌注損傷歷程炎癥的猛烈按捺作用.Pseletin表達(dá)和細(xì)胞間開釋對(duì)白細(xì)胞進(jìn)入損傷構(gòu)造起著關(guān)鍵作用，其表達(dá)水昭雪應(yīng)炎癥激活程度5.別的，TP按捺血小板產(chǎn)生血小板源性Pseletin，可以減輕缺血再灌注損傷的炎癥反響和血栓形成，進(jìn)而按捺炎癥和細(xì)胞毒損傷對(duì)亞細(xì)胞致死性損傷連鎖反響的放大作用，淘汰炎癥引起的心臟成效衰竭的產(chǎn)生6.結(jié)扎冠狀動(dòng)脈前落支后TP組TnT含

14、量升高受到明顯按捺，表白TP可以減輕心肌梗死程度.心肌中存在Tn，是高特異性和敏感性Ab檢測(cè)指標(biāo)，夸大Tn作用及作為心肌缺血壞死指標(biāo)如今已被普及推許7.Tn包羅T,I,，Tn聯(lián)結(jié)原肌球卵白，配合組成橫紋肌的重要緊縮單元，結(jié)扎LAD后造成局部心肌缺血，TP通過其內(nèi)皮細(xì)胞庇護(hù)作用使冠狀動(dòng)脈擴(kuò)張、微循環(huán)速率和血管開放數(shù)量增長(zhǎng)，別的通過改變微血管內(nèi)的血液流變學(xué)狀態(tài)，而增長(zhǎng)單元面積內(nèi)開放的毛細(xì)血管數(shù)，以及按捺炎癥作用和按捺自由基介導(dǎo)的構(gòu)造損害作用，而縮警覺肌梗死范疇、減輕病變程度，具有明顯的心肌庇護(hù)作用.我們以為TP可以按捺結(jié)扎LAD導(dǎo)致的對(duì)局部動(dòng)脈內(nèi)皮及供血區(qū)心肌損傷，增長(zhǎng)來自盤旋支、對(duì)角支動(dòng)脈以及右

15、冠動(dòng)脈遠(yuǎn)段分支部門側(cè)枝循環(huán)擴(kuò)張對(duì)缺血部位的再灌注，并減輕再灌注損傷，對(duì)冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮及心肌有明顯的庇護(hù)作用.通過其對(duì)內(nèi)皮表達(dá)成效的調(diào)控作用，TP可有用防治冠狀動(dòng)脈局促及減輕心肌梗死程度，大概具有防治ABG術(shù)后血管橋再局促的作用.【參考文獻(xiàn)】1HerlitzJ.Sendarypreventinafterrnaryarterybypassgraftinghatdekn?J.SandardivasJ,2022；38(2):69-74.2Krzanski,Bdzr,BrzstekT,etal.Valueftransthraiehardigraphyfrthedetetinfhighgradernarya

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