淺談腫瘤標志物培訓課件

1、腫瘤標志物（tumor markers，TM) 腫瘤標志物是指在腫瘤發(fā)生和增殖的過程中，由腫瘤細胞合成、釋放或者是機體對腫瘤細胞反應(yīng)而產(chǎn)生的一類物質(zhì)，這些物質(zhì)在血液、體液及組織中可檢測到，達到一定的水平時能提示某些腫瘤的存在。 腫瘤標志物高與查到癌細胞是兩回事，也不一定是代表患有腫瘤！淺談腫瘤標志物10/7/20221腫瘤標志物（tumor markers，TM) 腫瘤標志物是血清腫瘤標志物分類 淺談腫瘤標志物10/7/20222血清腫瘤標志物分類 淺談腫瘤標志物10/3/20222一、為什么要查腫瘤標記物？我們知道，早期診斷是治愈腫瘤的關(guān)鍵；而有些腫瘤標記物的升高往往早于臨床癥狀的出現(xiàn)，因此

2、腫瘤標記物有助于早期發(fā)現(xiàn)腫瘤跡象，早診斷、早治療，從而提高療效。比如，我們國家70年代以后在上海等地，通過對大量人群的甲胎蛋白普查，曾檢出不少肝癌特別是小肝癌患者，使很多病人得到了及時手術(shù)切除的機會。二、腫瘤標記物還能用于以下方面出現(xiàn)腫瘤癥狀或可疑腫物后的鑒別診斷腫瘤生物特點和疾病階段的判斷腫瘤治療后的療效觀察和判斷預后提示腫瘤的復發(fā)、轉(zhuǎn)移淺談腫瘤標志物10/7/20223一、為什么要查腫瘤標記物？淺談腫瘤標志物10/3/20223腫瘤指標升高是不是肯定就有腫瘤了？答案是不一定。腫瘤標志物不僅存在于惡性腫瘤中，也存在于良性腫瘤、胚胎組織、甚至正常組織中；腫瘤的診斷不能單獨依靠腫瘤標志物的檢查，

3、需要由臨床檢查、影像檢查、內(nèi)鏡檢查或手術(shù)探查等綜合判斷，而病理診斷是腫瘤診斷的“金標準”淺談腫瘤標志物10/7/20224腫瘤指標升高是不是肯定就有腫瘤了？淺談腫瘤標志物10/3/2腫瘤標記物篩查結(jié)果判讀腫瘤標記物檢查陰性：患相關(guān)惡性腫瘤的概率相對較低；如有家族史、癌前病變或有癥狀，仍需定期復查,結(jié)合其他檢查；腫瘤標記物檢查陽性：檢測可能有假陽性或患良性疾??；優(yōu)先考慮復檢,復檢仍陽性者進一步檢查；指標輕度升高，不要輕下結(jié)論，持續(xù)觀察腫瘤標志物的動態(tài)變化，如進行性升高，患惡性腫瘤的概率比較高；中重度升高或多項指標持續(xù)升高，提示腫瘤發(fā)生的可能性很高，必須盡快做醫(yī)學影像學和細胞病理學等檢查；不同醫(yī)院

4、檢驗科儀器、試劑各不相同，參考值不一定一樣，因此，不能隨意比較不同醫(yī)院測量值的高低。淺談腫瘤標志物10/7/20225腫瘤標記物篩查結(jié)果判讀腫瘤標記物檢查陰性：淺談腫瘤標志物1除了惡性腫瘤，引起腫瘤標記物升高的其他因素包括：良性疾病，如炎癥性疾?。焊闻K良性疾病時，AFP、CA19-9、CEA會升高；腎功能衰竭時2-微球蛋白及CA15-3、CA19-9、CEA和PSA會升高；風濕病時CA19-9濃度可增高；生理變化：妊娠時AFP、CA125、HCG會升高；不良習慣：吸煙、酗酒；檢查引起：屢次進行直腸指檢后，PSA值可升高；服用某些藥物；飼養(yǎng)寵物；此外，抽血過程中的污染、抽血引起的紅細胞破裂、標本

5、保存不當、試劑差異及檢測欠規(guī)范等因素也會干擾檢查結(jié)果。淺談腫瘤標志物10/7/20226除了惡性腫瘤，引起腫瘤標記物升高的其他因素包括：良性疾病，腫瘤標志物升高了，可不可以明確是哪個部位的腫瘤？有時可以，但多數(shù)不能單憑借腫瘤標記物來明確，還需要結(jié)合其他檢查。一種腫瘤標記物往往與多種惡性腫瘤有關(guān)，以下是一些常見的腫瘤標記物及其所提示可能有腫瘤發(fā)生的臟器：CA19-9 胰腺、胃腸道和肝膽CA15-3 乳腺、肺、卵巢、肝CA242 結(jié)直腸、胰腺、卵巢CA72-4 胃、卵巢、胰腺、乳腺CA125 卵巢、子宮、胰腺、肝、肺CA50 胰腺、乳腺、肺、胃腸道和肝膽淺談腫瘤標志物10/7/20227腫瘤標志物

6、升高了，可不可以明確是哪個部位的腫瘤？淺談腫瘤標志常見腫瘤的標志物檢測 淺談腫瘤標志物10/7/20228常見腫瘤的標志物檢測 淺談腫瘤標志物10/3/20228ADVIA Centaur XP全自動化學發(fā)光分析系統(tǒng)檢測原理淺談腫瘤標志物10/7/20229ADVIA Centaur XP全自動化學發(fā)光分析系統(tǒng)檢經(jīng)典直接化學發(fā)光方法吖啶酯(AE)為放光劑采用微磁顆粒分離兩種結(jié)合模式：競爭法夾心法淺談腫瘤標志物10/7/202210經(jīng)典直接化學發(fā)光方法淺談腫瘤標志物10/3/202210免疫測定抗體抗原示蹤/發(fā)光劑：吖啶酯分離方法：微磁顆粒分離檢測裝置淺談腫瘤標志物10/7/202211免疫測定

7、抗體淺談腫瘤標志物10/3/202211抗原抗體特意專一結(jié)合是檢測的基礎(chǔ)抗原抗體結(jié)合位點淺談腫瘤標志物10/7/202212抗原抗體特意專一結(jié)合是檢測的基礎(chǔ)抗原抗體結(jié)合位點淺談腫瘤標志發(fā)光劑是檢測的技術(shù)核心AE抗原抗體結(jié)合位點淺談腫瘤標志物10/7/202213發(fā)光劑是檢測的技術(shù)核心AE抗原抗體結(jié)合位點淺談腫瘤標志物10吖啶酯簡介提升擴散速率最大程度避免結(jié)合位點的遮蔽提高分析靈敏度堿性磷酸酶哎啶酯淺談腫瘤標志物10/7/202214吖啶酯簡介提升擴散速率堿性磷酸酶哎啶酯淺談腫瘤標志物10/3一秒鐘高強度的光釋放使報告結(jié)果更快光釋放(RLUs)時間 (妙)12吖啶酯簡介淺談腫瘤標志物10/7/2

8、02215一秒鐘高強度的光釋放使報告結(jié)果更快光釋放時間 (妙)12吖啶哎啶酯直接化學發(fā)光法的優(yōu)點無需額外的信號放大或底物光的釋放快速對溫度和pH值的影響不敏感背景干擾最小淺談腫瘤標志物10/7/202216哎啶酯直接化學發(fā)光法的優(yōu)點無需額外的信號放大或底物淺談腫瘤標微磁顆粒分離技術(shù)氧化鐵顆粒被吸引至磁場區(qū)與抗原或抗體發(fā)生共價結(jié)合微磁顆粒(PMP)抗體淺談腫瘤標志物10/7/202217微磁顆粒分離技術(shù)氧化鐵顆粒被吸引至磁場區(qū)微磁顆粒(PMP)抗用于分離結(jié)合與未結(jié)合的反應(yīng)物磁場未結(jié)合的AE微磁顆粒分離技術(shù)淺談腫瘤標志物10/7/202218用于分離結(jié)合與未結(jié)合的反應(yīng)物磁場未結(jié)合的AE微磁顆粒分離

9、技術(shù)檢測原理的反應(yīng)模式夾心法競爭法標記抗原檢測方法標記抗體檢測方法抗體捕獲模式淺談腫瘤標志物10/7/202219檢測原理的反應(yīng)模式夾心法淺談腫瘤標志物10/3/202219夾心法 步驟 1AE-標記抗體加入樣品中，與樣品抗原結(jié)合哎啶酯 (AE)抗體樣品中的分析物特異性抗原其它顆粒淺談腫瘤標志物10/7/202220夾心法 步驟 1AE-標記抗體加入樣品中，與樣品抗原結(jié)合PMP-抗體-抗原-抗體AE復合物加入與特異性抗體結(jié)合的微磁顆粒PMP，孵育，結(jié)合抗原的PMP再與AE-標記抗體結(jié)合夾心法 步驟 2淺談腫瘤標志物10/7/202221PMP-抗體-抗原-抗體AE復合物加入與特異性抗體結(jié)合的微

10、磁MagnetPMP-抗體-抗原-抗體AE復合物比色杯將未結(jié)合的AE分離并去除夾心法 步驟 3淺談腫瘤標志物10/7/202222MagnetPMP-抗體-抗原-抗體AE復合物比色杯將未結(jié)合樣品濃度光釋放(RLUs)加入酸堿試劑啟動化學發(fā)光反應(yīng)計算濃度夾心法 步驟 4淺談腫瘤標志物10/7/202223樣品濃度光釋放加入酸堿試劑啟動化學發(fā)光反應(yīng)計算濃度夾心法 采用標記抗原的競爭法 步驟 1微磁顆粒(PMP)抗體樣品抗原AE- 標記抗原AE-標記抗原與樣品抗原競爭結(jié)合與PMP共價結(jié)合的有限的抗體結(jié)合位點淺談腫瘤標志物10/7/202224采用標記抗原的競爭法 步驟 1微磁顆粒(PMP)抗體樣品

11、磁場PMP- 抗體- 抗原復合物PMP- 抗體- 抗原 AE復合物孵育后將反應(yīng)混合物置于磁場下，分離并除去未結(jié)合的AE采用標記抗原的競爭法 步驟 2淺談腫瘤標志物10/7/202225 磁場PMP- 抗體- 抗原PMP- 抗體- 抗原 樣品濃度光釋放(RLUs)加入酸堿啟動化學發(fā)光反應(yīng)計算濃度采用標記抗原的競爭法 步驟 3淺談腫瘤標志物10/7/202226樣品濃度光釋放加入酸堿啟動化學發(fā)光反應(yīng)計算濃度采用標記抗原采用標記抗體的競爭法 步驟 1AE-標記抗體PMP- 標記抗原樣品中的分析物特異性抗原結(jié)合抗原的PMP與樣品抗原競爭AE-標記抗體上有限的抗原結(jié)合位點淺談腫瘤標志物10/7/2022

12、27采用標記抗體的競爭法 步驟 1AE-標記抗體PMP- 標 磁場PMP-抗原-抗體AE復合物孵育后將反應(yīng)混合物置于磁場下，分離并除去未結(jié)合的AE采用標記抗體的競爭法 步驟 2淺談腫瘤標志物10/7/202228 磁場PMP-抗原-抗體AE復合物孵育后將反應(yīng)混合物置樣品濃度光釋放(RLUs)加入酸堿試劑啟動化學發(fā)光反應(yīng)計算濃度采用標記抗體的競爭法 步驟 3淺談腫瘤標志物10/7/202229樣品濃度光釋放加入酸堿試劑啟動化學發(fā)光反應(yīng)計算濃度采用標記夾心法與競爭法反應(yīng)原理小結(jié)競爭法夾心法樣品濃度樣品濃度光釋放(RLUs)光釋放(RLUs)淺談腫瘤標志物10/7/202230夾心法與競爭法反應(yīng)原理

13、小結(jié)競爭法夾心法樣品濃度樣品濃度光釋放抗體捕獲模式分析物是樣品中含有的抗體采用一種直接針對樣品中抗體的特異性抗體淺談腫瘤標志物10/7/202231抗體捕獲模式分析物是樣品中含有的抗體淺談腫瘤標志物10/3/抗體捕獲模式結(jié)合有抗人類IgM特異性抗體的微磁顆粒（PMP）被加入到樣品中人類IgM抗體與PMP上結(jié)合的抗人類IgM抗體進行結(jié)合淺談腫瘤標志物10/7/202232抗體捕獲模式結(jié)合有抗人類IgM特異性抗體的微磁顆粒（PMP）樣品中的抗體通過磁場作用與可能造成干擾的其它物質(zhì)進行分離抗體捕獲模式淺談腫瘤標志物10/7/202233樣品中的抗體通過磁場作用與可能造成干擾的其它物質(zhì)進行分離抗體加入對樣品中抗體具有親和力的AE-標記抗體抗體捕獲模式淺談腫瘤標志物10/7/202234加入對樣品中抗體具有親和力的AE-標記抗體抗體捕獲模式