淺談腫瘤標(biāo)志物培訓(xùn)課件

1、腫瘤標(biāo)志物（tumor markers，TM) 腫瘤標(biāo)志物是指在腫瘤發(fā)生和增殖的過程中，由腫瘤細(xì)胞合成、釋放或者是機(jī)體對(duì)腫瘤細(xì)胞反應(yīng)而產(chǎn)生的一類物質(zhì)，這些物質(zhì)在血液、體液及組織中可檢測(cè)到，達(dá)到一定的水平時(shí)能提示某些腫瘤的存在。 腫瘤標(biāo)志物高與查到癌細(xì)胞是兩回事，也不一定是代表患有腫瘤！淺談腫瘤標(biāo)志物10/7/20221腫瘤標(biāo)志物（tumor markers，TM) 腫瘤標(biāo)志物是血清腫瘤標(biāo)志物分類 淺談腫瘤標(biāo)志物10/7/20222血清腫瘤標(biāo)志物分類 淺談腫瘤標(biāo)志物10/3/20222一、為什么要查腫瘤標(biāo)記物？我們知道，早期診斷是治愈腫瘤的關(guān)鍵；而有些腫瘤標(biāo)記物的升高往往早于臨床癥狀的出現(xiàn)，因此

2、腫瘤標(biāo)記物有助于早期發(fā)現(xiàn)腫瘤跡象，早診斷、早治療，從而提高療效。比如，我們國(guó)家70年代以后在上海等地，通過對(duì)大量人群的甲胎蛋白普查，曾檢出不少肝癌特別是小肝癌患者，使很多病人得到了及時(shí)手術(shù)切除的機(jī)會(huì)。二、腫瘤標(biāo)記物還能用于以下方面出現(xiàn)腫瘤癥狀或可疑腫物后的鑒別診斷腫瘤生物特點(diǎn)和疾病階段的判斷腫瘤治療后的療效觀察和判斷預(yù)后提示腫瘤的復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移淺談腫瘤標(biāo)志物10/7/20223一、為什么要查腫瘤標(biāo)記物？淺談腫瘤標(biāo)志物10/3/20223腫瘤指標(biāo)升高是不是肯定就有腫瘤了？答案是不一定。腫瘤標(biāo)志物不僅存在于惡性腫瘤中，也存在于良性腫瘤、胚胎組織、甚至正常組織中；腫瘤的診斷不能單獨(dú)依靠腫瘤標(biāo)志物的檢查，

3、需要由臨床檢查、影像檢查、內(nèi)鏡檢查或手術(shù)探查等綜合判斷，而病理診斷是腫瘤診斷的“金標(biāo)準(zhǔn)”淺談腫瘤標(biāo)志物10/7/20224腫瘤指標(biāo)升高是不是肯定就有腫瘤了？淺談腫瘤標(biāo)志物10/3/2腫瘤標(biāo)記物篩查結(jié)果判讀腫瘤標(biāo)記物檢查陰性：患相關(guān)惡性腫瘤的概率相對(duì)較低；如有家族史、癌前病變或有癥狀，仍需定期復(fù)查,結(jié)合其他檢查；腫瘤標(biāo)記物檢查陽性：檢測(cè)可能有假陽性或患良性疾??；優(yōu)先考慮復(fù)檢,復(fù)檢仍陽性者進(jìn)一步檢查；指標(biāo)輕度升高，不要輕下結(jié)論，持續(xù)觀察腫瘤標(biāo)志物的動(dòng)態(tài)變化，如進(jìn)行性升高，患惡性腫瘤的概率比較高；中重度升高或多項(xiàng)指標(biāo)持續(xù)升高，提示腫瘤發(fā)生的可能性很高，必須盡快做醫(yī)學(xué)影像學(xué)和細(xì)胞病理學(xué)等檢查；不同醫(yī)院

4、檢驗(yàn)科儀器、試劑各不相同，參考值不一定一樣，因此，不能隨意比較不同醫(yī)院測(cè)量值的高低。淺談腫瘤標(biāo)志物10/7/20225腫瘤標(biāo)記物篩查結(jié)果判讀腫瘤標(biāo)記物檢查陰性：淺談腫瘤標(biāo)志物1除了惡性腫瘤，引起腫瘤標(biāo)記物升高的其他因素包括：良性疾病，如炎癥性疾?。焊闻K良性疾病時(shí)，AFP、CA19-9、CEA會(huì)升高；腎功能衰竭時(shí)2-微球蛋白及CA15-3、CA19-9、CEA和PSA會(huì)升高；風(fēng)濕病時(shí)CA19-9濃度可增高；生理變化：妊娠時(shí)AFP、CA125、HCG會(huì)升高；不良習(xí)慣：吸煙、酗酒；檢查引起：屢次進(jìn)行直腸指檢后，PSA值可升高；服用某些藥物；飼養(yǎng)寵物；此外，抽血過程中的污染、抽血引起的紅細(xì)胞破裂、標(biāo)本

5、保存不當(dāng)、試劑差異及檢測(cè)欠規(guī)范等因素也會(huì)干擾檢查結(jié)果。淺談腫瘤標(biāo)志物10/7/20226除了惡性腫瘤，引起腫瘤標(biāo)記物升高的其他因素包括：良性疾病，腫瘤標(biāo)志物升高了，可不可以明確是哪個(gè)部位的腫瘤？有時(shí)可以，但多數(shù)不能單憑借腫瘤標(biāo)記物來明確，還需要結(jié)合其他檢查。一種腫瘤標(biāo)記物往往與多種惡性腫瘤有關(guān)，以下是一些常見的腫瘤標(biāo)記物及其所提示可能有腫瘤發(fā)生的臟器：CA19-9 胰腺、胃腸道和肝膽CA15-3 乳腺、肺、卵巢、肝CA242 結(jié)直腸、胰腺、卵巢CA72-4 胃、卵巢、胰腺、乳腺CA125 卵巢、子宮、胰腺、肝、肺CA50 胰腺、乳腺、肺、胃腸道和肝膽淺談腫瘤標(biāo)志物10/7/20227腫瘤標(biāo)志物

6、升高了，可不可以明確是哪個(gè)部位的腫瘤？淺談腫瘤標(biāo)志常見腫瘤的標(biāo)志物檢測(cè) 淺談腫瘤標(biāo)志物10/7/20228常見腫瘤的標(biāo)志物檢測(cè) 淺談腫瘤標(biāo)志物10/3/20228ADVIA Centaur XP全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光分析系統(tǒng)檢測(cè)原理淺談腫瘤標(biāo)志物10/7/20229ADVIA Centaur XP全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光分析系統(tǒng)檢經(jīng)典直接化學(xué)發(fā)光方法吖啶酯(AE)為放光劑采用微磁顆粒分離兩種結(jié)合模式：競(jìng)爭(zhēng)法夾心法淺談腫瘤標(biāo)志物10/7/202210經(jīng)典直接化學(xué)發(fā)光方法淺談腫瘤標(biāo)志物10/3/202210免疫測(cè)定抗體抗原示蹤/發(fā)光劑：吖啶酯分離方法：微磁顆粒分離檢測(cè)裝置淺談腫瘤標(biāo)志物10/7/202211免疫測(cè)定

7、抗體淺談腫瘤標(biāo)志物10/3/202211抗原抗體特意專一結(jié)合是檢測(cè)的基礎(chǔ)抗原抗體結(jié)合位點(diǎn)淺談腫瘤標(biāo)志物10/7/202212抗原抗體特意專一結(jié)合是檢測(cè)的基礎(chǔ)抗原抗體結(jié)合位點(diǎn)淺談腫瘤標(biāo)志發(fā)光劑是檢測(cè)的技術(shù)核心AE抗原抗體結(jié)合位點(diǎn)淺談腫瘤標(biāo)志物10/7/202213發(fā)光劑是檢測(cè)的技術(shù)核心AE抗原抗體結(jié)合位點(diǎn)淺談腫瘤標(biāo)志物10吖啶酯簡(jiǎn)介提升擴(kuò)散速率最大程度避免結(jié)合位點(diǎn)的遮蔽提高分析靈敏度堿性磷酸酶哎啶酯淺談腫瘤標(biāo)志物10/7/202214吖啶酯簡(jiǎn)介提升擴(kuò)散速率堿性磷酸酶哎啶酯淺談腫瘤標(biāo)志物10/3一秒鐘高強(qiáng)度的光釋放使報(bào)告結(jié)果更快光釋放(RLUs)時(shí)間 (妙)12吖啶酯簡(jiǎn)介淺談腫瘤標(biāo)志物10/7/2

8、02215一秒鐘高強(qiáng)度的光釋放使報(bào)告結(jié)果更快光釋放時(shí)間 (妙)12吖啶哎啶酯直接化學(xué)發(fā)光法的優(yōu)點(diǎn)無需額外的信號(hào)放大或底物光的釋放快速對(duì)溫度和pH值的影響不敏感背景干擾最小淺談腫瘤標(biāo)志物10/7/202216哎啶酯直接化學(xué)發(fā)光法的優(yōu)點(diǎn)無需額外的信號(hào)放大或底物淺談腫瘤標(biāo)微磁顆粒分離技術(shù)氧化鐵顆粒被吸引至磁場(chǎng)區(qū)與抗原或抗體發(fā)生共價(jià)結(jié)合微磁顆粒(PMP)抗體淺談腫瘤標(biāo)志物10/7/202217微磁顆粒分離技術(shù)氧化鐵顆粒被吸引至磁場(chǎng)區(qū)微磁顆粒(PMP)抗用于分離結(jié)合與未結(jié)合的反應(yīng)物磁場(chǎng)未結(jié)合的AE微磁顆粒分離技術(shù)淺談腫瘤標(biāo)志物10/7/202218用于分離結(jié)合與未結(jié)合的反應(yīng)物磁場(chǎng)未結(jié)合的AE微磁顆粒分離

9、技術(shù)檢測(cè)原理的反應(yīng)模式夾心法競(jìng)爭(zhēng)法標(biāo)記抗原檢測(cè)方法標(biāo)記抗體檢測(cè)方法抗體捕獲模式淺談腫瘤標(biāo)志物10/7/202219檢測(cè)原理的反應(yīng)模式夾心法淺談腫瘤標(biāo)志物10/3/202219夾心法 步驟 1AE-標(biāo)記抗體加入樣品中，與樣品抗原結(jié)合哎啶酯 (AE)抗體樣品中的分析物特異性抗原其它顆粒淺談腫瘤標(biāo)志物10/7/202220夾心法 步驟 1AE-標(biāo)記抗體加入樣品中，與樣品抗原結(jié)合PMP-抗體-抗原-抗體AE復(fù)合物加入與特異性抗體結(jié)合的微磁顆粒PMP，孵育，結(jié)合抗原的PMP再與AE-標(biāo)記抗體結(jié)合夾心法 步驟 2淺談腫瘤標(biāo)志物10/7/202221PMP-抗體-抗原-抗體AE復(fù)合物加入與特異性抗體結(jié)合的微

10、磁MagnetPMP-抗體-抗原-抗體AE復(fù)合物比色杯將未結(jié)合的AE分離并去除夾心法 步驟 3淺談腫瘤標(biāo)志物10/7/202222MagnetPMP-抗體-抗原-抗體AE復(fù)合物比色杯將未結(jié)合樣品濃度光釋放(RLUs)加入酸堿試劑啟動(dòng)化學(xué)發(fā)光反應(yīng)計(jì)算濃度夾心法 步驟 4淺談腫瘤標(biāo)志物10/7/202223樣品濃度光釋放加入酸堿試劑啟動(dòng)化學(xué)發(fā)光反應(yīng)計(jì)算濃度夾心法 采用標(biāo)記抗原的競(jìng)爭(zhēng)法 步驟 1微磁顆粒(PMP)抗體樣品抗原AE- 標(biāo)記抗原AE-標(biāo)記抗原與樣品抗原競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合與PMP共價(jià)結(jié)合的有限的抗體結(jié)合位點(diǎn)淺談腫瘤標(biāo)志物10/7/202224采用標(biāo)記抗原的競(jìng)爭(zhēng)法 步驟 1微磁顆粒(PMP)抗體樣品

11、磁場(chǎng)PMP- 抗體- 抗原復(fù)合物PMP- 抗體- 抗原 AE復(fù)合物孵育后將反應(yīng)混合物置于磁場(chǎng)下，分離并除去未結(jié)合的AE采用標(biāo)記抗原的競(jìng)爭(zhēng)法 步驟 2淺談腫瘤標(biāo)志物10/7/202225 磁場(chǎng)PMP- 抗體- 抗原PMP- 抗體- 抗原 樣品濃度光釋放(RLUs)加入酸堿啟動(dòng)化學(xué)發(fā)光反應(yīng)計(jì)算濃度采用標(biāo)記抗原的競(jìng)爭(zhēng)法 步驟 3淺談腫瘤標(biāo)志物10/7/202226樣品濃度光釋放加入酸堿啟動(dòng)化學(xué)發(fā)光反應(yīng)計(jì)算濃度采用標(biāo)記抗原采用標(biāo)記抗體的競(jìng)爭(zhēng)法 步驟 1AE-標(biāo)記抗體PMP- 標(biāo)記抗原樣品中的分析物特異性抗原結(jié)合抗原的PMP與樣品抗原競(jìng)爭(zhēng)AE-標(biāo)記抗體上有限的抗原結(jié)合位點(diǎn)淺談腫瘤標(biāo)志物10/7/2022

12、27采用標(biāo)記抗體的競(jìng)爭(zhēng)法 步驟 1AE-標(biāo)記抗體PMP- 標(biāo) 磁場(chǎng)PMP-抗原-抗體AE復(fù)合物孵育后將反應(yīng)混合物置于磁場(chǎng)下，分離并除去未結(jié)合的AE采用標(biāo)記抗體的競(jìng)爭(zhēng)法 步驟 2淺談腫瘤標(biāo)志物10/7/202228 磁場(chǎng)PMP-抗原-抗體AE復(fù)合物孵育后將反應(yīng)混合物置樣品濃度光釋放(RLUs)加入酸堿試劑啟動(dòng)化學(xué)發(fā)光反應(yīng)計(jì)算濃度采用標(biāo)記抗體的競(jìng)爭(zhēng)法 步驟 3淺談腫瘤標(biāo)志物10/7/202229樣品濃度光釋放加入酸堿試劑啟動(dòng)化學(xué)發(fā)光反應(yīng)計(jì)算濃度采用標(biāo)記夾心法與競(jìng)爭(zhēng)法反應(yīng)原理小結(jié)競(jìng)爭(zhēng)法夾心法樣品濃度樣品濃度光釋放(RLUs)光釋放(RLUs)淺談腫瘤標(biāo)志物10/7/202230夾心法與競(jìng)爭(zhēng)法反應(yīng)原理

13、小結(jié)競(jìng)爭(zhēng)法夾心法樣品濃度樣品濃度光釋放抗體捕獲模式分析物是樣品中含有的抗體采用一種直接針對(duì)樣品中抗體的特異性抗體淺談腫瘤標(biāo)志物10/7/202231抗體捕獲模式分析物是樣品中含有的抗體淺談腫瘤標(biāo)志物10/3/抗體捕獲模式結(jié)合有抗人類IgM特異性抗體的微磁顆粒（PMP）被加入到樣品中人類IgM抗體與PMP上結(jié)合的抗人類IgM抗體進(jìn)行結(jié)合淺談腫瘤標(biāo)志物10/7/202232抗體捕獲模式結(jié)合有抗人類IgM特異性抗體的微磁顆粒（PMP）樣品中的抗體通過磁場(chǎng)作用與可能造成干擾的其它物質(zhì)進(jìn)行分離抗體捕獲模式淺談腫瘤標(biāo)志物10/7/202233樣品中的抗體通過磁場(chǎng)作用與可能造成干擾的其它物質(zhì)進(jìn)行分離抗體加入對(duì)樣品中抗體具有親和力的AE-標(biāo)記抗體抗體捕獲模式淺談腫瘤標(biāo)志物10/7/202234加入對(duì)樣品中抗體具有親和力的AE-標(biāo)記抗體抗體捕獲模式